问题1：如何正确应用药物敏感结果？
正确运用药敏试验结果应考虑以下3个方面：
首先要确定病原菌，如未找到真正的致病菌，药敏实验不但不能指导用药甚至可能误导临床；
重视耐药监测，这是经验用药的一个重要的参考；
考虑到药敏试验的局限性：体外报告敏感的药物体内治疗不一定有效，而体外报告耐药的药物体内治疗不一定无效。
问题2：是否MIC越低的药物越好？
不一定。因为不同药物对同种细菌，同一药物对不同细菌的折点均可不同，并且若细菌产生某些特殊耐药机制时，即使体外敏感也应报耐药，另外尚需考虑药动学和耐受性。因此，不能单纯比较MIC值而认为MIC越低的药物就一定越好。 MIC只表示一种药物对某一株细菌抗菌作用的强弱 ，MIC越低（离中介值越远）说明该药物对相应的病原菌的作用越强。只能比较同一种药对同一株菌，若MIC值升高，可认为其耐药性提高。
问题3：是否所有报告的细菌均为病原菌？
不一定。原因如下：
所报告细菌为污染菌或定植菌，细菌培养结果的临床意义大小与所取标本有关。如为血液等无菌标本则临床意义较大，但即使血培养阳性也可能为污染菌。某些标本易受污染如痰标本易于受咽喉部携带菌的污染，尿培养易受下尿道、尿道口寄居菌污染。
可能为应用抗菌药后的菌群交替或菌群失调。特别是原为复数菌感染时，针对优势菌治疗一段时间后可能非优势上升为优势菌，或广谱抗菌药治疗后可能出现真菌感染。
有２种以上病原菌时因生长速度不同、营养要求不同，培养结果不能真实反映病原菌的种类、数量。
问题4：为什么有时痰涂片结果与痰培养结果不一致？
由于痰标本进行培养和涂片时选取的部位不一致；
某些快生长菌所占比例并不多，但由于生长速度快、营养要求低，能在培养过程中迅速变为优势菌而掩盖其他菌的生长；
标本从采集到接种的时间过长，造成部分苛养菌死亡，在涂片中看到的只是菌的残骸而非活菌。
问题5：我们想用的药物在药敏试验中没有做？
1.天然耐药
2.可能是药物的敏感性被其他药物所预报
普通细菌培养鉴定操作规程
1 检验目的
做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理
人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义；另外机体某些部位是无菌的 ，如检出细菌则视为致病菌。并排除采样及操作污染。
3 标本要求
（1）标本类型：血液，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等体液；痰液，前列腺液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。
（2）标本采集：见标本采集手册
（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。
（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。
4 容器和添加剂类型
均使用灭菌器皿盛放标本
5 试剂
（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。
6仪器设备：
（1）接种针、接种环、酒精灯
（2）梅里埃ATB药敏鉴定仪
（3）显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平
7 校准程序
(送市计量质量检测研究所校准)
8操作步骤 （1）所有标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种，血培养发现阳性立即进行接种。
（2）接种：以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜，观察结果。
（3）涂片：肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色；
（4）纯培养：根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/柯玛嘉或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。
（5）鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见梅里埃ATB微生物鉴定系统
9 质量控制：
参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动
10 生物参考区间
血液，尿液，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长；其他标本如大便，痰液为正常菌群或未见致病菌。
