作物分子设计育种(精)
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分子标记在作物育种中的应用作物育种是改良作物种质的重要手段,通过对作物的遗传基础的深入研究,运用现代生物技术手段,筛选出具有优良性状基因的优良种质材料,从而加速有关作物的育种进程。
在现代生物技术手段中,分子标记技术在作物育种中扮演了非常重要的角色。
本文将介绍分子标记在作物育种中的应用。
一、分子标记简介分子标记是指与基因组中某个特定区域或特定性状相关的DNA序列片段。
这种技术可以用于确定个体间的遗传差异,进行基因型鉴定,进而确定等位基因种类及其比例。
通过分子标记技术,可以确定物种间的基因组组成和遗传的联系,并且还可以对单个个体的基因组进行分析和定位,制定具体的育种策略。
分子标记技术在育种材料鉴定和筛选中有着广泛的应用。
习惯上,育种过程需要大量的物种杂交,然后去通过后代材料中的遗传差异进行筛选、后代选择和提高纯度。
这种育种方法需要大量的时间和耗费大量的资源。
而采用分子标记技术,可以大大提高材料筛选的速度和效率。
远缘杂交后代中的有些个体通常会表现出可喜的性状,但是由于其他不良的遗传特征,基本上是无法继续进行育种的。
这个时候,分子标记技术就可以对杂交后代的DNA样本进行分析,从而确定哪些个体的基因组组成更加适合于后续育种筛选工作。
2. 分子标记在基因型分析和遗传图谱绘制中的应用在作物遗传基础的研究中,分子标记技术在基因型分析和遗传图谱绘制中的应用日益广泛。
通过分子标记技术,可以分析大量的遗传标记,确定不同基因型间的遗传差异,对遗传多样性和相关性进行统计分析,最终清晰地绘制出遗传图谱,揭示了不同群体间的遗传关系。
遗传图谱的绘制对于作物育种的后续研究至关重要,能够帮助育种人员了解群体内的基因性状分布情况,确定功能多样的分子标记,确保育种目标的达成。
3. 分子标记在杂交组合选择中的应用分子标记在杂交组合选择中的应用同样十分重要。
通过分析杂交后代的DNA序列,可以细致地分析出每个基因型对数量性状、质量性状、抗病性等性状的影响,并且还可以计算各基因型的复杂性状遗传度。
通过分子设计育种实现作物品质的改良作为人类的重要食物来源,作物的品质对于我们的生活质量和健康至关重要。
然而,传统的育种方法往往需要很长时间才能实现作物品质的改良。
然而,随着科学技术的进步,分子设计育种作为一种新兴的育种方法,为加快作物品质改良提供了新的途径。
分子设计育种是通过对作物基因组的分析和编辑,以及对关键基因的甄选和改良,来实现对作物品质的精准改良。
这种育种方法结合了遗传学、基因组学和生物信息学等多个学科的技术手段,利用大数据分析和高通量测序等先进技术,可以更加深入地了解作物的基因组结构和功能,从而找到影响作物品质的关键基因。
分子设计育种的核心思想是找到与作物品质相关的关键基因,并对其进行精确的编辑和改良。
通过基因编辑技术如CRISPR/Cas9等,研究人员可以直接对目标基因进行精确的编辑,从而实现对作物品质的改良。
例如,通过编辑水稻中控制粮米产量的基因,可以实现水稻的高产品种的育成;通过编辑番茄中控制品质的基因,可以提高番茄的口感和营养价值。
除了基因的编辑,分子设计育种还包括了对关键基因的甄选和改良。
通过对作物基因组的全面分析,研究人员可以确定与作物品质相关的候选基因。
随后,利用基因编辑技术和其他遗传技术,可以对这些候选基因进行改良和优化,进一步提高作物的品质。
例如,通过对小麦中控制面团质量的基因进行改良,可以生产出更好的面包用小麦品种。
分子设计育种不仅可以改良作物的品质,还可以增加作物的耐逆性。
面对日益恶化的环境和气候变化,作物的耐逆性一直是育种的重要目标之一。
