血小板膜表面CD62P检测活化方法
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流式细胞仪双色术检测机采血小板活化方法傅晓岚;陈兆珍;成晓玲;赵树铭【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2003(25)18【摘要】目的探讨一种流式细胞仪检测机采浓缩血小板悬液活化状态的方法。
方法用CD41 FITC、CD62 PE双色标记 ,避光反应 15min后加入 1ml 1%多聚甲醛固定 ,上机分析。
结果采用此方法测定2 2℃保存下不同时间的血小板CD62P表达 ,表明随着时间的延长CD62P阳性率增加 ,保存达到 3d及以上 ,CD62P阳性率增加非常显著。
标本以多聚甲醛固定在 2 4h对CD62P测试结果无明显影响 ,样品不固定处理 ,不同时间测定对结果影响非常大。
结论双色标记流式细胞术检测机采血小板活化敏感、特异 ,重复性好 ,操作简便 ,能较好地反映储存中血小板的CD62P的变化。
可方便应用于血小板的保存及输注的质量监控。
【总页数】2页(P1672-1673)【关键词】流式细胞术;血小板活化;CD62P;血小板保存【作者】傅晓岚;陈兆珍;成晓玲;赵树铭【作者单位】第三军医大学高原军事医学系中心实验室;第三军医大学附属西南医院输血科【正文语种】中文【中图分类】R446.11【相关文献】1.机采血小板保存质量控制的主要指标及检测方法 [J], 王鹤;鲍丽;王淑梅2.流式细胞术检测活化血小板采血方法的改良和护理 [J], 王素侠;张华伟;王振芳;郭琼;吕合作3.机采血小板中白细胞碎片定量检测方法的建立及其影响因素 [J], 蒋光明;张林杰;王保龙;叶书来;陈家萍;周建华;王敏;廖艳秋4.全血三色法流式细胞术检测血小板P-选择素的方法 [J], 龚艳春;郭冀珍;史桂英;石学耕5.流式细胞术与三种活化血小板检测方法对比与分析 [J], 吴迪因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
活化血小板检测方法活化血小板是指被某种刺激物激活后,细胞内释放出一种含有血小板生长因子(platelet-derived growth factor,PDGF)的血小板。
这种活化血小板在生理和病理条件下都有丰富的生物学功能,它们可以促进血管新生、细胞迁移和增殖、纤维蛋白溶解等。
活化血小板在生物学研究、生物医学技术和临床应用等方面都有广泛的应用。
为了检测活化血小板的生物学功能和应用价值,科学家们开发了多种方法,包括细胞学、免疫学、分子生物学等方法。
下面是十条关于活化血小板检测方法的详细描述:1. 光散射法光散射法是一种典型的血小板功能检测方法,它基于光学特性来测量血小板的形态、大小和聚集状态。
光散射法检测活化血小板时,可以通过检测血小板的聚集状态和形态来判断其活化状态。
2. 电阻抗法电阻抗法是一种测量细胞电阻的方法,它可以用来检测血小板的形态和大小,进而评价其活化程度。
电阻抗法还可以用于测量血小板与其他细胞的互作效应。
3. 血小板聚集率测试血小板聚集率测试是一种检测血小板功能的方法,它基于血小板在接触到激活物质后,聚集和黏附的特性。
通过测量血小板聚集率的改变,可以评价血小板的活性和功能状态。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种高通量的单细胞分析技术,可用于评估单个细胞及其亚群的生物学特性。
流式细胞术可以检测活化血小板的数量、形态和功能状态,并且可以分析不同血小板亚群的活性和功能。
5. 电子显微镜检查电子显微镜检查可以清晰地看到血小板的细节结构,包括血小板的形态、大小、颗粒和内部结构等,从而能够准确评估血小板的活性和功能状态。
6. PCR技术PCR技术是一种针对DNA序列进行扩增的高灵敏度技术,其可以用于检测血小板内含有的mRNA和DNA序列。
通过PCR技术,可以检测血小板内含有的多种生物标志物,如DNA 和RNA修饰物、微小RNA等,从而评价血小板的功能状态和表达谱。
7. 血小板膜蛋白检测血小板膜蛋白检测可以测量血小板表面的分子,如GPIIb/IIIa、GPIb、P-selectin等,这些分子是血小板活化的标志。
肿瘤患者放疗中血小板CD62P CD63及血浆CD62P的检测
及意义
唐中;杨明辉
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】2003(018)001
【摘要】目的探讨肿瘤患者在放射治疗中血小板CD62P、CD63、SCD62P水平
的变化情况.方法利用流式细胞术检测血小板CD62P、CD63,ELISA测定SCD62P,血球计数仪CD1700测定血小板数量.结果随着放射治疗时间延长CD62P、CD63、SCD62P表达均明显高于对照组,血小板数量低于对照组.结论放射治疗能使血小板CD62P、CD63高度活化,最终导致血小板数量下降.
