常见霉菌形态观察学习资料

一、目的要求
学习观察霉菌形态的基本方法，认识霉菌菌落特征与个体形态。要求每个同学必须掌握好具体操作方法。区分细菌、酵母菌和放线菌菌落特征。
二、基本原理 霉菌的营养体是分枝的丝状体，称菌丝体，其菌丝平均宽度3-10μm，分为基内菌丝和气生菌丝。生长到一定阶段时，气生菌丝中又可分化出繁殖菌丝。不同的霉菌其繁殖菌丝可以形成不同的孢子或子实体。 霉菌菌丝有无横隔膜，其营养菌丝有无假根、足细胞等特殊形态的分化，其繁殖菌丝形成的孢子着生的部位和排列情况，以及是否形成有性孢子等，是鉴别霉菌的主要依据，镜检时应仔细注意观察。 由于霉菌是真核微生物，其菌丝一般比放线菌粗长几倍至几十倍，并且菌丝生长比较松散，速度比放线菌快，因此，其菌落多呈大而疏松的绒毛状或棉絮状等特征。
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可从长出菌落的形状，大小、颜色、光泽、表面状况、边缘、隆起度、透光性、质地以及是否分泌色素等方面的特征来描述。一般讲，有鞭毛的菌落平，呈不规则的边缘，有荚膜的菌落看上去特别光滑，呈透明的水珠状，有芽孢的菌落常因芽孢折光率变化而粗糙，不透明，多皱折，表面似乎干燥等，同时细菌菌落易被接种环挑取。 菌落呈圆形、湿润具有粘性、不透明、表面光滑、有油脂状光泽，多数白色或乳白色，少数红色。与培养基结合不紧，易被挑取。当培养时间较长时，菌落颜色变暗，有特殊的酒香味。 观察放线菌菌落的外形、大小、表面形状、表面及背面颜色，与培养基结合情况等(即不易被接种环挑取菌体)
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三、操作方法
3.1 霉菌菌落特征的观察 观察并描述根霉与毛霉、青霉与曲霉的菌落形态，菌落大小，局限生长或蔓延生长；菌落表面和反面颜色，基质的颜色变化；菌落的组织状态，棉毛状、网状或毡状，疏松或紧密，有无同心环纹或放射状绉褶。3.2 霉菌个体形态的观察水浸片法 在于净载玻片上加棉兰一滴，用解剖针挑取少许菌体(或在培养皿盖上挑取少许霉菌体)，放于载玻片上棉兰染色液中，并将菌丝体分开，勿让它成团，加盖玻片，(注意不要产生气泡)。用滤纸吸去多余棉兰液，在低倍镜或高倍镜下观察。毛霉和根霉的观察 用上述水浸片法，剪取毛霉及根霉玻璃纸，分别制片后在低倍和高倍镜下观察，注意菌丝有无分隔，孢子囊梗有无分枝，有无假根和葡萄枝，孢子囊及子囊孢子的形状等。青霉与曲霉的观察 同用上述水浸片法，抽取青霉及曲霉插片，分别制片后在低倍镜和高倍镜下观察菌丝有无分隔，分生孢子梗有无分枝；帚状枝的形状，小梗，梗基的分枝和排列特点；顶囊的形状与小梗的列数；分生孢子的形状，大小与颜色。观察顶囊时，可用酒精反复冲洗，去掉复盖的大量孢子，使顶囊显示出来。

实验十八霉菌的形态观察目的要求学习霉菌的标本制备方法, 观察根霉、毛霉、青霉、曲霉、白地霉的形态构造。

材料1.菌种: 白地霉（Ceotrichum candidum）摇瓶培养液；根霉（Rhizopus sp. ）、毛霉（Mucorsp. ）、曲霉（Aspergillus sp. ）、青霉（Penicilli—um sp.）平板。

2.染料: 乳酸石炭酸棉蓝液。

3.其他：显微镜、载玻片、盖玻片、接种环、解剖针、培养皿、玻璃棒、滤纸、20％甘油。

原理霉菌菌丝较大, 细胞容易收缩变形, 孢子容易飞散, 在制备霉菌标本时, 常用乳酸石炭酸溶液作为介质, 具有不使细胞变形, 可杀菌防腐, 不易干燥, 能保持较长时间等优点, 若加入棉蓝, 又具有一定染色效果。

