全自动酶标仪的检验分析步骤

实验室酶标仪操作规程一．目的对检验室的酶标仪和分光光度计的使用过程进行规范管理。

二．适用范围适用于本公司检验室的检验人员对酶标仪和分光光度计的使用。

三．检测仪器操作步骤3.1酶标仪的操作步骤和注意事项3.1.1酶标仪的操作流程将一定数量处理好的样品放入微孔中插入框架，记录标准液和样品的位置，加入50ul氯霉素酶标记物至微孔，加入50ul6个稀释10倍的氯霉素标准液和样液到各自微孔，在加入50ul氯霉素抗体到各自微孔，轻拍混匀，20-25℃黑暗避光培养2h。

倒掉微孔中的液体，用蒸馏水洗板3次。

加50ul底物和50ul发色剂至每个微孔中，轻拍混均，20℃--25℃黑暗避光处孵育30min。

加100ul反应终止液至每个微孔中，轻拍混均后，在10 min内以空气为空白调零，测量并记录每个微孔溶液450nm波长的吸光度值。

实验结束后，关闭电源盖好防尘罩。

3.1.2酶标仪操作的注意事项3.1.2.1使用移液器加液，移液枪头不能混用。

3.1.2.2洗板要干净，避免交叉污染。

3.1.2.3严格按照试剂盒的说明书操作，反应时间准确。

3.1.2.4请勿将样品或试剂洒到仪器表面或内部，操作完成注意做好清洁工作。

3.1.2.5不要在测量过程中关闭电源。

3.1.2.6使用后盖好防尘罩。

3.2 分光光度计的操作和注意事项3.2.1分光光度计的操作流程打开分光光度计开关，打开样品室盖，放入参比样品和待测样品，调节波长到所需值，关闭样品室盖，以参比样调0和100%，方法为：按“功能键”切换到“透射比”调100%，按“功能键”切换到“吸光度”。

推拉拉杆，读出待测样品的吸光值。

实验结束，将比色皿拿出，盖好样品室盖，关闭电源。

3.2.2分光光度计的操作注意事项3.2.2.1.每次使用后应立即检查是否存有溢出溶液，经常擦拭样品室以防废液对不见火光路的腐蚀。

3.2.2.2仪器使用完毕应盖好防尘罩，可在样品室放置干燥剂，开机时取出。

3.2.2.3仪器液晶显示器和键盘日常使用和保存使用时注意防划伤，防水，防尘，防腐蚀。

全波长酶标仪使用方法全波长酶标仪是一种用于测量样品中特定酶活性的仪器。

它通过检测样品中酶与底物反应产生的荧光信号来定量分析酶活性。

全波长酶标仪具有灵敏度高、准确性好、操作简便等优点，广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。

