人教版高二生物选修一教学设计：专题五课题3《血红蛋白的提取和分离》

【主题】专题五课题3血红蛋白的提取和分离2012.04.26【情景创设】蛋白质是生命活动不可缺少的物质。

对蛋白质的研究和应用，首先需要获得纯度较高的蛋白质。

因此，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作。

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O和CO的运输。

在本课题中，我们将以血红蛋白为实验材料，学习蛋白质提取和分离的一些基本技术。

【问题设计】1、什么是凝胶色谱法？用这种方法分离蛋白质的原理是什么？2、缓冲溶液的作用体现在哪里？如何配制缓冲溶液及控制缓冲范围？3、什么叫电泳？用电泳法分离一些生物大分子的原理是什么？常用的电泳方法有哪些？4、简单说说哺乳动物的血液组成及血红蛋白的相关知识，如何对血样进行处理及对血红蛋白进行粗分离？处理后的血样发生了哪些变化？5、简述凝胶色谱柱的制作及装填操作步骤，如何判断色谱柱的装填是否成功？回答P70旁栏思考。

6、如何加样及洗脱？此过程中需注意什么，可观察到什么现象？常用的对蛋白质进行纯度鉴定的方法是什么？7、完成课后作业5 。

【达标检测】（必做）1. 用凝胶色谱法分离蛋白质的过程中，下列叙述正确的是（）A、相对分子质量较小的蛋白质行程大于相对分子质量较大的蛋白质B、相对分子质量较小的蛋白质行程小于相对分子质量较大的蛋白质C、相对分子质量较小的蛋白质行程等于相对分子质量较大的蛋白质D二者根本无法比较2. 使用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳过程中，不同蛋白质的电泳迁移率完全取决于（）A、电荷的多少 B 、分子的大小C、肽链的多少 D 、分子形状的差异3. 一分子的血红蛋白最多可携带的Q分子数和CO分子数分别是（）A 4、2 B、4、4 C、2、1 D、1、14. 样品处理中血红蛋白溶液离心后的分层顺序自上而下是：无色透明的甲苯层--- ___________ -- _______________________________ 红细胞破碎物的暗红色沉淀。

