分子生物学实验室的常规仪器设备及有关操作

分子生物学实验室常用仪器设备简介实验一分子生物学实验室常用仪器设备简介一、实验目的熟悉分子生物学实验室常用仪器并熟练使用二、实验原理1.恒温空气浴摇瓶：用于对温度和振荡频率要求较高的细菌培养、发酵、杂交、生化反应、酶和组织研究。

2、超净工作台：用于分子生物学无菌操作。

3.低温台式高速离心机：用于分离纯化DNA和蛋白质，如分离基因片段、沉淀和回收蛋白酶等。

4、微量移液管：是连续可调的，计量和转移液体的专用仪器，其装有直接读数容量计。

有多种规格：①0.5-10μl②10-100μl③20-200μl④100-1000μl。

5.电泳仪：用于测定大分子物质的分子量和鉴定物种亲缘关系的仪器。

6、pcr仪：用于目的基因的扩增，是一对寡糖核苷酸引物结合到正负dna链上的靶序列两侧，从而酶促合成拷贝数为百万倍的靶序列dna片段。

主要用于基础研究和应用研究等领域。

7.灭菌锅：用于对细菌、细胞培养和核酸实验中使用的试剂、器具和实验仪器进行严格灭菌。

三、实验仪器恒温空气浴摇床、超净工作台、低温台式高速离心机、微量移液管、灭菌罐、PCR仪、电泳仪。

四、实验步骤（一）恒温气浴的使用：1。

将样品瓶牢固地放置在弹簧夹中2、接通电源开关，仪器进入准备状态3、参数设定，（设定温度、时间、转速等参数）4.按开始键启动仪器，按暂停键暂停托盘旋转；5.按下电源按钮，显示屏将消失，关闭主电源开关（二）和超净工作台的使用1、使用工作台时，先经过清洁液浸泡的纱布擦拭台面，然后用消毒剂擦拭消毒。

2、接通电源，提前30分钟打开紫外灯照射消毒，处理净化工作区内工作台表面积15分钟后，关闭紫外线灯并打开送风机。

3、工作台面上，不要存放不必要的物品，以保持工作区内的洁净气流不受干扰。

4、操作结束后，清理工作台面，收集各废弃物，关闭风机及照明开关，用清洁剂及消毒剂擦拭消毒。

5.最后打开工作台紫外线灯，照射消毒30分钟，关闭紫外线灯，切断电源。

（3）低温台式高速离心机的使用1、把离心机放置于平面桌或平面台上，目测使之平衡，用手轻摇一下离心机，检查离心机是否放置平衡。

分子生物学实验平台管理办法分子生物学实验平台是××生命科学院公共开放共享实验平台。

实验室面对全院教师、研究生和本科生开放，为了加强实验室的管理，提高仪器设备的使用效率，根据有关规定，特制定本办法。

一、仪器的管理1.仪器设备是学校固定资产的一部分，仪器设备的管理和使用必须遵守××及学院实验室建设与管理办法。

仪器设备实行校、实验室二级管理，所有仪器设备的操作手册及技术资料原件一律建档保存，随仪器使用的只能是复印件,对仪器设备进行统一分类编号、建卡，并建立仪器设备日记帐。

2.仪器设备的专职管理人员对所管仪器设备应负全部责任，未经相关实验室负责人及管理人员批准许可，任何人不得自行随意移动、调换或借出实验室内的仪器设备。

3.各仪器要根据其保养、维护要求，进行及时或定期的干燥处理、充电、维护、校验等，确保仪器正常运转。

实验室应加强仪器设备的维护保养工作，发生故障应及时报修，以确保仪器设备处于完好状态。

4.保持仪器清洁，仪器的放置要远离强酸、强碱等腐蚀性物品，远离水源、火源、气源等不安全源。

5.实验室根据教学、科研的需要承担相应学科的实验任务，仪器设备做到统一调配、合理使用，提高使用率和发挥设备的高效能二、仪器的使用1.进入分子生物学实验室使用任何仪器，需认真填写实验预约申请，报备需要使用的仪器时间，批准后方可进入实验室使用，使用完毕后予以登记。

