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羟基蛋氨酸铁(铜、锰、锌)螯合率的测定长沙兴嘉生物工程质检中心氨基酸微量元素螯合物的生物利用率比无机离子的利用率高2~3倍，使用氨基酸微量元素螯合物是解决过量添加无机盐造成环境污染这一难题的有效方法，同时也防止了无机盐产生的不良妨碍及对维生素的拮抗作用。
但氨基酸微量元素螯合物在饲料生产中应用还对比滞后，其缘故除了价格因素外，缺乏适宜的质量检测方法，也是推广应用的一个重要障碍，目前在产品标签保证值中大多仅明示矿物元素和氨基酸的百分含量，用户无法客看地评价螯合物产品质量。
本研究旨在为羟基蛋氨基酸螯合物的质量检验提供一种简便有用的方法。
1原理试样经加热溶解、离心不离，分成沉淀态螯合元素、可溶性螯合元素及游离态金属离子。
可溶性螯合元素及游离态金属离子通过凝胶色谱，在规定条件下洗脱，实现可溶性螯合态金属元素和游离态金属离子的不离，从而可分不测得螯合态金属元素和游离态金属离子的含量，分不用原子汲取光谱法测定沉淀态螯合元素、可溶性螯合元素及游离态金属离子的含量，即可计算出相应的氨基酸螯合物的螯合率。
2试剂和材料实验用水应符合GB6682中三级用水的规格，使用试剂除特不规定外，均为分析纯。
克拉克—鲁布斯〔Clark—lubs〕缓冲溶液的配制—鲁布斯〔Clark—lubs〕缓冲液的配制分不量取 1.0mL氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL氯化钾(0.4mol/L)溶液，注进100mL容量瓶，稀释至刻度。
—鲁布斯〔Clark—lubs〕缓冲液分不量取20.8mL氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL氯化钾(0.4mol/L)溶液，注进100mL容量瓶，稀释至刻度。
—鲁布斯〔Clark—lubs〕缓冲液分不量取43.7mL氢氧化钠(0.1mol/L)溶液,12.5mL硼酸(0.4mol/L)溶液，12.5mL氯化钾(0.4mol/L)溶液，注进100mL容量瓶，稀释至刻度。
微量元素氨基酸螯合物合成及螯合率测定的研究一、引言微量元素是生命体系中不可缺少的重要元素，包括铁、锌、铜、锰等。
它们在生物体内发挥着重要的生理作用，如参与酶的催化反应、维持细胞结构和功能等。
而氨基酸作为生物体内的基本组成单元之一，也具有重要作用。
因此，将微量元素与氨基酸螯合形成氨基酸螯合物，不仅可以提高微量元素在生物体内的利用率，还可以增强其生物活性和稳定性。
二、微量元素氨基酸螯合物的合成方法1. 化学合成法化学合成法是一种常见的制备微量元素氨基酸螯合物的方法。
首先，在水溶液中加入适量的氨基酸，并与所需微量元素盐溶液混合，在调节pH值后加入还原剂进行还原反应，得到相应的螯合物。
该方法操作简单易行，但需要注意控制反应条件以避免产生副产物。
2. 生物法利用微生物或植物进行微量元素氨基酸螯合物的制备也是一种常见的方法。
例如，可以利用某些微生物如乳酸菌等在发酵过程中产生的氨基酸与微量元素形成螯合物。
这种方法具有较高的选择性和效率，且不需要使用有毒有害的化学试剂。
三、微量元素氨基酸螯合物的螯合率测定方法1. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种常用的测定微量元素氨基酸螯合物螯合率的方法。
该方法通过测定样品在特定波长下吸收的光强度来计算其螯合率。
优点是操作简单、快速，但需要准确控制实验条件以避免误差。
2. 原子吸收光谱法原子吸收光谱法是一种准确性较高的测定微量元素氨基酸螯合物螯合率的方法。
该方法通过将样品中所含微量元素原子激发至高能态，然后测定其在特定波长下发射或吸收的光强度来计算其螯合率。
