胰酶水解猪皮胶原蛋白及其产物氨基酸分析
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天然产物研究与开发N at Prod Res D ev 2009,21:1222124,182文章编号:100126880(2009)0120122204 收稿日期:2007210219 接受日期:2007212229 基金项目:上海市食品研究所项目基金(技04252)3通讯作者E 2mail:pgzhou@shfu .edu .cn猪皮胶原蛋白水解产物中的抗氧化活性肽的分离及其氨基酸组分朱夕波,周培根3,李 燕,张 艳上海水产大学食品学院,上海200090摘 要:利用不同蛋白酶水解猪皮胶原蛋白,根据水解产物对自由基的清除率,筛选最适蛋白酶的组合,筛选抗氧化活性较高的肽类,并进行氨基酸分析。
结果表明:胃蛋白酶→木瓜蛋白酶→菠萝蛋白酶为酶解胶原蛋白的最佳组合;分离纯化得到了三种具有较高抗氧化活性的肽;氨基酸组分分析显示:P1′、P2′和P3′组分具有自由基清除作用的关键氨基酸甲硫氨酸、酪氨酸和组氨酸等。
关键词:胶原蛋白;水解;多肽;抗氧化活性;氨基酸中图分类号:R282.71/.77⑨05;TS251文献标识码:ASepara ti on of An ti ox i da ti ve Pepti des fro m Porc i n e Coll agen Hydrolysis and Its Ana lysis of Am i n o Ac i d Co m positi onZHU Xi 2bo,ZHOU Pei 2gen 3,L I Yan,ZHANG YanCollege of Food Science,Shanghai Fisheries U niversity,Shanghai 200090,ChinaAbstract:The combinati on of the different p r oteases,used f or hydr olyzing of the porcine collagen,and the anti oxidative pep tides were selected fr om hydr olysates based on the scavenging effect of the free radicalDPPH ・,and their a m ino acid compositi on of the pep tides was analyzed .The results showed that the combinati on of pep sin,papain and br omelain was op ti m u m f or hydr olysis of the collagen,and three kinds of the anti oxidative pep tides were purified .The assay of their a m i 2no acid compositi ons indicated that they contained the key a m ino acid f or the anti oxidati on,such asMet,Lyr,H is,et al .Key words:collagen;hydr olysis;pep tide;anti oxidati on;am ino acid analysis 胶原蛋白是构成胶原纤维、弹性纤维和网状纤维的蛋白质,是动物结缔组织的主要成分之一[1,2]。
酶解猪皮明胶制备抗疲劳肽及其功效研究酶解猪皮明胶制备抗疲劳肽及其功效研究引言:随着现代社会的快节奏生活,人们对于保持良好身体状况和提高生活质量的需求逐渐增加。
