间接计数法-涂碟法、倒碟法、浊度法
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水质浊度的测定-浊度计法简介水质浊度是反映水中微小颗粒、胶体、细菌等杂质的浓度的一个参数。
对于近年来增多的黄褐色的水中,浊度也是衡量水质的重要指标之一。
因此,测定水中浊度对于确保水质安全,保障人民健康,具有重要的意义。
浊度的定义浊度是指水体中悬浮物质的密度,是一个无量纲参数,通常用浊度计来测定。
浊度计的种类1. 视差法浊度计视差法浊度计是按照浓度与透光度成反比的定律测定浊度的一种测定浊度方法。
它是在浊度计基础上设计的,通过比较标准液与待测液对光线透过时的差异来测定浊度。
适用于小于 50NTU(Nephelometric Turbidity Units)的浊度的测定。
2. 比较法浊度计比较法浊度计是利用比色比较的方法来检测样品的数值,与视差法浊度计不同,它可以对浊度较大的水样进行表测,但测量精度相对较低。
3. 直读式浊度计直读式浊度计是指仪器中已包含标准样品,可以直接读取其浓度值的一种测定浊度的仪器,其使用非常方便快捷,但需要注意该仪器的对标准有限制。
操作步骤以下是视差法浊度计操作步骤:1.准备试样取约 20 mL 待测水样,先经过0.45 μm 的微滤膜过滤,在用样品瓶容量补足至 50 mL。
如果样品浊度过高,可以进行逐级稀释。
2.标定仪器(1)取标准浊度为 0.02NTU 的硅酸铝溶液,调至比色杯中刻度线,斜视比对结果,并调整浊度计零点。
(2)取标准浊度为 10NTU 的硅酸铝溶液,调至比色杯中刻度线,斜视比对结果,并调节测量游标到 10NTU。
3.装样与测量(1)将样液和清水分别装入两个比色杯中,使溶液水平面与刻度线相切。
(2)将两个比色杯放在浊度计光路中,并按压比色杯盖,启动测量程序。
(3)待计算机自行计算结果后,取出比色杯清洗干净。
4.清洗仪器(1)将比色杯分别用水清洗干净,用纸巾擦拭干净。
(2)清洗仪器各部件,并将浊度计放回原处,可以做好维护工作。
注意事项1.在操作过程中要注意勿将单向比色镜的滤光片面朝上或朝下,避免因光线反射而伤害眼睛。
标题管蝶法,浊度法和稀释法的区别与联系前几天在和一位同事的聊天中,聊到了关于样品稀释的相关问题,并谈到了不同稀释方法各自的优缺点。
其中之一是:稀释法。
稀释法即浊度法。
这种方法一般用于在实验过程中,测定样品中总碱度、总碱度及总含盐量等指标。
使用这种方法可以得到相对较好的结果,但是操作复杂,需要反复进行测定;另一方面是:由于存在一定差别,因此这种方法被称为浊度法(volume method)或稀释法(wireless method)。
为了便于操作和准确测定,有些实验需要使用浊度来进行计算。
当进行多个实验时,为了节省样品中碱化氢、总碱度及总含盐量等指标后再对这些指标进行测定,也可以用稀释法则来表征,同时也要注意仪器的稳定性;有些研究还需要先对样品配制浓度或进行加液处理。
1、浊度法测定离子浓度的步骤在进行上述实验前,首先要进行溶液配制。
溶液的配制方法通常是用 PBS溶液来配制,而PBS溶液为碱性溶液。
在配制溶液时,我们通常会用 PBS配制盐酸;用 TDS配制硫酸亚铁;用Baseline配制硫酸铜等。
通常情况下,我们也会使用 NaCl代替一部分 TDS。
