脑损伤对大鼠脑组织GDNF表达的影响

第３７卷第２期第２２５页　２００８年４月　华中科技大学学报（医学版）　Ａｃｔａ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ　Ｓｃｉ　Ｔｅｃｈｎｏｌ　Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ｖ０Ｉ．３７　Ｎｏ．２　Ｐ．２２５　Ａｐｒ．　２００８　

新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡　

与神经营养因子ＧＤＮＦ的表达变化　

覃　琳　熊　英△　阳　倩　卓平辉　

四川Ｉ大学华西第二医院新生儿科，成都６１００４１　

摘要　目的探讨新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡与内源性胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）表达的　

变化。方法实验组和对照组各４５只大鼠分别于缺氧缺血后３０　ｍｉｎ、１　ｈ、４　ｈ、１２　ｈ、１　ｄ、３　ｄ、７　ｄ、１４　ｄ及２１　ｄ处死，免疫　组化（ｓＰ）法检测ＧＤＮＦ，ＴＵＮＥＬ法测定细胞凋亡。结果新生大鼠脑白质损害时，细胞凋亡在缺氧缺血后３　ｄ达到高　

峰，与对照组比较，在４　ｈ、１２　ｈ、１　ｄ、３　ｄ、７　ｄ均有统计学意义（均Ｐ＜０．０５）。实验组ＧＤＮＦ表达在缺氧缺血后７　ｄ达到　

高峰，与对照组相比，在３、７、１４　ｄ有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论新生大鼠脑白质损害时，ＧＤＮＦ于细胞凋亡的高峰　

时间开始表达，与此同时，细胞凋亡逐渐减少。表明在缺氧缺血所致的新生大鼠脑白质损害时，内源性ＧＤＮＦ的表达升　

高可能通过抑制细胞凋亡来发挥保护作用，并对后期的神经修复起一定作用。　

关键词脑白质损害；脑室周围白质软化；　神经营养因子；　细胞凋亡　中图法分类号Ｒ７２２．６　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＧＤＮＦ　Ｐｒｏｔｅｉｎ　ａｎｄ　ａｐｏｐｔｏｓｉｓ　ｏｆ　ｎｅｕｒｏｇｌｉａｌ　

Ｃｅｌｌｓ　ｉｎ　Ｎｅｏｎａｔａｌ　Ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　Ｗｈｉｔｅ　Ｍａｔｔｅｒ　Ｄａｍａｇｅ　

Ｑｉｎ　Ｌｉｎ，Ｘｉｏｎｇ　Ｙｉｎｇ△，Ｙａｎｇ　Ｑｉａｎ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　６１００４１　

・　ｌ３８　・　四川医学２００７年２月第２８卷（第２期）ＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａ１．２Ｏ０７．Ｖｏ１．２８，Ｎｏ．２　

缺氧缺血大鼠脑组织ＧＬＵＴ．１表达及地塞米松对其表达的影响　

钟琳，熊　英　，姚裕家　

（四川大学华西第二医院儿科，四川成都６１００４１）　

【摘要】　目的观察葡萄糖转运蛋白１（ＧＬＵＴ－１）在缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）大鼠脑组织的表达，了解地塞米松对　

ＧＬＵＴ－１表达的影响。方法７日龄新生ｓＤ大鼠，分为对照组、缺氧缺血组、地塞米松给药组０．５ｒａｇ／（ｋｇ・ｄ），于ＨＩＢＤ模型　

制成后０，６，１２，２４ｈ及７２ｈ处死，取脑组织作免疫组化图像分析，观察各组ＧＬＵＴ－１蛋白水平的变化。结果ＨＩＢＤ大鼠脑　

内ＧＬＵＴ－１表达较对照组增高，２４ｈ达高峰（Ｐ＜０．０５）；地塞米松给药组ＧＬＵＴ－１蛋白水平６ｈ即达高峰，在７２ｈ内维持在较　ＨＩＢＤ组更高的水平（Ｐ＜０．０５）。结论ＨＩＢＤ大鼠脑ＧＬＵＴ－１蛋白表达增加；地塞米松可迅速提高ＧＬＵＴ－１蛋白水平并使　

