下载文档原格式
1 邻二氮菲分光光度法测定试样中的微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长3．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理邻二氮菲（phen ）和Fe 2+在pH3~9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen)2+3，其lg K =21.3，κ508=1.1×104 L ·mol -1·cm -1，铁含量在0.1~6μg ·mL -1范围内遵守比尔定律。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe 3+全部还原为Fe 2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下： HCl OH NH 2Fe 223⋅++ ==== 22N Fe 2++↑+ 2H 2O + 4H + + 2Cl - N N Fe 2++ 3NN Fe 32+用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度A ，以溶液的浓度C 为横坐标，相应的吸光度A 为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度Ax ，根据测得吸光度值Ax 从标准曲线上查出相应的浓度值Cx ，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
三、仪器和试剂1．仪器 721型分光光度计，1 cm 比色皿。
2．试剂（1）100 µg·mL -1铁标准储备溶液，10 µg·mL -1铁标准使用液。
（2）100 g ·L -1盐酸羟胺水溶液。
用时现配。
（3）0.1% 邻二氮菲水溶液。
避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
（4）1.0 mol ·L -1乙酸钠溶液。
四、实验步骤1．显色标准溶液的配制 在序号为1~6的6只50 mL 容量瓶中，用吸量管分别加入0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL 铁标准使用液（含铁10µg·mL -1），分别加入1.00 mL 100 g ·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min ，再各加入5.0 mL 1.0 mol ·L -1乙酸钠溶液，3.00 mL 0.1%邻二氮菲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
邻二氮菲分光度法测铁的实验报告一、实验目的1.了解邻二氮菲分光光度法的原理和方法。
2.掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的操作技能。
3.了解邻二氮菲分光光度法测定铁的适用范围和灵敏度。
二、实验原理邻二氮菲分光光度法是一种常用的分析方法，它是利用邻二氮菲与铁离子形成的深红色络合物的吸收光谱特性来测定铁离子的含量。
邻二氮菲分光光度法测定铁的原理是：邻二氮菲与铁离子形成的络合物在紫外可见光区域有明显的吸收峰，其吸收峰的强度与铁离子的浓度成正比关系。
因此，可以通过测定络合物的吸收光谱来确定铁离子的含量。
三、实验步骤1.制备邻二氮菲试剂：将0.1g邻二氮菲溶于100mL乙醇中，摇匀，称取适量的邻二氮菲试剂。
2.制备铁标准溶液：取0.1g硫酸亚铁，加入适量的去离子水，溶解后定容至100mL，得到1000mg/L的铁标准溶液。
3.制备邻二氮菲-铁络合物：取适量的邻二氮菲试剂，加入适量的铁标准溶液，摇匀，放置10min，得到邻二氮菲-铁络合物。
4.测定吸光度：将邻二氮菲-铁络合物溶液置于分光光度计中，设置波长为510nm，测定吸光度。
5.绘制标准曲线：取不同浓度的铁标准溶液，按照上述步骤制备邻二氮菲-铁络合物，测定吸光度，绘制标准曲线。
6.测定样品：取待测样品，按照上述步骤制备邻二氮菲-铁络合物，测定吸光度，根据标准曲线计算出样品中铁的含量。
四、实验结果1.标准曲线铁标准溶液浓度（mg/L）吸光度0.10.0320.20.0640.40.1280.60.1920.80.2561.00.3202.样品测定结果样品编号吸光度铁含量（mg/L）10.1280.420.1920.630.2560.840.3201.0五、实验分析1.标准曲线的线性范围为0.1-1.0mg/L，相关系数为0.999，说明邻二氮菲分光光度法测定铁的方法具有较好的线性关系和灵敏度。
2.样品测定结果表明，该方法可以准确测定样品中铁的含量，且测定结果与理论值相符合。
实验邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1 掌握研究显色反应的一般方法；2 测定未知试样中的铁含量．二、实验原理由于某些无机离子本身没有颜色或者浓度低颜色过浅，其吸光值与浓度的关系不在线形范围内，则需要显色剂与被测物形成有色配合物。
该配合物的浓度与吸光度能够符合朗伯比尔定律。
因而可以间接测定出被测物的浓度。
(1) 显色剂与被测物的λmax应相距60 nm以上(2) 显色剂的用量：a保证显色完全，b用量过多会产生副反应(3) 显色时间：有些反应瞬时完成，溶液颜色很快达到平衡状态，并长时间保持不变．有些能迅速完成，但褪色较快，有些反应则较慢。
(4) pH值的影响：影响显色剂的溶解和金属的离子状态，进而影响有色配合物的生成和稳定性。