每次申请使用时间不得超过1各月，继续使用需再次申请，不得长期占用实验室。

2.使用仪器必须熟悉本仪器的性能和操作方法，学生必须在教师或实验技术人员的指导下按操作规程进行实验。

熟悉操作使用后必须经有关教师和实验人员同意方可进行独立操作。

3.使用仪器设备，必须严格执行操作规程，自觉遵守实验室规则，爱护仪器设备，注意安全，防止意外事故的发生。

任何人不得长期摆放个人设备，不得长期占用实验设备，实验室的任何设备都用于共享。

4.必须严格执行仪器设备运行记录制度，记录仪器运行状况、开关机时间。

实验一分子生物学实验室常用仪器及使用事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。

一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。

下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。

一、冷冻离心机低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。

基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。

在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。

配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。

极限转速20000rpm。

1. 安装与调试离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。

试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。

转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。

2. 操作程序（1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。

（2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。

（3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。

（4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。

在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。

（5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。

分子生物学实验室简介分子生物学实验室是一个专门从事分子生物学研究的实验室，致力于通过对生物分子的研究，揭示生命现象的本质和机制。

分子生物学实验室通常配备了一系列先进的仪器设备和技术，为研究人员提供了一个理想的工作环境，推动了分子生物学领域的发展。

本文将介绍分子生物学实验室的设备和研究内容，并讨论其在科学研究和医学领域中的重要性。

一、实验室设备1. 基础设施分子生物学实验室通常拥有一系列基础设施，包括干净的实验台和工作台、恒温培养箱、高速离心机、特定生物样本的防护罩等。

这些设备为研究人员的实验提供了一个严谨和稳定的工作环境，保证了实验结果的可靠性。

2. 分子生物学实验仪器分子生物学实验室还配备了一系列先进的分子生物学实验仪器，如PCR仪、DNA测序仪、蛋白质电泳仪、核酸纯化仪等。

这些仪器利用生物样本中的DNA、RNA和蛋白质等分子，进行分析和研究。

它们的使用使得研究人员能够更准确地描述生物分子的结构和功能，为研究提供了强有力的实验手段。

二、研究内容1. 基因研究分子生物学实验室主要进行基因研究，该领域关注基因是如何操控生物体的生长、发育和功能的。

实验室通过克隆、表达和纯化特定基因，研究基因的结构、功能和调控机制。

此外，还利用基因工程技术对基因进行改造，探索基因在疾病治疗、农业生产和生物工程等方面的应用潜力。

2. 蛋白质研究蛋白质是生物体内执行各种生物学功能的重要分子。

分子生物学实验室通过对蛋白质的表达、纯化和结构分析，研究蛋白质的结构和功能。

实验室还利用蛋白质工程技术，对蛋白质进行改造，寻找新的生物学功能和药物设计的靶点。

3. DNA和RNA研究DNA和RNA是生物体内遗传信息的携带者，也是分子生物学研究的关键对象。

实验室通过DNA和RNA的提取、放大、测序和基因组分析等技术手段，深入研究基因组、转录组和蛋白质组的结构和功能。

这些研究对于理解遗传信息的传递和转录调控机制非常重要。

三、重要性1. 科学研究分子生物学实验室是推动科学研究的关键力量。

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项一、酶与载体的分装酶类与载体：T载体(50 ng/μl)用灭菌水稀释4倍（12.5 ng/μl）后分装成10 μl 或20 μl；连接酶（solutionΙ）按5 μl分装；dNTP（10 mM）分装成50 μl；无菌水分装成1 ml；注意：（1）所有分装都必须用已灭菌的管。

（2）所有工具酶和载体的使用过程均在冰浴中进行。

（3）工具酶、载体以及试剂盒等实验室共用物品，用完后必须及时放回原处，以免耽误他人使用。

（4）当你发现你使用的是最后一管（盒）公用物品时，请马上告知负责人购买，以免耽误使用。

（5）感受态，氨苄青霉素和IPTG由研究生轮流负责制备。

每人负责六个月。

其他试剂则由第一位使用新包装的同学分装。

由于分子实验工具酶比较容易失活，必须在冰上进行分装。

二、常见抗生素及IPTG的配置以氨苄青霉素为例：1．准备足够量的1.5 ml的EP管、两个100 ml的离心管、0.22 μm水系滤器、注射器、蒸馏水，以上用品均要进行高压灭菌。