分子设计育种可以通过识别和改良与抗逆性相关的基因,为作物育种提供新的策略。
例如,通过改良水稻中控制抗旱能力的基因,可以培育出耐旱水稻品种,提高水稻的产量和适应性。
此外,分子设计育种还可以减少对化学农药和化肥的依赖。
作为传统育种的副产品,往往需要大量的化学农药和化肥来保护作物的生长和产量。
然而,这些化学品的使用不仅会给环境造成污染,还会对人类健康产生潜在的威胁。
一、作物分子育种作物育种基本任务:1.在研究和掌握作物形状遗传变异规律的基础上,发掘研究和利用作物种植资源;2.选育优良品种或杂种以及新作物;3.繁殖生产用种。
作物分子育种:即在经典遗传学和分子生物学等理论指导下,将现代生物技术手段整合于传统育种方法中,实现表现型和基因型选择的有机结合,培育优良新品种。
分子标记育种:又称为分子标记辅助选择,是利用与目标基因紧密连锁的分子标记,在杂交后代中准确鉴别不同个体基因型,从而进行辅助选择育种。
特点:能有效结合基因型与表现型鉴定,显著提高选择的准确性。
转基因育种:利用基因重组DNA技术,将功能明确的基因通过遗传转化手段导入受体品种的基因组,并使其表达期望形状的育种方法。
特点:能打破基因不同物种交流障碍,克服传统育种的困难问题。
分子设计育种(刚起步):目的——通过各种技术的集成与整合,在育种家的田间试验之前,对育种程序中的各种因素进行模拟、筛选和优化,确立目标基因型,提出最佳亲本选配和后代选择策略,提高育种试验可见性。
我国作物分子育种中存在的问题:1.基因资源挖掘力度有待加强;2.实用分子标记和具重要育种价值的基因十分贫乏;3.作物分子育种技术尚待突破;4.通过分子育种培育的突破性品种不多,产业化程度不高;5.作物分子育种的组织体系和实施机制需要创新。
作物分子育种意义:1.发展作物分子育种是保障国家安全的重大需求;2.全面实现作物分子育种相关技术突破;3.加速作物分子育种研发和产业化。
常规育种和分子育种比较:1.常规育种表现型选择时,会受时空因素影响,而分子育种不会;2.常规育种来源广,育种亲本贫乏;分子育种基因来源广,基因资源丰富。
3.常规育种基因局限于种内,少数局限于亚种间;分子育种基因交流不受物种限制。
4.常规育种目标性状有不明确性;分子育种目的基因功能已知,目标性状明确。
5.最明显特征:常规育种选择时间长;分子育种选择时间短,可调控基因及其产物的功能、表达。
农作物分子设计及快速稳定育种技术
农作物分子设计是一种利用分子生物学和遗传学技术对农作物进行改良的方法。
它通过对作物基因组的分析和编辑,能够精确地修改或插入特定的基因,从而使作物具有特定的性状或抗病虫害能力。
快速稳定育种技术是一种利用现代生物技术加速作物育种过程的方法。
它包括基因组学和基因编辑技术、高通量测序和分析方法、高效筛选和选择方法等。
这些技术可以帮助农业科学家更快地识别有用的基因和性状,从而加速作物育种和品种改良的过程。
农作物分子设计和快速稳定育种技术的应用可以帮助农业产业高效地改良作物品种,提高产量和品质,增强作物的抗逆性和抗病虫害能力,减少农药和化肥的使用量,以及提高农业可持续发展能力。
然而,农作物分子设计和快速稳定育种技术也面临着一些伦理和安全问题,包括对环境和人类健康的潜在风险,以及对遗传资源和农民权益的影响。
因此,在使用这些技术的同时,需要建立相应的监管政策和安全标准,确保其可持续和安全的应用。
分子标记辅助育种技术分子标记辅助育种技术是在水稻、小麦、玉米、大豆、油菜等重要作物上,通过利用与目标性状紧密连锁的DNA分子标记对目标性状进行间接选择,以在早代就能够对目标基因的转移进行准确、稳定的选择,而且克服隐性基因再度利用时识别的困难,从而加速育种进程,提高育种效率,选育抗病、优质、高产的品种。
