当前位置：文档之家 › 西洋参中皂苷类成分提取方法对比_李建明

西洋参中皂苷类成分提取方法对比_李建明

  • 格式：pdf
  • 大小：1.42 MB
  • 文档页数：3

下载文档原格式

  / 3

合集下载

西洋参中皂苷类成分的研究

西洋参中皂苷类成分的研究

西洋参中皂苷类成分的研究作者：鲍建材、刘刚、郑友兰、张崇禧西洋参（Panax quinquefolius L.）系五加科人参属植物，原产于加拿大和美国，由于其具有广泛的生物活性和独特的药理作用，多年来一直深受世界各国人民的喜爱。

西洋参中的化学成分比较复杂，包括皂苷类、挥发油类、氨基酸类、糖类和聚炔类等，但主要是皂苷类成分。

人类对西洋参的研究可追溯到19世纪，早在1854年美国一学者便从西洋参中分离得到了第一个皂苷类成分，但对西洋参全面深人的研究却始于20世纪70年代。

迄今为止，中外学者已从西洋参中分离鉴定出的皂苷类成分有3种：达玛烷型（Dammarane），齐墩果烷型（Oleanane），奥克梯隆醇型（Ocotillol）。

而分离出的人参皂苷40余种。

根中皂苷的研究1976年，李向高从美国产西洋参中分离得到3种皂苷元，即人参二醇、人参三醇和齐墩果酸皂苷元。

1978年日本学者真田修一等从日本长野引种的西洋参中分离出人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、RC、Rd、Re。

1982年Besso，H．等分离出7种皂苷，即Rg1、Rg2、Rb3、Rb1、F2，绞股蓝皂苷Ⅺ和西洋参皂苷R1（quenquinoside-R1）。

张崇禧从国产西洋参中分得人参皂苷RO、Rb1、Rb3。

Rc、Rd、Re等。

1983年魏均娴等从西洋参根中分得Ro、Rb1、Rg1、Re和pseudo-ginsenoside-F11（简称P-F11），P-F11是西洋参中的特有成分，是鉴别西洋参和人参的显著标志。

1985年松浦等从西洋参根中分离出13种皂苷，包括人参皂苷Rb1。

Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2、F2。

拟人参皂苷F11（pseudoginsenoside-F11），绞股蓝苷XVⅡ（gynostenoside-XV Ⅱ）和一种新的皂苷，即西洋参皂苷R1。

1987年徐绥绪等从辽宁栽培的西洋参根中分得：RO、Rb1、Rb2、Rd、Re、Rg1。

从西洋参中提取分离纯化人参皂苷Rb1和人参皂苷Re 的研究

从西洋参中提取分离纯化人参皂苷Rb1和人参皂苷Re 的研究

从西洋参中提取分高纯化人参皂苷Rb1和人参皂苷Re的研究2.1 西洋参粗提液的制备称取100g西洋参,粉碎成粗粉,用70%乙醇12倍量水浴加热回流提取3次(400mL×3),每次时间2h。

提取液减压浓缩至50mL,得西洋参粗提液。

HPLC检测发现,提取液中含有大量杂质,其主要成分有两种:人参皂苷Re(保留时间29.1min左右)和人参皂苷Rb1(保留时间50.3min左右)。

人参皂苷Re与Rb1的质量分数分别为10%和60%。

见图2。

2.2 人参皂苷Re与Rb1的初步纯化西洋参粗提液用15倍量水(V/W)溶解上已处理好D101大孔吸附树脂柱(50×4cm,树脂为200g)。

先用水洗柱,以去除大部分杂质, 再用2%NaOH溶液洗柱以除去色素,后用2% HCl溶液洗柱,再用水洗柱至流出液中性。

最后用90%乙醇淋洗,收集流出液。

回收溶剂至干,60℃减压干燥,得干燥疏松黄白色粉末6.0g,为西洋参总皂苷。

HPLC检测, 人参皂苷Re与Rb1的质量分数分别为12.5%和65% 。

2.3 人参皂苷Re与Rb1的进一步纯化西洋参总皂苷6.0g,用30mL70%乙醇溶解,加300mL丙酮搅拌, 析出大量沉淀,放置,过滤,沉淀干燥,得棕黄色干燥疏松粉末4.2g,为A部分。

