抑癌基因RASSF1A及其甲基化的研究进展

１００ｈｅａｄｅｄｓｐｅｒｍａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈｄｅｆｉｃｉｅｎｔｏｏｚｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎＣａ－ｐａｃｉｔｙ［Ｊ］．ＦｅｒｔｉｌＳｔｅｒｉｌ，１９９７，６８（６）：１１４４—１１４７．［２８］ＨｅｉｎｄｒｙｅｋｘＢ，ＶａｎｄｅｒＥｌｓｔＪ，ＤｅＳｕｔｔｅｒＰ，ｅｔａ１．Ｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｐｔｉｏｎｆｏｒｓｐｅｒｍ－ｏｒｏｅｃｙｔｅ－ｒｅｌａｔｅｄｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｆａｉｌｕｒｅ：船－ｓｉｓｔｅｄｏｏｃｙｔｅａｃｔｉｖａｔｉｏｎｆｏｌｌｏｗｉｎｇｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓＩＣ・ＳＩ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００５，２０（８）：２２３７－２２４１．［２９］ＢｅｒｋｏｖｉｔｚＡ，ＥｈｅｓＦ，Ｙａａｒｉｓ，ｅｔａ１．Ｔｈｅｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｎｏｒ－ｍａｌｃｙｏｆｔｈｅｓｐｅｒｍｎｕｃｌｅｕｓａｎｄｐｒｅｇｎａｎｃｙｒａｔｅｏｆｉｎｔｒａｃｙｔｏ－ｐｌａｓｍｉｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌｌｙｓｅｌｅｃｔｅｄｓｐｅｒｍ［Ｊ］．ＨｕｍＲｅｐｒｏｄ，２００５，２０（１）：１８５—１９０．［３０］ＢａｒｔｏｏｖＢ，ＢｅｒｋｏｖｉｔｚＡ，ＥｈｅｓＦ，ｅｔａ１．Ｒｅａｌ—ｔｉｍｅｆｉｎｅｍｏｒ－ｐｈｏｌｏｇｙｏｆｍｏｔｉｌｅｈｕｍａｎｓｐｅｒｍｃｅｌｌｓｉｓａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＩＶＦ－ＩＣＳＩｏｕｔｃｏｍｅ［Ｊ］．ＪＡｎｄｒｏｌ，２００２，２３（１）：１—８．（收稿日期：２００９—１１—１２修回日期：２００９一１２一１５）ＲＡＳＳＦｌＡ基因与结直肠癌关系的研究进展黄克强综述莫维光审校（广西医科大学第一附属医院病理科，南宁市５３００２１）【关键词】ＲＡＳＳＦｌＡ基因；结直肠癌；抑癌基因【中图分类号】Ｒ７３５．３【文献标识码】Ａ【文章编号】０２５３－４３０４（２０１０）０１－０１００－０５结直肠癌是我国常见的胃肠道恶性肿瘤，其发生发展是多阶段、多步骤的病理过程，与多个癌基因的激活及抑癌基因的失活有关。

肺癌患者血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因的检测分析唐华1,廖洪春1,岑玉兰2,廖光付3,唐际富21广西科技大学第二附属医院，广西柳州545006；2广西壮族自治区龙潭医院；3广西壮族自治区胸科医院摘要：目的检测肺癌患者血浆甲基化矮小同源盒基因2(SHOX2)及RAS相关区域家族1A(RASSF1A)基因，并探讨其意义。

方法肺癌患者92例(观察组)，肺部良性疾病患者68例(对照组)，采用甲基化特异PCR法检测两组血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因，并计算甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性率;分析血浆SHOX2、RASSF1A 基因甲基化阳性率与肺癌临床病理特征的关系；受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性对肺癌的诊断价值;另分析血浆与癌组织、支气管肺泡灌洗液(BALF)甲基化SHOX2,RASSF1A基因阳性率的一致性。

结果与对照组比较，观察组血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性率高(P均<0.05)。

血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性与肺癌肿瘤分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)，而与性别、年龄、病理类型、肿瘤分化程度无明显相关性(P均>0.05)o血浆甲基化SHOX2基因单独检测诊断肺癌的灵敏度为53.7%、特异度为86.07%，血浆甲基化RASSF1A基因单独检测诊断肺癌的灵敏度为64.1%、特异度为92.1%，两者联合检测诊断肺癌的灵敏度为81.6%、特异度为94.2%。

血浆与癌组织、BALF中甲基化SHOX2基因阳性率具有良好的一致性，一致率分别为87.3%(48/55),7.9%(47/48)，血浆与癌组织、BALF中甲基化RASSF1A基因阳性率具有良好的一致性,一致率分别为86.4%(51/59)、96.1%(49/51)。

