茶多酚的提取.ppt

茶叶中茶多酚的提取纯化1，实验内容1.1，浸出物的测定1.2，茶多酚含量的检测1.3，咖啡碱含量检测1.5，蛋白质含量的检测1.6，总糖含量的检测1.7，提取纯化2，实验步骤2.1，试样的制备称取3g（精至0.001g）磨碎试样于500mL锥形瓶中加入水温约为46.2℃蒸馏水164.2g，立即移入水温为46.2℃恒温箱中，浸提9.6min。

浸提完毕后立即趁热减压过滤。

滤液移入容量瓶中。

重复上次步骤对试样进行二次浸提。

最后残渣用热蒸馏水洗涤两到三次，并移入容量瓶，并定容。

2.2，浸出物的测量将具盖蒸发皿至于103+-2℃的恒温箱内烘干1h，取出，在干燥器内冷却至室温，称量（精至0.001g）。

准确称取上述试液50mL，注入已知质量的蒸发皿中，在沸水浴中小心蒸干，然后移到103+-2℃的恒温干燥箱中烘干3小时取出加盖，立即移到干燥器内冷却至室温，称量。

再烘干1小时，再移至干燥器至室温，称量，重复至两次称量差不超过0.001g以最小称量为准。

2.3茶多酚含量的检测【实验原理】在一定pH值条件下，酒石酸铁能与多酚类物质反应形成蓝紫色络合物，该络合物在540nm 波长下具有最大吸光度。

在适当的浓度范围内，茶多酚的含量与络合物的吸光度成正比，符合朗伯－比尔定律，因此可用分光光度法对茶多酚定量分析。

【实验材料及步骤】1、酒石酸亚铁溶液：称取1g（准确至0.0001g）硫酸亚铁和5g（准确至0.0001g）酒石酸钾钠，用水溶解并定容至1L（此液放置过夜后使用，可稳定1星期）。

2、pH＝7.5的磷酸盐缓冲液：a液（1/15mol/L的磷酸氢二钠溶液）：称取磷酸氢二钠23.877g，加水溶解并稀释至1L；b液（1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液）：称取经110℃烘干2h的磷酸二氢钾9.078g，加水溶解并稀释至1L。

取a 液85mL和b液15mL混匀，即得pH＝7.5磷酸盐缓冲溶液。

3、供试液的制备与测定：准确吸取待测溶液1mL，将其稀释1～25倍，移至25mL容量瓶中再从稀释液中准确吸取1mL，注入25mL 的容量瓶中，加水4mL 和酒石酸亚铁溶液5mL，充分混合，再加pH＝7.5 的磷酸盐缓冲溶液至刻度，用1cm 比色杯，在波长540nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度。

茶多酚提取实验蚌埠学院生物与食品工程系综合实验实验名称：茶多酚的提取工艺试验一、实验目的及要求：1.了解茶多酚的性质和用途。

2.了解植物天然产物的常规提取及精制方法。

3.通过本实验的具体操作，掌握并熟悉茶多酚的提取与精制的方法及其操作原理和步骤。

4.掌握提取精制过程中茶多酚的分析检测方法。

二、实验原理：茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，含量约占茶叶干重量的20％－30％。

茶多酚可以消除超氧阴离子和过氧化氢自由基，同时具有抑菌、杀菌，有效降低大肠对胆固醇的吸收，增强机体免疫能力等功能。

目前，茶多酚被广泛的用作食品、饮料、药品和化妆品的天然添加成分。

（离子沉淀法）茶多酚易溶于热水，与一些金属离子形成络合物，并在一定pH值下溶解度很低。

形成的金属离子络合物溶于酸溶液后，茶多酚再次转变成游离状态，再用对茶多酚有更好选择性的溶剂进行萃取、浓缩和干燥，即可得到茶多酚的纯品。

三、实验仪器：电动搅拌器、离心机、pH试纸、真空干燥箱、抽虑瓶、旋转蒸发仪、真空泵、天平、紫外分光光度计、容量瓶、烧杯、量筒等。

四、实验试剂及材料：氯化钠、碳酸氢钠、柠檬酸、硫酸铝、盐酸、亚硫酸氢钠、乙酸乙酯、维生素C（抗坏血酸）、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、硫酸、绿茶等五、实验内容及步骤：1．浸提1.1 预处理:粉碎干茶叶;粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高；1.2 提取:准确称取经过预处理的干茶叶末10. 00g,按照单因素实验的料液比、浸提温度、浸提时间分别搅拌浸提。