2. 洁净工作台紫外灭菌，然后进行以下操作。

3．称取2 g的氨苄青霉素粉末于离心管中，加入灭菌水至总体积为20 ml，轻摇离心管，至氨苄青霉素粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。

4．用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤器安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至100 ml的离心管中。

注意：动作要缓和，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。

5．把100 ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到1.5 ml的EP管中，每管0.5 ml。

在EP管上做好标记，包括名称、浓度、日期等。

6．把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。

注意：当你发现你使用的是最后一管抗生素时，请马上告知有关人员及时配制，以免耽误使用。

表1.常见抗生素的储存浓度及工作浓度名称储存浓度工作浓度氨苄青霉素（ampicillin）100 mg/ml 50 μg/ml～100 μg/ml卡那霉素（kanamycin）10 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml氯霉素（chloramphenicol）25 mg/ml 12.5 μg/ml～25 μg/ml链霉素（streptomycin）50 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml四环素（tetracyyline）10 mg/ml10 μg/ml～50 μg/mlIPTG 1 M 0.05-0.6 mM五、基因扩增1．引物与合成：设计引物序列，发至生工公司进行合成（jinan@）。

分子生物学实验室安全操作规范分子生物学实验室是进行生物大分子制备和分析常用技术、蛋白质与核酸的提取与分离、PCR技术、分子杂交与印迹技术、分子克隆技术、外源基因转移技术、蛋白质表达技术、分子标记技术、分子改造技术、测序及人工合成技术、基因组学技术、蛋白质组学技术、生物芯片技术、生物信息学技术、RNA研究技术和电泳检测等的场所，所有进入实验室的工作人员均应遵守必要的操作规范，现在就让未名雷蒙特带您来了解一下:1. 配制有毒挥发性溶液必须在通风橱内进行。

