当前位置：文档之家 › 草菇菌丝培养条件优化研究

草菇菌丝培养条件优化研究

  • 格式：pdf
  • 大小：1.29 MB
  • 文档页数：5

现代食品XIANDAISHIPIN147/工艺技术󰀡Process󰀡Technology

草菇菌丝培养条件优化研究

Study󰀡on󰀡Optimization󰀡of󰀡Culture󰀡Conditions󰀡of󰀡Straw󰀡Mushroom

◎ 李淑娴（佛山市高明区荷城民旺豆制品加工厂，广东　佛山　528511）Li Shuxian(Gaoming District of Foshan City, Hecheng Minwang Bean Products Processing Plant, Foshan　528511, China)

摘　要：本文在单因素试验的基础上，通过正交试验确定最佳营养因子和培养条件（pH值、温度），确定最佳培养基成分，设计选择最适宜的香菇菌丝体培养条件，为生产优良菌种和优质高效栽培草菇积累经验，有利于提高草菇的培植效率，增加草菇的经济效益。关键词：草菇菌丝；培养条件；优化措施Abstract：In this paper, on the basis of single factor experiment, by orthogonal experiment to determine the best nutritional factors and culture conditions (pH, temperature), to determine the optimal medium composition design, choose letinous edodes mycelium most suitable culture conditions, accumulate experience for the production of excellent strains and high quality and efficient cultivation of mushrooms, mushroom cultivation is helpful to improve the efficiency, to increase the economic benefits of straw mushroom.Key words：Mushroom mycelium; Culture conditions; Optimization measures中图分类号：S646.13

草菇营养丰富，味道鲜美。每100 g鲜菇含207.7 mg维生素C，2.6 g糖分，2.68 g粗蛋白，2.24 g脂肪，0.91 g灰分。草菇蛋白质含18种氨基酸，其中必需氨基酸占40.47%～44.47%[1]。此外，还含有磷、钾、钙等多种矿质元素，是国际公认的“十分好的蛋白质来源”，并有“素中之荤”的美名，是世界上第三大栽培食用菌[2]。1　材料与方法1.1　材料1.1.1　供试菌株与仪器设备菌株：草菇（Volvariella volvacea）菌株由佛山科学技术学院食品科学实验室保存。仪器设备：手提式压力蒸汽灭菌器，YXQ-SG46-280S，上海博迅实业有限公司；电子天平，MP400，上海第二天平仪器厂；微波炉，WP700机械型，广东格兰仕集团有限公司；霉菌培养箱，MTX-250B-Z型，上海博迅实业有限公司；超净工作台，SW-CJ-IBU，上海博迅实业有限公司；酒精灯、接菌种针、培养皿、烧杯、滴管、试管、锥形瓶。1.1.2　培养基配方PDA培养基（基本培养基）：马铃薯（去皮）200.0 g，葡萄糖20.0 g，琼脂20.0 g，蒸馏水1 000.0 mL。ｄｏｉ：１０．１６７３６／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｎ４１－１４３４／ｔｓ．２０１８．０１．０４５

现代食品2018年1月上正文-20180124.indd 1472018/1/24 11:06:55

现代食品XIANDAISHIPIN148/工艺技术Process Technology

1.1.3　供试碳源分别选择供试碳源（质量分数各为2.0%）：蔗糖、果糖、麦芽糖和玉米粉替代PDA培养基中的葡萄糖（CK）作培菌试验，pH自然。1.1.4　供试氮源以PDA为基本培养基，分别添加蛋白胨、酵母粉、硝酸铵和氯酸铵培菌。1.1.5　供试无机盐以PDA为基本培养基，分别添加大量元素（添加质量浓度各为1.0 g/L）KH2PO4、MgSO4和KNO3作培菌试验，并以普通PDA（不添加）作CK。以PDA为基本培养基，分别添加微量元素（添加质量浓度各为3.0 mg/L）：CuSO4、FeSO4和ZnSO4作培菌试验，并以基本PDA（不添加）作CK。1.2　方法1.2.1　营养单因子试验初步在CK平板上培养蘑菇菌丝，沿菌落边缘切割直径为5.0 mm的菌块，接种于不同碳源、氮源、无机盐（大量营养元素和微量元素）等平板培养基中，置于（30±0.5）℃恒温培养，任何时候加工菌丝生长培养皿终菌，定期观察。每次治疗重复3次。菌丝生长速度（mm/d）=菌落半径（mm）÷菌丝生长 天数（d）[3]。1.2.2　pH值试验培养基灭菌前，调节为4.0、6.0、7.0、8.0、10.0、11.0共6个pH值梯度进行培菌试验，每个处理3次重复，方法同营养单因子试验。1.2.3　温度试验将接种于PDA培养基上的菌块置于20、25、30、35、40 ℃共5个温度梯度进行培菌试验，每个处理3次重复，方法同营养单因子试验。1.2.4　营养因子正交试验根据以上单因子试验结果，以菌株和最佳的碳源（A）、氮源（B）、大量元素（C）和微量元素（D）等作为营养因子，采用4因子3水平正交表L9（34）设计培养基配方试验[4]，每个处理3次重复，分别测定菌丝长速和菌丝长势。2　结果与分析

