蛋白质相对分子量
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测定蛋白质相对分子量的方法
《测定蛋白质相对分子量的方法》
测定蛋白质相对分子量是生物学研究中常用的技术之一,它可以帮助研究者了解蛋白质的结构、功能和互作关系。
测定蛋白质相对分子量的方法主要有电泳、沉淀和放射免疫测定等。
电泳是最常用的测定蛋白质相对分子量的方法,它通过将蛋白质电泳到电泳凝胶板上,然后将凝胶板置于电压场中,使蛋白质在凝胶中移动,根据蛋白质在凝胶中的移动距离来测定其相对分子量。
沉淀法是另一种测定蛋白质相对分子量的方法,它是通过将蛋白质溶液与沉淀剂混合,使蛋白质沉淀,然后测定沉淀物的质量来计算蛋白质的相对分子量。
放射免疫测定是一种特殊的测定蛋白质相对分子量的方法,它是通过将蛋白质混合物接种到动物体内,使其产生免疫反应,然后收集抗体,测定抗体的浓度来计算蛋白质的相对分子量。
以上是测定蛋白质相对分子量的几种方法,它们都能够帮助研究者更好地了解蛋白质的结构、功能和互作关系。
测定蛋白质相对分子
相对分子量(Mw)是衡量蛋白质大小和形式,用来契合蛋白质之间的比较。
它可以被定义为某种蛋白质的分子重量除以其他某种蛋白质的分子重量的比例。
相对分子量的测定是有效的方法来确定蛋白分子的特定结构,因为它可以帮助有效地比较和分析多种蛋白分子之间的量,分子形式和结构。
蛋白质相对分子量的测定主要可以通过以下几种方法来实现:
一是电泳分析技术。
所谓电泳,就是将带有指定电荷的蛋白质投入到一种凝胶中,然后在电场作用下移动,和分割不同W,相对分子量的蛋白质。
这是一种简单快捷的方式来测量蛋白质相对分子量。
二是分光光度法。
这是一种利用飞行时间质谱来测定蛋白质相对分子量的先进技术,利用一种称为非相对质谱的先进仪器,以固态的质谱图显示和确定不同蛋白质的相对分子量。
三是双向电泳。
这是一种用于测量蛋白质相对分子量的灵活的技术,利用双向凝胶中的使用双向电场来分离不同的蛋白质。
它利用不同的电场,可以准确地测定蛋白质之间的区别,并准确确定相对分子量。
最后,细胞分解技术也可以用来测量蛋白质的相对分子量。
这种技术不仅可以测量蛋白质的相对分子量,而且还可以用来测量已有的蛋白质的完整性和数量,以用来研究特定的蛋白质性质。
通过以上所提及的几种方法,来测量蛋白质的相对分子量,使科学家们能够有效地了解蛋白质之间的关系,从而加深对蛋白质的研究。
它们也有助于确定新的蛋白质结构降解途径和深入研究该领域者关心的各种问题。
蛋白质计算专题1.有关蛋白质相对分子质量的计算例1 组成生物体某蛋白质的20种氨基酸的平均相对分子质量为128,一条含有100个肽键的多肽链的分子量为多少?解析:在解答这类问题时,必须明确的基本关系式是:蛋白质的相对分子质量=氨基酸数×氨基酸的平均相对分子质量-脱水数×18(水的相对分子质量)本题中含有100个肽键的多肽链中氨基酸数为:100+1=101,肽键数为100,脱水数也为100,则依上述关系式,蛋白质分子量=101×128-100×18=11128。
变式1:组成生物体某蛋白质的20种氨基酸的平均相对分子质量为128,则由100个氨基酸构成的含2条多肽链的蛋白质,其分子量为()A. 12800B. 11018C. 11036D. 8800解析:对照关系式,要求蛋白质分子量,还应知道脱水数。
由于题中蛋白质包含2条多肽链,所以,脱水数=100-2=98,所以,蛋白质的分子量=128×100-18×98=11036,答案为C。
变式2:全世界每年有成千上万人由于吃毒蘑菇而身亡,其中鹅膏草碱就是一种毒菇的毒素,它是一种环状八肽。