《血红蛋白的提取和分离》学历案（第一课时）一、学习主题本节课的学习主题为“血红蛋白的提取和分离”。

通过本课题的学习，学生将了解血红蛋白的基本性质、提取过程和分离方法，进而培养实践能力和科学研究兴趣。

本课时为第一讲，将聚焦于血红蛋白的概念和背景介绍。

二、学习目标1. 理解血红蛋白的概念、结构及其在生物体内的功能。

2. 掌握血红蛋白提取的基本原理和方法。

3. 学会使用离心机等实验器材，并了解实验操作注意事项。

4. 培养学生对生物化学实验的兴趣和实验操作能力。

三、评价任务1. 理解评价：通过课堂提问和小组讨论，评价学生对血红蛋白概念及功能的理解程度。

2. 操作评价：观察学生在实验操作中的表现，包括离心机操作、实验器材使用等，评价其操作能力。

3. 实验报告评价：学生完成实验报告后，根据报告的完整性、准确性和分析深度进行评价。

四、学习过程（一）导入新课通过展示人体血液的图片，引导学生思考血液中成分的种类和功能，引出血红蛋白的话题。

（二）新课讲解1. 血红蛋白的概念及结构讲解。

2. 血红蛋白在生物体内的功能介绍。

3. 血红蛋白提取的原理和方法简述。

（三）实验操作演示教师演示离心机的使用方法及注意事项，并指导学生进行实际操作。

（四）学生实验操作学生分组进行血红蛋白的提取实验，记录实验过程和结果。

（五）课堂小结总结本课学习的重点内容，强调实验操作注意事项。

五、检测与作业1. 完成课后习题，巩固本课学习的知识点。

2. 撰写实验报告，包括实验目的、材料与方法、实验过程与结果分析等。

3. 准备下一课时的相关知识预习，为后续学习做好准备。

六、学后反思1. 学生对血红蛋白的提取和分离有了初步的认识，对实验操作有了基本的掌握。

2. 在实验过程中，部分学生在使用离心机时存在操作不当的情况，需要加强操作技能的训练。

3. 学生在实验报告的撰写上，部分同学对实验结果的分析不够深入，需要在今后的学习中加强分析和解决问题的能力。

4. 本课时的学习为后续的学习打下了基础，学生对于生物化学实验的兴趣得到了激发，需要继续保持和加强。

人教版高二生物选修一《课题3血红蛋白的提取和分离》说课稿一、课题背景和意义《课题3血红蛋白的提取和分离》是人教版高二生物选修一的教材内容之一。

通过本课题的学习，学生将了解血红蛋白的结构和功能，掌握血红蛋白的提取和分离方法，并通过实验观察、分析和总结来提高科学实验的能力和科学素养。

血红蛋白是人体内重要的生物分子之一，它作为氧气的载体，参与了身体各个器官和组织细胞的呼吸过程。

因此，对血红蛋白的研究对于了解人体的生理和病理过程具有重要意义。

二、教学目标1.知识目标：–掌握血红蛋白的结构及其功能。

–了解血红蛋白的提取和分离方法。

2.能力目标：–学会使用实验仪器和设备进行实验操作。

–培养观察、分析和总结实验结果的能力。

3.情感目标：–培养学生对科学实验的兴趣和热爱。

–培养学生的合作意识和团队精神。

三、教学重点和难点教学重点： - 血红蛋白的结构和功能。

- 血红蛋白的提取和分离方法。

教学难点： - 血红蛋白的分离方法的操作和技巧。

四、教学内容与过程1. 血红蛋白的结构和功能血红蛋白是由四个亚基（两个α链和两个β链）组成的复合蛋白，每个亚基中存在着一个带有铁元素的血红素分子。

血红蛋白的主要功能是运输氧气到身体各组织。

2. 血红蛋白的提取和分离方法血红蛋白的提取和分离可以使用离心、色谱层析等方法。

2.1 离心法离心法是一种将混合物中的不同成分分离的常用方法之一。

在此实验中，我们使用离心机将血液样品进行离心，以将血红蛋白与其他成分分离。

2.2 色谱层析法色谱层析法是一种将混合物中的不同成分通过吸附和洗脱分离的方法。

在此实验中，我们使用色谱层析纸将血红蛋白分离。

3. 实验操作步骤步骤一：准备血液样本•取一小量新鲜血液，放入离心管中。

步骤二：使用离心机分离血红蛋白•将离心管放入离心机中进行离心，分离血红蛋白。

步骤三：制备色谱层析纸•将色谱层析纸剪成适当大小的条状。

步骤四：将分离的血红蛋白样品滴于色谱层析纸上•使用滴管将离心分离的血红蛋白样品滴于色谱层析纸上。

专题5 DNA与蛋白质技术课题5.3 血红蛋白的提取和分离一、【课题目标】（一）知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理（二）过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神二、【课题重点】凝胶色谱法的原理和方法三、【课题难点】样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填四、【教学方法】启发式教学五、【教学工具】多媒体课件六、【教学过程】（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物。

对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。

所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。

怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。

1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

（3）分离过程：（图5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。

（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。

一、蛋白质提取、分离（阅读教材P64～66）1．蛋白质分离的理论依据2．凝胶色谱法(分配色谱法)(1)概念：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。

(2)分离原理相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。

3．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制外界酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变。

(2)配制：通常由1～2种缓冲剂溶解于水中配制而成，调节缓冲剂的使用比例就可以制得在不同pH范围内的缓冲液。

4．电泳(1)概念：带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。

(2)原理①许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。

②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。

③电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。

二、血红蛋白的提取和分离（阅读教材P66～70）1．样品处理(1)红细胞的洗涤①目的：去除杂蛋白，以利于后续步骤的分离纯化。

②过程：分离(低速短时间离心)→用胶头吸管吸出上层透明的黄色血浆→下层暗红色的红细胞用生理盐水洗涤(如此重复三次)。

(2)血红蛋白的释放①目的：使红细胞破裂释放血红蛋白。

②过程(3)分离血红蛋白溶液：离心(以2 000 r/min速度，离心10 min)→观察到离心管中的溶液分为4层，从上往下依次为：第1层：无色透明的甲苯层。

第2层：脂溶性物质的沉淀层——白色薄层固体。

第3层：血红蛋白的水溶液——红色透明液体。

第4层：其他杂质的暗红色沉淀物。

将液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。

2．透析——粗分离过程：取1 mL的血红蛋白溶液装入透析袋中，将透析袋放入盛有300 mL的物质的量浓度为20 mmol·L －1的磷酸缓冲液中(pH＝7.0)，透析12 h。

课题：血红蛋白的提取和分离教学目标：1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理教学重点：凝胶色谱法的原理和方法教学难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填教学过程：（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化合物。

对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。

所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。

怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。

1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（见课件图）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

[（3）分离过程：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC －NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。

（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同［思考］阅读投影补充材料后，填写下表：（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。

（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质－SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。

2．实验设计2.1蛋白质的提取和分离一般分为哪些基本步骤？样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。

教学准备
1. 教学目标
1.通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离,使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法。

2.了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

2. 教学重点/难点
课题重点:凝胶色谱法的原理和方法。

课题难点:样品的预处理;色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

3. 教学用具
4. 标签
教学过程
【导入】导入
红细胞在人体内是一种非常重要的细胞,对于携带氧气和二氧化碳至关重要,但是你们知道为什么红细胞能携带这些气体吗?因为红细胞中含有一种特殊的蛋白质——血红蛋白。

