细菌的分布消毒和灭菌

第2章细菌的分布与消毒灭菌学习要点一、细菌的分布1. 土壤主要存在一些自营菌和腐物寄生菌，在自然界物质循环中起重要作用。

土壤中也有一些随着人及动物的分泌物、排泄物及尸体、残骸进入土壤的致病菌，但只有能形成芽胞的致病菌，如破伤风梭菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌等可长时间存活。

处理被泥土污染的创伤时要特别注意防止破伤风梭菌、产气荚膜梭菌等的感染。

2.水如被人和动物粪便污染，就可能带上伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌、致病性大肠埃希菌、钩端螺旋体等。

通过水源易引起各种感染，特别是消化道传染病的暴发流行。

3.空气空气中的细菌是吸附在尘埃微粒上，常见的致病菌有结核分支杆菌、白喉棒状杆菌、百日咳鲍特菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌、脑膜炎奈瑟菌、军团菌等，可引起呼吸道传染病或伤口感染。

4.有生命物体的表面和与外界相通的腔道中这些部位能为细菌生长繁殖提供条件，存在着复杂的细菌群及其它微生物，包括致病菌和非致病菌。

5.无生命物体的表面和与外界相通的内表面其细菌均来源于土壤、水、空气以及人和动物的污染。

二、消毒与灭菌是指用物理或化学方法来抑制或杀死外环境中及机体体表的微生物，以防止微生物污染或病原微生物传播的方法。

以下术语常用来表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度。

消毒指杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀灭芽胞或某些非23 病原微生物。

用以消毒的药品称为消毒剂(disinfectant )。

灭菌指杀灭物体上所有微生物的方法。

包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。

经过灭菌的物品称“无菌”物品。

需进入人体内部的医用器材要求绝对无菌。

防腐防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。

细菌一般不死亡。

无菌不存在活菌的意思。

防止细菌进入人体或其它物品的操作技术，称为无菌操作。

清洁是指通过除去尘埃和一切污秽以减少微生物数量的过程。

是物品消毒、灭菌前必须经过的处理过程，有利于提高消毒、灭菌的效果。

1.物理消毒灭菌法热力灭菌法高温对细菌具有明显的致死作用。

细菌的分布消毒和灭菌 SANY标准化小组 #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#实验报告课程名称： 医学微生物学 指导老师：________________成绩：__________________实验名称： 细菌的分布、消毒和灭菌 实验类型：_______________同组学生姓名：_____ _____一、 实验目的1. 了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。

2. 了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。

熟悉外界因素对细菌的影响，掌握常用的消毒和灭菌方法 3. 观察细菌鞭毛的变异4. 熟悉生物因素对细菌的作用 二、 实验材料三、 普通琼脂平板培养基、大肠杆菌肉汤培养液、枯草杆菌肉汤培养液、无菌毛细吸管、肉汤培养基管、电炉、锅子、高压灭菌器、接种环、酒精灯、紫外线灯、大肠杆菌培养物四、 操作方法1. 细菌的分布1) 空气中的细菌(8人一组)2) 取普通琼脂平板一个，打开盖暴露于空气中约15-30分钟，然后盖好，放37℃温箱孵育24小时后观察结果，计算有多少个菌落。

3) 手指皮肤上的细菌(8人一组)4) 用手指直接涂于普通琼指平板上，放37℃温箱孵育，24小时后观察结果，记录有多少种不同特征的菌落。

2. 消毒和灭菌1) 煮沸与高压灭菌法(2人一组)2) ●菌液：大肠杆菌/枯草杆菌3) ●甲组：煮沸（100℃，5min ）4) ●乙组：高压灭菌法（121 ℃，20min ） 5) ●丙组：不作任何加热处理6) 紫外线灭菌(8人一组) 图1 图1① 以灭菌接种环挑取大肠埃希菌培养物，于琼脂平板上作来回密集划线接种。

② 半启皿盖(将皿盖遮住涂面的1／2)，置于紫外线灯下lm 以内接受照射30分钟。

③ 盖上皿盖，于37℃培养24小时后观察结果。

3. 抗生素的抗菌试验 图24. ●菌株：金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠杆菌1号、2号 5. 示教抑菌圈uv30’培养箱1) 化学消毒剂对细菌的影响 2) ●观察抑菌圈3) 细菌鞭毛的变异 %石炭酸 图2 迁徙生长（H ）变形杆菌 点状生长、单个菌落（O ） 五、 实验结果1. 细菌分布的实验结果表1细菌分布的实验结果检查材料 空气手指细菌生长情况菌落个数平板培养基表面或多或少有菌落生长。