其维持在较ＨＩＢＤ组更高的水平。在ＨＩＢＤ后早期给予适当剂量的地塞米松可能具有脑保护作用。　

【关键词】缺氧缺血；脑损伤；新生大鼠；地塞米松；葡萄糖转运蛋白　

【中图分类号】　Ｒ　７２２　【文献标识码】　Ａ　【文章编号】　１００４．０５０１（２００７）０２．０１３８．０３　

Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｄｅｘａｍｅｔｌｍｓｏｎｅ　Ｏｌｌ　ＧＬＵＴ－１　ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ　ｕｎｉｌａｔｅｒａｌ　ｈｙｐｏｘｉａ－ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｏｆ　ｒａｔ　ｂｒａｉｎ．Ｚｈｏｎｇ　Ｌｉｎ－Ｘｉｏｎｇ　Ｙｉｎｇ－Ｙａｈ　ｙｕ一　

．Ｗｅｓｔ　Ｃｈｉｎａ　ＳｅｃｏｎｄＨｏｓｐｉｔａｌ－Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｆ钞－Ｃｈｅｎｇｄｕ－Ｓｉｃｈｕａｎ　６１００４１－Ｃｈ／ｎａ　

【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｗｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｈｉｓ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ　ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ（Ｄｅｘ）ｏｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｕｃｏ￣　

ｌ４１２　新疆医科大学学报　ＪＯＵＲＮＡＩ　（）Ｆ　ＸＩＮＪＩＡＮＧ　ＭＥＤＩＣＡｌ　ＵＮＩＶＥＲＳ１～１　Ｙ　２０１０　Ｄｅｃ．，３３（１２）　

大鼠闭合性脑损伤后ＣＯＸ一２、ＢＤＮＦ、ＰＤＧＦ—Ｂ　

表达变化的研究　

陈含笑　，金茂强　，吴　晓。　

（新疆医科大学基础医学院病理学教研室，新疆　乌鲁木齐８３００１１）　

摘要：目的　研究大鼠闭合性脑损伤后环氧化酶一２（ＣＯＸ一２）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）和血小板源性生　

长因子（ＰＤＧＦ－Ｂ）的表达时序性特点及其意义。方法　健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠５５只，雌雄不分，按照改良的Ｍａｒｍａｒｏｕ　损伤模型将其随机分为正常对照组（　一５），假损伤组（　一５）和损伤组（　一４５）。用免疫组化ＳＰ法检测ＣＯＸ一２、　

ＢＤＮＦ、ＰＤＧＦ－Ｂ在脑组织中的表达情况。结果ＣＯＸ－２免疫阳性表达在脑损伤后１～３　ｈ升高，１２　ｈ达高峰，５　ｄ　后基本恢复正常水平；ＢＤＮＦ脑损伤后１　ｈ明显增高，于３　ｈ达高峰，后逐渐下降，３　ｄ基本降至正常；ＰＤＧＦ－Ｂ脑损　

伤后１　ｈ增加，３～５　ｄ达高峰，１４　ｄ时仍高于正常。结论大鼠闭合性颅脑损伤后ＣＯＸ一２、ＢＤＮＦ、ＰＤＧＦ－Ｂ表达均　上调，且各自呈一定的时序性变化规律，可望为法医学颅脑损伤时间的推断提供参考。　

关键词：闭合性脑损伤；Ｃ（）Ｘ＿２；ＢＤＮＦ；ＰＤＧＦ—Ｂ；免疫组化　中图分类号：Ｒ６５１．５　文献标识码：Ａ　文章编号：ｌ００９—５５５１（２０１０）１２－１４１２－０４　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＣＯＸ－２，ＢＤＮＦ，ＰＤＧＦ－Ｂ　ａｆｔｅｒ　ｃｌｏｓｅｄ　ｔｒａｕｍａｔｉｃ　ｂｒａｉｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ　

ＣＨＥＮ　Ｈａｎ—ｘｉａｏ，ＪＩＮ　Ｍａｏ－ｑｉａｎｇ，ＷＵ　Ｘｉａｏ　

（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏＪ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｕｑｉ　８３００１１，Ｃｈｉｎａ）　

・１５３８・　四川医学２０１２年９月第３３卷（第９期）ＳｉｃｈｕａｎＭｅｄｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ，２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．９　ＧＤＮＦ基因修饰的神经干细胞抑制脑卒中后大鼠的Ｃａｓｐａｓｅ－３表达　陈贵军　，高小青　，杨朝鲜　，谭树凯　，袁琼兰　（１．自贡市第一人民医院神经外科，四川自贡６４３０００；２．泸州医学院神经生物学研究室，Ｉ￣ｌＪＩ　Ｊ泸州６４６０００；　３．同济大学医学院解剖与神经生物学教研室，上海２０００９２）　论著　