2. 使用实验室仪器设备要严格遵守操作规程，认真填写仪器设备使用记录。

使用精密贵重仪器设备，必须预约，并由专门负责的工作人员上机操作。

3. 实验室产生的工作废液及有毒有害物质，应在安全负责人的指导下妥善处理。

4. 在进行凝胶成像时，必须用保鲜膜把胶包好或用保鲜膜将胶和透照台隔开，确保不污染成像系统。

5. 实验过程中必须穿着工作服。

进行有毒、有害、有刺激性物质或有腐蚀性物质操作时，应戴好防护手套。

6. 由于实验过程中使用溴化乙锭(EB)、丙烯酰胺等有害物质，所有与此有关的操作必须带手套，在特定区域内完成，严禁将接触过此类物质的手套或其他杂物带出工作区。

7. 实验人员未经许可，不得随意动用专用实验的物品。

不得私自配制实验室各房门、抽屉、柜子钥匙，不得私自在实验室内安装其它设备。

8. 爱护仪器设备，节约实验材料，仪器设备如有损坏，要及时报告登记。

如发生意外事故，应立即采取必要措施，并及时报告实验室负责人、值班人员和报警。

9. 实验完毕后做好整理工作，关闭电源、水源、气源和门窗。

10. 工作结束后，清理使用过的台面及区域, 保持整洁。

实验室要保持安静、卫生，严禁在室内吸烟、饮食，严禁随地吐痰、大声喧哗。

分子生物学仪器设备安全操作规定分子生物学是研究分子结构、复杂的细胞和生物体的分子机制的学科。

随着现代科技的不断发展，分子生物学仪器设备得到广泛的应用。

为保障工作人员安全，本规定旨在规范分子生物学仪器设备的安全操作。

1. 培养箱安全操作1.1 保持清洁卫生培养箱作为实验室常用设备之一，在使用时应保持清洁卫生。

使用前应检查箱内是否有废弃物、杂物或污垢。

使用后应定期清洁箱体、观察口和照明系统，并保持培养箱内部干燥。

1.2 正确设置温度与湿度在使用培养箱时，应按照实验的需要正确设置温度和湿度。

使用前，应确认培养箱的温控及湿控系统均能正常工作。

设置温度和湿度时，应按照实验的需要，并确保设置正确。

1.3 避免过度装填在使用培养箱时，应避免过度装填，以免影响温控及湿控系统的正常工作，导致培养箱内部温度过高或过低，影响实验结果。

1.4 定期检查及维护为确保培养箱的正常工作，应定期检查温控及湿控系统的工作状态，并进行必要的维护。

若发现系统出现故障，应及时联系维修人员进行维护。

2. 离心机安全操作2.1 正确安装试管在使用离心机时，应确保试管正确安装在离心盘中，并确保离心盘平衡。

使用时避免过度转速和离心时间。

2.2 控制离心速度在使用离心机时，应按照实验需求控制离心速度，不宜过高或过低。

离心前应检查离心机转速表是否正常并调整速度。

在离心时，应关注离心机的运转情况，随时注意是否有异常情况。

2.3 预防样本泄漏在离心机转动时，试管内样本之间的力可能会相互作用，导致样本泄漏。

为了避免样本泄漏，应选择合适的离心管和离心机，同时注意安装离心管以及离心盘的角度和长度，使之尽可能的固定。

2.4 定期维护为确保离心机的正常工作，应定期检查机器运转情况，及时清洗离心盘、离心机转轴等易受污染的部分，确保离心机延长使用寿命并不影响实验结果。

3. PCR仪安全操作3.1 正确设置温度及时间在使用PCR仪时，应按照实验设计的参数设置温度和时间，确保PCR反应的可靠性。

分子生物学实验的使用注意事项引言：分子生物学实验是研究生物体内分子结构、功能和相互作用的重要手段。

然而，由于其涉及到微小而复杂的生物分子，实验过程中需要注意一系列的细节和技巧，以确保实验结果的可靠性和准确性。

本文将从实验前的准备工作、实验操作、实验设备和实验数据分析等方面，探讨分子生物学实验的使用注意事项。

一、实验前的准备工作1. 实验室环境准备：分子生物学实验需要在无菌、干净的环境中进行，因此实验室应保持整洁，工作台面、仪器设备和试剂容器等都要经过消毒处理。

2. 试剂准备：选择高纯度的试剂，确保其质量稳定。

同时，注意试剂的储存条件和有效期限，避免使用过期试剂或储存不当的试剂。

3. 实验方案设计：在进行实验前，要制定详细的实验方案，包括实验步骤、所需试剂和设备、实验时间等。

合理的实验方案可以提高实验效率和准确性。

二、实验操作1. 个人卫生和实验操作规范：在进行分子生物学实验前，必须进行充分的个人卫生，洗手并穿戴实验服、手套和口罩等防护用品。

此外，遵守实验室的操作规范，如不吃东西、不随意触摸面部等。

2. 操作技巧：分子生物学实验中，常涉及到微量试剂的操作，因此需要掌握准确的体积计量技巧和移液技巧。

同时，注意避免试剂的污染和交叉污染，避免误操作导致实验结果的不准确。

3. 温度控制：在一些分子生物学实验中，需要对试剂和样品进行温度控制，如PCR反应、酶切反应等。

因此，要掌握好温度控制设备的使用方法，并严格按照实验方案中的要求进行操作。

三、实验设备1. 仪器设备的校准和维护：实验仪器设备的准确性和稳定性对实验结果至关重要。

因此，在进行实验前，要对仪器设备进行校准，并定期进行维护保养，确保其正常运行。

2. 试剂储存和保存：分子生物学实验中使用的试剂需要储存和保存在适当的条件下，如低温、避光、密封等。

同时，要注意试剂的有效期限，避免使用过期试剂影响实验结果。

四、实验数据分析1. 数据记录和整理：在进行实验过程中，要及时记录实验操作和观察结果，并进行详细的数据整理。

实验室分子生物学实验基本操作规范及注意事项一、酶与载体的分装酶类与载体：T载体(50 ng/μl)用灭菌水稀释4倍（12.5 ng/μl）后分装成10 μl或20 μl；连接酶（solutionΙ）按5 μl分装；dNTP（10 mM）分装成50 μl；无菌水分装成1 ml；注意：（1）所有分装都必须用已灭菌的管。