母液回收溶剂至干,得棕黄色疏松粉末1.8 g,为B部分。

A部分中人参皂苷Rb1的质量分数提高到80%(人参皂苷Re下降为4.5% ),B部分中人参皂苷Re的质量分数提高到40% (人参皂苷Rb1下降为30% )。

见图3、图4。

2.4 人参皂苷Re和Rb1的再进一步纯化A部分用20mL水溶解,加200mL丙酮搅拌,析出大量沉淀,静置, 过滤, 沉淀再用20mL水溶解,加200mL丙酮同法处理,静置过滤,60℃减压干燥,得黄白色干燥疏松粉末2.6g,为人参皂苷Rb1。

HPLC 检测, 人参皂苷Rb1的质量分数为95% (人参皂苷Re为0.2% ), 见图6。

西洋参皂苷的HPLC测定及不同提取方法比较

西洋参皂苷的HPLC测定及不同提取方法比较

西洋参皂苷的HPLC测定及不同提取方法比较陈军辉;谢明勇;张中伟;李昌;罗珍【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2006(018)001【摘要】建立西洋参中7种人参皂苷含量测定的分析方法,并以7种人参皂苷的提取率为指标,对西洋参皂苷不同提取溶剂和不同提取方法进行比较.采用梯度洗脱,使用Alltima C18色谱柱,乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相,流速为1.2 mL/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm;分别选用不同的提取溶剂和不同的辅助提取方法提取西洋参皂苷.在选定的色谱条件下每种成分在各自的浓度范围内均具有较好的线性相关性,7种人参皂苷的加标回收率为94.1～97.9%.本法操作简便,重现性好,结果准确;各人参皂苷不同提取溶剂和不同提取方法的提取率有一定的差异.【总页数】6页(P120-125)【作者】陈军辉;谢明勇;张中伟;李昌;罗珍【作者单位】南昌大学,食品科学教育部重点实验室,南昌,330047;南昌大学,食品科学教育部重点实验室,南昌,330047;南昌大学,食品科学教育部重点实验室,南昌,330047;南昌大学,食品科学教育部重点实验室,南昌,330047;南昌大学,食品科学教育部重点实验室,南昌,330047【正文语种】中文【中图分类】R284.2;Q946.91【相关文献】1.HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rb1、Re、Rg1的含量 [J], 张菊;陈茹;何鹏飞;李艳萍;郭世民2.HPLC法测定不同产地西洋参中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 李岚;陈华3.HPLC测定不同提取方法对西洋参单体皂苷含量的影响 [J], 韩丹丹;吴文夫;魏建华;陈猛;曹立军;于凯祥;赵锐4.两种西洋参人参皂苷不同提取方法的比较 [J], 于京平;刘晓娜;宋佳璇;李黎明;张永清;周洁;陈彩云;王少平;林莺5.HPLC法测定20批不同产地西洋参花中8种人参皂苷的含量 [J], 许宁; 刘顺开; 王任晶; 汪莹; 闫凯莉; 齐滨; 刘莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