(一)发展回顾我国的农作物分子标记辅助育种的研究始于90年代初,在过去的近十年时间里,取得了重要的研究进展:1.构建了水稻等作物的染色体遗传图谱;2.构建了水稻染色体物理图谱;3.利用分子标记对我国作物种质资源遗传多样性进行了初步的研究;4.对一些重要的农艺性状进行了定位、作图与标记,相应的基因克隆已在进行。
在基因组计划开展以来的短短的几年时间内,主要农作物的遗传连锁图的绘制均已完成。
1996年我国用RFLP标记对水稻进行作图,构建了水稻12条染色体的完整连锁图。
此后,又构成了有612个标记的水稻遗传连锁图,较好地满足水稻遗传育种工作的需要。
除水稻之外,还绘制了谷子的RFLP连锁图。
构建了大豆分子标记遗传框架图、小麦野生近缘植物小伞山羊草的连锁图以及小麦的第1、第5、第6染色体部分同源群RFLP连锁图等。
1997年,利用广陆矮4号水稻品种构建的BAC文库,建立了631个长度不同的跨叠群。
用水稻遗传图谱上的RFLP标记及STS标记确定了631个跨叠群在水稻12条染色体上的位置,绘制出了水稻的染色体物理图。
该物理图长为352284Kb,覆盖了水稻基因组的92%。
我国近年来对作物的重要性状,如育性基因、抗性基因及产量性状基因的作图与标记方面开展了大量研究工作。
在育性方面,找到了与光敏核不育水稻的光敏不育基因位点连锁的RFLP标记。
定位了水稻不育系5460F的育性隐性单基因tms1,并找到与之紧密连锁(1.2cM)的RFLP标记。
定位水稻野败不育系恢复基因的两个主效基因Rfi3和Rfi4,初步确定了与其中Rfi3基因紧密连锁(2.7cM)的RFLP标记,并已转化为STS标记。
通过分子设计育种实现作物产量的提高在农业领域中,作物产量的提高一直是人们关注的焦点。
为了满足全球不断增长的人口需求,传统的农业方法已经无法满足全球粮食安全的需求。
因此,寻求一种新的育种方法是至关重要的。
分子设计育种作为一种新兴的育种方法,具有巨大的潜力来改善作物产量。
分子设计育种是利用分子生物学和基因工程技术来调控作物的遗传特性以实现产量的提高。
通过对作物基因组的分析,我们可以了解作物的遗传信息,进而进行精确的基因编辑和调整。
下面将讨论一些常见的分子设计育种方法来实现作物产量的提高。
首先,基因编辑技术是分子设计育种的重要工具之一。
利用CRISPR-Cas9系统,研究人员可以通过对特定基因的编辑来改变作物的性状。
例如,通过抑制一个抑制生长的基因,我们可以促进作物的生长并提高产量。
此外,通过编辑抗虫基因或提高作物抗病能力的基因,还可以减少作物遭受虫害和病害的损失,进一步提高产量。
其次,利用转基因技术来改善作物产量也是分子设计育种的重要手段之一。
通过向作物中引入外源基因,可以增加作物对营养物质的吸收能力或提高作物的抗逆能力。
例如,将一种能够增强作物对氮素利用效率的基因转移到作物中,可以有效提高作物在氮限制条件下的产量。
此外,转基因技术还可以用于提高作物的耐盐性、耐寒性和耐旱性等,以应对不同的环境压力。
另外,利用分子标记辅助选择的方法也可以实现作物产量的提高。
这种方法通过分子标记来筛选具有优良性状的作物个体,并进行后代选择。
分子标记可以帮助育种者更准确地选择具有所需性状的杂交个体,减少繁杂的传统育种过程中的资源和时间浪费。
通过这种方法,可以加快作物育种的速度和效率,从而更快地实现作物产量的提高。
此外,利用基因组学和生物信息学技术可以帮助鉴定和利用与作物产量相关的基因。
通过对作物基因组的广泛测序和分析,可以发现与产量相关的基因和调控因子。
进一步的研究可以揭示这些基因的功能和调控网络,为快速改良作物品种提供理论基础和指导。