（2）所有工具酶和载体的使用过程均在冰浴中进行。

（3）工具酶、载体以及试剂盒等实验室共用物品，用完后必须及时放回原处，以免耽误他人使用。

（4）当你发现你使用的是最后一管（盒）公用物品时，请马上告知负责人购买，以免耽误使用。

（5）感受态，氨苄青霉素和IPTG由研究生轮流负责制备。

每人负责六个月。

其他试剂则由第一位使用新包装的同学分装。

由于分子实验工具酶比较容易失活，必须在冰上进行分装。

二、常见抗生素及IPTG的配置以氨苄青霉素为例：1．准备足够量的1.5 ml的EP管、两个100 ml的离心管、0.22 μm水系滤器、注射器、蒸馏水，以上用品均要进行高压灭菌。

2. 洁净工作台紫外灭菌，然后进行以下操作。

3．称取2 g的氨苄青霉素粉末于离心管中，加入灭菌水至总体积为20 ml，轻摇离心管，至氨苄青霉素粉末完全溶解，以免过滤时堵塞滤膜。

4．用注射器吸取配制好的溶液，然后把滤器安在注射器上，缓缓推动注射器活塞，把溶液经滤膜推至100 ml的离心管中。

注意：动作要缓和，使滤出液出口正对着离心管，还要防止染菌。

5．把100 ml离心管中已除菌的氨苄青霉素溶液分装到1.5 ml的EP管中，每管0.5 ml。

在EP管上做好标记，包括名称、浓度、日期等。

6．把做好标记的盛有氨苄青霉素的EP管于-20℃保存。

注意：当你发现你使用的是最后一管抗生素时，请马上告知有关人员及时配制，以免耽误使用。

表1.常见抗生素的储存浓度及工作浓度名称储存浓度工作浓度氨苄青霉素（ampicillin）100 mg/ml 50 μg/ml～100 μg/ml卡那霉素（kanamycin）10 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml氯霉素（chloramphenicol）25 mg/ml 12.5 μg/ml～25 μg/ml链霉素（streptomycin）50 mg/ml 10 μg/ml～50 μg/ml四环素（tetracyyline）10 mg/ml10 μg/ml～50 μg/mlIPTG 1 M 0.05-0.6 mM三、分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制分子生物学实验中各种试剂与溶液的配制参见《分子克隆》。

分子生物学仪器操作保养规程前言分子生物学是生物学领域中最有前途和发展性的研究领域之一，与之相关的仪器设备相当重要。

不仅要掌握正确的操作方法，同时还要做好仪器设备的保养工作，以确保仪器设备的正常运行、延长使用寿命、提高工作效率、减少出错率。

本文档主要介绍一些分子生物学常用仪器的操作方法和保养规程。

PCR 仪操作保养规程PCR 仪是分子生物学实验中应用广泛的仪器之一，以下是对运用PCR 仪的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.在操作 PCR 仪前，确保手部清洁，并且戴好实验手套。

2.充分调节 PCR 仪的温控系统，设定好所需的反应体系工作温度和时间。

3.冷启动 PCR 仪时，将样品轻轻地放进去，不要用太大的力气，以免破坏样品。

4.加热启动 PCR 仪时，盖好盖子，不要露出样品才能开始加热。

保养规程1.每次操作完后，及时关闭PCR 仪，清理样品位和仪器表面。

2.请勿使用水、挥发类液体等有危险性的溶剂来清理仪器表面，使用湿布或稀释的消毒酒精。

3.PCR 仪在日复一日的使用中，热风扇的使用概率比较大，需要及时清理热风扇。

4.接通电源时，要注意与电器专线相连，要避免与大功率电器共用一条线路，以避免电路过载导致故障。

稳态离心机操作保养规程稳态离心机也是分子生物学常用的仪器之一，以下是对稳态离心机的操作和保养的一些常规规程：操作规程1.操作机器离心前，需要查验离心机内和离心机转盘是否松动。