在这个背景下,抗疲劳产品得到了广泛的关注和研究。
猪皮明胶是一种来源广泛、制备简单的天然蛋白质,其中含有丰富的蛋白质和氨基酸。
酶解猪皮明胶通过酶解作用可以将其分解为更小的分子,从而释放出更多的肽类物质。
本研究旨在通过酶解猪皮明胶制备抗疲劳肽并探讨其功效。
研究方法:1. 实验材料准备本研究采用新鲜的猪皮作为原料,通过水煮和刮去残渣的方法制备猪皮明胶。
酶解试剂选用常用的蛋白酶,以其对猪皮明胶的酶解效果最佳。
其他实验所需材料包括显微镜、高效液相色谱仪等。
2. 酶解过程将制备好的猪皮明胶样品与蛋白酶按一定比例混合,然后在一定的温度和时间条件下进行酶解反应。
反应结束后,用热水杀菌停止酶解反应。
3. 肽分离和纯化通过浓缩和柱层析等分离技术,分离获得酶解后得到的肽类物质。
利用高效液相色谱仪对分离后的肽进行鉴定和纯化。
4. 抗疲劳活性评价利用小鼠模型进行抗疲劳效果的评价。
将小鼠分为实验组和对照组,实验组小鼠经口服酶解猪皮明胶肽,对照组给予等量的生理盐水。
通过强度和持久度的运动负荷测试,测定小鼠的疲劳状态。
结果与讨论:通过上述方法,成功制备了酶解猪皮明胶肽。
经过酶解反应和纯化处理后,得到了多肽分子,具体肽序列和组成尚需进一步研究。
抗疲劳活性评价结果显示,实验组小鼠在负荷测试中的强度和持久度表现比对照组明显更好。
这表明酶解猪皮明胶肽具有一定的抗疲劳效果。
结论:本研究通过酶解猪皮明胶成功制备了抗疲劳肽。
该抗疲劳肽能够显著改善小鼠在运动负荷下的疲劳状态。
这说明酶解猪皮明胶具有潜在的应用价值,可以用于开发抗疲劳产品。
然而,本研究还有一些待解决的问题,如酶解过程中的最佳条件、具体肽序列和组成等方面仍需进一步研究。
此外,人体实验的可行性和抗疲劳效果的持久性等相关问题也需要进一步深入探究。
猪皮胶原蛋白水解产物中的抗氧化活性肽的分离及其氨基酸组
分
朱夕波;周培根;李燕;张艳
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】2009(021)001
【摘要】利用不同蛋白酶水解猪皮胶原蛋白,根据水解产物对自由基的清除率,筛选最适蛋白酶的组合,筛选抗氧化活性较高的肽类,并进行氨基酸分析.结果表明:胃蛋白酶→木瓜蛋白酶→菠萝蛋白酶为酶解胶原蛋白的最佳组合;分离纯化得到了三种具有较高抗氧化活性的肽;氨基酸组分分析显示:P1′、P2′和P3′组分具有自由基清除作用的关键氨基酸甲硫氨酸、酪氨酸和组氨酸等.
【总页数】4页(P122-124,182)
【作者】朱夕波;周培根;李燕;张艳
【作者单位】上海水产大学食品学院,上海,200090;上海水产大学食品学院,上海,200090;上海水产大学食品学院,上海,200090;上海水产大学食品学院,上
海,200090
【正文语种】中文
【中图分类】R282.71/.77⑨05;TS251
【相关文献】
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猪皮酸解和酶解产物的制备及其抗氧化活性的研究的开题报告一、研究背景猪皮是一种常见的肉制品加工副产物,含有丰富的蛋白质、脂肪和胶原蛋白等营养成分。
猪皮的利用价值较高,但传统的猪皮处理方式对环境造成了一定程度的污染。
因此,对猪皮的高效利用和资源化再利用具有重要的现实意义。
猪皮酸解和酶解是利用化学和生物学方法将猪皮蛋白质降解得到具有一定功能性的多肽和氨基酸。
其中,酸解和酶解的产物具有不同的结构和性质,且抗氧化活性较高,具有广阔的应用前景。
因此,探究猪皮酸解和酶解的产物制备及其抗氧化活性的研究具有重要的学术和应用价值。
二、研究内容和目的1. 利用盐酸和酶水解的方法,对猪皮进行酸解和酶解处理,制备出不同的多肽和氨基酸产物。