作物分子育种的原理、方法及应用前景作者:林菁华来源:《河南农业·综合版》 2013年第15期河南省农业广播电视学校沈丘分校林菁华分子育种,即在经典遗传学和现代分子生物学、分子遗传学理论指导下,将现代生物技术手段整合于经典遗传育种方法中,结合表现型和基因型筛选,设计培育优良新品种。
它是运用分子生物学的先进技术,将目的基因或DNA片段通过载体或直接导入受体细胞,使遗传物质重新组合,经细胞复制增殖,新的基因在受体细胞中表达,最后从转化细胞中筛选有价值的新类型构成工程植株,从而创造新品种的一种定向育种新技术。
分子育种研究主要包括转基因育种、分子标记辅助选择育种和分子设计育种,其核心仍然是经典育种手段和方法。
同时,由于分子生物学研究方法及其技术的应用,研究目的性和研究效率得到提高,原有的种间生殖隔离得到一定程度的打破,显示了明显的优越性。
目前,在一些作物中,分子标记辅助选择的育种应用已开展多年,育成品种已开始在生产上应用,转基因育种也取得了很大成就。
随着各种作物基因组测序和重要农艺性状基因的定位分离,染色体片段置换系的构建及等位基因功能效率的分析等研究的进展,分子设计育种已有一定的基础。
分子标记辅助育种是利用分子遗传标记,借助于目标基因紧密连锁的遗传标记的基因型分析,鉴定分离群体中含有目标基因的个体,从而提高了选择效率,减少了盲目性,加速了育种进程。
由于分子标记不受环境条件影响,因而使用这种方法可以提高选择的准确性,缩短育种周期,加快育种进程。
据估计,使用分子标记辅助育种的方法,可以使育种周期由原来的6~7年缩短到2~3年,选择效率提高数倍。
基于传统的杂交、回交育种方法,结合标记筛选,转移有利性状的基因并进行多个基因的聚合,是分子标记辅助选择育种的核心。
一、植物基因工程技术在现代分子育种中的研究和应用植物基因工程技术是在分子水平上定向重组遗传物质,为植物育种开辟了一条崭新的途径。
自 1983 年第一个转基因植物问世以来,转基因成功的植物种类不断扩大。
分子设计育种国家自然科学一等奖1. 概述分子设计育种是一种结合了生物技术和传统育种方法的新颖育种方式。
它不仅可以加快育种过程,提高作物的产量和抗病性,还可以减少对化学农药和化肥的依赖,从而减少对环境的污染。
近年来,我国在分子设计育种领域取得了突破性的进展,为此,国家自然科学基金委员会授予了“分子设计育种国家自然科学一等奖”。
2. 研究内容(1)分子设计育种的理论基础分子设计育种是基于对植物基因组的深入研究,通过对作物基因的分析和编辑,可以实现对植物性状的精准调控。
研究者在对作物基因组进行高通量测序和功能分析的基础上,利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术,实现了对植物抗逆性、产量、品质等性状的精准改良。
(2)分子设计育种的应用在水稻、小麦、玉米等重要农作物的育种中,分子设计育种已经取得了显著成果。
通过精准编辑关键基因,研究者培育出了抗旱、抗病、高产、优质的新品种,这些品种在实际生产中表现出了良好的应用价值,为农业生产提供了有力支持。
3. 突破性贡献(1)精准基因编辑技术利用CRISPR/Cas9等基因编辑技术,研究者可以直接对植物基因进行编辑,实现对植物性状的精准调控。
这一技术的出现极大地加快了作物育种的速度,大大提高了育种的成功率。
(2)遗传多样性的利用研究者在进行分子设计育种时,重视利用作物中的遗传多样性,通过对不同基因型的杂交和选择,培育出了适应不同环境条件的新品种。
这为丰富我国作物品种资源、增加作物耐逆性提供了重要的理论和实践支持。
4. 社会意义分子设计育种的成功应用,不仅可以提高我国农业生产的产量和质量,还可以减少对化学农药和化肥的使用,降低农业对环境的负面影响。
新品种的应用还可以减轻农民的劳动强度,提高农产品的市场竞争力,为农业现代化做出了重要贡献。