2.不同标本、转速、离心时间均有相应的程序，需根据自己的实验需求做好合理的设定。

3.启动离心机时，先放入标本或试管，然后将转盘固定。

4.从小转速到大转速逐渐加速，避免汽车抛锚现象。

5.离心结束之后，要等待离心机转速慢慢降下来，然后再轻轻地开盖取出标本。

保养规程1.在稳态离心机使用和保养中，检查离心机盘是否均匀摆置，避免盘摆不平。

同时，避免震动和模拟运动等原因导致离心机系统产生不稳定性问题。

2.注意离心机所有零部件之间的协调配合，并尽量避免不合适的装配、拆卸或掉落。

实验一分子生物学仪‎器的使用及原‎理一、实验目的1.学习认识分子‎生物学实验室‎的仪器设备2.了解分子生物‎学仪器设备使‎用的注意事项‎二、主要仪器设备‎1.普通离心机2.无菌操作台3.高速冷冻离心‎机4.PCR仪5.恒温振荡摇床‎6.真空干燥箱7.恒温水浴锅8.紫外分光光度‎计9.微波炉10.微量移液器11.Eppend‎o r f管12.高压灭菌锅13.电泳仪14.凝胶成像系统‎15.紫外仪三、实验报告要求‎写出分子生物‎学主要仪器设‎备的使用注意‎事项实验二：质粒（pEGFP-N1）的提取与酶切‎一. 实验目的1.了解碱裂解法‎提取质粒的基‎本原理和主要‎应用，掌握碱裂解法‎提取质粒的实‎验方法和各种‎试剂在提取过‎程中的作用。

二. 实验原理碱裂解法是利‎用细菌染色体‎D NA与质粒‎D NA结构的‎大小差异来分‎离质粒DNA‎的。

碱性（pH 12.0～12.5）条件可以破坏‎碱基配对，宿主和质粒D‎N A的碱基之‎间的氢键被破‎坏。

当条件恢复正‎常时（加入酸性试剂‎中和），共价闭合环状‎的质粒DNA‎会迅速准确地‎恢复配对，重新形成完全‎天然的超螺旋‎分子；而较大的细菌‎染色体DNA‎分子则难以复‎性，会交联形成不‎溶于水的线团‎结构，缠绕附着在细‎胞壁碎片上，离心时易被沉‎淀下来，而质粒DNA‎则留在上清液‎中，用异丙醇沉淀‎、70 %乙醇洗涤即可‎获得质粒DN‎A。

三. 仪器设备微量取液器（2 μL；20 μL；200 μL；1 000 μL），tip头，手掌型离心机‎，1.5 mL 离心管, 恒温水浴，制冰机，超净工作台，恒温培养箱。

振荡器，离心机，金属浴，电泳仪，凝胶成像仪。

四．实验试剂1.溶液Ⅰ：50 mmol/L葡萄糖；20 mmol/L Tris·HCl（pH = 8.0）；10 mmol/L EDTA（pH=8.0），高压蒸汽灭菌‎（121 ℃，0.105 Mpa）20 min。