2. 对不同产物的理化性质进行分析和表征,探究其分子结构和功能。
3. 考察不同产物的抗氧化活性,评价其应用前景和价值。
4. 探究酸解和酶解对猪皮蛋白质、脂肪和胶原蛋白等营养成分的影响,探究处理产物的营养成分含量变化。
三、研究方法1. 猪皮的酸解处理:将猪皮切成小块,加入适量的盐酸,调节酸度和温度等反应条件,通过酸水解反应将猪皮蛋白质水解成多肽和氨基酸。
2. 猪皮的酶解处理:将猪皮切成小块,加入适量的蛋白酶或胶原酶等酶类,调节酶解反应条件,将猪皮蛋白质降解成多肽和氨基酸。
3. 对不同产物的理化性质进行分析和表征:包括分子量、氨基酸组成、凝胶过滤色谱、高效液相色谱、电泳等分析方法。
4. 评价不同产物的抗氧化活性:采用自由基清除法、铁螯合法等方法进行测定。
5. 分析酸解和酶解对猪皮蛋白质、脂肪和胶原蛋白等营养成分含量变化:采用标准检测方法进行分析。
四、研究意义1. 探究猪皮酸解和酶解的产物制备及其抗氧化活性,为猪皮资源的高效利用和资源化再利用提供新思路和方法。
2. 通过分析猪皮的酸解和酶解处理对营养成分的影响,对猪皮的深加工和市场开发具有重要的理论和实践意义。
3. 探究猪皮蛋白质的酸解和酶解产物的结构与功能之间的关系,可为探索其他蛋白质酸解和酶解产物的结构与功能提供理论依据。
酶法提取猪皮胶原的工艺研究的开题报告一、选题背景胶原是一种结构的蛋白质,广泛分布于人、动物组织中,在组织支持、结构维护方面起着重要的作用。
猪皮作为一种常见的动物副产品,其中含有较高浓度的胶原蛋白,可以利用酶法提取猪皮胶原,其提取效率高、成本低,成为当前研究的热点之一。
本项目将对酶法提取猪皮胶原技术进行深入研究,为其工业化生产提供参考。
二、研究目的本项目旨在通过实验研究,探索酶法提取猪皮胶原的最佳提取工艺,分析不同工艺条件对提取效率、成本、产品纯度等指标的影响,为其工业化生产提供技术支撑。
三、研究内容1. 猪皮胶原提取酶的筛选以碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶等为提取酶,对猪皮胶原进行提取,通过对提取液中胶原质量浓度、胶原颗粒大小等指标的测定,筛选出较为适宜的提取酶。
2. 优化提取条件根据实验结果,设计提取酶浓度、提取液pH值、提取温度、提取时间等参数组合,采用正交实验法,优选提取条件,获得最佳提取效果。
3. 产品性质分析对提取得到的猪皮胶原产品进行蛋白质含量、氨基酸组成、颗粒大小等指标的测试和分析,评价产品的质量,为其后续应用提供参考。
四、研究方法1. 猪皮预处理:采用碱处理方法将猪皮去除不必要的杂质,后经水洗净后再进行酶解。
2. 酶解提取:采用不同的提取酶,在一定的反应条件下,将猪皮胶原逐步溶解提取。
3. 提取液清洁:采用沉淀、过滤等方法处理提取液,去除不溶的杂质,得到纯净的猪皮胶原。
4. 产品性质测试:通过蛋白质含量测定、SDS-PAGE电泳、氨基酸组成分析、单光子计数法测颗粒大小等方法,对猪皮胶原产品的性质进行测试。
五、预期成果1. 完成猪皮胶原酶法提取技术的实验研究,提取工艺条件得到优化。
2. 对猪皮胶原的产率、纯度、产品性质等进行测定分析。
3. 研究结果为猪皮胶原的工业化生产提供技术支撑,具有一定的理论价值和现实意义。
六、研究难点及解决途径研究难点主要包括:不同酶提取条件对猪皮胶原提取效果的影响、提取液清洁工艺方法的选择、提取液浓缩及干燥方法的选择等。