但该方法需要专业设备和技术支持，并且操作步骤较为复杂。
四、微量元素氨基酸螯合物的应用微量元素氨基酸螯合物在农业、医药、食品等领域都有广泛的应用。
例如，可以将铁螯合成氨基酸螯合物添加到饲料中，提高动物体内铁的吸收率和利用率；将锌螯合成氨基酸螯合物添加到医药品中，提高其生物利用度和稳定性；将锰螯合成氨基酸螯合物添加到植物肥料中，改善土壤环境并促进植物生长。
![氨基酸螯合物等保健食品申报与审评规定(试行)-国食药监注[2005]202号](https://img.taocdn.com/s1/m/b8c489dd8ad63186bceb19e8b8f67c1cfad6ee4b.png)
氨基酸螯合物等保健食品申报与审评规定(试行)正文：---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 氨基酸螯合物等保健食品申报与审评规定(试行)（国食药监注[2005]202号2005年5月20日）第一条为规范保健食品审评工作，根据《中华人民共和国食品卫生法》和《保健食品注册管理办法（试行）》，制定本规定。
第二条申请注册使用氨基酸螯合物生产的保健食品，除按保健食品注册管理有关规定提交有关资料外，还应提供如下资料：（一）提供明确的产品化学结构式、物理化学性质，配体与金属离子之比、游离元素和总元素之比。
（二）提供氨基酸螯合物定性、定量的检测方法（包括原料和产品）以及国家食品药品监督管理局确定的检验机构出具的验证报告。
（三）国家食品药品监督管理局确定的检验机构出具的急性毒性试验加做停食16小时后空腹一次灌胃试验（分别在灌胃2小时、4小时后重点观察消化道大体解剖和病理变化情况）和30天喂养试验[肝、肾、胃肠（包括十二指肠、空肠、回肠）]的组织病理报告。
（四）国内外该氨基酸螯合物食用的文献资料。
第三条申请注册使用微生物发酵直接生产的保健食品，除按保健食品有关规定提交相关资料外，还需提供下列资料：（一）菌种来源及国家食品药品监督管理局确定的检验机构出具的菌种鉴定报告。
（二）菌种的毒力试验报告。
（三）菌种的安全性评价报告。
（四）国内外该菌种用于食品生产的文献资料。
（五）发酵终产物的质量标准（包括纯度、杂质成分及含量）。
第四条申请注册以褪黑素为原料生产的保健食品，除按照保健食品注册有关规定提交资料外，还需提供下列资料，并符合下列要求：（一）产品配方中除褪黑素和必要的辅料（赋形剂）外，不得添加其他成分（维生素B6除外）。
一、测定螯合率称取一定量的氨基酸螯合物样品, 溶于蒸馏水中, 并定容到100mL, 摇匀。
取25mL到250mL锥形瓶中, 加3滴PAN指示剂或二甲酸橙指示剂; 用0.02mol/L EDTA溶液滴定, 记下所消耗溶液的体积V0。
另称相同量的氨基酸螯合物样品, 加50mL乙醇, 水浴温热并充分搅拌, 离心分离, 沉淀用蒸馏水洗, 定容到100mL, 摇匀。
取25mL到250mL锥形瓶中, 加3 滴PAN指示剂或二甲酸橙指示剂; 用0.02mol/L的EDTA溶液滴定, 记下所消耗的溶液的体积V1。
计算螯合率和金属元素总量。
二、计算螯合率氨基酸金属元素螯合物通过配位键形成了一个内络盐结构, 稳定性较好, 稳定常数在104～105, 但EDTA-M络合物的定常数lgK=18.8, 远大于氨基酸金属螯合物的稳定常数, 可以用EDTA配位滴定法直接滴定氨基酸螯合物中的金属[6]。
由此可以计算出样品的螯合率和金属元素的总含量:螯合率(%)= 螯合态金属元素的含量金属元素总量×100= CV1/CV0×100=V1/V0×100式中: C———标准EDTA溶液的浓度, mol/L;V1———滴定螯合态金属元素所消耗的EDTA溶液的体积, mL;V0———滴定金属元素总量所消耗的EDTA溶液的体积, mL。