实验步骤:先用溶解好的 NaCl水调节 pH值至6-8;然后用Al·K2O (1 mmol? L NaCl· KH2O)取代含 NaCl NaCl的溶液(注意一定要用到 NaCl Cl);将含 NaCl的溶液加入H2SO4溶液中搅拌至溶解(可通过改变反应时间使 Na+或 Al+发生改变),然后将混合液过滤去除杂质(可通过过滤去除杂质)。
2、溶液配制实验步骤将样品置于玻璃杯中,加入少量的已知含量的试剂,用无水乙醇(pH=6)或去离子水(pH=6)进行稀释。
将处理好的样品溶液放入玻璃杯中,并使其与去离子水混合。
最后把试剂放置于滤纸上,滤纸要尽量长一些,以利于过滤。
用毛细管吸水器从玻璃杯中吸取实验试剂(一般用pH=4),然后再吸到滤纸上。
滴定所需试剂为10 mL试管1滴或10 mL试管2滴。
中国药房2012年第23卷第5期China Pharmacy 2012V ol.23No.5Δ河北省2006年科学技术研究与发展指导计划(06276445)*讲师,硕士。
研究方向:制药工程。
电话:0431-********。
E-mail :zhiyao 2010@ #通讯作者:主任药师,硕士。
研究方向:药物分析。
E-mail :gyx 990928@ 麦迪霉素为一组16元环大环内酯类抗生素的混合物,是日本的Takashi 公司1971年从日本土壤中分离出来的生米加链霉菌(Streptomyces mycarofaciens )ATCC 21454经发酵提取分离制得的。
其抗菌作用稍低于红霉素,临床主要用于革兰阳性菌感染。
乙酰麦迪霉素为麦迪霉素的2个位点上的羟基经乙酰化所得的一种二乙酰化合物,对革兰阳性球菌有较强的抗菌活性,口服吸收良好,血药浓度高,无苦味,具有很好的制剂学优点。
乙酰麦迪霉素的体外活性与麦迪霉素基本相同,但体内活性却显著优于麦迪霉素,原因之一可能是由于分子结构中增加了2个乙酰基,使其脱酰化代谢变缓、体内浓度增加所致。
目前,乙酰麦迪霉素采用管碟法测定其含量[1~3]。
管碟法能直观反映样品的体外抗菌能力,尤其对于单纯化学方法难以分开的多组分抗生素来说,一直被广泛应用。
但同时因其操作烦琐、影响因素多,而使结果的准确性有待商榷。
采用浊度法测定则可克服上述不足之处[4,5]。
笔者建立了以浊度法测定乙酰麦迪霉素制剂效价的方法,并与管碟法比较。
通过对乙酰麦迪霉素用浊度法测定其效价的研究,可以进一步提高产品效价测定的准确性,有效地减少了误差。
同时,浊度法作为效价检测的方法,不但可反映抗菌能力的高低,且具有更直观的效果。
1仪器与试药WBS-100全自动微生物比浊法测定仪、石英培养杯(厚度2cm )(北京先驱威锋技术开发公司);CBZ-1抗生素光度比浊法测量仪、石英培养杯(厚度1cm )(北京潮声公司);CAM-ⅢA 智能抑菌圈测定仪(上海波浦新材料技术有限公司)。
浊度测定方法范文浊度是指水中悬浮颗粒物质的含量,是评价水体透明度的重要指标之一、浊度测定方法是通过测量光在水中传播过程中被散射和吸收的程度来确定水样的浊度。
下面介绍几种常用的浊度测定方法。
1.比较法:比较法是将待测水样与标准浊度溶液进行对比,通过判断两者之间的差异来确定待测水样的浊度。
这种方法简单、经济,适用于初步判断水样的浊度水平。
2.直读法:直读法是使用专用的浊度计测量水样的浊度。
这种方法通过测量光线穿过水样后的散射和吸收来确定浊度值。
直读法不仅准确可靠,同时操作简便,适用于现场快速测量。
3.散射法:散射法是通过测量水样中悬浮颗粒物对光的散射程度来确定浊度。
这种方法主要包括贝尔定律法和内禀浊度法两种。