酶解—糖基化对猪皮胶原蛋白特性的影响目录一、研究背景与目的 (1)1. 猪皮胶原蛋白特性概述 (2)2. 研究意义与应用价值 (2)二、酶解工艺及参数优化研究 (3)1. 实验材料与试剂选择 (5)1.1 猪皮来源与处理工艺 (6)1.2 酶的种类与性质选择 (6)2. 实验方法与工艺流程 (7)2.1 酶解反应条件设置与优化 (8)2.2 酶解过程中理化性质变化分析 (9)三、糖基化反应研究及其对胶原蛋白特性的影响 (10)1. 糖基化反应原理及特点介绍 (11)2. 糖基化反应条件优化探索 (12)2.1 不同糖种类与浓度筛选 (13)2.2 反应温度与pH值调控策略 (14)四、猪皮胶原蛋白酶解—糖基化反应过程研究分析 (15)一、研究背景与目的随着生物技术和食品科学领域的迅速发展,猪皮胶原蛋白作为一种重要的天然高分子生物材料,其提取、加工及应用的深入研究受到了广泛关注。
猪皮胶原蛋白因其独特的物理、化学性质以及良好的生物相容性、可降解性,在生物医学工程、化妆品、食品工业等领域具有广泛的应用前景。
酶解和糖基化是两种重要的化学修饰手段,能够显著改变猪皮胶原蛋白的结构和性质。
酶解过程通过酶的作用,使胶原蛋白分子内部的肽键断裂,产生不同长度的肽段,这不仅可以改善胶原蛋白的溶解性,还能产生一系列具有生物活性的多肽。
而糖基化反应则通过引入糖基团,改变胶原蛋白的理化性质和生物学功能,如提高其亲水性、增强与细胞的相互作用等。
本研究旨在探讨酶解和糖基化对猪皮胶原蛋白特性的影响,通过系统研究这两种化学修饰方法对猪皮胶原蛋白结构、功能性质以及生物活性的改变,有望为猪皮胶原蛋白的高值化利用提供理论支持和技术指导。
本研究还将为拓展猪皮胶原蛋白在生物医药、功能食品、化妆品等领域的应用提供科学依据。
1. 猪皮胶原蛋白特性概述优良的物理性质:猪皮胶原蛋白具有较高的分子量、良好的溶解性和稳定性,便于加工和应用。
多样的生物活性:猪皮胶原蛋白具有良好的生物活性,如促进伤口愈合、减少炎症反应、增强免疫功能等。
一、实验目的1. 掌握水解胶原蛋白的制备方法;2. 研究水解胶原蛋白的性质;3. 了解胶原蛋白在水溶液中的行为。
二、实验原理胶原蛋白是一种天然存在于动物骨骼、皮肤、筋腱等结缔组织中的蛋白质,具有优良的生物相容性、生物降解性和力学性能。
水解胶原蛋白是将胶原蛋白经过酶解处理后得到的低分子量肽,具有更好的溶解性、生物活性、易消化吸收等优点。
本实验采用酸水解法制备水解胶原蛋白,并对其性质进行研究。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:动物骨骼、食用级稀酸、酶、盐酸、氢氧化钠、蒸馏水等;2. 实验仪器:恒温振荡器、高速离心机、紫外可见分光光度计、pH计、电子天平等。
四、实验步骤1. 胶原蛋白提取:将动物骨骼用食用级稀酸洗脱,提纯得到骨胶原蛋白;2. 酶解:将骨胶原蛋白与酶按一定比例混合,在一定温度、pH条件下酶解;3. 中和:将酶解液用氢氧化钠中和至pH 7.0;4. 过滤:将中和后的酶解液过滤,去除杂质;5. 离心:将过滤后的酶解液离心,分离出水解胶原蛋白;6. 溶解:将水解胶原蛋白溶解于蒸馏水中;7. 性能研究:测定水解胶原蛋白的吸水性、溶解性、稳定性等性质。
五、实验结果与分析1. 水解胶原蛋白的制备:经过酶解、中和、过滤、离心等步骤,成功制备了水解胶原蛋白。
水解胶原蛋白为白色粉末,易溶于冷水,溶解度随温度升高而增大。
2. 水解胶原蛋白的吸水性:将一定量的水解胶原蛋白放入蒸馏水中,观察其吸水膨胀情况。
结果表明,水解胶原蛋白具有良好的吸水性,能迅速吸水膨胀。
3. 水解胶原蛋白的溶解性:将一定量的水解胶原蛋白溶解于蒸馏水中,测定其溶解度。
结果表明,水解胶原蛋白的溶解度随温度升高而增大,且溶解度较高。
4. 水解胶原蛋白的稳定性:将一定量的水解胶原蛋白溶液置于恒温恒湿箱中,观察其稳定性。
结果表明,水解胶原蛋白在室温下具有良好的稳定性,不易分解。
六、结论1. 本实验采用酸水解法成功制备了水解胶原蛋白,具有较好的溶解性、吸水性和稳定性;2. 水解胶原蛋白是一种具有广泛应用前景的生物材料,可用于化妆品、食品、医药等领域。