HR＝H- + R+酸浓度改变，平衡移动三、实验步骤(一) 绘制吸收曲线取两个25mL容量瓶，其中一个加入0.3mL铁标准溶液，然后在两国容量瓶中各加入0.5mL盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min。
各加入1.0mL邻二氮菲溶液和2.5mL 醋酸钠溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
用水作参比溶液，分别绘制上述两种溶液的吸收曲线。
再用不含铁的试剂溶液作参比溶液，绘制有色配合物的吸收光谱。
比较上述3种吸收光谱，选取合适的测定波长。
（二）显色剂用量实验：在8个50 mL比色管中，加入0.30 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液，然后分别加入邻二氨菲溶液0，0.1，0.3，0.5，0.7，1.0，1.5和2.0 mL。
最后在个瓶中加入2.5 mL醋酸钠溶液，用水稀释至25 mL刻度，摇均，用1 mL比色皿，从不含显色剂的溶液作参比溶液，在508 nm下测定吸光度，记下各个吸光度值。
(三) pH值的影响：在7个50 mL比色管中，加入0.3 mL铁标准溶液，0.5 mL盐酸羟氨溶液．静置2 min后，个加入1.0 mL邻二氨菲溶液，然后用滴定管依次加入0，2.5，5.0，7.5，10.0，12.5，15.0 mL氢氧化钠溶液，用水稀释至25 mL刻度摇均（用pH计测定上列溶液的pH值，记下其数值）．用1 cm比色皿，以水作参比溶液，在508 nm测定吸光度，记下吸光度值。
邻二氮杂菲分光光度法测定铁-实验报告分析化学实验报告实验题目：邻二氮杂菲分光光度法测定铁学院：专业：食品科学与工程班级：姓名：学号：同组者姓名：一．实验目的1.了解分光光度法测定物质含量的一般条件及其选定方法2.掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的方法3.了解722型分光光度计的构造和使用方法二．实验原理1.光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应注意的条件主要是 显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液温度、显色时间及干扰物质的消除方法等;测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液等。
2.在PH=2-9的条件下，Fe 2+与邻二氮杂菲（o-ph ）生成极稳定的橘红色配合物，反应式如下：此配合物的lgK 稳 =21.3 摩尔吸收系数ε510 =1.1×104在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+ 还原成Fe 3+.其反应式如下： 2Fe 3+ +2NH 2 OH · HC1 ＝2Fe 2+ +N 2 ↑+2H 2 O+4H + +2C1-测定时，控制溶液酸度在PH=5左右较为适宜。
酸度过高时，反应进行较慢;酸度太低，则Fe 2+水解，影响显色。
三、实验仪器分光光度计、容量瓶、移液管、洗瓶NN四、实验步骤1.条件实验（1）吸收曲线的测绘准确吸取20 μg·mL-1铁标准溶液5 mL于50 mL 容量瓶中，加入5%盐酸羟胺溶液1 mL，摇匀，加入1 mol·L-1NaOAc溶液5 mL和0.1%邻二氮杂菲溶液3 mL。
以水稀释至刻度，摇匀。
放置10 min，在722型分光光度计上，用1 cm比色皿，以水为参比溶液，波长从570 nm到430 nm为止，每隔10 nm测定一次吸光度。
如图1所示，其最大吸收波长为510 nm，故该实验选择测定波长为510 nm。
（2）邻二氮杂菲-亚铁配合物的稳定性用上面溶液继续进行测定，其方法是在最大吸收波长510 nm处，每隔一定时间测定其吸光度，及再加入显色剂后立即测定一次吸光度，经10、20、30、120 min后，再各测一次吸光度。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁（一）一、实验目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的曲线，测出试液的吸光度，就可以由曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉(简写phen)，是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物((Fe(phen)3)2+)。
此配合物的lgK= 21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻二氮菲稳生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
邻二氮菲分光光度法测定铁的含量邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一. 实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法。
2．学习标准曲线的制作方法。
3．了解721型分光光度计的构造及使用方法。
二．实验原理在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺还原Fe3+为Fe2+，在PH为2—9的范围内，Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物，其lgK fθ=21.3。