2.1　碳源对草菇菌丝生长的影响对5种不同碳源培养基进行了菌丝生长速度和生长势测定，由表1可知，草菇菌丝对参试的4种碳源均能利用，菌丝生长速度的顺序为蔗糖（6.68 mm/d）＞葡萄糖（6.15 mm/d）＞果糖（6.13 mm/d）＞麦芽糖 （5.62 mm/d）＞玉米粉（5.00 mm/d）。最佳碳源为蔗糖，比其他因素培菌的差异极显著。果糖、葡萄糖与麦芽糖、玉米粉培菌的差异极显著，玉米粉与麦芽糖培菌差异极显著。菌丝对玉米粉的利用率最差，表现为长速最慢、长势最弱。表1　碳源对草菇菌丝生长的影响表碳源/%菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.01蔗糖6.68aA+++++葡萄糖（CK）6.15bB++++果糖6.13bB++++麦芽糖5.62cC+++玉米粉5.00bD++注：①数据为3次重复的平均数；②+++++、++++、+++、++、+表示菌丝长势依次减弱[5]；③不同大、小写字母分别表示在0.01、0.05水平差异显著（下同）。2.2　氮源对草菇菌丝生长的影响以4种不同氮源培养基进行了平板上菌丝生长速度和生长势测定。表2表明，4种不同氮源培养基都能被草菇菌丝利用，菌丝生长速度的顺序为蛋白胨＞酵母粉＞硝酸铵＞氯酸铵，最佳氮源为蛋白胨，菌丝长速达6.93 mm/d，比酵母粉培菌的长速差异显著。硝酸铵与酵母粉培菌差异不显著，硝酸铵、酵母粉与氯

现代食品2018年1月上正文-20180124.indd 1482018/1/24 11:06:55

现代食品XIANDAISHIPIN149/工艺技术󰀡Process󰀡Technology

酸铵差异极显著。表2　氮源对草菇菌丝生长的影响表氮源/%菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.01蛋白胨6.93aA+++++酵母粉6.31bAB++++硝酸铵6.20bB++++氯酸铵4.49cC+++2.3　无机盐（大量元素）对草菇菌丝生长的影响在培养基中添加无机盐（大量元素）进行平板上菌对丝生长速度和生长势的测定。结果表明，硫酸镁＞磷酸二氢钾＞CK＞硝酸钾，即添加的无机盐中硫酸镁促进菌丝生长的效果最好，硫酸镁与磷酸二氢钾培菌效果差异显著，硫酸镁、磷酸二氢钾与CK培菌差异极显著，CK与硝酸钾培菌差异不显著。与CK相比，添加硫酸镁、磷酸二氢钾促进菌丝生长效果明显，而添加硝酸钾对于菌丝生长的促进效果不明显，甚至可能对菌丝生长造成不利影响，见表3。表3　大量元素对草菇菌丝生长的影响表大量元素菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.01硫酸镁6.45aA+++++磷酸二氢钾6.23bAB++++CK（不添加）5.82cC+++硝酸钾5.79cC+++2.4　无机盐（微量元素）对草菇菌丝生长的影响以4种不同微量元素培养基进行了平板上菌丝生长速度和生长势测定。由表4可知，硫酸亚铁＞硫酸锌＞CK＞硫酸铜，即说明微量元素能促进菌丝生长。试验菌株发酵硫酸亚铁菌生长速度快。最好的微量元素是硫酸亚铁。菌丝体高速生长6.47 mm/d，比对照组高8.74%，与硫酸锌和硫酸铜明显不同。表4　微量元素对草菇菌丝生长的影响表微量元素菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.01硫酸亚铁6.47aA+++++硫酸锌6.10bB++++CK（不添加）6.05bcB++++硫酸铜5.95cB+++2.5　pH对草菇菌丝生长的影响试验结果表明，草菇菌丝生长适宜的pH值范围较广，由表5可知，草菇菌丝在pH 7.0～10.0范围内生长良好，在pH大于10.0的情况下，菌丝还能较快生长，而pH值低于7.0以后，pH越低，菌丝生长速度越慢，长势越差，可见草菇菌丝适宜在中性偏碱的环境中生长。碱性环境不利于细菌的生长，因此在菌丝培养时可以适当增加pH，以减少杂菌的污染，促进草菇菌丝的生长，提高草菇菌丝的营养利用率。表5　pH值对草菇菌丝生长的影响表pH菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.018.07.01aA+++++7.06.25bA++++10.06.23bA++++11.06.02cB+++6.05.24dC++4.03.91eD+2.6　温度对草菇菌丝的影响温度是影响香菇菌丝生长的重要因素。对此，进行了不同温度下培养皿生长的试验，结果见表6。香菇菌丝生长在40 ℃时不生长，35 ℃和30 ℃时菌丝生长最好，25、20 ℃时，菌丝依次减速，菌丝体削弱。35、30 ℃时培菌差异不显著，35、30 ℃培菌与25、20 ℃差异极显著，20 ℃与35、30、25 ℃培菌差异极显著。

