材料2.1实验法案例
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M胆碱受体和H1受体激动药对离体豚鼠回肠的作用【摘要】目的:观察胆碱能神经递质乙酰胆碱,炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用。
观察M胆碱受体拮抗剂阿托品和组胺H1受体拮抗扑尔敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。
方法:运用RM6240生理信号采集处理系统以及张力换能器记录不同药物作用下的回肠平滑肌肌张力变化。
结果:加入乙酰胆碱后肠肌张力为1.09±0.48g,再加入阿托品与A药肠肌张力减小到0.08±0.03g(p<0.001);加入组胺后肌张力为2.12±0.80g,加入扑尔敏与肠肌张力减小到0.08±0.04g(p<0.001),加入氯化钡后肠肌大幅度收缩且呈不稳定性,再加阿托品后仅只略微降低其张力。
结论:乙酰胆碱为M胆碱受体激动药,组胺为H1受体激动药,氯化钡为肌肉兴奋剂,三者均可使肠道平滑肌收缩。
阿托品具有强抗胆碱作用;扑尔敏具有部分拮抗组胺作用;阿托品可通过拮抗胆碱能受的作用。
体部分减弱BaCl2【关键词】:平滑肌;张力曲线;拮抗剂;激动剂;M胆碱受体;H1受体1. 材料1.1 实验动物:豚鼠1.2 药品与试剂未标记的激动剂:A,B,C。
10-2g/L氯化乙酰胆碱(acetylcholine chloride)溶液;10-2g/L磷酸组织胺(histamine phosphate)溶液;10g/L BaCl2溶液。
拮抗剂:1g/L硫酸阿托品(atropine sulfate)溶液;10-3g/L氯苯那敏(chlorpheniramine)溶液。
台氏液(Tyrode) g/L: NaCl 8.0, KCl 0.2, MgCl2 0.1, CaCl2 0.2, NaH2PO4 0.05, NaHCO3 1.0, 葡萄糖 1.0。
1.3 仪器:离体装置:双层玻璃浴槽(20ml)、张力换能器、微距调节夹恒温水浴箱多道生理信号采集处理系统 RM6240生物信号采集处理系统2.实验方法2.1 准备:清洗浴槽:清洗后,将台氏液装至刻度;检查温度:37℃±0.5 ℃;检查通氧: 单个小泡溢出;打开电脑:选中桌面RM6240图标,选择“实验”---生理科学实验---肠肌2.2 实验步骤:清醒豚鼠轻击头部后股动脉放血打开腹腔取出回肠制作回肠标本一端固定在通气钩上置含有37℃台氏液的浴槽中通氧另一端固定在换能器上与多道生理信号采集处理系统的连接连接RM6240生物信号采集处理系统选择“实验”---生理科学实验---肠肌归零调节换能器张力(1g)稳定20分钟2.3 制作回肠标本:找到回盲部,在离回盲部1cm处剪断回肠,取出回肠约15cm左右一段,置于盛有台氏液的培养皿中,将回肠剪成1-1.5cm的小段。
摘要肉类是我国居民消费最大的食品之一,然而掺假事件时有发生,这不仅对消费者的经济利益造成损害,,更有甚者会对人类身体健康造成影响,因此对肉类掺假进行检测鉴别显得十分重要。
目前,国内外最常用的检测方法有PCR检测技术、电子舌电子鼻法、近红外光谱技术、色谱技术等。
本研究将在这里,我们将利用三类方法对肉类进行鉴定:一、根据动物细胞中细胞色素b基因的序列保守性,设计并合成种属特异性引物,用PCR 扩增技术得到肉和肉制品的目标DNA片段,通过荧光定量PCR技术,根据目标DNA片段的大小的不同来判断肉和肉制品种类。
二、根据仿生学原理,利用电子鼻和电子舌中对不同物质敏感程度不同的传感器对肉中特有的气味和味道信号的辨别和收集,通过软件优化后采用主成分分析法来对不同肉种类加以区分。
三、通过对光谱信息分析而提取出物质的特征信息的近红外光谱技术结合主成分分析法对不同动物来源肉进行分析。
三种方法均能够快速、准确的判断肉和肉制品的种类,且检测成本都较低,通过三种技术的强强联合为行业检测肉类提供了强有力的技术保障。
我们不但能将假肉区分开,还可以检测出肉中的掺假比例。
关键词:PCR扩增,qPCR,电子舌,电子鼻,近红外光谱技术,掺假肉类鉴别AbstractMeat consumption is one of the largest food, but have occurred adulteration, which not only cause damage to the economic interests of consumers, worse impact on human health, so the meat adulteration detecting identification is very important. At present, domestic and foreign most commonly used detection methods are PCR