西洋参中人参总皂苷含量的聚类分析_尹春梅

西洋参中人参总皂苷含量的聚类分析_尹春梅
本试验对不同时期采自吉林省不同产地的不
同生长年限的西洋参药材的根 、茎 、叶 3 个部位共 39 个样品进行了总皂苷含量测定 , 应用系统聚类 分析法进行数理统计分析 , 重点考察不同部位总
基金项目 :国家科技支撑计划项目(2006BAI09B05-10) 作者简介 :尹春梅 , 女 , 副教授 , 从事药用植物栽培及药材质量评价研究 。 收稿日期 :2009-11-20 修回日期 :2010-01-22 通讯作者
人参皂苷 类成分是西洋参 中的主要 活性物
质 , 其化学研究比较全面和深入 。 西洋参中皂苷 的含量是评价西洋参及其制剂的重要指标[ 3] 。国
内外对西洋参中皂苷的测定方法基本同人参 , 多 采用比色法 、薄层光密度法 、薄层扫描法 、高效液 相色谱法[ 4] 。西洋参传统以根入药 , 近年来随着 市场需求的不断增大 , 可供利用的资源严重不足 , 人们开始对西洋参茎 、叶等进行研究开发[ 5-6] 。
尹春梅1 , 李秀昌2 , 孙佳明2 , 唐 姗2 , 陈祥涛2 , 张 辉2
1 .吉林农业大学中药材学院 , 长春 130118 ;2 .长春中医药大学中医药与生物工程研发中心 , 长 春 130117
摘 要 :采用比色法测定了不同产地 、不同生长年限 、不同采收期西 洋参根 、茎 、叶共 39 个样品 中人参总 皂苷 的含 量 , 应用系统聚类分析法分析了不同采收期总 皂苷含量的 差异 。 结果表 明 :所 有样品根 、茎 、叶中总皂 苷 含量各聚为一大类 , 表现为叶 >根 >茎 。 不同产地根中总 皂苷含量差异明显 。 根 、茎 、叶的总皂苷含量按采收 期均可聚为 2 类 :4 ～ 6 月份的为一组 , 7 ～ 9 月份的为一组 , 7 ～ 9 月组的总皂苷含量明显高于 4 ～ 6 月组 。 关键词 :西洋参 ;总皂苷 ;比色法 ;聚类分析 中图分类号 :S567.51 文献标识码 :A 文章编号 :1000-5684(2010)03-0289-04

西洋参总皂苷酶水解产物成分研究_金建明

西洋参总皂苷酶水解产物成分研究_金建明

收稿日期：2014-02-14接受日期：2014-05-16基金项目：国家自然科学基金项目（31160017；21172095）；北京市自然科学基金项目（2142012）；云南省教育厅科学研究基金项目（2011Z120）*通讯作者Tel ：86-10-68984937；E-mail ：jinjm8@qq．com天然产物研究与开发Nat Prod Ｒes Dev 2014，26：1552-1556，1567文章编号：1001-6880（2014）10-1552-06西洋参总皂苷酶水解产物成分研究金建明1，2*，李有海2，张海伦1，梁朝宁3，唐双焱31北京工商大学植物资源研究开发北京市重点实验室，北京100048；2云南民族大学民族药资源化学国家民委-教育部重点实验室，昆明650500；3中国科学院微生物研究所中国科学院微生物生理与代谢工程重点实验室，北京100101摘要：西洋参总皂苷经β-糖苷酶催化水解，采用HPLC 检测分析确定西洋参总皂苷中的主要原人参二醇型皂苷Ｒb 1、Ｒd 、Ｒc 和Ｒb 2已经完全被水解。

水解产物通过反复硅胶柱层析和反向硅胶柱层析分离纯化得到7个皂苷，通过NMＲ谱图分析分别鉴定为人参皂苷compound K （1）、人参皂苷Mc （2）、人参皂苷Ｒg 1（3）、人参皂苷Ｒg 2（4）、人参皂苷Ｒe （5）、人参皂苷F 1（6）和拟人参皂苷F 11（7）。