血红蛋白究竟是什么,我们要研究它,首先就要进行提取和分离它。

【讲授】凝胶色谱法（分配色谱法）
1.原理:分子量大的分子通过凝胶颗粒的间隙,流程短,流速快;分子量小的分子通过凝胶颗粒的内部,流程长,流速慢。

2.凝胶材料:多孔性的多糖化合物
多媒体演示凝胶色谱法洗脱过程
【活动】缓冲溶液
展示摩托车减震器的图片,让学生讨论减震器的作用。

类比摩托车减震器的工作原理,理解缓冲液的作用。

1.组成:由弱酸和强酸弱碱盐组成
2.作用:抵制外界酸碱变化,保持pH稳定
【讲授】凝胶电泳
1.原理:不同蛋白质的带电性质、电量、性状和大小不同,在电场中受到的作用力、方向、阻力不同,导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

2.分离方法:琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰氨凝胶电泳等。

专题5 DNA 和蛋白质技术 课题3 血红蛋白的提取和分离【学习目标】本课题通过尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生能够体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法，并了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理，为今后学习运用这些技术打下基础。

【重点难点】重点：凝胶色谱法的原理和方法。

难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

【预习案】任务一. 凝胶色谱法（分配色谱法）：1、概念：根据被分离蛋白质的 ，利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用，来分离蛋白质的有效方法。

2、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ，而 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 ，移动速度 ，相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。

3、具体过程：A. 的蛋白质由于 作用进入凝胶颗粒内部而被滞留； 的蛋白质被排阻在凝胶颗粒外面，在了里之间迅速通过。

颗（2） （4） AB.（1）混合物上柱；（2）洗脱开始，的蛋白质扩散进入凝胶颗粒内；的蛋白质被排阻于凝胶颗粒之外；（3）的蛋白质被滞留；的蛋白质被向下移动。

（4）不同的蛋白质分子完全分开；（5）的蛋白质行程较短，已从中洗脱出来，的蛋白质还在行进中。

任务二．缓冲溶液：1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。

2、作用：能够抵制的对溶液的的影响，维持PH基本不变。

3、缓冲溶液的配制通常由种缓冲剂溶解于水中配制而成。

调节缓冲剂的就可以制得使用的缓冲液。

任务三. 电泳：1、概念：指发生迁移的过程。

2、原理：许多重要的生物大分子，如等都具有在下，这些基团会带上。

在电场的作用下，这些带电分子会向着与其移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子以及分子本身、的不同使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。

3、分类：①电泳②电泳。

选修1专题5课题3血红蛋白的提取和分离教学设计一、课题目标1.知识目标a.说出从血液中初步获取血红蛋白的原理和方法。

b.说明凝胶色谱法的原理和方法。

c.说出电泳的基本原理和方法。

2.能力目标运用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离纯化。

3.情感目标通过运用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离纯化，锻炼科学的思维方法，培养实事求是的科学态度。

二、课题重点凝胶色谱法的原理和方法。

三、课题难点样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填。

四教学流程引导学生回忆蛋白质的物理化学性质，指出其是蛋白质提取与分离的依据。

1.分子的形状、大小2.电荷性质和多少3.溶解度4.吸附性质5.对其他分子亲和力（二）方法及原理概述蛋白质分离的两种常用方法和原理，再分别详细讲解。

凝胶色谱法：根据相对分子质量的大小分离蛋白质电泳法：根据分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同分离蛋白质1.凝胶色谱法（1）材料：凝胶展示图解，讲解种类和特点。

多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

（2）原理：指导学生观察教材图5-13凝胶色谱法分离蛋白质的原理，讲解分离过程。

步骤：混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子原理：当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程较短，移动速度较快。

相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。

2.缓冲溶液①材料：实验所用凝胶是交联葡聚糖凝胶。

②方法：凝胶用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，一次性缓慢倒入色谱柱内。

不能有气泡存在。

然后用300mL物质的量浓度为20 mmol/L磷酸缓冲液充分洗涤平衡12h，使凝胶装填紧密。

3.样品的加入和洗脱使吸管管口沿管壁将样品缓慢加入色谱柱内，不要破坏凝胶面。

待红色的蛋白质接近色谱柱低端时，用试管收集流出液，每5mL收集一管，连续收集。

专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》[学习目标]1．尝试对血液中血红蛋白的提取和分离，使学生体验从复杂体系中提取生物大分子的基本过程和方法 2．了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理[知识链接]血红蛋白由四条链组成，含两条α链和两条β链，其中每条肽链环绕一个亚铁血红素基团，此基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳，血红蛋白因含有血红素而呈现红色。