结论肺癌血浆甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性率增加，两指标与肺癌肿瘤分期、淋巴结转移有关，联合检测两者有助于提高肺癌的诊断,血浆与癌组织、BALF中甲基化SHOX2、RASSF1A基因阳性率具有良好的一致性。

健康域公卫从全世界范围来看，癌症死亡人数中占比最大的当数肺癌，根据GLOBOCAN（全球癌症流行病学的数据库）2020年数据显示，新增肺癌患者高达220万例（占癌症患者总数的11.4%），死于肺癌的人数高达179万例（占癌症总死亡人数的18.0%）。

采用低剂量计算机断层扫描（LDCT）对肺癌患者进行初步筛查能够提高肺癌的诊断率，从而提高肺癌患者生存率。

但是LDCT的灵敏度高而特异性低容易造成误诊，因此通过LDCT检测结果异常的患者需完善其他检查以进一步确认。

因此，仍需寻找简便易行、灵敏度和特异性好的无创手段对肺癌进行早期诊断[1]。

由于DNA甲基化与人类发育和肿瘤疾病密切相关，它是目前研究最透彻、最广泛的表观遗传学的现象之一。

DNA甲基化往往在肿瘤发病的早期甚至癌前病变时就已经发生，因此DNA甲基化的异常改变或可成为用于肺癌早期诊断的生物标记物。

为此本文主要就肺组织、外周血、肺泡灌洗液等标本当中DNA甲基化检测与肺癌早期诊断的研究进展进行综述。

1DNA甲基化的定义DNA甲基化是一类可稳定遗传的表观修饰，其参与了个体发育及细胞分化等基本生物学过程。

DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶的作用下，把甲基从通用甲基供体S-腺苷-L-甲硫氨酸添加到胞嘧啶的5-碳位置的一种化学修饰现象。

这种方式能够通过改变DNA的稳定性、DNA和蛋白质的互作方式以及染色质结构来调控靶向基因的表达。

多项研究表明，DNA的异常甲基化主要表现为全基因组的低甲基化状态和启动子CpG岛的高甲基化状态。

2DNA甲基化与肺癌肺癌的发生发展涉及一系列异常的表观遗传变化。

DNA甲基化作为表观遗传的重要修饰手段之一与癌症的发病有密切关系，是正常细胞癌变时最早发生的事件。

在癌变的早期阶段，不仅肿瘤细胞，甚至在非肿瘤细胞中也发生了异常的DNA甲基化。

抑癌基因失活的原因除了认为与碱基的突变和缺失有关外，另一个重要的原因被认为是其启动子区的高度甲基化。

中华医学科技奖形式审查结果公布年份2018推荐奖种医学科学技术奖项目名称RASSF1A抑制肝细胞癌生长的基础和临床研究推荐单位推荐单位：江苏省医学会推荐意见：本项目在国内外较早提出RASSF1A等是新的肝细胞癌（HCC）预后的预测分子，初步阐明RASSF1A抑制肝癌发生发展的分子机制，利用自行构建的双重靶向性的纳米载体介导RASSF1A在HCC过表达，可明显抑制HCC在体内外的生长，本项目研究丰富了HCC发生发展的分子机制，还为利用RASSF1A基因进行HCC基因治疗提供了可行性依据，并为进行HCC基因治疗联合化疗药物治疗的临床前研究提供了实验依据。

关键技术还可临床转化。

本项目的实施及推广运用具有开拓性和创新性的贡献，也具有很强的前瞻性和可操作性。

该成果在基层医院中得到运用，对评估HCC患者的预后起到很好的预测作用，进一步指导临床治疗，取得良好的社会效益及经济效益。

目前获得国家发明专利授权1项，发表相关研究论文17篇，其中被SCIE收录17篇、在Web of Science核心合集中共被引用122次，引起国内外的广泛重视和认可，具有广泛的应用前景和深远的社会价值。

经认真审阅，该项目推荐材料真实可靠，候选单位、候选人具备获奖条件，提交资料齐全，符合要求，不存在知识产权纠纷或项目完成单位、完成人员排序争议。

同意申报中华医学科技奖。

项目简介多年来薛万江团队勇于创新，使得RASSF1A（Ras association domain family 1 A）在肝细胞癌（HCC）基础和临床研究处于国内领先地位，部分达到国际先进水平。

本项目已在SCI收录期刊发表论文17篇，已获国家发明专利1项，研究成果已获南通市科技进步二等奖2项。

在多年研究基础上，获得1项国家自然科学基金资助，1项江苏省高校自然科学研究项目资助，1项南通市科技计划项目资助。

此外，研究成果被多家单位应用，并多次在国内学术会议上交流。

本项目主要特色有以下四方面：1、HCC预后相关分子标志物的研究HCC的发生发展过程是一个由多个因素诱导、多基因和多条信号通路激活共同参与的复杂网络机制。

·综述·SHOX 2和RASSF 1A 基因甲基化在消化道肿瘤 诊断和预后预测中价值的研究进展单阳阳 张健锋 毛振彪【摘要】 消化道肿瘤发病率较高，由于其早期诊断较为困难，导致患者预后较差，因此对高危人群的筛查、早期诊断和及时治疗尤为重要。