11 患者检验结果的可报告区间
109例细菌培养鉴定及药敏结果的分析
对细菌种类分析，可以为临床医生对疾病的诊断和临床提供科学的医学证据，也有助于院内交叉感染和流行病学的调查分析。同时对细菌的药敏实验进行分析，将有助于临床合理和有效用药，本文从临床标本分离培养出的细菌种类和耐药情况进行统计分析，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 标本来源：2005年8月～2006年4月，收集我院门诊、住院患者的痰、尿、大便、血、咽拭子、胸腹水、脓及分泌物等共109例样本。
1.2 培养基、药敏纸片由杭州天和微生物试剂有限公司提供。
1.3 方法：K-B琼脂扩散法标准按生产厂家提供的标准判定。
2 结果
2.1 细菌组成分类：由109例标本中分离出88例阳性标本，其中单一细菌感染病例75例，混合感染13例，主要病原菌的组成及分类见表1。
2.2 药敏结果分析：药敏试验共选择了18种抗菌素，75例G+、G-细菌的耐药性情况见表2。
3 讨论
3.1 表1可看出培养出来的主要致病菌是白色念珠菌（26.2%）、金黄色葡萄球菌（22.7%）、（大肠）埃希氏杆菌类（22.7%）、化脓性链球菌群（13.7%）；白色念珠菌类和金黄色葡萄的比例远远高于其它地区的报道，原因可能是本地区盲目乱用抗生素导致。值得一提的是20例金黄色葡萄球感染者中，有4例来自于本院烧伤感染患者，他们对药物的敏感性完全相同，高度怀疑是我院院内感染。
3.2 从表2可看出致病菌对常用的广谱抗菌素都产生了很高的耐药性，其中氨苄青霉素72%、苯唑青霉素72%、红霉素72%、SMZco 61.3%、四环素56%、氯霉素46.6%、氨曲南46.6%、复达欣42.6%。这种现像可能是本地区地理位置偏远经济落后一直尚未开展细菌培养药敏试验，医师只有盲目开药而造成耐药菌株的增加。笔者认为在尚未开展此项工作的医院，应建立细菌室，为临床医师合理科学用药提供医学证据。
3.3 本地区的真菌感染率明显增高，感染者年龄最大56岁，最小3个月，临床表现均为长期腹泻，抗菌素治疗无效，说明当地医生滥用抗菌素后引起正常菌群失调，导致条件致病菌变成致病菌。临床医师应该引起关注和重视。
全自动细菌培养鉴定药敏系统主要由两部分构成，即：血培养仪（BACTEC9050）和细菌鉴定/药敏仪。
全自动血培养仪是一种专门设计用于快速培养和检测血液中细菌和真菌的仪器，BACTEC9050血培养仪采用的培养瓶主要有需氧和厌氧标准瓶，加有树脂的需氧和厌氧Plus瓶以及儿童瓶等。其树脂瓶经现场实验证明能较快地发现瓶中细菌并有较高的检出率。目前此系统在世界上特别是在欧美应用十分广泛。
BD PHOENIXTMM System凤凰全自动微生物鉴定/药敏系统是专业设计应用于临床微生物实验室进行快速细菌鉴定及药物敏感试验的全自动设备。仪器原理为先进的荧光增强与传统方法的结晶。系统连续监测，试验完成后可立即得出结果;革兰阳性菌和阴性菌准确度为95%；细菌的药敏时间较手工方法也大为缩短。从接收标本到出具报告时间仅为48h左右，准确度为95%。全自动细菌培养鉴定的投入使用，将在以下四个方面大大提高工作效率：一是提高培养基营养条件利于苛养菌生长。二是加强细菌耐药性监控。鉴于目前耐药性的问题日趋严重，该系统能较准确地做好常规的抗生素敏感试验，并保存有关的菌种和数据以便进一步分析，包括耐药趋势的统计分析、耐药机制的检测和研究，重点耐药菌株如MR-SA、VRE和ESBL等的监测和耐药基因的检测等。三是帮助临床合理应用抗生素，检测病原微生物对抗生素的敏感性是临床微生物实验室最重要的工作之一。
抗生素敏感性检测的主要目的是预测抗生素的治疗效果，并帮助临床医生针对某一特定的临床感染问题选择最合适的药物，该系统不仅能正确、迅速检出病原体，而且给临床提供可能存在的耐药机制，帮助临床合理应用抗生素。四是提供临床（咨询）服务，目前备受人类重视的难治的耐药菌有：①耐青霉素肺炎链球菌（PRP）；②耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌（MRSA）；③耐万古霉素肠球菌（VRE）；④耐万古霉素葡萄球菌（VRSA）；⑤耐多种药物的结核分枝杆菌（MDR-TB）；⑥真菌感染日益增多；⑦产超广谱β-内酰胺酶的革兰阴性杆菌（ESBL）；⑧持续高产染色体I型β-内酰胺酶（AmpC）的阴沟肠杆菌、产气肠杆菌，弗劳地枸橼酸杆菌；⑨多重耐药的铜绿假单胞菌，不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌。随着该系统的投入使用以及与临床的及时沟通，对协助临床医生解决治疗感染性疾病的困难也有一定的帮助。
