睡莲酚对小鼠酒精性肝损伤的保护作用研究

第３８卷第１期　２０１５年２月　云南中医学院学报　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｙｕｎｎａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　ｏｆ　Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｖ０１．３８　Ｎｏ．１　２．２０１５　葛根复合胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用研究　王思为，夏道宗△，方月娟，余妙，罗　萌　（浙江中医药大学药学院，浙江杭州３１００５３）　摘要：目的研究葛根复合胶囊对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法采用灌胃５０％酒精（１２￣ｌＪｋｇ）的方　式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型，研究不同剂量（１００，３００，５ｅＯｍｇ￣ｇ）葛根复合胶囊（ＣＣＰＬ）对酒精性肝损伤小鼠　活动状态，血清丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）和天冬氨酸氨基转移酶（ＡＳＴ），肝脏氧化应激参数丙二醛（ＭＢＡ）和谷胱甘　肽过氧化物酶（ＧＳＨ—Ｐｘ），以及肝脏组织病理学的影响。结果中、高剂量ＣＣＰＬ可显著降低酒精性肝损伤小鼠血清　中ＡＬＴ和ＡＳＴ活性，并能显著升高肝脏中ＧＳＨ—Ｐｘ活性（Ｐ＜Ｏ．０５或ｔ９＜０．０１）。低、中、高剂量ＣＣＰＬ均可显著降低　酒精性肝损伤小鼠肝脏中ＭＤＡ含量（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且具有量效关系，最大降幅为５４．４％；其中高剂量组与　阳性对照护肝片效果相当。此外，ＣＣＰＬ对酒精性肝损伤小鼠肝脏组织的病理学改变有较强拮抗效应。结论葛根　复合胶囊对小鼠酒精性肝损伤具有较好的保护作用，能为以葛根为主要原料开发具有解酒护肝功效的膳食补充剂　或药物奠定了基础。　关键词：葛根；复合胶囊；酒精；肝损伤保护　中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标志码：Ａ　文章编号：１０００—２７２３（２０１５）Ｏｌ一０００１—０４　葛根为豆科植物野葛或甘葛藤［Ｐｕｅｒａｒｉａ　ｌｏｂａｔａ　（ｗｉｌｌｄ．）Ｏｈｗｑ的干燥根，市面上最多的是葛根粉，具　有很多功效，据《中国药典））（２０１０版）记载，葛根味　甘辛，性凉，人脾，胃，肺经，有解肌退热，生津止渴，　透疹，升阳止泻，通络活络，解酒毒之功效【ｌ＿３】。葛根　含有黄酮类、香豆素类、多糖等多种活性成分　。枳　棋子系鼠李科植物枳棋（Ｈｏｖｅｎｉａ　ｄｕｌｃｉｓ　Ｔｈｕｎｂ．）的　干燥成熟带肉质花序轴的果实及种子，具有很好的　药理作用，其功效主要为清热利尿、止渴除烦、解酒　等　。葛根和枳棋子都是我国卫生部公布的药食两　用物品。　酒及酒精性饮料作为日常饮用的饮品在中国　具有悠久的历史，并且随着社会发展，酒的消费在　当今世界经济中占了很大的比重。适当的饮酒能促　进血液循环的功效，但长期大量饮酒会导致中毒性　的酒精性肝损伤，例如酒精性脂肪肝、酒精性肝硬　化、酒精性肝纤维化等，还有可能会进一步产生严　重的疾病［８－叫。目前国内对解酒药物的研究报道较　多，但有关解酒功能性食品的开发还很少。本课题　组已经完成葛根解酒护肝复合胶囊的制备工艺研　究，确定１００ｇ胶囊含葛根醇提物１６ｇ（相当于葛根　粉１５０ｇ）、枳棋子粉末３６ｇ、蔗糖２５ｇ、葡萄糖６ｇ、牛　磺酸５　Ｖｃ　５　ｇ、淀粉５　柠檬酸２ｇ。本文旨在研究　葛根复合胶囊（ｃｏｍｐｏｕｎｄ　ｃａｐｓｕｌｅ　ｏｆ　Ｐｕｅｒａｒｉａ　ｌｏｂａｔａ，　ＣＣＰＬ）对小鼠酒精性肝损伤的保护作用，为以葛根　为主要原料开发具有解酒护肝功效的膳食补充剂　或药物奠定基础，提供科学实验依据。　１材料与方法　１．１　买验弃右料　１．１．１样品与试剂　葛根复合胶囊，本实验室自制；护肝片，黑龙江　葵花药业股份有限公司；ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＭＤＡ、ＧＳＨ—Ｐｘ　检测试剂盒，南京建成生物工程研究所；乙醇、甲醛　等其他试剂均为国产分析纯。　１．１．２　动物　实验用清洁级雄性ＩＣＲ小鼠由浙江中医药大　学动物实验中心提供，来源于上海西普尔一必凯实　验动物有限公司，动物生产许可证号ＳＣＸＫ（沪）　基金项目：国家自然科学基金（８１３７４０４８）；国家级大学生创新创业训练计划项目（２０１４１０３４４００８）；浙江省大学生科技创　新活动计划暨新苗人才计划（２０１４Ｒ４１０００３）　收稿日期：２０１４—１２—２６　作者简介：王思为（１９９０－），男，浙江衢州人，在读硕士研究生，主要从事中药药理学研究。　△通信作者：夏道宗，Ｅ一－ｍａｉｌ：ｘｉａｄａｏｚｏｎｇ＠ｚｃｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　