近年来，表观遗传学在肿瘤发病机制中的作用受到了广泛关注并取得了突破性研究进展。

促癌基因矮小同源盒基因2（SHOX 2）和抑癌基因Ras 相关结构域家族1A （RASSF 1A ）甲基化作为生物标志物在消化道肿瘤诊断和预后预测中的敏感度和特异度较高，有较高的应用价值。

该文就SHOX 2和RASSF 1A 基因甲基化在消化道肿瘤诊断和预后预测中价值的研究进展作一综述。

【关键词】 SHOX 2基因；RASSF 1A 基因；DNA 甲基化；消化道肿瘤DOI: 10. 3969/j. issn. 1673-534X. 2023. 02. 004基金项目：吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金项目 （320.6750.19088-75）；南通市科技局基础科学研究面上项目 （JC22022040）；南通市卫健委面上项目（MA2021004）作者单位：226001 南通大学附属医院消化内科通信作者：毛振彪，Email:*************尽管在消化道肿瘤治疗方面的研究已取得了较大进展，但在全球范围内消化道肿瘤的病死率仍较高，结直肠癌（CRC ）、胃癌、原发性肝癌的病死率分别为9.2%、8.2%、8.2%[1]。

因此，应用非侵入性方法检测早期肿瘤标志物十分重要，而DNA 甲基化是被研究得较多的表观遗传修饰，DNA 甲基化水平和模式的改变，可以导致抑癌基因沉默，或原癌基因激活，进而增高肿瘤的发生风险。

矮小同源盒基因2（SHOX 2）和Ras 相关结构域家族1A （RASSF 1A ）基因是多种肿瘤信号通路的调节剂，已被证明可以促进肿瘤的发生和进展；SHOX 2和RASSF 1A 基因甲基化检测的敏感度较高，尤其在疾病早期阶段[2]。

应用研究RASSF1A和SHOX2基因甲基化检测联合快速现场细胞学评价对肺癌的诊断价值任雪珠1，2，张树森2，3，蔡志刚1，2△，李海涛1，2，许晓岚1，2，齐天杰1，2，李宏林1，2摘要：目的评估RAS相关区域家族1A（RASSF1A）联合矮小同源盒基因2（SHOX2）基因甲基化检测和快速现场细胞学评价（C-ROSE）对肺癌的诊断价值。

方法选取行RASSF1A和SHOX2甲基化检测并有明确病理诊断的179例可疑肺癌患者，其中肺癌58例，肺良性病变121例。

179例中114例（肺癌45例，肺良性病变69例）通过迪夫快速染色完成C-ROSE检测。

以病理结果为金标准，分析RASSF1A、SHOX2甲基化和（或）C-ROSE诊断肺癌的敏感度及特异度，同时明确不同标本类型和不同肿瘤类型中RASSF1A和SHOX2甲基化的结果与病理诊断的一致性。

结果RASSF1A联合SHOX2甲基化检测的敏感度为77.59%（45/58），特异度为80.17%（97/121）。

亚组分析中，肺穿刺活检及肺泡灌洗液标本中甲基化与病理诊断一致率较好，分别为88.8%（8/9）、79.75%（126/158），而胸水的一致率稍差，为63.64%（7/11）。

小细胞肺癌和鳞癌甲基化检测准确率分别为100%（5/5）、92.31%（12/13），肺腺癌为66.67%（18/27）。

C-ROSE检测的敏感度为75.56%（34/45），特异度为95.65%（66/69）。

甲基化检测联合C-ROSE的敏感度为86.96%（39/45），特异度为86.67%（60/69）。

结论RASSF1A、SHOX2甲基化检测及C-ROSE用于肺癌的诊断均具有较高的敏感度和特异度，两者结合将成为病理学诊断的有效的补充手段，两者结合有助于进一步提高诊断肺癌的效能。