detection technology, electronic tongue electronic nose method, near infrared spectroscopy, chromatography technology. This study will be here, we will use three kinds of meat identification methods: First, based on sequence conservation of animal cells, the cytochrome b gene was designed and synthesized species-specific primers by PCR amplification techniques to get meat and Meat target DNA fragments by quantitative PCR, depending on the size of the target DNA fragments to determine the type of meat and meat products. Second, according to the principle of bionics, the use of electronic nose and electronic tongue sensitivity to different substances different sensors to identify and collect meat unique smell and taste signals, after the adoption of software to optimize the use of principal component analysis to different types of meat distinction. Third, through the analysis of spectral information and feature information extracted substances near infrared spectroscopy combined with principal component analysis of meat from different species were analyzed. Three methods are able to quickly and accurately determine the type of meat and meat products, and testing costs are low, through the powerful combination of three techniques for detecting the meat industry to provide a strong technical support. We not only can distinguish fake meat, can also detect adulteration of meat ratio.Keywords:PCR amplification,qPCR,smartnose,smartongue,NIRS,identification of adulterated meat目录摘要 (1)Abstract (2)目录 (3)1 文献综述 (1)1.1 课题背景 (1)1.2 研究现状 (1)1.3 研究意义 (1)1.4 文献综述 (2)1.5 研究方案确定 (5)2 实验流程和方案依据及原理说明 (6)2.1 分子生物学部分 (6)2.1.1 基因组抽提 (6)2.1.2 引物设计原理 (6)2.1.3 PCR原理 (7)2.1.4 琼脂糖凝胶电泳原理 (8)2.1.5 QPCR原理 (8)2.2 仿生生物学部分 (8)2.2.1 电子鼻检测原理 (8)2.2.2 电子舌检测原理 (9)2.2.3 近红外光谱定性分析原理 (10)3 实验方法 (11)3.1 实验材料 (11)3.2 实验仪器 (11)3.3 细胞破碎 (12)3.4 EZUP柱式动物组织基因抽提 (12)3.5 PCR步骤 (17)3.6 Q PCR操作步骤及数据处理 (18)3.7 电子鼻操作步骤 (18)3.8 电子舌操作步骤 (19)3.9 电子鼻、电子舌数据处理 (19)3.10 近红外光谱定性分析操作步骤及数据处理 (20)4结果与讨论 (21)4.1 PCR检测分析掺假肉类 (21)4.2电子鼻鉴定结果 (31)4.3 电子舌鉴定结果 (31)4.4 近红外光谱定性分析结果 (33)5 结论与展望 (33)5.1结论 (34)5.2展望 (34)参考文献 (36)致谢 (39)1 文献综述1.1 课题背景跨入21世纪以后,出现了很多肉类掺假的问题,例如在2011年被发现的牛肉浸膏事件,2012年底在欧洲发生的“马肉风波”,2013年在中国餐饮业发现的羊肉掺假事件。