现代食品2018年1月上正文-20180124.indd 1492018/1/24 11:06:55

现代食品XIANDAISHIPIN150/工艺技术Process Technology

表6　温度对草菇菌丝生长的影响表温度/℃菌丝平均长速/（mm/d）差异显著性菌丝长势0.050.0130.06.14aA+++++35.06.05aA+++++25.05.73bB++++20.03.35cC+++40.00dD2.7　优化营养因子的确定为了找出草菇菌丝生长培养基的优化组合，选取对草菇菌丝生长影响比较大的4个重要营养因子，即碳源（蔗糖）、氮源（蛋白胨）、大量元素（硫酸镁）和微量元素（硫酸亚铁），采用L9（34）正交表设计4因子3水平的培养基配方正交试验[6]，试验设计及结果见表7。表7　优化营养因子正交试验结果及分析表

合集下载

灵芝菌丝液体深层发酵种子培养条件研究

灵芝菌丝液体深层发酵种子培养条件研究

第１２卷第２期　太原师范学院学报（自然科学版）　Ｖｏ１．１２　Ｎｏ．２　２０１３年６月　ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＴＡＩＹＵＡＮ　ＮＯＲＭＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）　Ｊｕｎ．２０１３　

灵芝菌丝液体深层发酵种子培养条件研究　

吴丽华　仪慧兰　伊晶晶。　

（１太原师范学院生物系，山西太原０３００３１；２山西大学生命科学与技术学院，山西太原０３０００６；　３．中国辐射防护研究院放射医学与环境医学研究所，山西太原０３０００６）　

（摘要］　利用液体深层发酵方法进行灵芝茵丝最佳培养基和菌种最适种龄的确定．通过单因　素实验和正交实验，研究了不同培养基对液体深层发酵灵芝茵丝生长及多糖含量的影响，确定了灵　芝液体深层发酵的培养基配方为：玉米粉３　，豆粉３　，ＫＨ　２ＰＯ　０．１５　，ＭｇＳＯ　０．１５　；并且通　过研究茵种种龄对液体深层发酵灵芝茵丝生物量及漆酶活性的影响，确定了灵芝液体深层发酵所　

需菌种的最适种龄为４　ｄ．　（关键词）　灵芝；培养基；多糖；漆酶；种龄　（文章编号］　１６７２—２０２７（２Ｏ１３）０２－０１２９—０４　（中图分类号］０６９　（文献标识码）　Ａ　

灵芝（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ　Ｌｕｃｉｄｕｍ）是我国传统名贵药食两用菌，古代被称之为神草．始载于汉代《神农本草　

