微生物学第三章消毒与灭菌

微生物的消毒和灭菌技术一、微生物消毒和灭菌的概念消毒:是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。

通常用化学的方法来达到消毒的作用。

用于用于消毒的化学药物叫做消毒剂。

灭菌:是指把物体上所有的微生物(包括细菌芽孢在内全部杀死的方法, 通常用物理方法来达到灭菌的目的。

灭菌方法分为物理灭菌法和化学灭菌法。

防腐:是指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。

用于防腐的化学药物叫做防腐剂。

无菌:不含活菌的意思,是灭菌的结果。

防止微生物进入机体或物体的操作技术称为无菌操作二、微生物的消毒方法常用的消毒方法有物理法和化学法。

物理法就是用物理方法杀灭或清除病原微生物和其他有害生物,主要有热消毒法、紫外线消毒法、电离辐射法、微波法等。

最常用的物理消毒方法是热消毒法和紫外线消毒法。

热消毒法(煮沸法 :是最简单有效的消毒方法,不需要特殊设备即可进行。

杀灭繁殖型细菌与病毒效果好, 对芽胞作用较小。

煮沸时间一般为 10~30分钟。

金属器械、棉织品、食具、玻璃制品等可用煮沸消毒。

但毛皮、呢绒和塑料制品等不能煮沸消毒。

热消毒法不适用于芽胞污染的消毒紫外线消毒法就是利用紫外线照射使微生物诱变致死, 达到将被服中的有害微生物除掉的目的。

消毒用紫外线灯管有 15W 、 20W 、 30W 等规则。

瓦数代表灯管在 25~40℃时紫外线输出能量。

灯管寿命一般为 3000~4000小时, 超过此时限效果不可靠。

紫外线对一般细菌、病毒均有杀灭作用。

革兰阴性菌最敏感, 其次为革兰阳生菌。

但结核杆菌却有较强抵抗力。

一般紫外线消毒对细菌芽胞无效。

紫外线广泛用于室内空气消毒, 如手术室、烧伤病房、传染病房、实验室等。

灯管距地面约 2.0~2.5m 高。

每 10~15cm 2面积可设 30W 灯管一个,最好每照射 2小时后,间歇 1小时后再照,以免臭氧浓度过高。

灯管用铝制灯罩作反向或侧向照射,可用于有人在的条件下消毒空气。

对污染表面消毒时, 灯管距表面不超过 1m , 灯管周围 1.5~2cm 处为消毒有效范围。

《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握：（1）消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。

（2）消毒灭菌的运用（3）病原微生物实验室的分级2.熟悉：常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用；常用的化学消毒剂的种类及其应用。

实验室感染的控制以及监督和法律责任。

3.了解：热力灭菌法的种类和应用范围；常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。

【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌（一）热力灭菌法（二）辐射杀菌法（三）滤过除菌法（四）超声波消毒法（五）干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法（一）化学消毒灭菌法的原理（二）消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1．防腐2．高压蒸气灭菌法3．灭菌4．无菌5．消毒6．抑菌7．巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1．化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。

2．高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg／C㎡，温度达_______℃，维持时间是_______min。

3．紫外线杀菌力最强的波长为_______，常用于无菌室的_______消毒。

4．预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。

5．消毒手术包常采用的方法是______________________，其温度达到______________，维持时间是_____________________，可去除细菌及___________________。

消毒与灭菌知识点总结一、概念与分类消毒与灭菌是指利用化学、物理或其他方法杀灭或去除细菌、病毒、真菌、寄生虫等病原微生物的过程。

消毒主要针对可见的病原微生物，而灭菌则包括对细菌、病毒、真菌等更小的微生物。

根据不同的消毒、灭菌目的以及方法，消毒与灭菌可以分为多种类型，主要包括物理消毒、化学消毒、生物消毒等。

二、消毒与灭菌的方法1. 物理消毒物理消毒方法主要包括高温消毒、辐射消毒和过滤消毒。

高温消毒通过加热杀灭微生物，可以使用湿热、干热和高温气体消毒。

辐射消毒则是利用紫外线、X射线和γ射线等辐射杀灭细菌病毒。

过滤消毒则是通过对空气和水进行过滤来去除微生物。

2. 化学消毒化学消毒方法主要包括气体消毒、液体消毒和固体消毒。

其中气体消毒主要通过使用氯气、乙烯氧化物和过氧乙酸等气体来灭菌。

液体消毒则是利用酒精、碘伏、高锰酸钾等液体来进行消毒。

固体消毒则是通过使用过氧化物、次氯酸钠和双氧水等固体材料来消毒。

3. 生物消毒生物消毒是指利用生物学方法来消灭微生物，主要包括利用细菌、酵母菌和真菌等微生物来进行消毒。

三、选择合适的消毒与灭菌方法在实际生产、生活和医疗过程中，选择合适的消毒与灭菌方法是非常重要的。

根据不同的场合和要求，需要选择适合的消毒与灭菌方法。

比如，在医疗器械消毒和医疗场所消毒中，常用的方法包括高压蒸汽灭菌、乙烯氧化物消毒和紫外线消毒等。

在食品加工和餐饮场所，常用的方法包括高温杀菌、过氧化氢消毒和次氯酸钠消毒等。

四、消毒与灭菌的注意事项在进行消毒与灭菌时，需要注意以下几点：1. 选择合适的消毒与灭菌方法，根据不同的场合和要求进行选择；2. 控制消毒与灭菌的时间与温度，确保杀灭微生物的效果；3. 根据需要对消毒与灭菌的效果进行监测和验证；4. 严格执行消毒与灭菌操作规程，确保操作的安全与卫生；5. 对消毒与灭菌后的物品进行储存与封存，以免再次被污染。