贝尔定律法是根据贝尔定律中光的散射和吸收之间的关系来计算浊度,需要使用特定的光源和探测器。
内禀浊度法是根据水样中固有颗粒导致的光散射程度来测量浊度,基本原理是通过去除颗粒物质后的水样与未去除的水样之间的浊度变化来计算浊度值。
4.整流法:整流法是通过摄影或视频记录水样在特定条件下光线通过程中的改变来判断浊度。
这种方法需要使用特殊的光学设备,能够记录水样中悬浮颗粒物对光线的整流效应,具有较高的精度和准确性。
5.颜色比较法:颜色比较法是使用色度计对待测水样的颜色进行比较,从而判断水样的浊度。
这种方法通过比较不同浓度的标准溶液与待测水样的颜色差异来确定浊度值。
颜色比较法操作简单,但精度较低,适用于一般水质测定场合。
总结而言,浊度测定方法有比较法、直读法、散射法、整流法和颜色比较法等多种,其中直读法和散射法是常用且较为准确的方法。
根据实际需要和条件选择合适的测定方法,可以有效评价水体的清澈度和水质状况。
浊度的测量方法浊度是指液体中悬浮颗粒或溶解物质的浓度,是用来描述液体清澈程度的一个指标。
浊度的测量方法有多种,常用的方法包括光散射法、透射法和电导法等。
一、光散射法光散射法是测量浊度常用的方法之一,它利用光在液体中的传播受到悬浮颗粒的散射而发生变化的原理来进行测量。
根据散射光的强度和角度的关系,可以得到浊度的数值。
在光散射法测量中,常用的仪器是浊度计。
浊度计通过发射一束光束进入待测液体中,然后测量光在液体中的散射情况。
根据散射光的强度,浊度计可以计算出液体的浊度值。
光散射法测量浊度的优点是简单、快速,适用于大多数液体。
二、透射法透射法是另一种常用的测量浊度的方法。
透射法是通过测量液体中光的透射率来间接得到浊度的数值。
透射法的原理是,当光通过液体时,悬浮颗粒会散射部分光线,导致透射率的降低。
根据透射率的变化,可以计算出浊度的数值。
透射法测量浊度时,常用的仪器是透射浊度计。
透射浊度计通过发射一束光束进入待测液体中,然后测量光的透射率。
根据透射率的变化,透射浊度计可以计算出液体的浊度值。
透射法测量浊度的优点是准确、稳定,适用于浊度较低的液体。
三、电导法电导法是一种利用电导率测量浊度的方法。
电导率是指液体中溶解物质或悬浮颗粒导电能力的大小。
当液体中的悬浮颗粒增多或溶解物质浓度增加时,电导率会相应增大。
因此,通过测量液体的电导率,可以间接得到浊度的数值。
电导法测量浊度时,常用的仪器是电导浊度计。
电导浊度计通过将待测液体通电,测量液体中的电导率。
根据电导率的变化,电导浊度计可以计算出液体的浊度值。
电导法测量浊度的优点是灵敏、快速,适用于浊度较高的液体。
浊度的测量方法有光散射法、透射法和电导法等。
根据不同的实际情况和要求,可以选择合适的测量方法来进行浊度的测量。
无论使用哪种方法,都需要仪器设备的支持,并且要注意正确操作,保证测量结果的准确性。
浊度的测量在环境保护、水处理、食品加工等行业中具有重要的应用价值,对于保障产品质量和环境安全具有重要意义。
几种常用的细菌计数方法常用的细菌计数方法主要有显微镜计数法、平板计数法、膜过滤法和浑浊度法等。
下面将逐一介绍这些方法。
显微镜计数法是最基本的细菌计数方法之一、将细菌培养液取少量放在显微镜载玻片上,用显微镜观察并计数细菌个数。
这种方法需要操作技巧熟练,适用于较稀疏的细菌培养液,但不适用于高密度的细菌培养液,并且仅能得到一个粗略的细菌数量。
平板计数法是一种较为常用的细菌计数方法。