[新知预习]一、基础知识1．凝胶色谱法(1)概念：凝胶色谱法也称做分配色谱法，是根据____________的大小分离蛋白质的有效方法。

(2)原理：大多数凝胶是一些微小的________球体，内部有许多贯穿的通道，当____________不同的蛋白质通过凝胶时，________________的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程________，移动速度较慢；而______________的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在凝胶外部移动，路程________，移动速度较快。

____________不同的蛋白质因此得以分离。

2．缓冲溶液(1)作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制外界的________对溶液pH的影响，维持pH基本不变。

(2)配制：通常由1～2种________溶解于水中配制而成。

调节________的使用比例就可以制得在不同pH范围内使用的缓冲液。

3．电泳(1)概念：是指_______粒子在电场的作用下发生_______的过程。

(2)原理：许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的________下，这些基团会带上____________。

在电场的作用下，这些________分子会向着与其所带电荷________的电极移动。

电泳利用了待分离样品中各种分子________的差异以及________的大小、________不同，使带电分子产生不同的________，从而实现样品中各种分子的分离。

(3)常用的电泳方法：琼脂糖凝胶电泳和______________电泳。

《血红蛋白的提取和分离》教学设计一、教材分析“血红蛋白的提取和分离”是人教版选修1专题5“DNA和蛋白质技术”中课题3的内容。

蛋白质的提取是开展生物学研究的基本技术之一，本课题从基础入手，学习血红蛋白的提取和分离应用的几种常用的分子生物学技术：透析、琼脂糖凝胶色谱法、电泳。

教材先介绍这几项技术的基本原理，再结合实验操作介绍实验方法，这样学生理解比较困难，容易混淆，所以本设计采用分组合作学习的方法，激发学生学习兴趣，讨论交流中突破难点。

由于本课题内容较多且复杂，所以要求学生按照提前编好的导学案学习。

通过对本专题的学习，学生巩固必修课中学习的有关蛋白质的理论知识，还能了解提取生物大分子的基本思路和方法，为今后在该领域的深造打下基础。

二、教学目标（一）知识与技能尝试从血液中提取和分离血红蛋白；了解凝胶色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理。

（二）过程与方法尝试提取和分离血液中的血红蛋白，体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤。

（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神。

三、教学重难点1、重点：掌握血红蛋白提取和分离的基本过程和方法，细化过程；凝胶色谱法的原理和方法。

2、难点：样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填四、教学方法：自主学习、小组合作学习、六、板书设计七、教学反思优点：1、设计问题情境，培养合作学习教学设计思路符合教学内容实际，结合学生现有的认知结构，然后在现有的基础水平上建构新的知识，培养了学生自主学习和合作学习的能力。

首先是展示血红蛋白空间结构图片，从而引出课题血红蛋白的提取和分离。

再通过学生自主学习、分组合作学习和师生的共同探讨完成本节课的学习。

2、学习安排合理，注重知识联系在教学中，从基础知识凝胶色谱法、缓冲溶液、电泳法到实验操作样品处理、透析、纯化等层层推进，让学生分组合作学习后再归纳总结，从而形成知识框架，体验成功之感。

《血红蛋白的提取和分离》教学设计教学目标（一）知识与技能1、尝试从血液中提取和分离血红蛋白2、了解色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理（二）过程与方法体验血红蛋白提取和分离的实验的严格要求，注意按照操作提示进行相关步骤（三）情感、态度与价值观初步形成科学的思维方式，发展科学素养和人文精神教学重难点课题重点凝胶色谱法的原理和方法课题难点样品的预处理；色谱柱填料的处理和色谱柱的装填教学工具多媒体教学过程（一）引入新课蛋白质是生命活动的主要承担者，是细胞内含量最高的有机化和物。

对蛋白质的研究有助于人们对生命过程的认识和理解。

所以需要从细胞中提取蛋白质进行研究。

怎样提取蛋白质呢？（二）进行新课1．基础知识蛋白质的物化理性质：形状、大小、电荷性质和多少、溶解度、吸附性质、亲和力等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。

1．1凝胶色谱法（分配色谱法）：（1）原理：（图5－13a）分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快；分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢。

（2）凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。

（3）分离过程：（图5－13b）混合物上柱→洗脱→大分子流动快、小分子流动慢→收集大分子→收集小分子＊洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。

1．2缓冲溶液（1）原理：由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3－NaHCO3，HC－NaC，NaH2PO4/Na2HPO4等），调节酸和盐的用量，可配制不同pH的缓冲液。

（2）缓冲液作用：抵制外界酸、碱对溶液pH的干扰而保持pH稳定。

1．3凝胶电泳法：（1）原理：不同蛋白质的带电性质、电量、形状和大小不同，在电场中受到的作用力大小、方向、阻力不同，导致不同蛋白质在电场中的运动方向和运动速度不同。

ks5u思考］阅读教材后，填写下表：（2）分离方法：琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺经胶电泳等。

（3）分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质－SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于分子大小。