β-糖苷酶催化西洋参总皂苷水解实验表明，西洋参中原人参二醇型皂苷的水解产物是人参皂苷compound K 和人参皂苷Mc 。

关键词：西洋参；原人参二醇型皂苷；人参皂苷compound K ；β-糖苷酶中图分类号：Ｒ939．9文献标识码：AChemical Constituents of Enzymatic Hydrolysate of TotalGinsenoside Extract of Panax quinquefoliumJIN Jian-ming 1，2*，LI You-hai 2，ZHANG Hai-lun 1，LIANG Chao-ning 3，TANG Shuang-yan 31Beijing Key Laboratory of Plant Ｒesources Ｒesearch and Development ，Beijing Technology and Business University ，Beijing 100048，China ；2Key Laboratory of Ethnic Medicine Ｒesource Chemistry ，State Ethnic Affairs Commission ＆Ministry of Education ，Yunnan University of Nationalities ，Yunnan Kunming 650500，China ；3CAS Key Laboratory ofMicrobial Physiological and Metabolic Engineering ，Institute of Microbiology ，ChineseAcademy of Sciences ，Beijing 100101，China Abstract ：The total ginsenoside extract of Panax quinquefolium was hydrolyzed by β-glycosidase．HPLC analysis indica-ted that ginsenosides Ｒb 1，Ｒd ，Ｒc and Ｒb 2were completely hydrolyzed．Seven ginsenosides were isolated from the hydrol-ysate ，and identified as ginsenoside compound K （1），ginsenoside Mc （2），ginsenoside Ｒg 1（3），ginsenoside Ｒg 2（4），ginsenoside Ｒe （5），ginsenoside F 1（6）and pseudo-ginsenoside F 11（7），respectively．The protopanaxdiol-type ginsen-osides in the total ginsenoside extract of P．quinquefolium were converted into ginsenoside compound K and ginsenoside Mc by the β-glycosidase．Key words ：Panax quinquefolium ；protopanaxdiol-type ginsenosides ；ginsenoside compound K ；β-glycosidase西洋参（Panax quinquefolium L．）又名花旗参、西洋人参、洋参、美国人参、广东人参等，是我国传统的名贵中药材，为五加科人参属植物，原产北美洲的加拿大南部和美国北部，现我国的许多地区都有引种栽培。

人参、西洋参不同部位提取物中14种皂苷含量比较

人参、西洋参不同部位提取物中14种皂苷含量比较

人参、西洋参不同部位提取物中14种皂苷含量比较李蕾;谢丽娟;王国明;徐芳菲;郭畅冰;王和宇;曹志强【摘要】目的分别对人参不同部位提取物和西洋参不同部位提取物中14种单体皂苷含量进行比较.方法采用高效液相色谱法进行检测,色谱柱:BDS柱(HYPERSIL C18250mm*4.6mm,5μm),紫外检测器;流动相:乙腈-水梯度洗脱.流速:1mL/min,柱温:40℃,检测波长:203m.结果通过比较人参和西洋参不同部位提取物中14种单体皂苷含量可知,Rb1、Rc、Rb2在人参根提取物中含量最高,Rf为人参根提取物中特有单体皂苷;Rg1、F1、Rb3在人参茎叶提取物中含量最高;Re、Rh1(S)、Rg2(S)、Rd、F2、Rg3(S)在人参果提取物中含量最高.Rb1、Rc在西洋参根提取物中含量最高;Rg1、Re、Rh1(S)、Rg2(S)、F1、Rd、F2在西洋参茎叶提取物中含量最高;Rb2、Rb3、Rg3(S)在西洋参果提取物中含量最高.结论通过对人参和西洋参不同部位提取物中14种单体皂苷含量比较可知,Rf为人参特有单体皂苷,在人参根中含有,西洋参中没有.Rb1、Rc均是在根中含量高,Rg1、F1均是在茎叶中含量高.高效液相色谱法分离、分析人参皂苷效果好、准确、迅速、简便,也可作为评价人参属植物质量的有效分析方法.建议对人参、西洋参中含量较高的人参皂苷进行提取分离,直接用于创新药物的开发.【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2018(030)003【总页数】3页(P11-13)【关键词】人参;西洋参;人参皂苷;高效液相色谱【作者】李蕾;谢丽娟;王国明;徐芳菲;郭畅冰;王和宇;曹志强【作者单位】吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033;吉林人参研究院·吉林长春·130033【正文语种】中文人参为五加科植物人参（Panax ginseng C.A.Meye）的干燥根和根茎，始载于《神农本草经》，具有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津养血，安神益智之功效[1]。