将稀释后的细菌培养液均匀涂在含有培养基的平板上,经过一段时间的培养后,可以通过数独落在平板上形成的菌落数量来估计初始细菌数量。
通常将膨胀菌落数乘以相应的稀释倍数从而得到细菌的数量。
平板计数法的优点是简单易行,适用于大量细菌的计数,但该方法只适用于能够在固体培养基上生长的细菌。
膜过滤法是一种通过滤除细菌并计数膜上细菌数量的方法。
将细菌培养液通过微孔膜过滤器,在膜上滤除细菌,然后将膜放在富含营养物的培养基上进行培养,形成菌落后进行计数。
与平板计数法相比,膜过滤法更适用于含有颗粒物的液体或空气中的细菌计数。
膜过滤法的优点是操作相对简单,适用于含有较多颗粒物或固体物质的液体的细菌计数,但该方法仅适用于能够通过过滤的培养液。
浑浊度法是一种通过测量培养液的浑浊度来估计细菌数量的方法。
利用光密度计或比色计测量细菌培养液的吸光度或浑浊度,并通过细菌密度与浑浊度之间的关系来计算细菌数量。
这种方法不需要进行涂片或过滤步骤,适用于细菌数量较多的情况。
然而,浑浊度法有一定的局限性,因为细菌的大小、形状和组成可能对浑浊度产生影响,而且需要事先建立浑浊度和细菌数量间的校准曲线。
除了以上介绍的方法,还有一些其他的细菌计数方法,如Flow cytometry(流式细胞仪)、Most probable number(最可能数)等,这些方法各有特点,可以根据实际需要选择合适的方法进行细菌计数。
细菌计数方法的选择应根据实验的目的、样品性质和操作条件等因素来确定。
浊度浊度是指水中悬浮物对光线透过时所发生的阻碍程度。
水中的悬浮物一般是泥土、砂粒、微细的有机物和无机物、浮游生物、微生物和胶体物质等。
水的浊度不仅与水中悬浮物质的含量有关,而且与它们的大小、形状及折射系数等有关。
1简介水中含有泥土、粉砂、微细有机物、无机物、浮游生物等悬浮物和胶体物都可以所构成使水质变的浑浊而呈现一定浊度,水质分析中规定:1L水中含有1mgSiO2的浊度为一个标准浊度单位,简称1度。
通常浊度越高,溶液越浑浊。
2测定方法比浊法或射光法测定浊度可用比浊法或散射光法进行测定。
我国一般采用比浊法测定,将水样和用高岭土配制的浊度标准溶液进行比较侧度不高,并规定一升蒸馏水中含有1毫克二氧化硅为一个浊度单位。
对不同的测定方法或采用的标准物不同,所得到的浊度测定值不一定一致。
浊度的高低一般不能直接说明水质的污染程度,但由人类生活和工业生活污水造成的浊度增高,表明水质变坏。
浊度计测定浊度也可以用浊度计来测定的。
浊度计发出光线,使之穿过一段样品,并从与入射光呈90°的方向上检测有多少光被水中的颗粒物所散射。
这种散射光测量方法称作散射法。
任何真正的浊度都必须按这种方式测量。
浊度计既适用于野外和实验室内的测量,也适用于全天候的连续监测。
可以设置浊度计,使之在所测浊度值超出安全标准时发出警报。
其他方法浊度也可以通过利用色度计或分光光度计测量样品中颗粒物的阻碍作用造成的透射光强衰减程度来估计。
然而,管理机构并不承认这种方法的有效性,这种方法也不符合美国公共卫生协会对浊度的定义。
利用透光率测量容易受到颜色吸收或颗粒物吸收等干扰的影响。
而且,透光率和用散射光测量法测得的结果之间并无相关性。
尽管如此,在某些时候色度计和分光光度计的测量结果可以在水处理系统或过程控制中用于测定浊度的大幅度变化。
3浊度单位1.FTU,浊度,即水的混浊程度,由水中含有微量不溶性悬浮物质,胶体物质所致,ISO标准所用的测量单位为FTU(浊度单位),FTU与NTU(浊度测定单位)一致。