【总页数】3页(P104-106)
【作者】唐中;杨明辉
【作者单位】川北医学院附属医院检验科,四川,南充,637000;川北医学院附属医院
检验科,四川,南充,637000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.11+3
【相关文献】
1.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
2.血小板活化标志物CD62P、CD63的表达与血小板参数对非小细胞肺癌患者的
意义 [J], 雷鸣;胡黎娅;王自米;金从国;杨蕊
3.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
4.肿瘤患者放射治疗中血小板CD62P、CD63及血浆CD62P的检测 [J], 唐中;杨明辉
5.流式细胞仪检测血小板CD63、CD62P在偏头痛患者发病中的意义 [J], 郑冰;林惠;张书强;罗助荣
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原发性血小板减少性紫癜的血小板活化分子CD62P及CD …肖若冰;周铭
【期刊名称】《衡阳医学院学报》
【年(卷),期】2000(028)002
【摘要】目的探讨原发性血小板减少性紫癜(ITP)患者血小板的活化。
方法
应用流式细胞术检测ITP患者的血小板CD62P(α-颗粒糖蛋白)、CD63(溶酶体膜糖蛋白)表达。
结果(1)ITP患者的CD62P、CD63表达率显著高于对照组;(2)患者CD62P的表达与CD63、PAIgG、PAIgM呈正的直线相关,与Plt呈负的直线相关,与PAIgA为零相关;(3)患者CD63的表达与PAIgG、PAIgA、PA
【总页数】2页(P145-146)
【作者】肖若冰;周铭
【作者单位】衡阳医学院第二附属医院,湖南衡阳;上海市中西医结合医院检验科【正文语种】中文
【中图分类】R554.6
【相关文献】
1.冠心病心虚证不同证型与血小板活化分子CD62P及CD63表达的关系 [J], 杨
丁友;段学忠
2.紫外线照射充氧自血回输对银屑病患者血小板活化分子CD62P及CD63表达的影响 [J], 刘华昌;李冠勇;周春蕾
3.脑挫裂伤血瘀证患者血小板活化分子CD62P和TSP的改变及临床意义 [J], 陈
永斌;阮玉山;黄李平;陈业强;李山;谭源福
4.PAIgG及血小板活化标志物PAC-1、CD62P检测在原发性血小板减少性紫癜患者临床意义 [J], 王传新;牛爱军;卢振铎;杨晓静;王立水;邹雄;
5.银屑病辨证分型与血小板活化分子CD62P及CD63表达的关系 [J], 李冠勇;刘华昌;尹格平;孙晓明
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血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病患者早期肾脏微血管病变中的表达李云婷;张雷雷;张巧丽【摘要】目的观察糖尿病肾病患者血小板活化标志物CD62P、CD63表达情况,探讨其在糖尿病早期肾脏微血管病变中的作用.方法选择单纯糖尿病48例,早期糖尿病肾病50例,正常对照组49例.应用流式细胞仪检测各组CD62P、CD63的阳性表达率.结果早期糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于单纯糖尿病组和正常对照组;单纯糖尿病组CD62P、CD63阳性表达率高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01).