若20种氨基酸的平均分子量为128,则鹅膏草碱的分子量约为( )A.1024 B. 898 C.880 D.862解析:所谓环肽即指由首尾相接的氨基酸组成的环状的多肽,其特点是肽键数与氨基酸数相同。
所以,鹅膏草碱的分子量=8 ×128-8 ×18=880,答案为C。
2.有关蛋白质中氨基酸数、肽链数、肽键数、脱水数的计算在解答这类问题时,必须明确的基本知识是蛋白质中氨基酸数、肽链数、肽键数、脱水数的数量关系。
基本关系式有:n个氨基酸脱水缩合形成一条多肽链,则肽键数=(n-1)个;n个氨基酸脱水缩合形成m条多肽链,则肽键数=(n-m)个;无论蛋白质中有多少条肽链,始终有:脱水数=肽键数=氨基酸数-肽链数例2 氨基酸分子缩合形成含2条肽链的蛋白质分子时,相对分子量减少了900,由此可知,此蛋白质分子中含有的氨基酸数和肽键数分别是()A.52、52B.50、50C.52、50D.50、49解析:氨基酸分子形成蛋白质时相对分子质量减少的原因是在此过程中脱去了水,据此可知,肽键数=脱水数=900÷18=50,依上述关系式,氨基酸数=肽键数+肽链数=50+2=52,答案为C。
测定蛋白质相对分子质量的方法
测定蛋白质相对分子质量的方法有多种,以下列举几种常用的方法:
1. SDS-PAGE:通过聚丙烯酰胺凝胶电泳,将蛋白质按照分子量大小分离出来。
蛋白质在胁迫条件下与SDS形成复合物,其电荷密度相对一致,所以主要根据蛋白质在凝胶中的迁移距离来估算其分子量。
2. SDS-PAGE-Western blotting:在SDS-PAGE的基础上,将分离出的蛋白质转移到聚合物膜上,并使用特异性抗体检测靶蛋白。
通过与已知分子量的标准品比较,可以推断目标蛋白质的相对分子质量。
3. 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS):该方法通过将蛋白质与基质结合后,利用激光辐射将其离子化,并通过不同质荷比(m/z)的飞行时间分析获得蛋白质的质量/电荷比。
结合已知质量的标准品,可计算得到蛋白质的分子量。
4. 高效液相色谱-多角度光散射(HPLC-MALS):通过高效液相色谱分离蛋白质,并结合多角度光散射检测器,测量蛋白质溶液中散射光强的变化。
根据多角度光散射理论,计算出蛋白质颗粒的质量和大小分布,从而推断其相对分子质量。
需要注意的是,不同的方法可能有其适用范围和准确性上的差异,因此选择合适的方法需要根据具体实验目的和条件进行评估。
蛋白质的分子量的计算:
蛋白质相对分子质量=氨基酸相对分子质量总和—失去水分子的相对分子质量总和。
蛋白质中肽键数的计算:
肽键数(或脱去的水分子数)=氨基酸数—肽链数。
平均分子量:20种氨基酸平均分子量为128。
蛋白质是由C(碳)、H(氢)、O(氧)、N(氮)组成,一般蛋白质可能还会含有P(磷)、S(硫)、Fe(铁)、Zn(锌)、Cu(铜)、B(硼)、Mn(锰)、I(碘)、Mo(钼)等。
这些元素在蛋白质中的组成百分比约为:碳50%、氢7%、氧23%、氮16%、硫0~3%、其他微量。
1.一切蛋白质都含氮元素,且各种蛋白质的含氮量很接近,平均为16%;
2.蛋白质系数:任何生物样品中每1g元氮的存在,就表示大约有100/16=6.25g 蛋白质的存在,6.25常称为蛋白质常数。
蛋白质的有关计算作者:徐永芬来源:《神州》2012年第02期蛋白质是生命活动的主要承担者,于蛋白质相关的计算试题是历年高考命题的热点,也是考试最容易出错的知识点。
如何有效的解答这类题目,关键在于学生熟练掌握计算规律。