抗菌和抑菌效果评价方法引言:随着抗生素的广泛应用和细菌耐药性的不断增强,对抗菌和抑菌效果评价方法的研究变得越来越重要。
本文将介绍几种常用的抗菌和抑菌效果评价方法,以期为相关研究提供参考。
一、最小抑菌浓度(MIC)最小抑菌浓度是指抑制细菌生长所需的最低药物浓度。
常用的MIC 测定方法有两种:管法和板法。
管法采用不同浓度的抗生素溶液与细菌进行反应,观察细菌生长情况以确定最小抑菌浓度。
板法则是将抗生素涂于琼脂培养基上,再将细菌接种于上面,通过观察细菌生长情况来确定最小抑菌浓度。
这两种方法都具有操作简单、结果可靠的特点,被广泛应用于抗菌药物的研究和临床应用。
二、抗菌圈直径法抗菌圈直径法是通过测量药物在琼脂培养基上抑制细菌生长所形成的抗菌圈直径来评价抗菌效果的方法。
该方法适用于各种抗菌药物的评价,操作简单、结果直观,广泛应用于实验室和临床。
通过测量抗菌圈直径,可以判断药物对细菌的抑制程度,进而评估其抗菌效果。
三、抑菌率法抑菌率法是通过将不同浓度的抗生素溶液与细菌进行反应,然后观察细菌生长情况,计算抑菌率来评价抑菌效果的方法。
抑菌率是指抑制细菌生长的百分比,通常使用百分比作为评价指标。
抑菌率法可以较直观地反映药物对细菌的抑制能力,但其结果受到实验条件和操作方法的影响,需要注意标准化实验条件以确保结果的准确性。
四、细菌存活率法细菌存活率法是通过测量抗生素处理后细菌存活的比例来评价抗菌效果的方法。
常用的方法有平板计数法和浊度法。
平板计数法是将处理后的细菌溶液均匀涂布于琼脂平板上,经过一段时间后,计算细菌的存活率。
浊度法则是通过测量细菌溶液的光学密度来评估细菌存活率。
这两种方法都可以较准确地评估抗菌效果,但需要注意操作的严谨性和结果的可靠性。
五、细菌增殖曲线法细菌增殖曲线法是通过测量细菌在不同浓度抗生素处理条件下的生长曲线来评价抗菌效果的方法。
该方法可以直观地反映药物对细菌生长的抑制程度,并且可以确定最佳抑菌浓度。
間接計數法-塗碟法、倒碟法、濁度法
一、目的:練習使用塗碟、倒碟法,並使用UV儀器測量吸收值,以及調配NA
培養基。
二、原理:將待測水樣經過適量的稀釋,以塗碟法、倒碟法和UV儀器測量吸收
值推算吸光值與菌數的關係式。
三、過程方法:
1.培養基配製:秤
2.3g的NA,加入100ml的二段水,混合後放入高溫高
壓滅菌釜中(121℃,壓力1.1kg/cm2,15~20分鐘)。
2.樣品稀釋:取1ml的樣品加入9ml的二段水製成10-1再由10-1內取0.1ml
的水溶液加入9ml製成10-2以此類推配置10-3、10-4。
3.測濁度:以次方小→大,從10-4→10-1分別放入UV儀測量吸收值,吸
收越少,表示混濁度越高。
4.塗碟法:取4個培養基,分別從10-4→10-1各取0.1cc滴入4個不同的
培養基中;取三角彎棒,噴上70%的酒精,再用酒精燈燃燒
至三角彎棒上的酒精完全揮發且冷卻。
取1培養基,45∘角旋轉使菌液均勻分布培養基中,放入37
℃的恆溫培養箱中培養,隔日計算其菌落數。
5.倒碟法:將NA培養液從高溫高壓滅菌釜中取出,再分別平均分配於4
個試管柱中,放置冷卻至40~50℃才可加入不同濃度的樣品各
取0.1cc,混合後,倒入培養皿,放入37℃恆溫培養箱中,隔日
計算其菌落數。
四、材料:錐形瓶、玻璃培養皿、三角彎棒、吸球、定量玻璃吸管、稱藥杓、酒
精燈、螺紋試管、試管蓋、玻棒、隔熱手套、稱藥紙、標籤。
五、結果:
倒碟法
塗碟法
1.說明10ml之菌液如何配置成10-2倍與10-3倍之稀釋菌液?