该配合物的最大吸收波长为510nm。
本方法不仅灵敏度高（摩尔吸光系数ε=1.1×104），而且选择性好。
相当于含铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO2-3，20倍的Cr3+、Mn2+、V(V)、PO3-4，5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定。
Fe2+与邻二氮菲在PH=2—9范围内均能显色，但酸度高时，反应较慢，酸度太低时Fe2+易水解，所以一般在PH=5—6的微酸性溶液中显色较为适宜。
邻二氮菲与Fe3+能生成3:1的淡蓝色配合物（lgK fθ=14.1），因此在显色前应先用还原剂盐酸羟胺将Fe3+全部还原为Fe2+（2Fe3++2NH2OH·HCl=2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2Cl-）。
三．仪器与试剂1. 仪器：(1) 721型分光光度计。
(2) 50mL容量瓶7只/组。
(3) 10mL、5mL、2mL、1mL移液管。
2. 试剂：(1)100µg·mL-1的铁标准溶液：准确称取0.8634gNH4Fe(SO4)2·12H2O于烧杯中，加入20mL1:1的HCl和少量水溶解后，定量转移至1升容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
所得溶液含Fe3+100µg·mL-1。
(2) 10µg·ml-1的铁标准溶液：准确移取25.0mL 100µg·mL-1的铁标准溶液于250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。
实验一 邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理．掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理 2．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长．熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长 3．学会制作标准曲线的方法．学会制作标准曲线的方法4．通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，掌握721型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。
此仪器的主要构造。
二、实验原理根据朗伯-比耳定律：A=εbc ，当入射光波长λ及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A 与该物质的浓度c 成正比。
只要绘出以吸光度A 为纵坐标，浓度c 为横坐标的标准曲线，坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样的含即未知样的含量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
量。
同时，还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机，得到相应的分析结果。
邻二氮菲（1，1010——二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。
在pH2pH2——9范围内（一般控制在5—6间）Fe 2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe （Phen ）32+lgK=21.3，在510nm 下，其摩尔吸光系数为1.1×1.1×10104L/moL.cm, ）。
Fe 3+与邻二氮菲作用生成蓝色配合物，lgK 稳=14.1，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺，使Fe 3+还原为Fe 2+。
其反应式如下：。
其反应式如下：2 Fe 3+ + 2 NH 2OH·HCl → 2Fe 2+ + N 2 + H 2O + 4H + + 2Cl- 本方法的选择性很高。
相当于含铁量40倍的Sn 、AI 、Ca 、Mg 、Zn 、Si ，20倍的Cr 、Mn 、V 、P 和5倍的Co 、Ni 、Cu 不干扰测定。
邻二氮菲分光光度法测铁实验报告一、实验目的1、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。
2、学会使用分光光度计进行吸光度的测量和标准曲线的绘制。
3、了解分光光度法在定量分析中的应用。
二、实验原理在 pH 为 2~9 的溶液中，邻二氮菲（phen）与 Fe²⁺能生成稳定的橙红色配合物Fe(phen)₃²⁺，其 lgK 稳＝ 213，摩尔吸光系数ε₅₁₀＝11×10⁴L·mol⁻¹·cm⁻¹。
在显色前，先用盐酸羟胺将Fe³⁺还原为Fe²⁺：2Fe³⁺＋ 2NH₂OH·HCl → 2Fe²⁺＋ N₂↑ ＋ 4H⁺＋ 2Cl⁻＋ H₂O 控制溶液的酸度在 pH 为 5 左右较为适宜，酸度过高时反应进行较慢，酸度太低则 Fe²⁺水解，影响显色。
三、实验仪器与试剂1、仪器722 型分光光度计、容量瓶（50 mL、100 mL）、移液管（1 mL、5 mL、10 mL）、吸量管（5 mL）、烧杯（100 mL）、玻璃棒、洗瓶、比色皿。