金属元素的总量(%)= C×V0×10- 3×M×4 m×100式中: C———标准EDTA溶液的浓度, mol/L; V0———滴定金属元素总量所消耗的EDTA溶液的体积, mL;M———金属元素的分子量, g/mol; m———称取的样品量, g。
氨基酸金属离子螯合物合成条件及测定方法的研究一、本文概述氨基酸金属离子螯合物是一类重要的生物无机化合物，具有广泛的应用价值，包括在医药、农业、食品、环境科学等领域。
这些化合物是由氨基酸分子中的羧基、氨基和侧链功能团与金属离子通过配位键形成的稳定结构。
由于氨基酸的种类繁多，以及金属离子的多样性，使得氨基酸金属离子螯合物的种类非常丰富，其合成条件及测定方法也具有独特性和复杂性。
本文旨在深入研究氨基酸金属离子螯合物的合成条件及测定方法。
我们将探讨不同氨基酸与金属离子形成螯合物的最佳反应条件，包括反应温度、pH值、反应时间、溶剂种类等因素对螯合物形成的影响。
我们将研究氨基酸金属离子螯合物的表征方法，如红外光谱、紫外光谱、核磁共振等，以及测定其稳定性、溶解性等物化性质的方法。
我们还将探讨氨基酸金属离子螯合物的生物活性及其潜在的应用价值。
通过本文的研究，我们期望能够为氨基酸金属离子螯合物的合成提供理论依据和技术支持，为其在各个领域的应用提供基础数据和实验依据。
我们也期望通过本文的研究，能够推动氨基酸金属离子螯合物领域的研究进展，为相关领域的学者和从业者提供有价值的参考信息。
二、氨基酸金属离子螯合物的合成条件研究氨基酸金属离子螯合物的合成是一个涉及多种因素的过程，包括反应温度、pH值、反应时间、氨基酸与金属离子的摩尔比等。
为了优化合成条件，本研究对这些因素进行了系统的研究。
反应温度对螯合物的形成有显著影响。
一般来说，适当的提高温度可以加速反应速率，但过高的温度可能导致反应失控或生成不稳定的副产物。
因此，我们在室温至沸腾温度范围内设置了多个温度点，观察其对螯合物生成的影响。
实验结果显示，在60-80℃的温度范围内，氨基酸与金属离子的螯合反应进行得较为顺利，产物的生成速度和纯度均达到较优水平。
pH值也是影响螯合物合成的重要因素。
氨基酸在不同pH值下具有不同的电离状态，这直接影响其与金属离子的配位能力。
我们通过调整反应溶液的pH值，观察其对螯合物生成的影响。
金属氨基酸螯合物质量的检测方法
金属氨基酸螯合物质量的检测方法
美国企利
摘要：到当前为止，没有一种单一的检测方法就能够对螯合物的质量做出最终的评价。
本文所介绍的原子吸收光谱法(AAS)和选择性离子电极(ISE)相结合，经过检测产品中总的金属含量和溶液中自由金属离子的含量，两者之间的差值就是螯合金属的量。
这种方法，即判断不螯合或弱螯合，要比试图直接检测螯合金属要来的容易和简单。
关键词：氨基酸螯合物，原子吸收光谱法(AAS)，选择性离子电极(ISE)
Abstract: At present， no single test can effective give the conclusive chelates quality. This article introduce using atomic absorption spectrophotometry(AAS) and Ion selective electrodes to determine the total metal and free metal ion (unbound free metal)， the difference show the amount of bound metal. It is easier and simple to judge no-bound or weak-bound than try to measure the bound metal.