Masson三色染色法
1.实验目的
MASSON染色观察病变的组织
2.实验材料
2.1石蜡切片
2.2仪器与试剂
2.2.1
(1)电热恒温干燥箱
(2)光学显微镜及拍照设备
(3)冰箱
(4)电子天平
(5)盖玻片
(6)染缸
2.2.2
(1)二甲苯
(2)无水乙醇
(3)Weigent氏苏木素液
(4)1%盐酸液
(5)立春红-品红溶液
(6)1%磷钼酸液
(7)1%淡绿液
(8)1%醋酸液
3.实验步骤:
操作方法:
(1)切片常规脱蜡至水,蒸馏水洗;
(2)Weigent氏苏木素液染核5-10分钟;
(3)自来水洗;
(4)1%盐酸酒精分化数秒(在显微镜下控制染色,除核为黑色,片中其他均混为白色);
(5)自来水洗;
(6)丽春红—品红溶液5-10分钟
(7)清水水溶液洗;
(8)1%磷钼酸分化直到各种成分被染清晰10分钟(胶原纤维呈淡红色,肌纤维、纤维素呈鲜红色);
(9)清水洗
(10)1%淡绿液染2—5分钟(或用2%苯胺蓝水溶液替代)
(11)1%醋酸水溶液处理2MIN
(12)常规脱水、透明、封片。
结果:胶原纤维绿色(或蓝色),肌肉、纤维素红色,红细胞橘黄色,核蓝黑色。
Human-肺癌-马松染色法
Human-肺-马松染色法
Human-软骨-马松染色法
Human-胰腺癌-马松染色法
武汉云克隆诊断试剂研究所。
高三生物是高中生涯中最为重要的学科之一,也是考生们所必须面对的重要挑战之一。
在高三生物学习中,生长素类似物是学生们难以掌握的关键知识点之一。
而高效掌握生长素类似物,不仅可以让学生在高考中获得好成绩,更重要的是为其未来的发展奠定坚实的基础。
为此,本文将为大家详细介绍如何高效掌握生长素类似物的教学方法和策略。
一、生长素类似物的概念和作用:生长素类似物是一种天然或人工合成的化合物,与植物激素生长素具有结构上的相似性,并具有促进植物生长和发育的作用。
生长素类似物的主要作用包括:1、促进延长物质的合成和运输,促进细胞伸长;2、促进叶片、茎干、根系和花器官的生长和发育;3、改善植物耐性和适应力,使其抗逆性能增强。
二、生长素类似物的分类:生长素类似物可以根据其来源和化学结构分类。
1、天然生长素类似物,如天然植物激素生长素、生长调节物和其他天然化合物;2、人工合成生长素类似物,如合成激素和植物生长调节剂。
三、生长素类似物的教学策略:为了帮助学生高效掌握生长素类似物的知识,教师应采用以下策略。
1、搭建丰富的实验平台:生长素类似物是一个非常抽象的知识点,需要通过实验来帮助学生加深对其认识。
教师可以设计多样化的实验,让学生亲自动手,体验生长素类似物的作用,并加深对其作用机理的理解。
2、培养学生的分析思维习惯:在教学过程中,教师应该注重培养学生的分析思维习惯,让他们能够从实验数据中分析出问题的本质,并找出相应的解决方案。
3、提高学生的自主学习能力:生长素类似物是一个比较复杂的知识点,需要学生自主学习能力才能更加有效地掌握相关知识。
因此,教师应鼓励学生在课外自主进行相关资料的搜索和学习。
4、强化记忆与技能培训:对于生长素类似物这类知识点,教师应该注重学生的记忆能力的培训。
通过反复巩固,让学生将相关知识点牢记于心,并驾驭相关技能。
四、生长素类似物教学案例:以下是一份典型的生长素类似物教学案例。
教师可以参考这些例子,来更好的帮助学生掌握相关知识。
多肽的阳离子方法-概述说明以及解释1.引言1.1 概述多肽是由氨基酸通过肽键连接而成的生物大分子,具有广泛的生物学功能和应用价值。
在多肽的研究与应用领域中,阳离子方法是一种常用的技术手段。
本文将着重介绍多肽的阳离子方法,包括方法的基本原理、应用案例以及存在的挑战与展望。
阳离子方法是利用多肽中氨基酸带正电荷的性质,通过与带负电荷的物质相互作用来实现分离、富集、纯化和功能研究等目的的一种方法。
多肽在中性溶液中常常具有带正电荷的性质,这是由于多肽分子中的某些氨基酸在特定条件下会失去质子而呈现阳离子状态。
因此,通过合理设计和选择适合的条件,可以利用这种阳离子特性来实现多肽的特定操作。
多肽的阳离子方法具有广泛的应用领域。
例如,在多肽的分离与富集方面,阳离子方法可以通过与带负电荷的固相材料或某些分子筛材料相互作用,实现多肽的富集和纯化。
在药物研发领域,阳离子方法也被广泛应用于药物传递系统的设计与优化,通过引入阳离子基团可以提高多肽在生物体内的稳定性和传递效率。
此外,阳离子方法还可以用于多肽的功能研究,如通过与带有负电荷的蛋白质相互作用来探索多肽的生物活性机制。
然而,多肽的阳离子方法在实践中也存在一些挑战和限制。
首先,多肽的阳离子性质受到多种因素的影响,如pH值、离子强度和温度等,因此需要在实验设计中考虑到这些因素的影响。
其次,阳离子方法对多肽的特异性选择性较低,往往会与其他带负电荷的物质发生非特异性相互作用,影响多肽的纯化和功能研究。
