薄片和电镜的观察图片库

小知识如何看电镜照片及其它电镜照片具有直观、通俗的特点，一般大家都能看明白。

但从电镜专业的角度来说，多了解一些电镜成像的基础知识，对于更好地从电镜照片中得到更多的信息是非常有好处的。

图1是一张电镜照片，在图中标出了亮、暗、黑不同的部位，并对形成亮、暗、黑的原因进行了解释。

上面电镜照片是由亮(白)、暗(灰)、黑几种不同色素集合而成，对于正常的二次电子图象来说：（1）亮是代表样品高凸部位、面向检侧器的部位、具有高原子序数元素的部位，导电性能好的部位。

（2）暗则反之。

（3）不同程度的亮暗，即为不同的差异，那些孔洞、缝隙、底下部位呈现黑色。

由于样品的电磁性能、荧光性能，边缘和尖端效应造成的亮度差异，了解、综合这些样品信息，然后才能获得有关该样品形貌的正确断论，从中得到更多的信息。

在区分图象上，还应该注意，对于样品有透明膜的表面或透光外壳等情况，在光学显微镜下可以无妨碍地看清下面或内部的细节形态，虽然有时常常难以分清该细节是在外表还是在内部。

但在扫描电镜中情况就不一样，由于电子显微镜只能“看到”5-10nm厚的深度，所以它只反映外表的形态，外表既使覆有很薄的透光层，电镜也是看不到下面细节的。

附：扫描电镜的优点及与光学和透射电镜的比较扫描电镜的优点很多，其中最重要的一点是景深特别大。

同样的放大倍数，扫描电镜的景深一般是光学显微镜的100倍，是透射电镜的1000倍左右。

景深大，拍摄出来的照片立体感强，具有更多细节。

表1列出了扫描电镜、光学显微镜和透射电镜的主要不同点。

表1 扫描电子显微镜与光学和透射电镜比较表项目光学显微镜(OM) 扫描电镜(SEM) 透射电镜(TEM) 1、分辨本领：最高熟练操作容易达到0.1um（紫外光显微镜）0.2 um5 um0.5nm10nm100nm0.1～0.2nm0.5~0.7nm5~7nm2、放大倍数1~2 000倍10~150 000倍100~800 000倍3、景深短：0.1mm（约10倍时）1um （约100倍时）长：10mm （约10倍时）1mm （约100倍时）10um （约1000倍时）1um （约10000倍时）短：接近扫描电镜，但实际上为样品厚度所限制，一般小于100nm4、视场100mm（1倍时）10mm （10倍时）1mm （100倍时）0.1mm （1000倍时）10mm （10倍时）1mm （100倍时）0.1mm （1 000倍时）10um （1 0 000倍时）1um （1 000 000倍时）2mm （100倍时）其它同扫描电镜说明：现在某些光学显微镜，经过光学系统特别是数字化处理后，据报到，其景深可以到达SEM的效果，但实际是否完全一样，尚待验证。

实验五细胞器的光镜切片和电镜照片观察【实验目的】观察除了实验二～五以外的其它细胞器在光学显微镜和电子显微镜下的基本形态结构。

【实验内容】一、三种细胞器的光镜切片（一）高尔基复合体(Golgi Complex)用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片:神经细胞因合成运输大量的蛋白质而含有发达的内质网和高尔基复合体，在低倍镜下观察，神经节的假单极细胞体被神经束分隔成群。

神经细胞的胞体呈圆形或椭圆形。

转换高倍镜观察，细胞中央不着色的圆形区为细胞核。

在核的周围有黑褐色颗粒状或呈不规则的条索状结构即为高尔基复合体。

图5一l神经节细胞(示高尔基复合体)(二)尼氏小体(Nissl’s Body)甲苯胺兰染色的牛脊髓涂片，尼氏小体即光镜下的粗面内质网。

在低倍镜卡观察，染成蓝色的大三角形、星形细胞就是脊髓前角神经细胞，染色较深的小细胞为神经胶质细胞。

转换高倍镜观察，可见脊髓前角神经细胞的细胞质中许多蓝色颗粒或网状结构即为尼氏小体。

图5—2 脊髓前角神经细胞的尼氏小体(三)中心体(Centrosome)铁苏木素染色的马蛔虫子宫切片，在低倍镜下观察可见许多受精卵细胞，细胞的外面有卵壳，细胞与卵壳之间的腔叫卵壳腔。

在某些卵细胞内，于核附近有圆形的小粒——中心粒，它与周围致密的细胞质——中心球，组成中心体。

转换高倍镜观察，可见中心体的外围还有星状的放射细丝即星体。

染色体中心体图5—3马蛔虫受精卵细胞、分裂中期(示中心体)二、六种细胞器的电镜照片（一）高尔基复合体(Golgi Complex)人体胃粘膜细胞高尔基复合体电镜照片：细胞质中有散在的高尔基复合体，其结构要由三部分组成：扁平囊、大囊泡和小囊泡，它们共同构成紧密重叠的囊泡结构。