5. 结语分子设计育种的引入和应用,为我国农业的可持续发展提供了新的思路和途径。
通过不断的研究和创新,我国在分子设计育种领域必将取得更多的成就,为实现农业现代化和农产品的高质量供给做出更大的贡献。
作物学报ACTA AGRONOMICA SINICA 2011, 37(2): 191 201/zwxb/ ISSN 0496-3490; CODEN TSHPA9E-mail: xbzw@本研究由国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2006AA10Z1B1)资助。
*通讯作者(Corresponding author):万建民, E-mail: wanjm@, Tel: 010-******** 第一作者联系方式: E-mail: wangjk@, Tel: 010-********Received(收稿日期): 2010-11-19; Accepted(接受日期): 2010-12-16.DOI: 10.3724/SP.J.1006.2011.00191中国作物分子设计育种王建康李慧慧张学才尹长斌黎裕马有志李新海邱丽娟万建民*中国农业科学院作物科学研究所 / 农作物基因资源与基因改良国家重大科学工程, 北京100081摘要: 分子设计育种通过多种技术的集成与整合, 对育种程序中的诸多因素进行模拟、筛选和优化, 提出最佳的符合育种目标的基因型以及实现目标基因型的亲本选配和后代选择策略, 以提高作物育种中的预见性和育种效率, 实现从传统的“经验育种”到定向、高效的“精确育种”的转化。
分子设计育种主要包含以下3个步骤: (1)研究目标性状基因以及基因间的相互关系, 即找基因(或生产品种的原材料), 这一步骤包括构建遗传群体、筛选多态性标记、构建遗传连锁图谱、数量性状表型鉴定和遗传分析等内容; (2)根据不同生态环境条件下的育种目标设计目标基因型, 即找目标(或设计品种原型), 这一步骤利用已经鉴定出的各种重要育种性状的基因信息, 包括基因在染色体上的位置、遗传效应、基因到性状的生化网络和表达途径、基因之间的互作、基因与遗传背景和环境之间的互作等, 模拟预测各种可能基因型的表现型, 从中选择符合特定育种目标的基因型; (3)选育目标基因型的途径分析, 即找途径(或制定生产品种的育种方案)。
一、名词解释1 作物分子育种: 直接从分子水平上改变某一作物品种基因组成而创造可稳定遗传变异来进行新品种培育的过程,称为作物分子育种。
2 基因组: 一个物种单倍体细胞所含有的整套染色体,物种全部遗传信息的总和,包括核基因组和细胞器基因组。
3 人工染色体: 人工组建的具有染色体功能的DNA分子。
4 功能标记: 称诊断标记,是基于生物功能已知的引起表型变异的基因内部序列多态性位点开发的分子标记。
5 分子设计育种: 利用作物基因组学蛋白质组学和代谢组学的生物数据,借助生物信息学的方法和手段,对整个基因组控制作物重要农艺性状的基因及基因网络进行分子水平上的设计和操作,进而培育作物新品种的过程。
6 基因组学: 研究基因组结构、功能和进化的科学。
7 染色体工程:按照人们预定目标,采用一定的方法和步骤,通过染色体操纵改变生物染色体组成并进而改变其遗传性的过程。
8 物理图谱:用分子生物学方法直接检测DNA标记在染色体上的实际位置绘制成的图谱。
9 序列图谱:以某一染色体上所含的全部碱基顺序绘制的图谱。
10 遗传图谱:指基因或DNA标记在染色体上的相对位置与遗传距离。
通常用cM表示(基因或DNA片段在染色体交换过程中分离的频率)。
11 转录图谱:以EST为位标,根据转录顺序的位置和距离绘制的图谱,它是染色体DNA某一区域内所有可转录序列的分布图,是基因图的雏形。