经》，被认为能“益心气”、“安精魂”、“补肝益气”、“坚筋骨”，列为上品　卜　．灵芝多糖具有抗肿瘤作用，近年来　

引起了人们的广泛重视．目前我国灵芝多糖主要从灵芝子实体中提取，但野生资源稀缺，而人工栽培生产周　

期长（２个月ＩＰＡ３ｃ）Ｅ引，采用液体深层培养的方法来获取灵芝菌丝体和灵芝多糖，可大大缩短培养的周期Ⅲ．　

本文对灵芝菌丝液体深层发酵的培养条件进行了初步研究，以期为规模化生产提供实验依据．　

１材料和方法　

１．１　菌种培养　

实验菌株：赤芝６号．　

斜面培养基：ＰＤＡ培养基，ｐＨ自然．　

液体种子培养基：土豆２Ｏ　，葡萄糖２　，ＫＨ　ＰＯ　０．３　，ＭｇＳＯ　０．０７５　，ｐＨ自然．　

草菇菌种原种配方

草菇菌种原种配方

草菇菌种原种配方

一、引言

草菇是一种常见的食用菌，深受人们喜爱。而草菇的种植过程中，菌种的选择和配方是至关重要的。本文将介绍草菇菌种原种配方的相关内容，包括菌种选择、培养基配方和培养条件等方面。

二、菌种选择

在草菇菌种原种配方中，菌种的选择是第一步。合适的菌种能够保证菌丝的生长和菌盖的良好品质。常用的草菇菌种有杨树菇、松树菇、竹荪菇等。在选择菌种时，要考虑其适应性、生长速度和产量等因素，以及市场需求。

三、培养基配方

草菇菌种原种配方中的培养基配方是非常重要的一环。培养基的成分要能够提供菌丝生长所需的营养物质，并且要保持适当的pH值和湿度。下面是一种常用的草菇菌种原种培养基配方：

1. 碳源：玉米粉、蔗糖、木质素等；

2. 氮源：麸皮、豆粉、蛋白粉等；

3. 矿物质：石膏、石灰、磷酸二氢钾等；

4. 维生素：维生素B1、B2、B6等；

5. pH调节剂：氢氧化钠、磷酸等；

6. 湿度调节剂：水。

根据不同的菌种和培养条件，可以进行适当的调整和改进。此外，还可以添加一些生长促进剂、抗菌剂和保鲜剂等，以提高菌丝的生长速度和产量。

四、培养条件

除了菌种选择和培养基配方，草菇菌种原种配方中的培养条件也是非常重要的。以下是一些常见的培养条件要点：

1. 温度：草菇的适宜生长温度为20-25摄氏度。过高或过低的温度都会影响菌丝的生长和产量。

2. 光照：草菇属于光照喜好菌种，但直射阳光会对菌丝生长不利。因此，应保持适当的光照强度和光照时间。

3. 通风：草菇菌种原种的培养环境要保持适当的通风量，以保持空气的新鲜度和湿度的稳定。

4. 湿度：草菇对湿度要求较高，通常保持在80%左右。过高或过低的湿度都会影响菌丝的生长和菌盖的形成。

5. pH值：草菇菌种原种的适宜pH值范围为6-7.5，过高或过低的pH值都会影响菌丝的生长和产量。

以上是草菇菌种原种配方中的一些要点，通过合理的菌种选择、适宜的培养基配方以及恰当的培养条件，可以获得优质的草菇产品。

草菇栽培实验

草菇栽培实验

草菇栽培实验

一、【实验目的】

1、学习草菇的栽培操作步骤 。

2、掌握草菇的栽培难点及关键技术。

3、通过草菇的理论学习掌握食用菌袋料栽培的一般方法和栽培管理技术。

二、【实验原理】

袋式栽培是目前国内应用最为普遍的一种栽培方法。按照培养料的不同处理方式，可分为生料、发酵料、熟料、发酵熟料4种袋式栽培法。与床式栽培相比，袋式栽培在封闭条件下发菌，能有效地控制杂菌污染，提高栽培成功率；菌袋可立体堆码，能大量节约做菇床和栽培架的开支。