实验三细菌的分布与消毒灭菌实验三细菌的分布与消毒灭菌【⽬的】①了解细菌⼴泛分布于⾃然界及正常⼈体，树⽴“有菌观念”，从⽽认识⽆菌操作对于微⽣物学及医学实践的重要性。

②了解正常⼈体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起⼈类疾病，称为正常菌群。

③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常⽤的消毒灭菌⽅法。

④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗⼒。

⼀、细菌的分布检查（⼀）空⽓中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。

【⽅法】①取普通琼脂平板⼀只开启⽫盖，培养基⾯向上放于实验桌上，暴露5～30min后盖好。

②置37℃培养18～24⼩时后观察结果。

【结果】（填表10-1）平板培养基表⾯或多或少有菌落⽣长。

（⼆）地⾯⽔中的细菌检查【材料】地⾯⽔(河⽔、井⽔或池⽔)、⾼层琼脂培养基、1ml⽆菌吸管、灭菌培养⽫。

【⽅法】①以⽆菌吸管吸取1ml地⾯⽔，加⼊灭菌平⽫中。

②将已溶化且冷⾄45℃左右的⾼层琼脂倾注⼈上述平⽫中，加盖后轻轻摇动，使⽔与琼脂充分混匀，静凝。

③37℃24⼩时后取出观察，计数菌落。

【结果】（填表10-1）（三）⾐服、票证、头发、⼿指⽪肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。

【⽅法】取普通平板⼀个，⽤蜡笔在平板背⾯玻璃上划成四等分，并贴上标签(图10-1)。

然后以⽆菌操作法，⽤⾐袖⾓、票证、头发及⼿指或指甲内污物，在平板培养基表⾯相应部位轻轻涂抹，置37℃培养24【结果】填表培养基表⾯涂抹处有菌落⽣长。

⾐服、票证、头发、⼿指⽪肤上的细菌检查（四）正常⼈体咽喉部的细菌检查⾎液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。

【⽅法】取灭菌棉拭⼀⽀，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于⾎液琼脂培养基—侧，然后改⽤灭菌接种环作分离划线接种。

盖上⽫盖，37℃孵育24⼩时（或者采⽤咳喋法）。

【结果】（填表10-1）琼脂平板表⾯有菌落⽣长。

其中占优势的是⼀种细⼩菌落，其周围有草绿⾊的不完全溶⾎环。

此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。

第十二章细菌的分布与消毒灭菌种类繁多的细菌在自然界的分布极为广泛，它们与外界环境及宿主一起构成相对平衡的生态体系，大多数细菌对人体是无害的，但有些细菌侵入人体或因某些原因导致人体内微生态平衡失调时，可以引起疾病。

因此，了解细菌在自然环境及正常人体的分布，认识正常菌群的作用及微生态平衡与失调的关系，对加强无菌观念、正确使用消毒灭菌方法、防止医院感染、传染病及菌群失调的发生均有十分重要的意义。

第一节细菌的分布一细菌在自然界的分布土壤含有细菌生长繁殖必需的营养物质、水分、适宜的pH及气体环境。

因此，细菌的种类和数量很多，一般离地面10cm～20cm耕作层的土壤中，细菌含量最多。

土壤中的细菌多数为非病原菌，在自然界的物质循环中起着重要的作用。

土壤中的病原菌可来自人和动物的排泄物以及死于传染病的人畜尸体，多数病原菌在土壤中容易死亡。

但有一些能形成芽胞的细菌，如破伤风梭菌、产气荚膜梭菌、炭疽芽胞杆菌等，它们在土壤中可存活几年或几十年，并能通过伤口感染，因此，当伤口被泥土污染时，应采取清创等必要的措施进行预防和治疗。

水也是细菌生存的天然环境，水中的细菌主要来自土壤和人、动物的排泄物等，水中细菌的数量通常是地面水多于地下水，静止水多于流动水，沿岸水多于中流水，由于水容易受人和动物的粪便及多种排泄物的污染，所以水中可含有伤寒沙门菌、痢疾志贺菌、霍乱弧菌等病原菌。

水源被污染可引起多种消化系统传染病的流行，因此，保护水源，加强水和粪便的管理，是预防和控制肠道传染病的重要环节。

空气中缺乏营养物质与水分，且受日光照射，细菌不易繁殖。

但由于人群和各种动物的呼吸道及口腔中的细菌可随唾液、飞沫散布到空气中。

土壤中的细菌也随尘埃飞扬在空气中，因此空气中可存在不同种类的细菌。

尤其在人口密集的公共场所或医院，空气中细菌种类和数量显著增多。

常见的病原菌有金黄色葡萄球菌、链球菌、结核分枝杆菌、白喉棒状杆菌及脑膜炎奈瑟菌等，可引起伤口或呼吸道感染。