酒精性肝损伤模型及其保护作用的研究进展

通过对酒精性肝损伤的发病机制、动物模型的制作进行介绍，对急性和慢性酒精性肝损伤的保护作用进行了综述，为进一步研究酒精诱使的肝损伤保护机制、开发相关保健药物提供理论基础。

标签： 酒精性肝损伤；保护作用；研究

［Abstract］Through the introduction of production mechanism, on alcoholic

liver injury animal model, the protective effect on acute and chronic alcoholic liver

injury were reviewed, and provide a theoretical basis for further research on alcohol

protection mechanism, induce liver injury related to the development of health care

medicine.

［Key words］Keywords alcoholic liver injury; protective effect; study

随着环境污染和药物等的影响，近年来与肝脏有关的疾病呈不断上升的趋势，重型肝炎、肝纤维化、肝硬化等在人群中占有很大的比例，肝脏疾病已严重威胁人类健康，因而肝损伤保护研究成为天然药物研究的热点之一。

酒精性肝病是因长期大量饮用各种含乙醇的饮料所致的肝脏损害性病变，从病理学和临床分型，它包括酒精性脂肪肝、酒精性肝炎以及酒精性肝硬化等。随着我国国民经济的发展，人们生活方式，饮食习惯和结构的改变，酒精性肝病已严重威胁着人类健康。近年来，我国酒精性肝病的发病率迅速增加，发病率仅次于占主要地位的病毒性肝炎。

酒精性肝损伤的防治成为一个全球性的严峻课题。本文就酒精诱使的肝损伤保护作用的有关情况进行简要的综述。

水芹黄酮对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用*

徐璐1，魏渊2，夏国华2，朱孝雷1，蒋亚萍1，武谦虎1**

1江苏省镇江市第三人民医院，镇江212000；2江苏大学药学院，镇江212000水芹为伞形科尧水芹菜属植物水芹Oenanthejavanica渊Blume冤DC.的全草袁其味甘尧性凉袁入肺尧

胃尧肝经遥具有清热尧利尿尧化湿之功效袁主治暴热烦

渴尧黄疸尧水肿尧食积腹痛等症遥民间自古就有将水

芹视作中草药的记载[1]遥近年来一系列药理研究[2]