1、氨基酸数、肽键数、脱水数和肽链数的关系规律1:肽键数=失去水分子数=氨基酸数-肽链数(若形成环肽,取肽链数为0)例1、(2010·上海高考)由m个氨基酸构成的一个蛋白质分子,含n条肽链,其中z条是环状多肽。
该蛋白质分子中含有的肽键数为()A.m-z+n B.m-n-zC.m-n+z D.m+z+n解析:在形成蛋白质的过程中,脱水缩合形成的肽键数=氨基酸数—肽链数。
由于z条是环状多肽,在公式中取肽链数应取n-z,故肽键数为m-(n-z),等于m-n+z。
答案:C2、蛋白质相对分子量的计算规律2:蛋白质相对分子量=氨基酸数×氨基酸平均相对分子量-失去水分子数×18例2、若某蛋白质的相对分子质量为11935,在合成这个蛋白质过程中脱水量为1908,假设氨基酸的平均分子量为127,则组成该蛋白质分子的肽链数为()A. 1条B. 2条C. 3条D. 4条解析:依据公式蛋白质的相对分子量=所有氨基酸的分子量-脱水的分子量。
脱水量1908,可得脱水数为1908÷18=106,蛋白质中氨基酸数为(11935+1908)÷127=109,又因为脱水数=氨基酸数-肽链数,可以得到肽链数为109-106=3.答案:C3、蛋白质中游离氨基或羧基数目的计算规律3:若不考虑R基上氨基或羧基数目,氨基酸脱水缩合形成的一条多肽链中,总有一个氨基位于肽链最左侧,有一个羧基位于肽链最右侧。
①、至少含有的游离氨基或羧基数目=肽链数②、游离氨基或羧基数目=各氨基酸含有氨基或羧基数目-肽键数=肽链数+R基中含有的氨基或羧基数目例3、现有氨基酸800个,其中氨基总数为810个,羧基总数为808个,则由这些氨基酸合成的含有2条肽链的蛋白质共有肽键、氨基和羧基的数目依次分别为()A.798、2和2 B.798、12和10C.799、1和1 D.799、11和9解析:根据氨基酸的结构通式可知,组成蛋白质的一个氨基酸至少有一个氨基和一个羧基。
蛋白质相对分子质量=蛋白质相对分子质量是指一个蛋白质分子的质量与单位质量的质子或中子的比值。
它是一个蛋白质分子中所含有的所有原子的质量总和,通常以Dalton(Da)为单位。
蛋白质相对分子质量可以帮助科学家确定蛋白质的结构、功能和相互作用,对于生物科学研究具有重要意义。
蛋白质相对分子质量的计算涉及到蛋白质分子的组成,通常包括氨基酸的种类和数量。
每种氨基酸的分子量不同,因此蛋白质相对分子质量可以根据蛋白质的氨基酸组成来计算。
一般情况下,蛋白质分子由上百至上千个氨基酸组成,因此需要精确计算每种氨基酸的质量并累加得到最终的相对分子质量。
蛋白质相对分子质量的计算可以通过化学实验手段获得,也可以通过生物信息学工具进行计算。
在化学实验中,科学家可以利用质谱仪对蛋白质分子进行质谱分析,通过测量质子或中子的质量来确定蛋白质的相对分子质量。
而在生物信息学方面,科学家可以利用计算机程序根据蛋白质的氨基酸序列从而得到相对分子质量的估算值。
蛋白质相对分子质量的大小对蛋白质的性质和功能有着重要的影响。
一般来说,相对分子质量较大的蛋白质往往具有复杂的结构和多样的功能。
大分子量的蛋白质通常能够承载更多的功能基团,并且在细胞内部起着重要的调节作用。
许多酶类蛋白质的分子量较大,可以在生物代谢过程中发挥催化作用。
蛋白质相对分子质量还可以影响蛋白质的性质,例如溶解性和稳定性。
较大的分子量通常意味着蛋白质在水溶液中的溶解度较低,也更容易在环境变化下失去构象稳定性。
在蛋白质的工程设计和应用中,相对分子质量的大小需要被充分考虑。
蛋白质相对分子质量是衡量蛋白质分子大小和复杂程度的重要指标,它对于了解蛋白质的结构、功能和生物学意义都具有重要的意义。
通过对蛋白质相对分子质量的研究和计算,科学家们可以更好地理解蛋白质在生物系统中的作用,进一步推动生物科学领域的发展。