霉菌的有些结构在制片过程中易被破坏, 影响观察, 可采用载玻片培养法。

此法便于直接显微镜下观察, 尤其适用于根霉的假根, 曲霉的足细胞及分生孢子链等结构的生长情况的观察, 并且还可在同一标本上观察到微生物发育的不同阶段的形态。

方法1. 白地霉的观察取一块干净的载玻片, 加一滴白地霉培养液, 加盖玻片制成水浸标本片, 在显微镜下观察白地霉菌丝及节孢子的形态。

2. 其他霉菌观察（1）一般观察法: 加一滴乳酸石炭酸棉蓝液于洁净的载玻片中央, 用解剖针从菌落的边缘处挑取少量带有孢子的菌丝, 放入乳酸石炭酸棉蓝液中, 再细心地把菌丝挑散开, 加盖玻片, 注意不要有气泡产生。

置于显微镜下观察, 菌丝呈蓝色, 颜色的深度随菌龄的增加而减弱。

观察根霉时, 注意观察其菌丝（无横隔）、假根、孢子囊柄（与假根相对着生）、孢子囊、囊轴、囊托、孢子囊孢子及厚垣孢子。

观察毛霉时, 注意观察其菌丝（无横隔）、孢子囊柄、囊轴、孢子囊孢子及厚垣孢子。

观察曲霉时, 注意观察其菌丝（有横隔）、足细胞, 分生孢子梗、顶囊、小梗（形状、层数及在顶囊上的着生情况）, 分生孢子的着生情况。

观察青霉时, 注意观察其菌丝（有横隔）, 分生孢子梗, 带状枝（小梗的轮数及对称性）, 分生孢子的着生情况。

实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。

霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

菌丝分为营养菌丝与气生菌丝，营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料，从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系，可分化出产生孢子的结构。

菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。

菌丝在显微镜下观察呈管状，有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞，有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。

霉菌的菌落形态较大，质地较疏松，颜色各不相同。

霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。

菌丝、孢子及菌落等特征，因霉菌的种类而异，因而为种类鉴定非常重要的依据。

由于霉菌的菌丝体较粗，而且孢子容易飞散，若在水中溶易变形，显微测量时与实际值存在人为偏差，故观察时将其置于棉蓝乳酚油中，既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用，还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用，真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。

二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp．)，青霉(Penicillium sp．)，根霉(Rhizopus sp．)；棉蓝乳酸油染色液，载玻片，盖玻片，解剖针，滤纸，显微镜等。

三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块，火焰烧去酒精；2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴；3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中；4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开；5、将1洁净的盖玻片盖于染液上，以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液；6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。

四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开；2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下，否则在盖上异形成气泡。

五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。

3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同？II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。

实验三、霉菌的形态观察
一、实验目的：
（1）观察霉菌的群落特征
（2）观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态
（3）掌握霉菌的制片方法
二、实验原理：
霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。

在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。

有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。

菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。

菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。

菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。

在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。

由于霉菌的菌丝较大，而且孢子容易飞散，如将菌丝体制与水中易变形，故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。

三、实验材料：
（1）菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉
（2）时间和溶液：乳酸石炭酸棉溶液
（3）仪器和其他物品：显微镜、接种环、载片、擦镜纸等
四、实验内容：
产黄青霉：顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉：分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜
黑根霉：假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子
五、实验结果：
六、讨论
（1）霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种？
无性繁殖——无形孢子：游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子
有性繁殖——有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子。

实验2 霉菌的形态观察一、实验目的1. 学会对霉菌的制片方法。

2.了解和熟悉毛霉、根霉、曲霉、青霉的形态构造。

二、实验原理霉菌除少数为单细胞外，基本构造都是分枝或不分枝的菌丝。

菌丝体无色透明或呈暗褐色至黑色；或呈现鲜艳的颜色。

在固体培养基上长成绒毛状或棉絮状。

菌丝内部构造在显微镜下观察时皆呈管状。

低级的霉菌其丝状管道中无横隔，因此其菌丝体内含有许多细胞核。

而在一些比较高等的霉菌丝状管道中皆有横隔，由横隔将菌丝隔成许多细胞。

霉菌的繁殖方式很多，有各种各样无性及有性的繁殖方式，是分类时的重要依据，另外菌丝体与菌落形态的特征也是鉴别的依据。

霉菌菌丝和孢子通常比细菌和放线菌粗得多。

常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此用低倍镜即可观察。

观察霉菌形态有多种方法，常用的有以下三种：（1）直接制片观察法：是将培养物置于乳酸石炭酸溶液中，制成霉菌制片镜检。

用此溶液制成的霉菌制片的特点是：细胞不变形、具有防腐作用、不易干燥、能保持较长时间、能防止孢子分散等。

必要时，还可用树胶封固，制成永久标本长期保存。

（2）载玻片培养观察法（如下图）：用无菌操作将少量培养基琼脂置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片与盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。