扁平囊约3～8层，它们平行排列，略弯曲成弓形。

凸出的一侧为形成面，可见许多小囊泡，凹入的一侧为成熟面，可见扁平囊末端呈球形膨大，在分泌细胞中膨大部分不断脱离扁平囊，形成分泌泡。

(二)内质网(Endoplasmic Reticulum)人胃壁细胞、恒河猴脊髓前角运动神经细胞粗面内质网电镜照片：粗面内质网在分泌蛋白质的细胞中较发达，在细胞核周围可见有较密集的膜层结构即为粗面内质网，它们大都呈片状排列，粗面内质网可与细胞核膜相通连。

1、电子显微镜（electron microscope), 简称电镜, 是使用电子来展示物件的内部或表面结构的显微镜。

是显微镜的一种！但电镜是大型精密仪器,其原理、结构与光镜显著不同。

2、原理: 高速运动的电子在电场或磁场的作用下，会发生折射，并且能被聚焦，能聚焦即能成像。

高速运行的电子的波长比可见光的波长短（波粒二象性), 电子显微镜的分辨率（约0.1纳米）远高于光学显微镜的分辨率（约200纳米, 光学显微镜的分辨率受其使用波长的限制)。

3、电镜的种类：按目的分：透射电镜、扫描电镜 分析装置：X-rays 波谱仪、能谱仪；按用途分：生物医学用电子显微镜、非生物医学用电子显微镜； 按原理分:场发射、非场发射； 分辨率:显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距。

其计算公式是σ=λ/NA 式中σ为最小分辨距离；λ为光线的波长；NA 为物镜的数值孔径。

可见物镜的分辨率是由物镜的NA 值与照明光源的波长两个因素决定。

NA 值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。

要提高分辨率，即减小σ值，可采取以下措施:（1） 降低波长λ值，使用短波长光源。

（2） 增大介质n 值以提高NA 值（NA=nsinu/2）。

（3） 增大孔径角u 值以提高NA 值。

（4）增加明暗反差。

放大倍数到一定程度时就图像模糊，而电子显微镜用电子做光源，可以清晰。

5、常见电镜技术 1、超薄切片技术2、负染色技术3、冰冻复型技术4、冷冻超薄切片技术5、电镜酶细胞化学技术6、免疫电子显微镜技术7、电镜放射自显影技术8、核酸大分子的电镜样品制备技术9、SEM 电镜样品制备技术10、电子探针；11、电镜原位杂交技术。

7、EM 在医学中的应用 ①在基础医学方面：a.观察细胞的亚微结构：线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器的接构及病理变化。

b.观察药物的代谢机理及对亚微结构的影响。

c. 研究病毒的作用机理及作用靶。

d.探讨分子病理学的发生机制。

实验二细胞的超微结构—透射电镜下的细胞器实验目的：通过使用透射电子显微镜观察和研究细胞的超微结构，了解细胞器的形态和组织，以及其在细胞功能中的作用。

实验原理：透射电子显微镜是一种利用电子束通过样品的原理进行显微观察的仪器。

相比传统光学显微镜，透射电子显微镜具有更高的分辨率和放大倍数。

实验步骤：1.准备样品：使用透射电子显微镜需要制备薄片样品。

将细胞或组织固定、切片和上染色剂等。

2.调整放大倍数：根据需要观察的细胞器，调整透射电子显微镜的放大倍数。

3.开始观察：将样品放入透射电子显微镜中，调整焦距和对比度，开始观察细胞超微结构。

4.记录结果：使用电子显微镜拍摄或记录所见到的细胞器的图像和形态。

根据观察结果，对细胞器的结构和功能进行分析和讨论。

实验结果：观察细胞的超微结构可以看到许多细胞器，如细胞核、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等。

细胞核是细胞的控制中心，一般位于细胞的中央。

在透射电镜下观察，可以看到核膜（由内核膜和外核膜组成）、核孔、核仁等结构。

核膜通过核孔与细胞质相连，核仁是RNA合成的地方。

线粒体是细胞的能量中心，通过细胞呼吸产生ATP。

在透射电镜下观察，线粒体呈棒状或梭形，内部含有许多内膜，并形成一系列被称为嵴（cristae）的褶层。

嵴上含有许多氧化酶，参与细胞呼吸。

内质网是细胞的重要细胞器之一，两个片层之间的空腔称为内质网腔。

内质网膜上覆盖着许多小颗粒，称为核糖体。

内质网分为粗面内质网和平滑内质网，前者存在核糖体，用于蛋白质合成，后者没有核糖体，参与脂质代谢和钙离子存储。

高尔基体是细胞的分泌细胞器，具有分泌蛋白质、糖蛋白质和磷脂等功能。

高尔基体由多个平面被膜囊构成，形成一系列被称为囊泡的结构。

在透射电镜下可以看到高尔基体具有一层由囊泡组成的堆叠结构。

溶酶体是细胞的消化系统，其内部含有多种水解酶。

溶酶体呈球状或椭圆形，在透射电镜下可以看到其内部含有酶泡。

溶酶体参与细胞内的废物降解和吞噬体的形成。