早期糖尿病肾病组与单纯糖尿病组β2微球蛋白高于正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01).结论血小板活化标志物CD62P、CD63在糖尿病早期肾损害中有着重要的临床意义.【期刊名称】《河北医科大学学报》【年(卷),期】2015(036)005【总页数】3页(P551-553)【关键词】糖尿病肾病;CD62P;CD63;微血管病变【作者】李云婷;张雷雷;张巧丽【作者单位】河北医科大学第二医院检验科,河北石家庄 050000;河北省食品质量监督检验研究院食品部,河北石家庄050000;河北医科大学第二医院检验科,河北石家庄 050000【正文语种】中文【中图分类】R735.7糖尿病肾病是2型糖尿病最常见的并发症,是糖尿病主要微血管病变之一。
据统计30%~40%糖尿病患者可能发生糖尿病肾病,进而发展成为终末期肾脏疾病[1];因其发生机制复杂,早期缺乏明显的症状和体征,容易错过最佳的治疗时间而最终导致肾衰竭,因此临床早期全面诊断显得尤为重要。
近年有研究发现糖尿病肾病患者血小板活化显著高于不伴肾病者,且2型糖尿病早期患者开始出现血小板活化,抗血小板活化药物对2型糖尿病有一定的疗效[2],均提示血小板的活化与糖尿病肾病的形成有关。
本研究观察2型糖尿病并发早期肾病患者血小板膜糖蛋白CD62P、CD63的表达情况,旨在探讨其在糖尿病肾病早期微血管病变发展过程中的临床价值。
测定血小板表面CD62p评估心房颤动的高血凝状态樊红光;洪小苏;陈建昌;江建良【期刊名称】《中国血液流变学杂志》【年(卷),期】2004(14)1【摘要】目的通过测定心房颤动(房颤)患者血小板表面CD62p了解血小板活化百分率,评估原发病、左房内径(LAD)、年龄和心室率对房颤的血凝状态的影响,以期对临床治疗产生一定的指导作用.方法采用流式细胞仪(FCM)测定房颤组和对照组血小板表面CD62p了解血小板活化百分率.结果除孤立性房颤组外,其它各房颤组血小板活化率均高于对照组(P<0.05).血小板活化率与LAD、年龄有良好的相关性(r分别为0.655和0.508,P值均<0.01),与心室率无相关性.结论血小板活化率和LAD可以作为评估房颤患者高血凝状态的两个重要指标,对指导抗凝治疗有重要意义.【总页数】2页(P84-85)【作者】樊红光;洪小苏;陈建昌;江建良【作者单位】连云港市第一人民医院心脏中心,连云港,222004;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006;苏州大学附属第二医院心内科,苏州,215006【正文语种】中文【中图分类】R541.75【相关文献】1.单核细胞和血小板CD40L高表达及血小板CD62P高含量与急性冠脉综合征的关系 [J], 沈凯;袁国裕;陈国雄;俞晓军;王炎一;方波;王红娜;魏峰涛2.流式细胞仪测定血小板表面CD62p的临床意义 [J], 徐长根;戴瑞娣;朱阳泉3.化纤胶囊对脓毒症大鼠血小板最大聚集率、血小板活化复合物(PAC-1)、血小板表面蛋白CD62p的影响 [J], 王若晖;李雪;李卉4.糖尿病合并急性冠状动脉综合征患者血小板表面PAC-1和CD62P表达水平 [J], 柳晓娜;朱宁;魏国峰;王纪文;李忠艳5.外周血凝血指标、血小板计数和NLR检测对恶性肿瘤患者治疗前机体凝血状态的评估价值 [J], 汪敏;于鹏跃;王言;宋燕珂;李峣;孙莹;赵丽艳因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