12 同源:如果两条或多条序列拥有共同祖先,则称它们同源。
13 直系同源:不同物种间,功能相同或相似的序列来源于共同祖先的现象。
14 并系同源:同一物种中,由于基因倍增事件产生相似序列的现象。
15 异同源:指物种间遗传物质平行转移的现象。
16 染色体转导:(染色体介导的基因转移技术)将同特定基因表达有关的染色体或染色体片段转入受体细胞,是该基因得以表达,并能在细胞分裂中一代一代地传递下去,又称染色体转导。
17 序列比对:通过比较生物分子序列,发现它们的相似性,找出序列之间共同的区域,同时辨别序列之间的差异,从而揭示生物序列的功能、结构和进化的信息。
目前,对大多数作物的育种来说,育种家可供利用的亲本材料有几百甚至上千份,可供选择的杂交组合有上万甚至更多。
由于试验规模的限制,一个育种项目所能配置的组合一般只有数百或上千,育种家每年花费大量的时间去选择究竟选用哪些亲本材料进行杂交;对配制的杂交组合,一般要产生2000个以上的 F2 分离后代群体,然后从中选择1%~2%的理想基因型,中选的 F2 个体在遗传上是杂合体,需要做进一步的自交和选择,每个中选的 F2 个体一般需产生100个左右的重组近交家系才能从中选择到存在比例低于1%的理想重组基因型。
育种早期选择一般建立在目测基础上,由于环境对性状的影响,选择到优良基因型的可能性极低,统计表明,在配制的杂交组合中,一般只有1%左右的组合有希望选出符合生产需求的品种,考虑到上述分离群体的规模,最终育种效率一般不到百万分之一。
因此常规育种存在很大的盲目性和不可预测性,育种工作很大程度上依赖于经验和机遇。
生物个体的表型是基因型和环境共同作用的结果,植物育种的主要任务是寻找控制目标性状的基因,研究这些基因在不同目标环境群体下的表达形式,聚合存在于不同材料中的有利基因,从而为农业生产提供适宜的品种。
生物数据可以来自生物的不同水平,如群体水平、个体水平、孟德尔基因水平和 DNA 分子水平等,各类生物数据为作物育种提供了大量的信息。
尤其随着分子生物学和基因组学的飞速发展,生物信息数据库积累的数据量极其庞大,但由于缺乏必要的数据整合技术,可资育种工作者利用的信息却非常有限,作物重要农艺性状基因( quantitative trait locus,QTL )的定位结果也难以用于指导作物育种实践。
作物分子设计育种将在庞大的生物信息和育种家的需求之间搭起一座桥梁,在育种家的田间试验之前,对育种程序中的各种因素进行模拟筛选和优化,提出最佳的亲本选配和后代选择策略,从而大幅度提高育种效率。
1 作物分子设计育种相关基础研究现状及发展趋势近年来,主要作物的基因组学研究,特别是拟南芥、玉米、水稻和小麦基因组学研究取得了巨大成就,基因定位和 QTL 作图研究为分子设计育种奠定了良好基础,计算机技术在作物遗传育种领域的广泛应用为分子设计育种提供了有效的手段。
国内外生物领域的高技术飞速发展,主要表现在以下5个方面。
1.1 生物信息学遗传信息数据库中的数据呈“爆炸式”增长在过去的几年里,由于基因组学和蛋白组学的飞速发展,3大核酸序列数据库,即欧洲生物信息研究所( European Bioinf ormatics Institute,EBI )维护的 EMBL 数据库、美国国家生物技术信息中心( National Center for Biotechnology Inform ation,NCBI )的 GenBank 数据库和日本国立遗传学研究所( Japan National Institute of Genetics Center for Informati on Biology )的 DDBJ 数据库,截至1992年1月总计收录核酸序列数据只有59317条,共77805556碱基对;截至2005年3月,3大数据库收录的核酸序列已经达到43118204条,共计47099081750碱基对,年份间呈几何级数增长。