证

实袁黄酮类化合物对急性肝损伤有较好的保护作

用袁而水芹含有较丰富的黄酮类物质[3~6]遥因此袁探索

水芹黄酮对肝损伤保护作用有一定研究前景遥本实

验以水芹黄酮对小鼠急性酒精性肝损伤保护作用

进行实验研究遥

1材料与仪器

1.1实验动物

健康KM小鼠60只袁雌雄各半袁体质量渊18~22冤g袁

由江苏大学医学院实验动物中心提供袁许可证号院SYXK渊苏冤2013-0036袁合格证号院苏动质字第98201号遥

1.2药品制备与试剂

水芹黄酮提取物制备[7]院水芹渊采自江苏溧阳袁

经中国药科大学中药教研室鉴定为伞形科水芹菜

属植物水芹的全草冤晒干后袁70%乙醇以1颐10倍量

回流提取3次袁每次1h遥冷却过滤袁合并滤液袁浓缩

分离乙醇袁提取物加蒸馏水稀释备用遥

白酒渊乙醇度数为56%袁北京红星股份有限公

司冤曰注射用还原型谷胱甘肽钠渊商品名院古拉定袁云南积华药业有限公司冤曰血清丙氨酸氨基转移酶渊ALT冤尧天门冬氨酸氨基转移酶渊AST冤尧碱性磷酸酶

渊ALP冤尧谷酰转肽酶渊GGT冤尧胆固醇渊CHO冤尧甘油三酯

渊TG冤尧低密度脂蛋白胆固醇渊LDL-C冤尧高密度脂蛋

白胆固醇渊HDL-C冤等测定试剂盒袁均购自南京建成

工程生物研究所曰超氧化物歧化酶渊SOD冤活性尧丙二

醛渊MDA冤尧谷胱甘肽过氧化物酶渊GSH-Px冤尧谷胱甘

肽S转移酶渊GST冤等试剂盒袁均购自武汉博士得生

物工程有限公司曰PGE2尧TNF-琢尧IL-6等试剂盒袁均

中国中医药科技２Ｏ０８年３月第１５卷第２期Ｍａｒ．２００８　Ｗ．１５　Ｎｏ．２　・　ｌｌ５　・　玉米肽对小鼠酒精性肝损伤保护作用的研究　付　萍杨铭　陈颖丽　王　清杨丽萍李伟　（吉林省中医中药研究院・长春１３００２１）　摘要　目的：研究玉米肽对酒精性肝损伤的保护作用。方法：以无水乙醇刺备酒精性肝损伤模型，观察　玉米肽对肝脏的保护作用。结果：玉米肽能显著降低酒精性肝损伤模型小鼠肝组织ＭＤＡ、ＴＧ含量，增加　ＧＳＨ含量，明显改善肝组织损伤程度。结论：玉米肽可显著降低无水乙醇对肝脏的损伤，对酒精性肝损伤　有明显的保护作用。　主题词肝损伤，酒精性／中医药疗法玉米肽／治疗应用　小鼠　玉米是一种常用食物，具有很高的营养价值，从玉米中　提取的玉米肽具有很强的营养保健作用，能够缓解疲劳、抗　氧化、保护肝脏。本文对玉米肽对酒精性肝损伤的保护作用　进行了初步研究。　１实验材料　１．１药物玉米肽：１．６５６ｇ生药　，由吉林大学提供，实验前　用蒸馏水配制成１．４ｏ％、０．７０％、０．３５％的溶液，置４￣Ｃ冰箱　保存备用。人参皂苷：由吉林省中医中药研究院植化室提　供，实验前用蒸馏水配制成０．５％的溶液，置４￣Ｃ冰箱保存备　用。海王金樽片：深圳药业有限公司生产，实验前用蒸馏水　配制成１２．８５％的溶液，置４￣Ｃ冰箱保存备用。　１．２试剂实验用ＭＤＡ、ＧＳＨ、ＴＧ试剂盒：均为南京建成生　物工程研究所产品。　ｔ．３动物昆明种小鼠，体重１９—２２ｇ，雌雄各半，均购自吉　林大学动物实验研究中心。　２实验方法　２．１动物分组、造模及给药参照文献＿ｌ　方法，小鼠随机等　分为５组，按表１所示剂量灌胃给药，每日１次，连续３０天，　对照组和模型组给予蒸馏水，体积均为２Ｏｒａｌ／妇。实验结束　时除正常组外其余各组均１次灌胃给予５０％乙醇（１２ｒｒａ／￣），　正常对照组给予蒸馏水，禁食１６小时处死动物。　２．２指标及测定取肝脏制成组织匀浆，检测肝组织中丙　二醛（ＭＤＡ）、还原型谷胱甘肽（ＧＳＨ）、甘油三酯（ＴＧ）含量，均　按试剂盒说明操作。　２．３肝组织病理改变的观察　取肝脏进行病理组织学检　查：从肝左叶中部横切面取材，冷冻切片，苏丹Ⅲ染色，显微　镜下观察，从肝脏的一端视野开始记录细胞的病理变化，用　４ｏ倍物镜连续观察整个组织切片，主要观察脂滴在肝脏的　分布、范围和面积，并计分。　评分标准：肝细胞内脂滴散在，稀少；计０分。含脂滴的　肝细胞不超过１／４；计１分。含脂滴的肝细胞不超过１／２；计２　分。含脂滴的肝细胞不超过３／４；计３分。肝组织几乎被脂　滴代替；计４分。　２．４统计学方法实验结果数据以（　±ｓ）表示，组间比较　采用两样本均数配对ｔ检验。　３结果　３．１对酒精性肝损伤小鼠肝组织中ＭＤＡ、ＧＳＨ、ＴＧ含量的　影响见表１。　表１　对酒精性肝损伤小鼠肝组织中Ｉ￣ＩＤＡ、ａＳＨ、ＴＣ　含量的影响（，ｌ＝１０，　±ｓ）