过滤（用抽滤的方法）得到茶多酚提取液。

用附一的方法测提取液中的茶多酚含量。

单因素实验步骤：（1）将称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在85℃下，分别提取0.5h、0.75h、1.0h、1.25h、1.5h，测提取液的吸光度，绘制曲线图，找出最佳提取时间。

（2）称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在所测得的最佳提取时间下，分别在75℃、80℃、85℃、90℃、95℃下浸提，测提取液的吸光度，绘制曲线，找出最佳提取温度。

茶多酚的提取
提取茶多酚的方法一般分为两种，一种是化学提取法，另一种是物理提取法。

1.化学提取法：首先将茶叶添加到有机溶剂中（如乙醇、乙酸乙酯），用乙醇或乙酸乙酯提升茶多酚含量，通常用于油性或极端复杂的多酚混合物。

2.物理提取法：这种方法利用政戒法（如冷冻干燥、液体挥发凝固沉淀）、萃取（如溶剂萃取）和微滤及吸附来提取茶多酚。

物理提取需要一定的技术，需要精确控制时间、温度和压力条件，以保持产品质量，同时还要求大量溶剂消耗和污染物的排放。

茶多酚的提取实验目的1.尝试探究未知实验的原理与实现方法，根据资料自行设计实验。

2.练习离子沉淀方法的操作。

实验原理茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。

其中以黄烷醇类物质（儿茶素）最为重要。

茶多酚又称茶鞣或茶单宁，是形成茶叶色香味的主要成份之一，也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。

本草千叶IT茶中含有丰富的茶多酚。

茶多酚在茶叶中的含量一般在15％－－20％。

理化性质1、物理性质茶多酚在常温下呈浅黄或浅绿色粉末，易溶于温水(40℃一80℃)和含水乙醇中；稳定性极强，在pH值4—8、250℃左右的环境中，1.5个小时内均能保持稳定，在三价铁离子下易分解。

2、化学性质茶多酚是从茶叶中提取的全天然抗氧化食品，具有抗氧化能力强，无毒副作用，无异味等特点。

利用沸水煮，可将茶叶中的有机物分离，过滤即可得到含茶多酚的液体。

将滤液进行离子沉淀，可将茶多酚与其余有机物分开，得到含量较高的茶多酚与该离子盐的混合物。

酸转溶并萃取，再蒸干溶剂即可得到含量达90%以上的茶多酚晶体。

茶叶；0.5mol/L NaHCO3 溶液；0.1mol/L AlCl3溶液50mL；80mL乙酸乙酯；实验仪器100mL圆底烧瓶；可加热磁力搅拌器；天平；布氏漏斗；蒸馏装置；分液漏斗。

实验步骤1.取2g茶叶，尽量研碎，加入40mL水，加热至85℃，持续大约1h，冷却后抽滤得茶叶浸提液；2.在滤液中加入0.1mol/L AlCl3溶液50mL，再用0.5mol/L NaHCO3 溶液调节ph为5~6之间，这时产生沉淀，抽滤得沉淀；3.将沉淀在60℃水浴下用80mL0.016 mol/L的稀硫酸转溶15min，抽滤取滤液；4.用40mL的乙酸乙酯萃取2次，每次萃取时间为10min，合并萃取液；5.蒸馏，将乙酸乙酯回收，剩余固体为茶多酚。

加热装置萃取装置乙酸乙酯回收及茶多酚固体蒸干装置实验结果实验中，由于使用的是原始材料，需要自行计算与配制溶液，过程繁杂，仪器使用的种类与数量均很多，各种操作也多，并有减压蒸馏的新方法，对我构成了极大的挑战。