【摘要】　目的研究胶质源性神经营养因子（￣ｉａｌ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｎｅｕｒａｌ　ｆａｃｔｏｒ，ＧＤＮＦ）基因修饰的神经干细胞（ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅＨｓ，ＮＳＣｓ）移植对脑卒中后大鼠缺血侧脑组织内半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶－３（ｃｙｓｔｅｉｎｙｌ　ａｓｐａｒｔａｔｅ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ・　ａｓｅ．３，ｃａｓｐａｓｅ．３）表达的影响，探讨ＧＤＮＦ基因修饰的神经干细胞（ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ）移植对大鼠脑卒中的神经保护作用机制。　方法取新生大鼠脑组织分离培养ＮＳＣｓ，收集第６代前的ＮＳＣｓ备用。用重组腺病毒ＧＤＮＦ转染神经干细胞，制备ＧＤＮＷ　ＮＳＣｓ。暂时性阻塞大鼠大脑中动脉制备脑卒中模型，３ｄ后，用脑立体定位仪向卒中侧侧脑室分别给予ＮＳＣｓ、ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ和　生理盐水。再灌注时间１周、２周、３周、５周、７周后处死大鼠（ｎ＝３）。裂解卒中侧脑组织，离心后得到脑组织蛋白样品，通　过蛋白免疫印迹（Ｗｅｓｔｅｒｎ　Ｂｌｏｔｔｉｎｇ）检测Ｃａｓｐａｓｅ－３表达。结果ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ、ＮＳＣｓ、ＮＳ各组ｅａｓｐａｓｅ一３的表达在１周、２周、３　周、５周、７周各时间点均逐渐降低。ＮＳＣｓ组、ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ组显著低于ＮＳ组（Ｐ＜０．Ｏｌ；Ｐ＜０．００１）；ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ组明显低　于ＮＳＣｓ组（Ｐ＜Ｏ．０１）。结论ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ移植治疗脑卒中的机制可能与抑制ｃａｓｐａｓｅ一３表达有关。　【关键词】　脑缺血；神经干细胞；ＧＤＮＦ；ｃａｓｐａｓｅ－３　【中图分类号】Ｒ－３３２　【文献标识码】Ａ　【文章编号】１００４－０５０１（２０１２）０９—１５３８－０４　Ｔｈｅ　ｇｒａｆｔｉｎｇ　ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ　ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ＧＤＮＦ　ｇｅｎｅ　ｉｎｈｉｂｉｔｓ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｃａｓｐａｓｅ－３　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｃｅｒｅ－　ｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．ＣＨＥＮ　Ｇｕｉ－ｊｕｎ　，ＧＡＯ　Ｘｉａｏ—ｑｉｎｇ　，ＹＡＮＧ　Ｃｈａｏ—ｘｉａｎ　，ｅｔ　ａ１．１．　Ｆｉｍｔ　Ｐｅｏｐｌｅ　ｓ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆＺｉｇｏｎｇ，　Ｚｉｇｏｎｇ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６４３０ｏ０；２．Ｌｕｚｈｏｕ　Ｍｅｄｉｃａｆ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｌｕｚｈｏｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ　６４６０００，Ｃｈｉｎａ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｇｒａｆｔｉｎｇ　ｎｅｕｒａｌ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌｓ（ＮＳＣｓ）ｍｏｄｉｆｉｅｄ　ｂｙ　ｇｌｉａｌ　ｃｅｌｌ　ｌｉｎｅ—ｄｅｒｉｖｅｄ　ｎｅｕｒａｌ　ｆａｃｔｏｒ（ＧＤＮＦ）ｇｅｎｅ（ＧＤＮＦ／ＮＳＣｓ）ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　Ｃａｓｐａｓｅ．３　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｓｕｂｊｅｃｔｅｄ　ｔｏ　ｃｅｒｅｂｒａｌ　ｉｓｃｈｅｍｉａ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　△通讯作者　本实验从人前列腺发育的角度进一步证实雄激素　与前列腺问质的作用先于上皮细胞，雄激素介导的问　质细胞和上皮细胞间的相互作用在前列腺生长发育中　发挥着重要的作用，为ＢＰＨ及Ｐｃａ的发生和进展奠定　了一定的理论基础。　参考文献：　［１］Ｂｒｏｏｋｅ　ＧＮ，Ｐａｒｋｅｒ　ＭＧ，Ｂｅｖａｎ　ＣＬ．Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｏｆ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｉｎ　ａｄｖａｎｃｅｄ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｎｃｅｒ：ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ　ｃｏ－ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ｒｅｃｒｕｉｔ－　ｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｇｅｎｅ，２００８，２７（２１）：２９４１—２９５０　［２］Ｓａｊｊａｄ　Ｙ，Ｑｕｅｎｂｙ　Ｓ，Ｎｉｃｋｓｏｎ　Ｐ，ｅｔ　ａｌ　［３］　［４］　ｌｏｃａｌｉｚａ—　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｕｒｏｇｅｎｉｔａｌ　ｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｈｕｍａｎ　ｅｍｂｒｙｏｓ　［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，２００４，１２８（３）：３３１～３３９　Ｐｌａｎｚ　Ｂ，Ｗａｎｇ　Ｑ，Ｋｉｄｅｙ　ＳＤ，ｅｔ　ａ１．Ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓ　ｏｆ　ｓｔｒｏ—　ｍａｌ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｐｒｏｓｔａｔｅ：ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｃｅｌｌ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｋｅ．　ｒａｔｉｎｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｂｙ　ａｎｄｒｏｇｅｎ［Ｊ］．Ｊ　Ｕｒｏｌ，１９９８，１６０（５）：　１８５０～ｌ８５５　Ｇｎａｎａｐｒａｇａｓａｍ　ＶＪ，ＭｃＣａｈｙ　ＰＪ，Ｎｅａｌ　ＤＥ，ｅｔ　ａ１．Ｉｎｓｕｌｉｎ—ｌｉｋｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ＩＩ　ａｎｄ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｓｔａｔｅ［Ｊ］．ＢＪＵ　Ｉｎｔ，２０００，８６（６）：７３１—７３５　［５］Ｇｅｒｄｅｓ　ＭＪ，ＬａｒＢｅｎ　Ｍ，Ｄａｎｇ　ＴＤ，ｅｔ　ａ１．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｔ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｓｔｒｏ—　ｍａｌ　ｃｅｌｌ　ｍｙｏｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｙ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ａｎｄ　ＴＧＦ—ｂｅｔａｌ［Ｊ］．Ｐｒｏｓｔａｔｅ，　２００４，５８（３）：２９９—３０７　［６］吴刚，那彦群，孔祥田。等．ＢＰＨ组织中雄激素受体与转化生长　子ＢＩ型受体表达的相关性研究［Ｊ］．中华泌尿外科杂志，１９９９，２０　（５）：３０２—３０５　［７］甘道举，江军，陈善勤，等．雄激素受体在雄激素非依赖性前列腺　癌的表达［Ｊ］．临床泌尿外科杂志，２００６，２１（４）：２７９～２８１　［８］Ｉｔｏｈ　Ｎ，Ｐａｔｅｌ　Ｕ，Ｓｋｉｎｎｅｒ　ＭＫ．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　ｈｏｍｍｎａｌ　ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ－・ａｌｐｈａ　ａｎｄ　ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐ－　ｔｏｒ　ｇｅｎｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｐｒｏｓｔａｔｉｃ　ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ　ａｎｄ　ｓｔｒｏｍａｌ　ｃｅｌｌｓ　［Ｊ］．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ，１９９８，１３９（３）：１３６９～１３７７　［９］Ｐｌａｎｚ　Ｂ，Ａｒｅｔｚ　ＨＴ，Ｗａｎｇ　Ｑ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｋｅｒａｔｉ—　ｎｏｃｙｔｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ　ｂｅｎｉｇｎ　ａｎｄ　ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ　ｈｕｍａｎ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ［Ｊ］．Ｐｒｏｓｔａｔｅ，１９９９，４１（４）：２３３～２４２　［１０］Ｇｒｅｇｏｒｙ　ＣＷ，Ｆｅｉ　Ｘ．Ｐｏｎｇｕｔａ　ＬＡ，ｅｔ　ａ１．Ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎ—　ｃｒｅａｓｅｓ　ｃｏａｃｔｉｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｎｄｒｏｇｅｎ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ　ｉｎ　ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ　ｐｒｏｓｔａｔｅ　ｃａｎｃ—　ｅｒ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ，２００４，２７９（８）：７ｌ１９～７１３Ｏ　（收稿日期：２０１１－０９．１４）