下面是全波长酶标仪的使用方法：1. 准备工作：a. 确保全波长酶标仪处于正常工作状态，检查光源、滤光片、检测器等部件是否正常。

b. 准备试剂和样品，根据实验要求选择合适的底物、酶和缓冲液。

c. 清洗酶标板，使用洗涤液将酶标板清洗干净，然后用去离子水冲洗，最后用吸水纸拍干。

2. 加样：a. 将底物溶液加入酶标板的相应孔中，通常每个孔加入200-300微升底物溶液。

b. 将待测样品加入酶标板的相应孔中，通常每个孔加入100-200微升样品溶液。

c. 将酶标板放入酶标仪的样品槽中，确保样品与底物充分混合。

3. 设置参数：a. 根据实验要求设置全波长酶标仪的工作波长，通常选择激发波长和发射波长。

b. 设置检测时间，通常为1-5分钟，根据实验要求调整检测时间。

c. 设置温度，根据实验要求设置酶反应的温度，通常为37℃。

4. 启动检测：a. 打开全波长酶标仪的电源，等待仪器自检完成。

b. 在全波长酶标仪的操作界面上选择“开始检测”或“开始运行”，启动检测程序。

c. 观察全波长酶标仪的检测结果，记录荧光信号的变化。

5. 数据处理：a. 根据实验要求计算样品中酶的活性，通常采用单位时间内荧光信号的变化值表示酶活性。

b. 对实验结果进行统计分析，如方差分析、t检验等，以评估实验结果的可靠性。

c. 根据实验结果撰写实验报告，总结实验过程和结果。

6. 清洗和维护：a. 实验结束后，关闭全波长酶标仪的电源，取出酶标板。

b. 使用洗涤液清洗酶标板，然后用去离子水冲洗，最后用吸水纸拍干。

c. 定期对全波长酶标仪进行维护，如更换光源、滤光片等，确保仪器处于良好工作状态。

通过以上步骤，您可以使用全波长酶标仪进行酶活性的测定。

Thermo酶标仪检测luciferase的实验步骤首先介绍一下 Thermo酶标仪。

酶标仪是一种通过特定反应制备出的蛋白质。

它可以通过酶来分解蛋白质，从而使得蛋白质分解为小分子。

Thermo,来自法国，拥有50多年的历史，在全球50多个国家销售。

广泛应用于食品，饮料，饲料，添加剂，生物技术，医药和制药等领域，已成为全球生物技术领域的领军品牌。

Thermo酶标仪应用多项先进技术，可以迅速检测luciferase,而且准确迅速，具有极高的灵敏度与特异性。

适用于各种类型病原的检测。

对于luciferase在多种食物中的检测与分析可以达到快速准确。

例如在果蝇中检测 luciferase最好使用快速灵敏的测试方法; Luciferase在果蝇中主要使用快速灵敏的检测方法; luciferase在哺乳动物中主要使用快速灵敏的检测方法; luciferase在人体外细胞中主要使用快速灵敏的检测方法；在各种酶标试剂中应用最多的是 Luciferase (即人- luciferase)检测法；根据动物来源不同，可以用 luciferase (即人- luciferase)、 luciferase (即 Luciferase- luciferac)、Luciferase (即 Luciferac monocyte)等方式，以及根据人体细胞中表达不同蛋白类型的方法进行检测。

1、试剂准备如需进行生物安全分析，则需准备好相应的生物安全试剂（无菌试剂）。

这些试剂是从正规渠道采购，其采购时间不能太长，否则会影响实验结果的准确性。

生物安全分析所用试剂有三个等级:1)可直接用于细胞水平检查和细胞毒性测试的试剂（用于实验室外的检查）。

2)需符合以下要求：生物安全级别3 (不能在生物制品实验室外进行);可直接用于细胞水平检查和细胞毒性测试的试剂需要通过微生物实验室进行筛选和鉴定才能进行分析；需要注意的是：所需生物安全实验用品必须具有合法检验资质；应具备相应的核酸检测报告和核酸扩增检测资质（如 CDC或PCR);所需实验用品不能用于细胞水平检查和细胞毒性测试；所需试剂是经过专门鉴定而得到、可以用于人、猪、牛、羊、兔等不同来源细胞水平检查的试剂；需按照规范的要求将所需生物安全实验室试剂用来做任何实验；也可以不使用这些试剂，只购买这些试剂中的一种以减少不必要的成本和浪费。

全自动酶标仪(XLx800)1 目的：规范设备操作，确保生产质量和人身安全。

2 适用范围：适用于全自动酶标仪(XLx800)的操作。

3 责任人：设备操作人员及设备维护人员。

4 程序：4.1 编辑检测方案任何一次实验（包括方案和实验数据）都需要以相应的方案（检测的具体程序步骤）为基础,因此实验的第一步就是要打开一个方案或创建一个新的方案。

4.1.1 确保仪器与计算机之间正确连接,打开仪器,待仪器自检完成后,双击Gen5软件图标，打开软件，出现任务管理器。

点击方案，通过“新建...”或“打开”按钮创建新的方案或重新编辑已有方案。

4.1.2 点击新建... ,选择合适的方案类型（在此以标准方案为例），出现方案界面，进行程序、板布局。

数据处理、报告/导出构建器的编辑。

4.1.2.1 双击程序，出现程序界面（根据仪器的配置不同，可以选择的功能按钮为黑色，不能选择的功能按钮变为灰色）：(1) 板类型：在下拉框中选择酶标板的型号和类型，默认为96孔板。

