第四讲 DNA的复制与修复
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1 第三篇 遗传信息的传递
简答题
1.图示并文字说明分子生物学的中心法则。并叙述其发现意义。
第十四章 DNA的生物合成
一、名词解释
端粒、端粒酶、反转录、cDNA、复制、引发体、领头链、随从链、冈崎片段、引物、半保留复制、半不连续性复制、复制叉、复制子、Klenow片段
二、填空题
1.人类体细胞的基因组总长为6.0×109bp,含46条DNA分子。
2.在DNA复制过程中,能够连续合成的链称为领头链或先导链,不能够连续合成的链称为滞后链或随从链,这种复制方式称为半不连续复制。
3. DNA体内复制的主要特征有半保留复制、双向复制和半不连续复制。
4.维持DNA复制保真性(Fidelity)的分子机制有:⑴ 严格遵守碱基配对法则;⑵ DNA聚合酶对碱基的选择能力;⑶ 即时的校读功能。DNA自发突变的频率约为10-9。
5.反转录合成cDNA包括三个步骤,它们是⑴ 以mRNA为模板合成cDNA的第一条链;⑵ 杂化双链中RNA链的水解;⑶ 合成cDNA的第二条链。
6.催化DNA复制的聚合酶的全称为DDDP;催化反转录的酶的全称为RDDP。
7.在E.coli中,特异识别复制起始区的蛋白因子是DnaA;在E.coli
DNA复制过程中,执行校读功能的是DNA pol I,真正催化复制的酶是DNA pol Ⅲ,连接冈崎片段的酶是DNA连接酶。
8.催化真核生物染色体端粒中DNA复制的酶称为端粒酶,它是一种特殊的反转录酶,通过一种称为爬行模型的机制维持染色体的完整。
9. 原核生物DNA pol Ⅲ执行碱基选择功能的亚基是ε亚基。
10. DNA复制的底物是dNTP;而发生聚合的核苷酸是dNMP。
11. DNA复制时,子链的延伸方向是5′→3′。
12.引物的作用是提供3′-OH末端。
三、问答题
1.何谓反转录(reverse transcription)?其发现意义是什么?
DNA的复制和修复
填空题
1.DNA复制是定点双向进行的, 股的合成是 ,并且合成方向和复制叉移动方向相同; 股的合成是 的,合成方向与复制叉移动的方向相反。每个冈崎片段是借助于连在它的 末端上的一小段 而合成的;所有冈崎片段链的增长都是按 方向进行。
2.DNA连接酶催化的连接反应需要能量,大肠杆菌由 供能,动物细胞由 供能。
3.以RNA为模板合成DNA称 ,由 酶催化。
5.基因突变形式分为: , , 和 四类。
8.前导链的合成是 的,其合成方向与复制叉移动方向 ;随后链的合成是 的,其合成方向与复制叉移动方向 。
10.DNA聚合酶I的催化功能有 、 、 和 。
12.细菌的环状DNA通常在一个 开始复制,而真核生物染色体中的线形DNA可以在 起始复制。
13.大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的 活性使之具有 功能,极大地提高了DNA复制的保真度。 14.大肠杆菌中已发现 种DNA聚合酶,其中 负责DNA复制, 负责DNA损伤修复。
15.DNA切除修复需要的酶有 、 、 和 。
16.在DNA复制中, 可防止单链模板重新缔合和核酸酶的攻击。
17.DNA合成时,先由引物酶合成 ,再由 在其3′ 端合成DNA链,然后由
切除引物并填补空隙,最后由 连接成完整的链。
选择题
1.DNA按半保留方式复制。如果一个完全放射标记的双链DNA分子,放在不含有放射标记物的溶液中,进行两轮复制,所产生的四个DNA分子的放射活性将会怎样:
A.半数分子没有放射性
B.所有分子均有放射性
第4章DNA复制
第四章 DNA复制(DNA Replication)1.主要内容
1)DNA复制概览
2)细菌DNA复制
3)真核DNA复制
2.教学要求
1) 掌握原核⽣物和真核⽣物DNA的复制特点
2)熟悉原核⽣物和真核⽣物DNA复制的酶系统
第⼀节DNA复制概述
第⼆节DNA复制的酶学
第三节原核⽣物DNA复制
第四节真核⽣物DNA复制
第⼀节DNA复制概述(DNA Replication: An Overview)
⼀、基本概念
⼆、DNA的半保留复制
三、复制起点、⽅式和⽅向
四、DNA复制的半不连续性
⼀、基本概念复制⼦(Replicon,复制单位或复制元)
DNA中含有⼀定复制起点和复制终点的复制单位。1.3万— 90万不等
A unit of the genome in which DNA contain a region from origin to terminator ?复制体(Replisome):复制叉处的许多酶和蛋⽩组成的复合体,协同动作合成DNA。?The multi protein (30±) structure that assembles at replicating fork to undertake synthesis ofDNA
⼆、DNA的半保留复制
(Semi-Conservation Replication)CsCl (Cesium chloride) density gradient ultracentrifugation(CsCl密度梯度超离⼼)?Labeled E.Coli DNA with 15N 14N
三、复制起点、⽅向和⽅式 All prokaryotic chromosomes and many bacteriophage and viral DNA molecules are circles and comprise single replications.(单复制⼦)
1、复制起点(origin ,ori 或 O ,复制原点)复制开始处DNA 分⼦的特定位置 原核⽣物(Prokaryote ):单复制起点,即——整个染⾊体只有⼀个复制单位 真核⽣物(Eukaryote ): 多复制起点,即--⼀个genome 中有多个复制单位2、复制⽅向(复制过程的顺序性)
组卷测试
一:填空题
1.端聚酶由________________和________________两个部分组成,它的生理功能是________________。
2.原核细胞DNA复制时形成的冈崎片段比真核细胞DNA复制形成的冈崎片段________________。
3.维持DNA复制的高度忠实性的机制主要有________________、________________和________________。
4.光复活酶的辅基是________________和________________或________________,它能直接修复________________。
5.________________和________________酶的缺乏可导致大肠杆菌体内冈崎片段的堆积。
6.E.coli参与错配修复的DNA聚合酶是________________。
7.DNA损伤可分为________________和________________两种类型,造成DNA损伤的因素有________________和________________。
8.________________病毒是研究真核细胞DNA复制最好的材料。
9.同源重组可分成两步反应:第一步反应是________________;第二步反应是________________。
10.参与大肠杆菌DNA复制的主要聚合酶是________________,该酶在复制体上组装成________________二聚体,分别负责________________链和________________链的合成,已有证据表明后随链的模板在复制中不断形成________________结构。
11.大肠杆菌在DNA复制过程中切除RNA引物的酶是________________,而真核细胞DNA复制过程中切除RNA引物的酶是________________或________________。