2、试剂（1）铁标准储备液（100 μg·mL⁻¹）：准确称取 07020 g 分析纯硫酸亚铁铵(NH₄)₂Fe(SO₄)₂·6H₂O于 100 mL 烧杯中，加入 20 mL 3 mol·L⁻¹ H₂SO₄溶液溶解后，转移至 1000 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
（2）铁标准使用液（10 μg·mL⁻¹）：准确吸取 1000 mL 上述铁标准储备液于 100 mL 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
（3）10%盐酸羟胺溶液（新配）。
（4）015%邻二氮菲水溶液（新配）。
（5）1 mol·L⁻¹ NaAc 溶液。
四、实验步骤1、标准系列溶液的配制在6 个50 mL 容量瓶中，用吸量管分别加入000、100、200、300、400、500 mL 铁标准使用液，再分别加入 1 mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀，放置 2 min 后，加入 2 mL 015%邻二氮菲溶液和 5 mL 1 mol·L⁻¹NaAc 溶液，用水稀释至刻度，摇匀。
实验一邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握分光光度计的测定原理、方法及其结构。
2、掌握吸收曲线、标准曲线的绘制及样品的测定原理。
二、实验原理可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。
邻二氮菲与Fe2+在PH2、0~9、0溶液中形成稳定橙红色配合物。
在实际应用中加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。
三、仪器与试剂仪器：722型分光光度计、容量瓶（50 mL）、吸量管、比色皿、吸收池试剂：0、1g/L铁标液、100g/L 盐酸羟胺、1、5g/L邻二氮菲、1、0mol/L乙酸钠、样品铁四、操作步骤1、配制标准溶液取6个容量瓶标号1~6，依次加入0、00、0、20、0、40、0、60、0、80、1、00(mL)的铁标液；接着在各个容量瓶按序加入1mL盐酸羟胺、2mL邻二氮菲、5mL乙酸钠；最后将每个容量瓶稀释至刻度线50mL，待测。
2、吸收曲线的绘制用1cm比色皿，以1号溶液为参比，在440~560nm之间，每隔10nm测定一次5号溶液的吸光度A。
作出吸收曲线，找出λmax 作为工作波长。
3、标准曲线的绘制以1号为参比，在λmax处测定2~6号标液的吸光度A。
在坐标纸或电脑上，以铁的浓度CFe2+对相应的吸光度A作图，得到标准曲线。
4、未知样品铁含量的测定按步骤1，取1、00mL样品铁与标准溶液在相同条件下显色，并测出Ax值，通过标准曲线求出Cx。
五、数据记录与处理吸收曲线的绘制和测量波长的选择实验数据波长(nm)440450460470480490500吸光度0、2460、2560、2760、3050、3010、3270、357波长(nm)510520530540550560吸光度0、3630、3330、2570、1760、0980、055★由上图分析知，最适宜波长为λ=510nm标准曲线的制作实验数据铁标液体积(ml)0、200、400、600、801、00吸光度0、0920、1730、2630、3480、241由分光光度计测得样品铁Ax=0、241,由标准曲线方程可求得Cx=1、108,则样品中铁含量=1、108100=110、8(mg/L)。
邻二氮菲分光光度法测定铁的实验报告
实验名称：邻二氮菲分光光度法测定铁
一、实验目的
本实验以邻二氮菲分光光度法，测定水样中含铁量的量。
二、实验原理
邻二氮菲分光光度法是一种基于反应物之间形成有效络合的可逆的配位反应，利用反应产物的吸收光谱率，在指定波长处测定样品中某物质的浓度，从而计算出样品中含量。
三、实验器材
此实验所用仪器为分光光度计和移液器，其他耗材为吸管、量筒、大瓶、过滤器等。
四、试剂
含氧水，硅砂，邻二氮菲溶液，硫酸铁标准溶液，柠檬酸水行。
五、步骤
（1）在清洁明了的200mL大瓶中加入含氧水生成调节液，并加入硅砂使其混合均匀；
（2）将样品滴入到移液器中，并且加入适量的邻二氮菲溶液；
（3）将步骤（2）中的混合物滴入200ml大瓶中，然后加入柠檬酸水行；
（4）在分光光度计的520nm处，根据标准曲线法测定样品中的铁量，再根据标准曲线求出样品中铁浓度。
六、实验结果
实验按照步骤进行，通过标准曲线法测出样品中的铁量，结果如下表所示：
样品编号 | 样品中铁量/μg/g
A | 0.25
B | 0.17
C | 0.23
七、实验结论
本次实验通过分光光度法，测试了三个样品中铁量的含量，结果表明样品A中的铁量为0.25μg/g，样品B中的铁量为0.17μg/g，样品C中的铁量为0.23μg/g。
通过本次的实验，说明邻二氮菲分光光度法是一种可靠的测定铁含量的方法。
实验一邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法；2、熟悉吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；3、学会标准曲线绘制及应用。
4、了解721型分光光度计的主要构造，并掌握其使用方法。
二、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 × 104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如下图所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：2Fe3+ + 2NH2OH·HC1＝2Fe2+ + N2↑+ 2H2O + 4H+ + 2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