2002年,国际3大机构 PIR ( Protein Information Resources,蛋白质信息资源,美国国家健康研究所)、EBI 和 SIB ( Swiss Institute of Bioi nformatics,瑞士生物信息研究所)将3个蛋白质数据库 PIR、SWISS-PROT 和 TrEMBL 合并组建了单一的权威性蛋白质数据库UniProt,截至2005年5月24日已经收录了1748002条蛋白质序列共计555158414个氨基酸。
在这些数据库中,有关植物 DNA 序列主要来源于拟南芥、玉米、水稻和小麦等。
水稻作为模式植物和世界上最重要的粮食作物之一,其基因组学研究一直走在其他作物的前列,是第一个完成测序的重要农作物。
我国在2002年完成了世界首张籼稻基因组草图,与 Syngenta 公司完成的粳稻基因组草图同时发表在 Science。
随后完成了粳稻(日本晴)4号染色体的精确测序,是世界上首先完成的2条精确测序水稻染色体之一。
同时还完成了籼稻(广陆矮4号)4号染色体80%的精确测序以及水稻4号染色体着丝粒的序列分析。
上述工作的完成使我国水稻基因组测序研究处于世界领先水平。
所有这些序列以及基因和蛋白质结构和功能的数据成为全世界科学界的宝贵资源和财富,这些海量的序列信息给高效、快速的基因发掘和利用提供了新的契机,在若干研究领域实现跨越式发展甚至“革命”的时机已经到来’。
但是,如何收集和处理这些 DNA 和蛋白质信息,并在作物改良中加以应用仍是一个巨大的挑战。
1.2 分子标记技术发展日新月异自20世纪80年代以来,先后开发出基于 Southern 杂交的第一代分子标记( RFLP 为代表)和基于 PCR 的第二代分子标记( SSR 为代表)。
随着植物基因组学研究的发展,全基因组序列、EST 及全长 cDNA 数量迅猛增长,成为开发新型分子标记的新资源。
因此目前全世界正在大力开发基于基因序列的第三代分子标记,即来自 cDNA 序列的 SSR 和 SNP 标记。
这类分子标记具有数目多、适于高通量检测的优点;更重要的是,由于 EST 和 cDNA 全长序列是表达基因序列,通过对现有的 EST 或全长cDNA 数据进行标记查寻,再进行合适的标记引物设计和多态性检测,就可以找到稳定可靠的基于表达基因的特定分子标记。
因为标记来自基因的转录区域,因此这些标记能更好地对基因功能的多样性进行更直接的评估。
cSSR 标记还具有一个优点,即部分标记可以跨物种应用,因为在不同物种中的表达基因大多数是相似的,针对这些表达基因设计的 SSR 标记就可以在物种间通用。
此外,根据 EST 序列信息或根据不同种质资源中的基因序列比较分析,还可以开发出针对特定等位基因的 SNP 标记,这些 SNP 标记将大大方便对有利基因的分子标记辅助选择。
1.3 基因和 QTL 定位研究广泛深入作物重要农艺性状大多是数量性状,受多基因控制,这些基因间存在复杂的相互作用,基因的表达容易受环境因素的影响。
分子标记技术的飞速发展,极大促进了基因定位特别是数量性状基因定位的研究,定位数量性状的基因位点( QTL ),阐明它们的效应、上位性以及与环境的互作,是当代遗传育种研究的一个重要方向。
目前,植物 QTL 定位方面应用较广的方法有:区间作图、复合区间作图和基于混合线性模型的复合区间作图等。
利用这些方法,对主要农作物的数量性状进行了大量的定位研究,截止2005年4月仅 CAB (国际农业和生物学中心文摘数据库)收录的各种 QTL 定位的论文就有3497篇,其中植物方面的 QTL 定位研究论文1581篇,研究比较深入的作物有水稻、玉米、小麦和番茄等。