此外,阳离子方法在大规模生产和应用中也存在成本和可持续性等方面的问题,需要进一步的技术改进和研究。
综上所述,多肽的阳离子方法是一种重要的技术手段,具有广泛的应用潜力。
通过合理设计和选择适合的条件,可以实现多肽的分离、纯化和功能研究等目的。
然而,阳离子方法在实践中还存在一些挑战和限制,需要进一步的研究和改进。
未来,随着科学技术的不断发展和创新,相信多肽的阳离子方法将会得到更广泛的应用和推广,为多肽研究与应用领域带来更多的突破和进展。
实验法案例
案例一现场实验帮助A公司胜诉
美国的A公司生产著名的运动包,该公司发现B公司(一个大型的中心商业集团)引进一条生产线,生产的运动包与A 公司生产的运动包形状几乎完全一样,消费者很难区分。
A公司指控B公司,说B公司误导消费者,让消费者觉得自己买的是A 公司的产品,而实际买的却是B公司的产品。
为了证实这一点,A公司进行了一次现场实验。
试验中选择了二组妇女,给第一组妇女看的是A公司生产的包,包面上的所有标签都去掉,所有的标识、说明都印在包的内层。
给第二组妇女看的是B公司生产的包,包面上的商标明显可见,所有的标签和悬挂物都按出售现场的样子保留。
A公司希望通过这种实验了解妇女们购买包时的选择标准。
例如,她们能否区分出包的不同来源和品牌,她们依据什么进行识别或辨认,如果靠某些东西来辨认的话,那么这样做的理由是什么。
每组样本都是200人,实验分别在芝加哥、洛杉矶和纽约的大商场进行。
调查采用拦截式面访,被调查者是配额样本,即按妇女不同的年龄比例分配样本单位。
实验结果表明,大多数消费者无法区分两种包的不同来源,她们购买包时的依据主要是包的款式,而A公司生产的包是名牌商品,这种包的款式是人们所熟悉的。
这个结果支持了A公
司的立场。
调查数据帮助A公司在法庭上胜诉,B公司同意停止销售自己公司所生产的包。
案例二科普节目效果实验
为了提高儿童(4岁~7岁)对天文学基本知识的了解,培养家长和儿童对天文学和观察天象的积极性,提高他们对天文学的鉴赏能力,有关部门制作了一套天文学科普节目,在天文馆展出。
为了了解这套节目的效果,需要调查在天文馆的观看经历对儿童产生了什么影响。
这种影响可以分为两个层面,一个是短暂的影响,这可以通过受访者对观看节目的感受得到反映;另一个是长期影响,即看完节目后采取了什么相关行动。
所以这项节目效果实验调查的设计是这样的:在儿童观看节目前和观看节目后的几分钟时间内对他们进行短暂的调查,然后,在观看节目一个月以后,进行另一项跟踪调查。
接受调查的样本量为儿童500名,家长500名。
首先的调查是在天文馆现场进行的。
在该节目演出期间,每个被抽中的儿童在观看节目前接受访员大约5分钟的谈话调查。
访员所询问的问题与被访者年龄相适应,知识问题与天文学相关,同时还要询问观察天象的经历(如果有观察天象经历的话)。
观看节目前询问的问题有看电视节目的习惯,例如,询问是否看过“我们的宇宙”(一个在电视上播过的天文学科普节目)、家庭学习资源(如电视、望远镜、电脑等)以及以前是否参观过天文
馆或者类似的地方。
观看后的询问应该由同一个访员来进行。
询问时间不超过10分钟,问题包括节目中有关信息的回忆、对观察天象的兴趣和态度。
在询问结束后,送给被询问的孩子一个有关天文学内容的小礼物,以感谢他们接受访问。
对于带领儿童参观的家长或看护人,在他们观看节目之前填写一个简短的问卷,在观看节目后马上填写另一个简短的问卷。
两次问卷的长度分别不超过5分钟和10分钟。
观看前的问卷将询问被访者是否带领孩子参与过与天文学知识有关的活动,孩子参加活动的特点,以及他们对天文学的兴趣和了解程度。
观看前的访问同样也包括以前观察天象的经历(如果有这样的经历的话)、个人学习天文学的资源(望远镜、家庭电脑和杂志等)。
观看后的访问将了解看护人对带领儿童观看节目有关内容的评论、将观看到的知识运用到今后有关活动中的想法、他们个人对天文学的兴趣和态度。
在被调查者接受现场调查以后约一个月,用电话调查方式对被访者进行跟踪调查。
调查员为天文馆现场的同一个人,调查时间为10分钟。
跟踪调查是为了采集被访者在观看节目后是否进行过与天文学有关的活动(买书、资料或者望远镜,观看有关天文学的电视节目,后来又去参观天文馆或者天文学类场馆,与孩子共同讨论有关天文学问题以及观察天象),对天文学和科学的态度以及是否思考过(经过一段时间后)对天文馆观看节目的评价。
在对家长访问结束后,要询问家长是否可以询问孩子几个问
题。
如果得到同意,访员要让孩子回忆一些那天观看天文学节目的问题,参加天文学方面的一些活动或者观看有关电视节目、与家长和其他小朋友讨论的问题。
对儿童的电话访问不超过10分钟。
在这个案例中,我们没有详细讨论如何抽选天文馆,以及在中选的天文馆现场如何抽选接受调查的家长与孩子,但抽选的原则是随机的。
由于这是一个尚未实施的设计方案,所以对于天文馆中所进行的这种科普节目是否有效还无法作出评估。