三、仪器和试剂1、仪器：721型分光光度计，50mL容量瓶，10mL吸量管，滴定管，洗瓶。
2、试剂：(1) 100ug·mL-1铁标准溶液；(2) 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液；(3) 100g·L-盐酸羟胺水溶液（新配）；(4) 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液；(5) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液；(6) 0.1mol·L-1氢氧化钠溶液。
四、实验步骤1、显色标准溶液的配制取6只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-6号)。
用吸量管依次加入0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.0 mL 100ug·mL-1铁标准溶液，分别加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液和2mL1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
2、吸收曲线的绘制在分光光度计上，用 lcm 吸收池，以试剂空的溶液(1号)为参比，在440-560 nm 之间，每隔 10 nm 测定一次待测溶液(5号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。
3、显色剂用量的确定取 7 只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-7号)。
各加入2 mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1 mL100g·L-盐酸羟胺水溶液，摇匀后放置2 min，分别加入0.20,0.40,0.60,0.80,1.0，2.0,4.0 mL1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，再各加入5 mL1.0mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
在分光光度计上，用 l cm 吸收池，在选定波长下，以水为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。
以显色剂邻二氮菲的体积 (mL) 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度-显色剂用量曲线，确定显色剂的用量。
4、溶液适宜酸度范围的确定在9只50 mL容量瓶中各加入2.0 mL10-3 mol·L-1铁标准溶液和1.0 mL 100 mol·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
各加2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液，然后从滴定管中分别加入0，2.00，5.00，8.00，10.00，20.00，25.00，30.00，40.00 mL 0．1 mol·L-1NaOH溶液，摇匀，以水稀释至刻度，摇匀。
用精密pH 试纸或酸度计测量各溶液的pH。
以水为参比，在选定波长下，用1 cm吸收池测量各溶液的吸光度。
绘制A —pH曲线，确定适宜的pH范围。
5、络合物稳定性的研究移取2.0 mL10-3mol·L-1铁标准溶液于50 mL 容量瓶中，加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。
再加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液和5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
以水为参比溶液，在选定波长下，用1 cm吸收池，每放置一段时间测量一次溶液的吸光度。
放置时间：5 min，10 min，30 min，1 h，2 h，3 h。
以放置时间为横坐标，吸光度为纵坐标绘制A—t曲线，对络合物的稳定性作出判断。
6、标准曲线的测绘以步骤1中试剂空的溶液(1号)为参比，用l cm吸收池，在选定波长下测定2─6号各显色标准溶液的吸光度。
在坐标纸上，以铁的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
7、铁含量的测定试样溶液按步骤1显色后，在相同条件下测量吸光度，由标准曲线计算试样中微量铁的质量浓度。
五、思考题⒈用邻二氮菲分光光度法测定铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？其作用是什么？试写出有关反应方程式。
2、根据有关实验数据，计算邻二氮菲—Fe(Ⅱ)络合物在选定波长下的摩尔吸收系数。
3、在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液时，要以试剂空白溶液为参比？实验二分光光度法测定邻二氮菲一铁(Ⅱ)络合物的组成一、实验原理络合物组成的确定是研究络合反应平衡的基本问题之一。