西洋参中总皂苷的提取工艺研究

西洋参中总皂苷的提取工艺研究

选文献 报道很 多 ，提取工 艺考察 多采用 水煎 ，温浸 法 ，乙醇 回流 提取法 ，西洋参 中活性 成分 以皂苷类为主 ，而皂苷类成分 均易溶于
法 ，超声法 ，而以乙醇回流提取法 的效率相对较高 ，但其他 因素结论 甲醇 、乙醇等溶剂 ，结合文献报道 ，从安全性 、经济性和生产 可行性
不一 致 ，如加醇量 ，加热 回流时间等 尚需进一步试验研究 。因此本文 角度考虑 ，选择乙醇作为提取溶剂 。结合文献综 述应用 ７０％乙醇作
我们 设计并开发 出一个适用 于大学实验 物理教育 的数据采集 ｐｈｙｓｉｃｓ ｅｘｐｅｒ ｉｍｅｎｔｓ ｏｎ ｆｒｅｅ，ａｎｄ ｄａｍｐｅｄ ｈａｒｍｏｎｉｃ ｏｓｃｉｌｌａｔｉｏｎ 言编程作为开发语 言 ，在 Ａｎｄｒｏｉｄ智能手 Ｊ Ｐｈｖｓ ８１ ｆ２０１３）。４７２—４７５．ＤＯＩ：１０．１ｌ１９／１．４７９３４３８．
２ 方 法 和 结 果
色剂为空 白对 照。用紫外分光光度计在 ５４０ｎｍ吸收波长 （转下页 ）
自己的实验结果是否符合实验要求 。通过这些 信息 ，学生们可 以很 ｒｏｍｅｏ，Ｓ． （２０１５）：Ａｎ ｅｍｂｅｄｄｅｄ ｓｙｓｔｅｍ ｃｏｕｒｓｅ ｕｓｉｎｇ ＪａｖａＭＥ ａｎｄ
容易地检查他们 的结果是好否符合要求 ，更加快速 的发现实验 中存 ａｎｄｒｏｉｄ．Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐ１．Ｅｎｇ．Ｅｄｕｃ．．２３：２９４—３０３．ｄｏｉ：１０．１００２／ｃａｅ．
西 洋 参 （Ｐａｎａｘｑｕｉｎｑｕｅｆｏｌｉｕｓ Ｌ）的根 ，
原产 于北美 ，我国亦 有栽 培 ，西洋参性
凉 ，味甘苦 ，补肺 阴，清火 ，养 胃生津 ，
含 人 参 皂 苷 Ｒｂｌ、 Ｒｂ２、Ｒｃ、Ｒｄ、Ｒｅ、
Ｒｇｌ、Ｒｏ以及 拟人 参 皂 苷 Ｆ１１（ＰＦＩ１）
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Abstrac t O bjective: T o op tim ize the extraction m ethod and im prove the extraction ra tio of g insenosides from Panax quinquefoli um M ethods: Four d ifferent ex traction m ethods, including hea t reflux ex traction m ethod, ultrason ic extraction me thod, m ulti stag e counte rcurrent extraction m ethod and ultrason ic assisted mu lti stage countercurrent ex traction m ethod w ere com pared according to the ex traction ra tio of to ta l sapon ins and seven g insenosides analyzed by HPLC includ ing R b1, Rb2, R c, R d, R e, Rg1, Rg2 R esu lts: T he u l trasonic assisted mu lti stage countercurrent ex traction m ethod w as the best m ethod and had the advantages of higher e fficiency, low er ex traction tem pera ture and less so lvent consum ption Conclusion: T he u ltrasonic ass isted m ulti stage countercurrent ex traction me thod is hoped to be w idely used in the pharm aceutical industry