(2) 预先设定：在检测选项中选择检测范围后，检测范围固定。

随时设定：适用于相同的多次实验检测范围不固定的情况，选择后实验开始前再进行检测范围的选择。

(3) 验证：对所编写的程序是否符合逻辑进行有效性的验证，如果不符合则会显示错误的问题在第几步。

(4) 检测：点击检测按钮，进行参数设置。

检测方法：吸收光，荧光，发光。

检测类型：终点，区域扫描，光谱。

检测速度：正常（反复检测8次），快速。

全板：选择检测范围。

光程校准：光程校正（表示对样本孔的值进行光程校正，因为酶标板各样本孔内样本液的高度不一定为1cm，使用该选项，可自动把吸收值校正为光程1cm时的吸收值）。

波长：选择或输入（全波长酶标仪适用）可以同时定义6个检测波长。

区域扫描:选择该功能可以对每个孔进行多次读数，读数的次数通过设置矩阵的大小来控制，读数次数越多准确度越高，但是读板的速度会降低。

光谱：定义扫描的开始，停止波长和步长。

Uranus AE 95酶免仪标准操作规程【1】目的指导操作者正确、安全地使用Uranus AE全自动酶免仪，以确保仪器正常运行，测定结果准确、可靠。

【2】适用范围本科室检验人员。

【3】职责检验室负责人负责培训、指导本室检验人员正确使用BC-5390血液细胞分析仪；检验室工作人员及值班者按此操作规程使用仪器。

【4】样本要求无凝块的血清。

【5】操作步骤5.1 实验前准备工作5.1.1 检查废针桶和废液桶是否清空。

如果没有请清空并进行必要的消毒处理。

5.1.2 准备试剂、阴阳对照和质控的量是否足够，同时确保试剂盒中没有气泡，以免出现漏加的情况。

5.1.3 装针，装针的时候请不要带橡胶手套，以防静电使针装得不稳。

将针盒放到针盒底座处，对比较干燥的地方建议用湿布擦拭一下针的表面。

5.1.4 准备好实验所需的各种洗液。

5.1.5 将标本依次摆放到试管架上，注意在摆放时检查血清是否够量且有无凝块，若需扫描条码，注意条码的方向。

5.2 实验操作过程5.2.1 开启Uranus AE的电源，开启电脑，双击电脑桌面上的若弹出对话框：说明加样针不足，需及时向供应商请购加样针，然后使用发卡器和充针卡充针。

详见“加针步骤”。

5.2.2 点击确定后在桌面弹出的对话框中输入“用户名”及“密码”；用户名为“1”，无需密码，点击“确认”进入主界面。

进入程序后点初始化按钮，观察加样臂和抓手臂的运行是否正常，如果不正常请进行简单的问题排查，无法解决时请联系工程师进行解决。

将准备好的洗板机测试微板放到洗板机上，进入洗板机模块后，运行“洗板机测试程序”观察洗板机的吸液和注液是否正常，如果出现堵孔等情况，请用通针清理后重新测试。

如果出现不吸液、不注液、洗板头运动不正常等现象，请进行简单的排查，问题还是无法解决时请联系工程师给予解决。

5.2.3点主界面中的添加实验组并选择要做的实验组5.2.4 输入标本个数，下一步5.2.5 扫描或手工录入标本的条码。

Bio-TAK-ELX800型全自动酶标仪操作及维护规范1. 引言Bio-TAK-ELX800型全自动酶标仪是一种常用于生物化学和分子生物学实验室中的仪器，广泛应用于酶标法实验。