血小板活化标志物CD62p、PAC-1在心血管系统疾病中的研究进展齐茗综述审校(延安大学附属医院,陕西延安 716000)【摘要】许多心血管系统疾病的发生与发展都与血小板的活化有关,而在血小板活化的过程中会释放出多种特异性的标志物(如CD62p,PAC-1),随着流式细胞仪在临床中的广泛应用,为血小板活化的检测提供了极大的方便,血小板活化对判断是否具有血栓形成和血栓形成倾向具有重要意义。
本文就血小板活化在心血管系统疾病中的应用进行综述。
【关键词】血小板活化;CD62p;PAC-1目前的研究发现, 血小板是从骨髓造血组织中的巨核细胞上脱落下来的胞质小块,其主要的功能是凝血、止血和修补破损的血管,此外,血小板还在动脉粥样硬化、炎症、肿瘤转移等的发生发展过程中起着重要作用[1,2]。
正常的血小板活化参与体内生理性止血的过程,然而,血小板活化过度则会引起多种血栓性疾病的发生,如急性心肌梗死、深静脉血栓等。
在血小板活化的过程中,会释放出多种具有特异性的标志物,其中最具特征性的是CD62p和PAC-1 [3,4]。
1.血小板活化标志物CD62p(也称为P-选择素,GMP140)是一种位于血小板特殊颗粒和血管内皮细胞的weibel-palade小体内的膜糖蛋白。
在正常情况下,CD62p只少量表达在血小板表面,当血小板受到刺激时,迅速、大量地在血小板膜表面表达,通过N端的凝集素样结构域作用,介导活化的内皮细胞与单核细胞、中性粒细胞等的粘附功能,这些细胞不仅促进纤维蛋白沉积,还参与炎症反应和血栓的形成。
用抗GMP140抗体处理活化的血小板后,其相互之间的粘附作用立即消失,说明GMP140可介导活化血小板或内皮细胞与白细胞之间的粘附,是血小板活化的重要标记物之一。
PAC-1是血小板膜糖蛋白II b/IIIa复合物,也是血小板表面较丰富的糖蛋白,含有与纤维蛋白原(Fg)、纤维连接蛋白(Fn)、vWF因子等粘附蛋白结合的特异位点,在正常情况下以单体形式存在,没有与配体结合的能力。
血小板膜表面CD62P检测
操作步骤
1. 标本采集:
(1)采血管顺序编号。
(2)抽取静脉血,采血管中注入2ml。
(3)于10分钟之内完成血小板激活和染色步骤,操作时应注意
减少人工激活。
注意事项:1、至少要采集10ml全血
2、而且必须用粗针采血
3、如果是用注射器,则将采的血先放入才血管,最后将
剩余的几毫升弃掉或做它用。
4、如果是用采血针采血,先弃掉2ml,然后再往采血管中采
集。
2. 荧光抗体染色:
(1)取2支试管,加入待测外周血标本,两管各加5ul
(2)在对照管中加入CD62P的同型对照抗体、CD61 各20μl
(3)在试验管中加入CD62p抗体和CD61抗体各20μl。
(4)轻轻混匀,室温暗处孵育15-20分钟。
(5)孵育后,加入500ul的PBS(若血小板数目过多,可以多加一
些PBS),混匀后上机检测;若不能立即上机,加入500ul 1%的多聚甲醛溶液固定,24小时内上机分析。
注意事项:
1、在所有操作中动作应轻柔,不可力度过大,因为血小板容易活化
2、方案的建立:
两张图:(1)散点图CD61/SS,圈CD61阳性的血小板(2)直方图CD62P,分析血小板的表达情况
FS,SS均应选择Log方式检测,阈值设在FL1(CD61的荧光通道)上,值可能会比较大,可能在200、300左右。