茶多酚的提取
一．实验器材：
pH酸度计、索氏提取器、分液漏斗、蒸馏装置、温度计、小烧杯两个、大烧杯两个、棕色玻璃瓶一个。

二.所用药品
70%乙醇、0.415mol/LZnCl2、15%NaHCO3、2mol/L硫酸溶液、乙酸乙酯、2%维生素C水溶液、柠檬酸。

三.实验步骤
1.提取
称取10g茶叶末放入索氏提取器中，按物料比1：20加入70%乙醇，回流2小时（在70ºC条件下）。

2. 沉淀
移取浓缩后的茶多酚提取液10 mL于小烧杯中，加入0．415 mol/L ZnC1 水溶液，摇匀，用质量分数15％的NaHCO3水溶液调节酸度，在室温条件用酸度计测定，离心得到茶多酚——锌盐沉淀，用蒸馏水洗涤沉淀物2次，称重，计算茶多酚的沉淀率。

3.萃取
将茶多酚——锌盐沉淀移至烧杯中，加入2倍体积的蒸馏水混匀，室温下加入一定量硫酸溶液，沉淀物溶解（料酸体积比1：2），离心去除少量胶状沉淀。

茶多酚酸转液用15％的NaHCO3水溶液调节酸度，再用乙酸乙酯在室温下分两次萃取，合并萃取液（20ºC下，转溶15min）。

在乙酸乙酯相中加入质量分数为2％的Vc水溶液(用柠檬酸调节pH为3．0)，两者体积比为2：1，洗涤两次。

60℃减压浓缩酯相回收大部分乙酸乙酯。

在60ºC下进行真空干燥，成品茶多酚为棕黄色粉末，置于棕色玻璃瓶中低温保存。

茶叶中茶多酚的提取方案茶叶中富含一类多羟基的酚类物质, 即茶多酚( T ea Polyphenols, 简称T P) , 它是以儿茶素类( 约占TP 的79% ) 为主体的多酚类化合物; 此外, 还含有黄酮、黄酮苷类、花色素类、酚酸及缩酚酸等。

TP 占绿茶干物质的20% ~ 30%, 具有很强的抗氧化作用和良好的药理作用, 能够高效地抗癌、抗衰老、抗辐射、清除人体自由基、降血糖和血脂。

本研究以茶多酚提取产率和含量为指标, 对浸提溶剂浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等因素进行比较, 确定绿茶中茶多酚的最佳提取条件, 为茶多酚的工业化提取提供科学依据。

1 材料与方法1.1 材料与仪器绿茶、分光光度计、恒温水浴箱、恒温干燥器、过滤及萃取的设备。

1.2 试剂硫酸亚铁、酒石酸钾钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、乙醇、氯仿、乙酸乙酯等均为优级纯化学试剂。

1.3 茶多酚提取采用溶剂萃取法, 其原理是根据T P 易溶于水、乙醇、乙酸乙酯等溶剂的性质, 用水或乙醇先将茶多酚从茶叶中提取出来, 用氯仿除去杂质, 再用乙酸乙酯将其从水提物中分离出来,最后将乙酸乙酯回收, 即得到固体的茶多酚, 计算其产率。

提取方法见图1。

1.4 正交试验设计及结果按照上述提取工艺, 经过多次单因子对比试验, 正交试验设计为: 选择浸提溶剂乙醇浓度、浸提时间、等量氯仿萃取次数、等量乙酸乙酯萃取次数等4 个因素,每个因素3水平,见表1。

以茶多酚的产率和含量为考察指标, 用L9( 34) 正交表安排试验, 其结果见表2。

表1 正交试验因素- 水平表( 试验条件)水平因素浸提溶剂浓度( %) A浸提时间( h) B等量氯仿萃取次数C等量乙酸乙酯萃取次数D1 95 1 1 12 80 1.5 2 23 60 2 3 3表2 正交试验设计及结果A B C D 产率( %) 含量( %)1 1 1 1 12 1 2 2 23 1 3 3 34 2 1 2 35 2 2 3 16 2 3 1 27 3 1 3 28 3 2 1 39 3 3 2 1产率( %)K1 E = E = K2K3R含量( %)K1K2K3R1.5 茶多酚含量的测定准确称取所制得的茶多酚粉末0.1g,加入蒸馏水,完全溶解,定容至100 mL 水溶液备用。