酶标法是一种基于酶的高灵敏度检测技术，常用于测定蛋白质、核酸、细胞等生物分子的含量、活性和浓度。

为了保证实验结果的准确性和稳定性，操作和维护规范对于酶标仪的正常运行至关重要。

2. 操作规范2.1 仪器准备在进行实验前，需要对Bio-TAK-ELX800型全自动酶标仪进行适当的准备工作。

以下是具体步骤： - 确保仪器正常供电，并接通仪器与计算机之间的通信线。

- 打开仪器电源，等待仪器启动完成。

- 清洁工作台面，并将所需的仪器配件和试剂准备齐全。

- 检查仪器所有电缆和接头，确保其连接牢固。

2.2 样品处理在进行样品处理之前，应根据实验要求和试剂盒说明书准确配制试剂，并按照以下步骤进行样品处理： - 将样品转移到适当的试管或微孔板中。

- 加入适量的试剂，并按照实验要求进行混合和振荡。

- 控制好反应时间和温度，确保结果的准确性。

2.3 仪器设置在进行实验之前，需要根据实验要求对仪器进行相应的设置。

以下是一般的设置步骤： - 打开软件程序，并选择适当的实验模式。

- 设置各项参数，如波长、时间、温度等，根据实验要求进行调整。

- 将样品放入仪器中，并按照实验要求选择合适的孔位。

2.4 实验执行执行实验时，需要按照以下步骤进行操作： - 点击“开始”按钮，开始实验。

- 实时观察仪器运行情况，并注意记录实验数据。

- 确保样品标识的准确性和结果的可追溯性。

3. 维护规范为确保Bio-TAK-ELX800型全自动酶标仪的长期稳定运行，需要进行定期的维护工作。

以下是一些常见的维护规范： ### 3.1 仪器清洁定期对仪器进行清洁，可以保持其表面的整洁和无菌性。

具体操作包括： - 使用干净的软布轻轻擦拭仪器外壳和显示屏。

- 使用去离子水或乙醇轻轻擦拭仪器内壁和检测窗口，确保其干净无尘。

SOP_03-4 酶标分析仪校准的标准操作程序一、目的：确保仪器正常运转与结果的准确性，严格检验质量标准，为临床提供及时、可靠的结果报告。

二、适用范围：免疫检验项目的校准。

三、操作人员：检验科授权工作人员四、操作步骤：一个实验室测定结果的可靠性是由其精密度、准确性及可比性所决定的，一般必需从下面几方面着手：(1)选好测定方法；(2)质量过硬的试剂盒；(3)质优的测试仪器；(4)进行正确的校准；(5)规范化操作；(6)室内质量控制；(7)室间质评活动；(8)一支素质高的队伍。

1 校准：1.1 酶标分析仪与生化分析仪一样，不论如何先进，它还是一个比较器，它测试出来的标本结果是随着标准限的设置不同而变化的。

校准仪器是室内质控的重要部分。

1.2 对于一个临床检测项目，如果其所用方法的测定原理、试剂、仪器、校准品中任何一个不同，都可能得到不同的测定结果。

因此，想要得到准确可靠的测定结果，而该结果又具有与国际、国内其他实验室的可比性，应该建立一个标准测定系统。

鉴于目前的ELISA方法许多测定项目尚无统一的国家标准，在全自动酶标分析仪上应使用配套的试剂和标准品尤其重要，不能乱用。

2 检验方法、仪器和试剂盒的选择：实验室检验应使用最可靠的测定方法，检测仪器须经严格选择和科学的评价。

临床检测中使用的检测试剂（国产和进口）均须是经过国家药品监督管理局批准和中国药品生物制品检定所批批检合格的诊断试剂盒，实验室使用试剂时，应优先选择经过临床评估质量优良的试剂盒。

3 校准方法：实验室中的设备必须定期进行维修与校准，并制定设备维修与校准的制度。

3.1 ELISA洗板机与酶标读数仪是最常用和最重要的仪器，应该设立预防性的维护制度，以保证仪器的正常工作。

方法如下：每天：每次操作要按要求设立对照。

核对酶标仪滤光片波长、检查洗板机管道是否通畅，是否有漏液现象。

每周：清洗仪器表面，保护光学零件，不沾灰尘。

每月：洗涤时检查各孔是否与相应的冲洗头对位良好，负压是否符合规定要求。

性能验证报告单位名称：AAA医院科室名称：检验科实验室：临床微生物室仪器名称：全自动酶标仪型号规格：NEXGEN FOUR仪器编号：WS028验证人员：审核人：批准人：验证日期：2012年8月1日—2012年9月10日AAA医院检验科性能验证报告1. 验证系统基本信息2.1定性实验的符合率、特异性和敏感度的验证：本实验室计算了2010-2011年间参加卫生部临检中心室间质评的对比结果，将两方结果输入表格中通过公式计算各项性能指标。