研究者从不同角度分析了 QTL 的主效应、 QTL 之间的互作效应、QTL 与环境的互作效应等,采用的作图群体包括重组自交系( RIL )、加倍单倍体( DH )、F2 及其衍生群体、回交群体、随机交配群体和染色体片段置换系( CSSL )群体等;在此基础上,进行单基因分解、精细定位和图位克隆研究。
等位基因变异的检测与表型性状的深入鉴定相结合已成为从种质资源中发掘新基因的有效手段。
自1995年以来,Eshed 和 Zamir 倡导利用高代回交导入系结合定向选择,大规模发掘种质资源中有利基因,从而获取 QTL 的复等位基因在不同遗传背景下的表达效应,以便将 QTL 定位研究与植物育种紧密结合起来,为分子设计育种提供全面、准确的遗传信息。
1.4 基因电子定位与电子延伸得到应用利用 EST 或 cDNA 全长序列等信息对表达序列直接进行作图已成为发掘新基因和比较基因组学研究的重要途径之一。
EST 是目前发现新基因的主要信息来源之一,尤其是对尚未进行全基因组测序的小麦和玉米等作物来讲,EST 是了解基因组中基因序列特征、开发基因特异性标记的重要信息基础。
例如,通过把与抗病基因或防御反应基因相似的 EST 在水稻染色体上进行作图,发现部分 EST 定位在以前就已明确含有抗病基因的染色体区域。
通过 EST 序列还可以鉴定出那些编码特定代谢途径中的酶类基因,因此 EST 也是揭示作物代谢途径的重要方法。
NCBI 利用 BLAST 技术把 EST 数据进行了整理和分析,建立了 dbEST 数据库;为了更好地利用 EST 数据,NCBI 还根据基因序列对 EST 进行了分类,进一步建立了 UniGene 数据库,其中来自水稻、小麦和玉米的序列数分别为20607条、22959条和13193条(2003年7月数据)。
研究表明,通过将 EST 或 cDNA 全长序列等信息对表达序列直接进行作图,可以把不同基因定位在染色体上。
例如,Wu 等用6591个水稻 EST 进行了转录图的构建,明确了各表达基因在染色体上的位置。
这些数据与全基因组序列的基因注释信息结合起来,已使人们对水稻中的基因有了更清晰的认识。
1.5 转基因技术和标记辅助选择方法取得一定进展利用转基因技术进行作物品种改良已取得一定进展。
但是,目前转基因技术还仅限于利用主基因改良单一目标性状,对于由多基因控制的大多数重要农艺性状,转基因技术尚无法发挥其优势。
另一方面,国内外对分子标记辅助选择育种做了不少有益的尝试,但对主基因控制的性状,分子标记辅助选择并不比传统的选择方法有明显优势;对多基因控制的重要农艺性状,由于 QTL 在遗传上的复杂性、背景依赖性以及与环境的复杂互作,现有的 QTL 定位成果很难直接用于指导分子标记辅助选择育种。
2 我国开展分子设计育种的时机已经成熟模式植物拟南芥和水稻的全基因组序列测定的完成,使得植物基因组学研究由结构基因组向功能基因组等各种“组学”迅猛发展。
基因组学和蛋白组学借助生物信息学的力量让人们从分子水平上了解植物亚细胞生理活动及真核生物的多细胞是如何组成并实现其复杂的功能,各种“组学”把传统生物学迅速带入了系统生物学的新时代,这一革命性的改变催生了分子设计( m olecular design )的概念。
目前,已有许多研究机构在做前期准备工作,朝此方向发展。
美国农业部已投资在十几个研究单位建立各种作物的数据库,这些数据库的整合将成为未来分子设计育种的重要基础。
其他比较有影响的研究机构如美国的先锋公司、澳大利亚的昆士兰大学和CSIRO,以及国际玉米小麦改良中心在基因型到表型建模、基因型与环境互作分析及育种模拟等方面开展了研究。