1培养箱在分子生物学试验中,有很多反应都是在特定温度下进行的,这时就需要一个控温的装置.例如：用于细菌的平板培养,我们通常设定为37℃于培养箱倒置培养；其他分子生物学实验如酶切等需要25℃,30℃,37℃等条件.2冰箱冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器.分子生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存.具体来说,不同温度下保存的物品如下：a.4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等.b.-20℃适用于某些试剂、药品、酶、血清、配好的抗生素和DNA、蛋白质样品等.c.-80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、纯化的样品、特殊的低温处理消化液,感受态等的保存.d.0-10℃的层析冷柜适合低温条件下的电泳、层析、透析等实验.3摇床摇床是实验室常用仪器,一般有常温型和低温型两种.对于分子生物学实验室,如果能配置低温型摇床,就可以适应不同的实验需求.例如：用于大肠杆菌,酵母菌等生物工程菌种的振荡培养及蛋白的诱导表达,培养通常为28度和37度,诱导表达需要20-37度；在感受态的制备过程中,需要有18度的温度控制；用于蛋白凝胶的染色脱色时振荡,常温使用；用于大肠杆菌常规转化时振荡复苏,常为37度.对于控制温度低于室温时,我们需要低温型摇床来控温.4水浴锅水浴锅也是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分.例如,用于42度的大肠杆菌转化时的热激反应；用于DNA杂交过程中水浴控温.5烘箱烘箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干.烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择.例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干；用于RNA方面的实验用具,需要在250℃烤箱中烘干.6纯水装置纯水装置包括蒸馏水器和纯水机.蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守；纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水.纯水使用也有不同的级别,一般实验用水需要纯水,用于PCR、DNA测序、酶反应均需要超纯水.7灭菌锅分子生物学所用到的大部分实验用具都应严格消毒灭菌.包括实验物品、试剂、培养基等.灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的.用户需要根据自己的需要选购.8天平天平用于精确称量各类试剂.实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别.9液体量器液体量器用于精密量取各类液体.常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯.10pH计用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性.有时也需要利用pH 计测定样品溶液的酸碱度.11分光光度计分光光度计通过测定吸光值,从而用于分析样品核酸和蛋白的含量及纯度；同时也可以测定培养菌液的浓度.12离心机离心机有冷冻和常温之分.主要用于收集微生物菌体、细胞碎片以及其他沉淀物.有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境.例如在感受态制备过程中必须保证低温环境,所以需要冷冻离心机.13超净工作台分子生物学中凡是涉及对细菌的操作均需在超净工作台下完成,还有感受态制备,转化反应等,都需要无菌的环境.14电泳系统实验室常用的电泳主要是三种：水平电泳用于核酸DNA/RNA的琼脂糖电泳检测；垂直电泳用于蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳检测；转印电泳用于将蛋白转印到膜上做western 检测.15PCR仪PCR仪有不同的类型,分别用于不同的实验.普通和梯度PCR仪用于基因克隆和基因检测过程中DNA/RNA的扩增.荧光定量PCR仪用于核酸定量分析、基因表达差异分析、单核苷酸多态性检测、甲基化检测.原位PCR仪用于鉴定和定位带有靶序列的细胞在组织中的位置.16凝胶成像分析系统/紫外检测仪凝胶成像系统用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶和蛋白聚丙烯酰胺凝胶的观察和拍照,有些可以进行切胶操作.紫外检测仪可以用于对染色后的核酸琼脂糖电泳胶的观察,胶回收时切胶操作,但是不能连接电脑拍照.17制冰机实验室常用的是雪花制冰机,制冰机一般是按每日制冰量分成不同型号.分子实验室中制造大多数核酸、蛋白质的实验操作所需的低温环境,以减少核酸酶或蛋白质酶的水解.感受态制备也需要长时间冰浴.18磁力搅拌器在配置试剂过程中,有些试剂较难溶解,这时需要借助磁力搅拌器.磁力搅拌器可以加速溶解固体内容物.磁力搅拌器一般带加热功能.19生物安全柜分子实验中涉及的试剂和样品很多是有毒的,对于操作人员来说伤害较大.为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护.20微波炉和电炉用于溶液的快速加热,电泳琼脂糖凝胶的加热溶化配制,固体培养基的加热溶化.21液氮罐分子生物学实验中感受态细胞的制备需要液氮处理.感受态的保存也可以存于液氮中.22微管移液器微管移液器也有不同型号,是用于准确量取特定体积的溶液.。

《分子生物学》实验讲义实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍实验二质粒DNA分离纯化实验三琼脂糖凝胶电泳实验四聚合酶链反应(PCR)检测质粒DNA实验五限制酶切鉴定质粒DNA实验一分子生物学实验基础知识及常用仪器介绍一、实验目的了解分子生物学实验特点，了解分子生物学实验室常用设备及基本实验操作。

二、实验内容1.分子生物学实验知识⑴严格操作规程分子生物学实验一般比较复杂，如所用试剂多、操作步骤多、实验时间长等，因此为保证实验效果，在实验室中一定要有整体观念，严格按照操作规程进行。

⑵耐心细致操作实验中不能急于求成，特别是对于初入门者，应反复操作，积累经验。

⑶习惯微量操作在分子生物学实验中，试剂的用量往往很少，常常细到1ul液体、ug或ng固体，这是平常肉眼很难看到的，所以刚刚接触实验的人往往感到不习惯，总是担心要取的东西能否看到、准不准确，操作的样品会不会丢失，总是想加大反应体积，以为越多越好。

这些观念都是错误的。

只有定时定量加入液体，才能保证实验成功，所以平时应加以练习，逐渐建立微量操作的观念才能解决好问题。

⑷防止实验污染分子生物学实验的对象主要是核酸，不同生物材料的DNA和DNA之间，不同的样品之间，核酸酶等蛋白酶与核酸之间，产物与反应物之间都有可能造成污染，最终导致实验的失败。