样本来源：参加卫生部室间质评材料（2010-2011年）果合计 6 24 302.2精密度验证2.2.1批内精密度验证2.2.1.1 验证方法选择丽珠生物技术有限公司的HIV室内质控品和北京康彻思坦生物技术有限公司TP室内质控品在同一批试验内，按规定的操作方法，一天内平行做20个测试相同的样本，计算其x、S与CV。

验证日期：HIV 2012.9.6 TP 2012.8.31验证人员：李继霞、薛炼试剂厂商及批号：HIV上海科华201204021 TP上海科华201112021质控品厂商及批号：HIV丽珠20110801 TP康彻思坦201110005HIV 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10测定结果0.569 0.567 0.595 0.602 0.563 0.571 0.5710.5560.551 0.576 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20HIV、TP定性实验（ELISA）的批内变异CV%均小于10%，符合要求。

2.2.2 批间精密度2.2.2.1 验证方法选择丽珠生物技术有限公司的HIV室内质控品和北京康彻思坦生物技术有限公司TP室内质控品，每天按照常规标本的方法一样测定，连续测定至少20天，计算其x、S与CV。

验证日期：2012.8.1—2012.8.31验证人员：李继霞、薛炼试剂厂商及批号：HIV上海科华201204021 TP上海科华201112021质控品厂商及批号：HIV丽珠20110801 TP康彻思坦201110005HIV、TP定性实验（ELISA）的批间变异CV%均小于15%，符合要求。

酶标仪性能评价与鉴定方法的理论基础及其解释成军孙关忠郑怀竟（南京军区医学检验质控中心、解放军第117医院检验科杭州310013卫生部临床检验中心）摘自《陕西医学检验》1998.13(4)12摘要为提高酶标仪检测结果的室内重复性和增强室间可比性，对已建立的酶标仪性能评价与鉴定的基本方法进行了详细解释和补充，以供同行在评价、鉴定仪器时参考与应用。

关键词酶标仪性能评价鉴定近年来，酶标仪在临床实验室中的应用越来越普及，使得酶免疫分析法（EIA）的自动化程度及精确性愈来愈高，尤其是近几年，进口的、国产的单、多通道全自动酶标仪的种类及型号发展非常迅猛，是临床实验室自动化程度继生化分析仪、血细胞计数仪、血凝仪等之后的又一次更新和提高。

然而，国内外有关酶标仪性能系统评价的方法甚少，有的评价指标简单且不全面，有的对其性能评价所采用的方法不尽一致，导致不同仪器之间、厂家与用户之间、用户与用户之间的评价指标缺乏可比性，这是由于酶标仪在制造工艺（多通道检测器）、测定原理（垂直光路光度测定法）与其它水平光路光度测定的仪器（721分光光度计）之间存在着很大的差别。

因此，我们对国内外几个不同厂家和型号的仪器经过系统研究论证，初步建立了一套较为完善的酶标仪性能评价指标与鉴定的基本方法。

经初步应用，效果满意，应广大读者和用户的要求，拟将酶标仪性能评价与鉴定方法的理论及其原理作一介绍和补充，以供同行在评价、鉴定和使用仪器时参考，从而为进一步提高检测结果的室内重复性和室间可比性提供可靠的保证。

1.方法与原理1.1滤光片波长精度检查及其峰值测定1.1.1方法及其衡量的标准：用高精度紫外可见分光光度计（波长精度±0.3 nm）对不同波长的滤光片进行光谱扫描，检测值与标定值之差即为滤光片波长精度，其差值越接近于零且峰值越大表示滤光片的质量越好，波长精度越高。

1.1.2理论基础：酶标仪的滤光片质量好坏，直接影响仪器的灵敏度高低，而滤光片的质量又是以其波长精度及其峰值指标来衡量的，因此滤光片波长精度及峰值是衡量酶标仪的重要参数之一，这在厂家的仪器说明书中虽未曾提及，但在仪器的实际使用过程中，我们发现对滤光片波长精度和峰值进行检查是重要的也是必要的，通过检查可以发现滤光片的波长标定值与实测值的符合程度，可以发现滤光片的质量是否符合要求。