关键词：肺肿瘤；DNA甲基化；诊断；RAS相关区域家族1A；矮小同源盒基因2；快速现场细胞学评价中图分类号：R446.8，R734.2文献标志码：A DOI：10.11958/20212015Diagnostic value of RASSF1A and SHOX2gene methylation detection combined with rapid on-site cytological evaluation in lung cancerREN Xuezhu1,2,ZHANG Shusen2,3,CAI Zhigang1,2△,LI Haitao1,2,XU Xiaolan1,2,QI Tianjie1,2,LI Honglin1,2 1The Frist Department of Respiratory and Critical Care Medicine,the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang050000,China;2Hebei Key Laboratory of Respiratory Critical Care;3Department of Respiratory and CriticalCare Medicine,Xingtai People's Hospital Affiliated to Hebei Medical University△Corresponding Author E-mail:*******************Abstract:Objective To evaluate the diagnostic value of RASSF1A and SHOX2gene methylation detection combined with rapid on-site cytological evaluation(C-ROSE)in lung cancer.Methods A total of179patients suspected lung cancer patients with RASSF1A and SHOX2methylation detection and definite pathological diagnosis were selected,including58 cases of lung cancer and121cases of benign lung disease.C-rose detection was performed in114of179patients(45lung cancers and69benign lung lesions)by Diff-quick ing pathological results as the gold standard,the sensitivity and specificity of RASSF1A,SHOX2methylation and/or C-ROSE in the diagnosis of lung cancer were analyzed.The consistency between the results of RASSF1A and SHOX2methylation in different specimen types and different tumor types and pathological diagnosis was determined.Results The sensitivity and specificity of RASSF1A combined with SHOX2 methylation detection were77.59%(45/58)and80.17%(97/121),respectively.In the subgroup analysis,the coincidence rates between methylation and pathological diagnosis in lung biopsy and biopsy and alveolar lavage fluid(BALF)specimens were88.89%(8/9)and79.75%(126/158),respectively,while the consistency of pleural fluid was less than63.64%(7/11).In the subgroup analysis of lung cancer types,the accuracy of methylation detection was100%(5/5)and92.31%(12/13)in lung small cell carcinoma and squamous cell carcinoma.which was66.67%(18/27)in lung adenocarcinoma.The sensitivity and specificity of C-ROSE detection were75.56%(34/45)and95.65%(66/69)respectively.The sensitivity of methylation 基金项目：2020年度河北省医学科学研究课题计划（20200060）；河北省县级综合医院适宜卫生技术推广项目资助（20200017）作者单位：1河北医科大学第二医院呼吸与危重症医学一科（邮编050000）；2河北呼吸危重症重点实验室；3河北医科大学附属邢台市人民医院呼吸与危重症医学科作者简介：任雪珠（1986），女，主管检验师，主要从事ROSE在呼吸介入技术中的应用价值研究。

RASSF1A甲基化在前列腺癌诊断中的Meta 分析作者：张建东张雁钢来源：《中国当代医药》2013年第27期[摘要] 目的探讨RAS相关区域家族1A基因（RASSF1A）甲基化在前列腺癌诊断中的意义。

方法收集已发表的关于RASSF1A基因甲基化在前列腺癌与前列腺增生症中报道的国内外文献，针对结果进行统计学综合（Meta）分析。

采用优势比（OR）及95%置信区间（95%CI）评价疗效，统计学分析采用RevMan 4.2软件。

结果共9篇文献符合纳入标准，包括前列腺癌组541例和前列腺增生组258例的RASSF1A甲基化研究结果，Meta分析显示，研究文献中总的OR值及95%CI均在垂直线的右侧（OR=6.39，95%CI为4.32～9.46），差异有统计学意义（P[关键词] RAS相关区域家族1A基因；甲基化；前列腺癌；诊断[中图分类号] R737.25 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2013）09（c）-0010-04前列腺癌（prostate cancer，PCa）是老年男性的常见疾病，在欧美发病率较高。

目前，在美国PCa的发病率已经超过肺癌，成为威胁男性健康的第一位肿瘤。

随着我国人均寿命的不断增长，饮食结构的改变及诊断技术的不断提高，近年PCa发病率迅速增高。

局限性早期PCa，早期发现可以得到有效的治疗或可以达到治愈。

但是，接近90%的患者发现时已发生骨转移，失去手术治疗的机会。

PCa发生骨转移后中位生存时间为9～12个月[1-2]。

目前，PCa的筛查依赖于血清前列腺特异性抗原（prostate-specific antigen，PSA）、超声和直肠指检。

但是，直肠指检和超声发现肿瘤时，多数患者已属于疾病进展期或晚期。

血清PSA的检测用于PCa的早期筛查后，提高了PCa的诊断率。

但是，其仍存在许多不足：①PSA筛查的敏感性较低，只有约30%PSA阳性筛查者病理证实为PCa[1]；②PSA值在灰阶的患者，穿刺活检阳性率更低，研究表明PSA在3～15 μg/L时，穿刺活检阴性率为70%～80%[2]；③PSA值低于阈值时，仍有患PCa的可能，例如，Thompson等[3]对9459例PSA肿瘤是多因素参与、多基因变异积累、多阶段发生的复杂的病理过程。