故要从所用试剂、仪器设备、耗材及操作人员等方面进行防止污染的操作。

⑸正确处理试剂分子生物学实验中对试剂的要求十分严格，包括试剂的等级、配制、除菌储备等各方面均有严格要求。

⑹注意实验安全分子生物学实验中，操作者常会接触一些对人体有害的试剂，必须实验安全要求进行实验操作，否则会给实验室甚至整个人类带来巨大的危害。

2.分子生物学实验常用仪器介绍⑴微量取液器⑵水纯化装置（离子交换器、超纯水装置）⑶离心机（低速、高速、超速）⑷电泳装置（电泳仪、电泳槽）⑸灭菌设备（高压蒸汽灭菌锅、过滤除菌器）⑹超净工作台⑺PCR仪⑻凝胶成像系统（紫外分析仪、核酸凝胶电泳图谱的记录）⑼温度控制设备（冷冻设备、培养箱、水浴箱、烤箱）⑽其它设备（紫外可见分光光度计、微波炉、凝胶干燥器、真空干燥仪）3.分子生物学基本实验操作⑴基因组DNA的分离与纯化（核酸浓度和纯度测定）⑵真核细胞mRNA的分离与纯化⑶质粒DNA的提取⑷PCR基因扩增实验⑸限制性内切酶酶切实验⑹DNA重组技术⑺DNA转移技术⑻DNA测序：化学法、双脱氧链终止法⑼核酸探针的制备技术：末端标记、PCR法制探针、非放射性探针⑽分子杂交技术：Southern印迹、Northern印迹和Western印迹4.微量移液器的使用可调节微量移液器标准操作程序（适用的液体：水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液）：⑴调节数字至所需体积；⑵装上吸嘴（不同规格的移液器用不同的吸头），注意气密性）；⑶按到第一档，垂直进入液面几毫米；⑷缓慢松开控制按钮（否则液体进入吸头过速会导致液体倒吸入移液器内部吸入体积减少）；⑸停顿1s后将吸嘴提离开液面；⑹平稳按压打出液体。

实验室常用设备操作保养规程实验室的常用设备在进行实验和研究时扮演着重要的角色，因此需要定期进行保养和操作规范。

下面将列出几种常见的设备，并阐述其操作和保养规程。

1. 显微镜显微镜使用较为频繁，在使用前需检查镜头、目镜和物镜是否干净，如有污渍及时清洗。

操作时，要使用手轮缓慢移动样本，不要使用手指直接触碰物镜或物镜转接部分。

操作完毕后需关闭灯光、保持物镜和舞台的清洁和干燥。

每两周需用气温粉末清洗镜头和目镜，并要定期进行光路的调整和对焦。

2. 电子秤电子秤是实验室中常用的物质计量工具，使用时需注意防止物体摔落在称盘上造成损坏。

操作时应佩戴防静电手环或使用防静电地垫，不要将电子秤直接暴露于阳光下或接近电磁场。

使用后应定期进行校准和清洁，并及时更换电池以保证准确的称量结果。

3. 离心机离心机是实验室中重要的分离设备，使用时需注意保持设备平稳，不要超载或过速旋转。

操作前需检查离心管是否密闭，不要使用带有损伤或松动的离心管。

使用完毕后需将离心机内外清洗干净，特别是转子和离心管等易滋生细菌的部分。

每月需进行一次离心机的全面清洁和消毒。

4. 恒温槽恒温槽常用于生化实验和细胞培养，使用时需严格按照设备说明进行设置。

操作前需检查水位和温度控制系统是否正常，避免因水位过低或过高造成设备损坏。

使用完毕后需及时清空水槽内的残留物和水，定期对温度控制系统进行校准和维护。

定期更换水质较差的实验室水以避免水质的影响。

5. 温箱温箱是常见的加热设备，使用前需确认设备是否接地，保证安全使用。

操作时不要将样品直接放在加热管上，应选用合适的容器进行加热。

使用完毕后应及时清洗设备内部，特别是加热管和容器内壁的清洁，以保证下一次使用的卫生。

6. pcr仪PCR仪是分子生物学中常用的设备，操作时需注意避免震动和物品的摇晃，不要在使用过程中将手指伸进仪器内部。

使用完毕后需进行清洁和消毒，特别是优化温度环节和反应管的清洗。

定期检查设备的温度传感器和其他重要部件是否正常工作。