五、消毒与灭菌的重要性消毒与灭菌在现代社会中扮演着非常重要的角色，它关系到人们的生活健康和生产安全。

第三章消毒与灭菌第一节物理因素对微生物的影响第二节化学因素对微生物的影响第三节生物因素对微生物的影响1、灭菌（sterilization）指杀死物体中所有微生物的过程。

经灭菌后物体内外不含有任何活的微生物及其细菌的芽胞、霉菌孢子等。

2、消毒（disinfection）指杀灭物体中的病原微生物的过程。

消毒只要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其细菌的芽胞、霉菌孢子等不做要求。

3、防腐（antisepsis）指阻止或抑制微生物生长繁殖。

4、无菌（asepsis）指没有活的微生物的状态。

采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其它物体的方法，称为无菌法。

以无菌法进行的操作称为无菌操作。

无菌操作（如下图）第一节物理因素对微生物的影响一、温度(一)低温大多数微生物对低温具有很强的抵抗力。

低温下，代谢活动降低到最低水平，生长繁殖停止，但仍可长时间保持活力。

意义：保存菌种、毒种、疫苗等(二)高温：高温对微生物具有明显的致死作用热力灭菌法：干热灭菌和湿热灭菌两种方法。

二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。

原因：（1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固，蛋白质的含水量与凝固所需的温度成反比；（2）湿热的穿透力比干热强；（3）湿热的蒸汽遇物体放出潜热进一步提高物体的温度。

1、干热灭菌法(1)火焰灭菌法: 分为灼烧和焚烧两种，灼烧主要用于耐烧物品，直接在火焰上烧灼，如接种针（环）、金属器具、试管口等的灭菌；焚烧常用于烧毁的物品，直接点燃或在焚烧炉内焚烧，如传染病畜禽及实验感染动物的尸体、病畜禽的垫料以其他污染的废弃物等的灭菌(2)热空气灭菌法干热灭菌器适用于高温下不损坏、不变质的物品，如玻璃器皿、瓷器等的灭菌。

灭菌温度需160-170℃维持1.5-2 h 。

2、湿热灭菌法(1)煮沸消毒法:煮沸10～20 min可杀死所有细菌的繁殖体，芽胞常需煮沸1～2 h 才被杀死。

用于饮水、一般手术器械如刀剪、注射器、针头的消毒。

实验三消毒与灭菌一、实验目的：掌握微生物消毒与灭菌的方法二、实验原理灭菌是用物理或化学的方法来杀死或除去物品上或环境中的所有微生物。

消毒是用物理或化学的方法杀死物体上绝大部分微生物(主要是病原微生物和有害微生物)。

消毒实际上是部分灭菌。

灭菌原理：高压蒸汽灭菌是将待灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内，通过加热，使灭菌锅隔套间的水沸腾而产生蒸汽。

待水蒸汽急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽，然后关闭排气阀，继续加热，此时由于蒸汽不能溢出，而增加了灭菌器内的压力，从而使沸点增高，得到高于100℃的温度。

导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

适用于一般培养基、玻璃器皿、无菌水、金属用具。

一般培养基在121．3℃灭菌20分钟即可。

干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。

细胞内的蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，当环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快，反之含水量越小，凝固缓慢。

因此，与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度高（160—170℃），时间长（1—2小时）。

但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烤焦，甚至引起燃烧，因而一般塑料制品不能用干热灭菌。

三、实验仪器高压蒸汽灭菌锅、电热烘箱、四、实验内容消毒与灭菌的方法很多，一般可分为加热、过滤、照射和使用化学药品等方法。

（一）加热法加热法又分干热灭菌和湿热灭菌两类。

1.干热灭菌有火焰烧灼灭菌和热空气灭菌两种。

火焰烧灼灭菌适用于接种环、接种针和金属用具如镊子等，无菌操作时的试管口和瓶口也在火焰上作短暂烧灼灭菌。

通常所说的干热灭菌是在电烘箱内灭菌，此法适用于玻璃器皿如吸管和培养皿等的灭菌，在热空气160℃-170℃下保温2小时进行灭菌。

2.湿热灭菌（1）高压蒸汽灭菌法此法是将物品放在高压蒸汽灭菌锅内1.05kg／cm2(15磅/英寸2)，121.3℃保持15-30分钟进行灭菌。

时间的长短可根据灭菌物品种类和数量的不同而有所变化、以达到彻底灭菌为准。