关键词 人参皂苷 ; 超声波提取; 组罐式超声波提取 中图分类号: R 284 2 文献标识码: A 文章编 号: 1001 4454( 2008) 12 1896 03
Com parison Resarch on D ifferen t Extraction M ethods of G insenosides from Panax qu inquefolium
L I Jian m ing, CHEN Y un, ZHANG L i juan, Q IAN Y u ( Schoo l of Chem istry and Chem ical Eng ineer ing /G uangdong K ey L ab of P roduct T echno logy o fG reen Chem istry, South Ch ina U nivers i ty of T echnology, G uangzhou 510640, China)
摘要 目的: 选择更好的西洋参提取方法, 提高人参皂苷 的提取率。方 法: 以人 参总皂苷、人参皂 苷 R b1、R b2、 R c、Rd、R e、R g1、R g2 等 7种主要单体皂 苷收率为指标, 用 高效液相 色谱法 进行含 量测定, 比较 热回流 提取、超声波 提取、罐组式逆流提取、组罐式超声波提取 四种方法各自 的优劣。 结果: 组罐式 超声波 提取是 最佳的 提取方 法, 它 可以在保证提取效率的 前提下, 减少溶剂的用量, 降低提取温度。结论: 组罐式超 声波提取法 可望广泛 地应用在制 药工业上。
2 2 4 项下处理方法制成供试品溶液, 按 2 3 1 项下的色谱条件, 分别在 0、1、4、8、12、24、36、48 h 进样测定, 测得各色谱峰的峰面积和保留时间, 7种 人参皂苷 R b1、R b2、R c、R d、R e、R g1、R g2 峰面积 的 RSD 值 分 别 为: 0 57% 、1 38% 、1 51% 、0 79% 、 1 63% 、1 61% 、0 69% , 7 种组分保 留时间的 RSD 值为 0 43% ~ 0 86% , 说明供试品溶液在 48 h内化 学性质稳定。
0 9998
Rc
Y = 2 692 107X - 692
0 9997
R b2
Y = 3 864 107X - 1127
0 9998
RdY = 3 958 107 Nhomakorabea - 31016
0 9997
2 4 方法学考察 2 4 1 精密度实验: 精密吸取上述对照品溶液, 按
2 3 1 项下的色谱条件, 重复进样 5次, 测得各色 谱峰的峰面积和保留时间, 7种人参皂苷 R b1、R b2、 R c、R d、R e、R g1、R g2 峰 面 积 的 R SD 值 分 别 为 0 25% 、0 32% 、0 36% 、0 21% 、0 34% 、0 55% 、 0 50% 、0 30% , 7 种 组 分 保 留 时 间 的 RSD 为 0 20% ~ 0 59% , 表明仪器精密度良好。 2 4 2 稳定性实验: 精密称取西洋参粉末 1份, 按
基金项目: 广东省绿色化学产品技术重点实验室开放基金 ( GC200706) 作者简介: 李建明, 男, 在读硕士, 研究方向为中药有效成分的提取分离; E m ai:l l i jianm ing@ m ai l scu t edu cn。 * 通讯作者: 陈赟, 男, 讲师; E m ai:l yunchen@ scut edu cn。
18 96
Journa l o f Ch inese M ed icina lM a teria ls 第 31卷第 12期 2008年 12月
西洋参中皂苷类成分提取方法对比
李建明, 陈 赟* , 章莉娟, 钱 宇 (华南理工大学化学与化工学院 /绿色化学产品技术重点实验室, 广东广州 510640)