Ans:先加入90ml的二段水製成10-1;
取1ml的10-1加入10-2的瓶中,加9ml二段水製成10-2;
取1ml的10-2加入10-2的瓶中,加9ml二段水製成10-3。
2.實驗所得之總生菌數是否能真正代表樣品中的微生物數量?為什麼?Ans:不行;限於物理、化學因素,無法滿足所有細菌的營養需求,且肉眼無法判斷是否有重疊的菌落,所以測出的菌落比實際的還低。
3.為什麼進行平板計數法時,我們以0.2ml菌液進行塗抹,而不是直接採1ml
進行試驗?
Ans:比較少的菌液方便於觀察。
4.實驗完成之TGE培養皿內的菌落數(1)在30至300個之間;(2)不在30~300
個之間時,其生菌數的計算方式有何不同?
Ans:(1)在30至300個之間
生菌數=(X+Y)/2* D*(1.0/0.2)
X、Y:兩次重覆計數之菌落數;D:樣品稀釋倍數
1.各稀釋倍數中僅有一個稀釋倍數的一個培養皿,菌落數在30~300個
之間,用上列公式計算,註明為估計生菌數。
2.若各個培養基並無菌落生長,則生菌數以小於1乘以最低稀釋倍數表
示,註明為估計生菌數。
3.各培養皿的菌落數不在30~300個之間,用最接近30~300個菌落數
的同一稀釋倍數的兩個培養皿來計數。
用上列公式計算,註明為估計
生菌數。
4.若僅原水有菌落產生且少於30個計數,為估計生菌數。
5.各稀釋倍數中有兩個稀釋倍數的培養皿,菌落數在30~300個之間,
用下列公式計算,註明為估計生菌數。
(2)不在30~300個之間
生菌數=﹝(X1+Y1)*D1+(X2+Y2)*D2﹞/4*(1.0/0.2)D1、D2:菌落在30~300個之稀釋倍數;X1、X2:D1稀釋倍數的兩個培養皿的菌落數;Y1、Y2:D2稀釋倍數的兩個培養皿的菌落數
5.平板計數法進行計數時,其計數原則為何?
Ans:1.培養皿當有擴散菌落產生,超過於面積的1/2時就不加以計算。
2.培養皿當被擴散菌落抑制之菌落,超過面積的1/4時就不加以計數。
3.當擴散菌落為一條鏈狀時,為一個菌落。
兩條鏈狀以上且起源於不相同
時,每一條鏈狀為一個菌落,若起源一樣時,為一個菌落。
4.同一個培養皿若由兩個人各計數一次,其差異不能超過於10%;若由一
個人計數兩次以上時,差異不能超過5%。
6.討論:這個實驗我們做了酵母菌塗碟法和倒碟法,結果發現倒碟法生長的菌
落多於塗碟法,因為塗碟需要的技巧比較多,可能是菌液分布不是很
平均,導致菌落都集中在中間;也有可能是三角彎棒的溫度還沒完全
降下來,就開始使用了,導致菌落數變少,而且塗碟的接觸面積較小,
只限於平面上;至於倒碟法只要用NA培養液和樣品混合再倒入培養
皿內就可以了,比較沒有那麼多的技巧,所以菌落較為分散均勻,而
且倒碟的菌液散佈在培養基中。
7.心得:。