三、【实验材料】

1、食用菌品种：草菇菌种。

2、草菇配方：干稻草100kg，米糠或麸皮3-5kg , 过磷酸钙50kg，石灰1kg，肥土或火烧土适量。

3、仪器用具： 75%酒精、棉球、酒精灯、接种镊子、聚丙烯塑料袋、颈圈、高压蒸气灭菌锅等。

四、【实验步骤】

1、培养料的配制和发酵

以稻草为主原料:将稻草切成5～10cm长或用粉碎机粉碎。切碎的稻草用石灰水浸泡，每100kg草用5kg石灰，浸泡6h后捞起沥干，拌入石膏、畜禽粪、复合肥、磷肥、草木灰等建堆发酵。一般堆宽1.2m，堆高1m，长度1m以上，堆中间要适当打通气孔堆制好后，要盖膜保湿。堆制时间共5d，中间翻堆1次，翻堆时可加入米糠或麦麸（也可在铺料前拌匀加入），添加总量不超过5％。堆制发酵好的培养料要求质地柔软，含水量70％，pH9.0左右。堆制发酵后最好经二次发酵特别是添加了米糠或麦麸、干牛粪的原料，一定要进行二次发酵。

2、播种

当料温降至36℃左右时趁热播种（低温反季节时38～40℃），播种方法有穴播、条播、撒播。在生产上，大多采用穴播和垄式条播。采用穴播时，菌种掰成胡桃大小为宜，穴深3-5cm，穴距8-10cm。垄式条播是草菇高产的一种新方法，（每100kg料可产鲜草菇60kg上），方法是采用三层垄式栽培，先在地面或床架铺料，宽30～40cm，厚10cm，长度不等。沿四周播一层菌种，麦麸用前用3％的石灰水拌湿后放在菇房内进行二次发酵。在播种中心向内撒一层10cm宽的麦麸带，按上述方法铺第二层料、播种、撒麦麸，最上面铺一层料，料面播一层菌种，并撒少许培养料将菌种覆盖。或于床面覆盖一薄层（1cm厚）火烧土或肥沃的沙壤土，并在土层上适量喷些1％的石灰水，保持土层湿润，再盖上塑料薄膜以保温。

草菇生长要求的环境条件

草菇生长要求的环境条件

- 1 - 草菇生长要求的环境条件

1.温度：草菇属高温型伞菌，孢子萌发所需温度为25~45℃，以40℃为适宜，高于45℃或低于25℃均不能萌发。草菇菌丝生长能适应的温度范围是20~40℃，生长最适宜的温度为35~36℃，在这种温度下，菌丝生长最快。在低于15℃或高于42℃的情况下，菌丝生长缓慢，10℃停止生长，5℃以下菌丝很快死亡。子实体发育的适宜温度为28~32℃，气温在27~32℃最适宜，24℃以下时，子实体难以形成。在35℃以上高温下生长的草菇较早熟，并容易开伞，子实体较小。

2.水分：草姑喜欢生活在潮湿环境中，在高温高湿下才能出菇。水分不足，当只有50%时，菌丝生长缓慢，子实体难以形成，水分在65%以下时，子实体表面无光泽，且有凹凸不平的皱纹。但水分过多，将引起通气不良，造成烂菇和死菇。草堆含水量以75%左右为适宜，若低于60%或高于90%，皆不利于草菇的生长发育，空气相对湿度在菌丝生长阶段以80%为适宜，子实体发育阶段以85%--95%为适宜。

3.空气：草菇是好气性的菌类，菌丝生长阶段只需要少量通风，每天短时间通风换气即可，子实体发育阶段需较多的氧气，尤其是菇体快速发育时对新鲜空气的流通更为重要。因菇体生长需大量的氧气，若氧气不足，二氧化碳积累太多，会使子实体生长受抑制。所以，料堆水分不宜太多，草堆不宜太大、太厚；在菇场通风时，通气不能太快、太长， - 2 - 以免水分过分蒸发。

4.酸碱度：草菇适宜于在偏碱的环境条件下生长，菌丝正常生长的pH值在4--8，但以6.2--7.5为最适，菌丝生长旺盛，pH值在3以下，9以上时菌丝受阴，有报道草菇菌丝在pH值为12时仍能缓慢生长，所以在生产实践中最好将培养料的pH值控制在8左右，这样可有效地防止杂菌的污染。草菇的子实体形成的适宜pH值为5.0~7.0。

5.光线：草菇的担孢子萌发和菌丝生长完全不需要光线，但散射光是促进子实体形成的条件之一，在黑暗中菌丝是不会形成子实体的。同样，强烈的直射光对菇体生长有更严重的抑制作用，因此草菇喜半阴的散射光。适宜的散射光能促进子实体原基形成，生长健壮，增强抗病力，并有利于色素的转化。在露地栽培草菇时，可以覆盖草被，避免强烈的直射光照射，同时也避免了草堆水分大量蒸发。