罐式超声波提取是一种更为新颖节能的中药提取方 法。 1 材料、试剂与仪器 1 1 材料与试剂 西洋参主根, 吉林产, 购自广州 清平药材市场, 并经山东中医药大学李凌军副教授 鉴定为正品; 人参皂苷标准品 R b1、R b2、R c、R d、R e、 R g1、R g2购于浙江美迪康医药贸易服务 部 ( 供含量 测定用 ); 无水乙醇、磷酸为分析纯; 乙腈、甲醇为色 谱纯。 1 2 仪器 Varian 210 型高效液相色 谱仪 ( 美国 VARIAN ) ; KQ 600KDE型高功率数控超声波清洗器 ( 昆山超声仪器有限公司 ); 旋转蒸发 仪 ( 瑞士 BU CH I); 电子天平 ( 上海精密科学仪器有限公司 ) ; 高 速万能粉碎机 ( 天津泰斯 特仪器有限公 司 ) ; HH 4 数显恒温水浴锅 (常州澳华仪器有限公司 ) ; 循环水 真空泵 (巩义英峪予华仪器厂 ) 。 2 方法与结果
Journa l o f Ch inese M ed icina lM a teria ls 第 31卷第 12期 2008年 12月
18 97
2 1 样品处理 样品 ( 西洋参根 ) 粉碎后过 60目 筛, 置 60 真空干燥箱内干燥 24 h至恒重。 2 2 供试品溶液的制备 2 2 1 热回流提取: 称取 10 00 g 西洋参粉末于 250 m l锥形瓶内, 在 90 水浴条件下, 用 70% 的乙 醇溶液提取 3次, 每次 30 m in, 每次溶剂用量为 60 m l。合并 3次提取液, 待测。 2 2 2 超声波提取: 称取 10 00 g 西洋参粉末于 250 m l锥形瓶内, 在 60 条件下, 用 70% 的乙醇溶 液在超声波清洗器中提取 3次, 每次 30 m in, 每次溶 剂用量为 60 m 。l 合并 3次提取液, 待测。 2 2 3 罐组式逆流提取: 罐组式逆流提取详细操 作方式参考文献 4, 5 。采用三效罐组 式逆流提取, 每罐装药材 10 00 g, 用 70% 的乙醇溶液在 90 水 浴中连续逆流提取。每次提取 30 m in, 每次新鲜溶 剂用量为 60 m 。l 2 2 4 组罐式超声波提取: 组罐式超声波提取采 用类似组罐式逆流提取装置, 是将各提取罐置于超 声环境下。具体操作 方式则与罐组 式逆流提取相 同。采用 3 次 组 罐 式 超 声 波 提 取, 每 罐 装 药 材 10 00 g, 用 70% 的乙醇溶液在 60 超声波条件下 提取。超声波的功率为 600W, 频率 40KH z, 每次的 提取时间为 30 m in, 每次新鲜溶剂用量为 60 m 。l 2 3 含量测定 2 3 1 色谱条 件: 色谱 柱: V arian C18 ( 4 6 mm 250 mm, 5 m ); 柱温: 室温; 检测波长: 203 nm; 进样 量: 20 :l 流速: 1 1 m l /m in; 流动相为 0 05% 磷酸 水溶液和乙腈组成; 梯度洗脱程序为: 0~ 40 m in, 乙 腈的体积分数为 20% ; 40~ 70 m in, 乙腈的体积分数 为 20% ~ 35% ; 70 ~ 85 m in, 乙腈 的 体 积 分 数为 35% ~ 45% ; 85~ 90 m in, 乙腈的体积分数为 45% ~ 20% , 所有组份均在 90 m in内出完。 2 3 2 标准 曲线的制备: 分别称取 人参皂苷 Rb1 4 9 m g、R b23 7 m g、R c 4 8 m g、R d 4 9 m g、R e 5 6 m g、R g15 4 m g、R g2 5 2 m g, 移至 5 m l的容量瓶 内, 加 2 m l甲醇后超声振荡 2 m in, 定容刻度。分别 称取对照 品的储备 液 0 08、0 16、0 32、0 64、1 28 m l至 2 m l容量瓶, 定容至刻度, 摇匀, 得到系列浓度 的对照品混合液。分别进样 3 针, 每次 20 ,l 记录 色谱图。图 1是上述色谱条件下测得的某个混合标 准溶液的 H PLC 图谱。以对照品的浓度 ( mg /m l) 为 横坐标 ( X ), 对照品的峰面积为纵坐标 ( Y ), 进行线 性回归计算, 得到回归方程及相应的相关系数见表 1。