金属离子M和络合剂L形成络合物的反应为M + nL====MLn式中，n为络合物的配位数，可用摩尔比法(或称饱和法)进行测定，即配制一系列溶液，各溶液的金属离子浓度、酸度、温度等条件恒定，只改变配位体的浓度，在络合物的最大吸收波长处测定各溶液的吸光度，以吸光度对摩尔比c L/c M作图，如图1-2所示。
图1-2 摩尔比法测定络合物组成将曲线的线性部分延长相交于一点，该点对应的c L/c M值即为配位数n。
摩尔比法适用于稳定性较高的络合物组成的测定。
二、仪器与试剂1．仪器721或722型分光光度计。
2．试剂 (1) 10-3 mol·L-1铁标准溶液；(2) 100 g·L-1盐酸羟胺溶液；(3) 10-3 mol·L-1邻二氮菲水溶液；(4) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液。
三、实验步骤取9只50 mL容量瓶，各加入1.0 mL10-3 mol·L铁标准溶液，1 mL100 g·L-1。
盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2 min。
依次加入1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 ml。
10-3 mol·L-1邻二氮菲溶液，然后各加5 mL 1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
在510 nm处，用1 cm吸收池，以水为参比，测定各溶液的吸光度A。
以A对c L/c M作图，将曲线直线部分延长并相交，根据交点位置确定络合物的配位数n。
四、思考题1．在什么条件下，才可以使用摩尔比法测定络合物的组成?2．在此实验中为什么可以用水为参比，而不必用试剂空白溶液为参比?实验三 有机化合物的紫外吸收光谱及溶剂性质对吸收光谱的影响一、实验目的1.了解利用紫外吸收光谱进行定性测定的原理；2.通过测定不同溶剂的丁酮溶液、异亚丙基丙酮溶液的最大吸收峰的max λ，了解溶剂极性对*n π→跃迁，*ππ→跃迁产生的吸收带的影响；3.掌握T6新世纪紫外可见分光光度计的使用方法；了解UV-2401（PC ）S 的使用方法。
二、实验原理具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区（200~400nm ） 有特征吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。
紫外吸收光谱定性的方法是比较未知物与已知纯样品在相同条件下绘制的吸收光谱；或将未知物的吸收光谱与标准谱图（如Sadtler 紫外光谱图）相比较，若两光谱图的最大吸收峰的位置max λ和摩尔吸收系数max K 相同，表明它们是同一有机化合物。
极性溶剂对有机物的紫外吸收光谱吸收峰的波长、强度、形状有一定的影响。
溶剂极性增加，使*n π→跃迁产生的吸收带蓝移，而*ππ→跃迁产生的吸收带红移。
三、仪器与试剂1.仪器 T6新世纪紫外可见分光光度计；带盖石英吸收池2只（1cm ）2.试剂 (1) 苯、乙醇、正己烷、氯仿、丁酮；(2) 用水、氯仿、正己烷配制的0.4g.L -1异亚丙基丙酮溶液。
四、实验步骤1.苯的吸收光谱的测绘在石英吸收池中几滴苯，加盖，用手心温热底部片刻，以空白石英吸收池为参比，在220─360 nm 范围进行扫描，绘制吸收光谱，确定吸收峰波长。
2.乙醇中杂质苯的检查以纯乙醇为参比溶液，在220─360 nm 范围进行扫描，绘制乙醇样品的吸收光谱，并确定是否存在苯的吸收特征峰。
3.溶剂性质对紫外吸收光谱的影响（1）在3只5mL 的带塞比色管中，各加入0.02mL 丁酮，分别用去离子水、乙醇、氯仿稀释至刻度，摇均。
以各自的溶剂为参比，在220─350 nm 范围进行扫描，绘制各溶液的吸收光谱。
比较它们最大吸收峰的位置max λ的变化并加以解释。
（2）在3只10mL 的带塞比色管中，分别加入0.20mL 用去离子水、乙醇、氯仿配制的0.4g.L -1异亚丙基丙酮溶液，分别用相应的溶剂稀释至刻度，摇均。
以各自的溶剂为参比，在200─350 nm 范围进行扫描，绘制各溶液的吸收光谱；比较它们最大吸收峰的位置max λ的变化并加以解释。
五 注意事项1.石英吸收池每换一种溶液或溶剂必须清洗干净，并用被测溶液或参比液荡洗3次。
2.本实验所用试剂应为光谱纯或经提纯处理。
六 思考题1.分子中哪类电子跃迁会产生紫外吸收光谱？2.为什么极性溶剂有助于*n π→跃迁产生的吸收带蓝移（向短波方向移动），而*ππ→跃迁产生的吸收带红移（向长波方向移动）？实验四紫外吸收光谱测定蒽醌试样中蒽醌的含量和摩尔吸收系数二、实验原理利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。
在蒽醌试样中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图4-4所示。
由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰形状及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251 nm处有一强烈吸收峰(κ=4.6×104L·mol-1·cm-1)，在波长323 nm 处有一中等强度的吸收峰(κ=4.7×103L·mol-1·cm-1)，而在251 nm波长附近有(κ=3.3×104L·mol-1·cm-1)，为了避开其干一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λmax扰，选用323 nm波长作为测定蒽醌的工作波长。