Key words: Amino Acid Chelates，Atomic Absorption Spectrophotometry(AAS)，Ion selective electrodes(ISE)
前言
现在，一个国家的饲料监督管理部门能够在市场上发现有将近30种能够称之谓有机物的产品用于动物饲料中。
这些产品范围很宽广，只要是金属与有机分子结合，能给动物提供必须营养，就能够称为有机物，包括了从甲酸钙(蚁酸钙)到蛋白锌等整个范围。
大多数的营养学家相信，真正的有机微量金属要比无机微量金属具有更好的生物利用率。
虽然大家都认识到螯合物的优势，但她们实际面临的难题就是现在如何判断市场上出现的复合物和螯合物，这些数不清的金属螯合物，它们的质量和潜在有效性究竟如何。
在这些产品里，理论上金属元素被认为是与有机分子结合的，受到有机分子或配位体结构的保护，在消化道里比较稳定，直至最终被小肠吸收。
但当前市场上购得的有机微量金属缺少一种标准的实验室方法来测定其螯合程度。
现在，人们对螯合物的兴趣在不断增加，原本想给动物经过添加高剂量无机物达到足够生理需求量，但高剂量无机微量金属并没有贮留，而只是在消化道中路过，大量的无机物随粪便排到环境中，造成严重的金属污染。
经过使用有机螯合物，能够达到高水平的体内贮留。
饲料生产者能够减少添加的微量金属总量。
现在已经研发出一些新的化验方法来帮助评估这些有机微量金属产品的质量，特别是它们的螯合程度。
螯合物的复杂性给质量检测提出新难题
金属氨基酸复合物、金属蛋白盐和金属氨基酸螯合物都是来自美国饲料官员协会(AAFCO)的24种已批准和五种正申报的有机微量金属的定义。
这些产品在注册和登记时采用了许多不同的方法和途径，部分原因是这些产品常常很难去化验确认。
Grahame Leach博士指出，即使在很简单的化学体系中，一个金属和一个配位体有时候很难证明究竟是复合还是螯合。
Leach 博士是一个专攻有机生化的化学家，其专长是金属螯合物在动物营养方面的应用。
她在美国企利矿物质公司工作，这是美国第一家专业生产金属螯合物的跨国公司。
她说，由于螯合物结构非常复杂，结合的金属和较大的有机分子之间有很多种可能，这就使得要直接提供充分的证据来证明产品确实是螯合及螯合程度，变得越来越难。
“在氨基酸和微量金属之间发生的反应”Leach 博士解释说，“一种单一的氨基酸和单一的金属，仅仅是在某种特定的反应条件下，很容易就能够形成5到18种可能的化学结构。
进一步，水解蛋白质所形成的多种多样的肽或氨基酸，这种复杂性使得证明是螯合的任务难上加难。
证明金属是螯合的，这很重要，如果金属元素不是螯合的，自由的金属离子将会与竞争性的配位体，像是磷酸盐，植酸盐和其它的化合物等
结合。
与竞争性的配位体结合会导致金属不能够被吸收。
到当前为止，还没有有效地办法来测定螯合物的
质量。
她指出，国际性的AOAC批准的唯一分析方法是，测定总金属的含量，但这并不能区分金属是结合的还是自由的。
可疑的检测方法
缺少有效的检测方法，这意味着开发出的许多神
奇检测方法都没有真正的科学理论支撑。
这些可疑的方法包括测定分子大小，分子量和可溶性。
Leach 博士说，作为单独的方法，分子量大小并不能作为衡量螯合物的一个标准。
蒸汽压力薄膜渗透法，只能计算出平均分子
量。
而且，多成份的螯合物能够包括较大范围的化学成分，以及
较大范围的分子量。
质谱法和透析薄膜法能描绘出更详细的图
画。
Leach 博士说，可是这些技术能引起螯合物的解离，因此充其量只是能展示真实分子量的分布而矣。
分子量只是能稍微有一点表明样品中原子(元素)的组成，很少能表明结合的模式。
仅仅一个数字不能区分是一个
金属与二个小分子量配位体的结合，还是根本就没有与任何金属
结合的中等分子量的二肽配位体。
极低的分子量表明没有结合，仅仅是自由的简单配位体。
而中等
分子量范围和高分子量，这就很难说。
这也是导致某些产品规则。