这种方法可以保持霉菌的自然生长状态，还便于观察不同发育期的培养物。

（3）玻璃纸培养观察法：霉菌与放线菌的玻璃纸培养观察方法相似。

该方法用于观察不同生长阶段的霉菌的形态，也可获得良好的效果。

三、实验试剂与仪器1. 菌种：毛霉、根霉、曲霉、青霉等。

2. 溶液或试剂：乳酸石炭酸液3. 仪器或其他用具：显微镜、擦镜纸、接种环、接种钩、载玻片、盖玻片等。

四、实验步骤霉菌形态的观察——直接制片观察法观察霉菌时，除直接观察斜面或平皿的菌落外，制取霉菌标本时，由于菌丝粗大而且孢子很容易分散，放在水中观察细胞容易变形，因此，在制作标本时不用水，而用乳酸石炭酸溶液。

实验三霉菌的形态观察一、实验目的1.1 观察霉菌的菌丝以及菌丝体。

1.2 观察霉菌营养和气生菌丝体的特化形态1.3 学会用水浸法观察霉菌的技术。

二、实验原理霉菌形态比细菌、酵母菌复杂，个体比较大，具有分枝的菌丝体和分化的繁殖器官。

霉菌营养体的基本形态单位是菌丝，包括有隔菌丝和无隔菌丝。

营养菌丝分布在营养基质的内部，气生菌丝伸展到空气中。

营养菌丝体除基本结构以外，有的霉菌还有一些特化形态，例如假根、匍匐菌丝、吸器等。

霉菌的繁殖体不仅包括无性繁殖体，例如分生孢子，孢子囊等，包裹其内或附着其上的有各类无性孢子；还包括有性繁殖结构，例如子囊果，其内形成有性孢子。

在观察时要注意细胞的大小，菌丝构造和繁殖方式。

三、实验材料3.1器械接种针、接种环、酒精灯、载玻片、盖玻片、吸管3.2药品生理盐水3.3菌种黑根霉（Rhizopus nigricans）、青霉（Penicillum chrysogenum）黑曲霉（Aspergillus nigricans）等斜面菌种。

四、实验步骤4.1制水浸片取洁净的载玻片，滴加一滴乳酸一石炭酸液，挑取不同菌株的一团菌丝，分别置于不同的载玻片上（用记号笔标记菌株名称），加盖玻片。

4.2观察4.2.1观察青霉形态选取标记青霉的载玻片，观察霉菌的菌丝及其分隔情况。

观察菌丝体。

观察分生孢子着生情况(要求辨认分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子)。

4.2.2 观察根霉形态选取标记根霉的载玻片，观察假根、匍匐枝、孢子囊柄、孢子囊以及孢囊孢子。

五、结果5.1把观察到的各种霉菌绘图，并注明各部分名称。

5.2列表比较根霉与毛霉；青霉与曲霉在形态结构上的异同。

一段菌丝就是一个细胞，菌丝 由多个细胞组成，每个细胞内 有一至多个核。隔膜上有单孔 或多孔，细胞质和细胞核可自 由流通，每个细胞功能相同。 这是高等真菌所具有的类型。
按分化程度分:
营养菌丝（基内菌丝）:伸 入到培养基内部，以吸收养 分为主的菌丝。
气生菌丝:向空中生长的菌 丝.
气生菌丝发育到一定阶段可 分化成繁殖菌丝.
霉菌的菌体由分枝或不分枝的菌丝构成。 许多分枝菌丝相互交织在一起构成菌丝体。 菌丝是中空管状结构，直径约2-10µm。 霉菌菌丝类型： 按形态分：
▪ 无隔菌丝：为长管状单细胞，
细胞质内含多个核。
▪ 其生长表现为菌丝的延长和细胞核的增多。
▪ 这是低等真菌所具有的菌丝类型。
▪ 有隔菌丝 ▪ 菌丝中有隔膜，被隔膜隔开的
三、实验原理
霉菌：真核生物，菌丝较粗大，有分枝或不 分枝的。菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色， 或呈现鲜艳的颜色。在显微镜下观察时，菌 丝皆呈管状。在固体培养基上生长，为绒毛 状或棉絮状。一些较高等的霉菌丝状管道中 皆有横隔，由横格状菌丝隔成许多细胞。细 胞易收缩变形，而且孢子很容易分散，所以 制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。该染 色液使细胞不变形，具有防腐杀菌作用，且 不易干燥．能保持较长时间，溶液本身呈蓝 色，有一定的染色效果。
2、置于低倍镜下观察，必要时换高倍镜。
五、实验结果
1、绘出三种霉菌中任意两种的个体形态图，并 注明各部分名称
2、列表描述三种霉菌的菌落形态
菌 菌落状态 颜色 表面形态 边缘 干湿状况
名 （蔓延/局限）
（疏松/紧 （整齐/
密）/（棉 放射状）
絮状/毡状/
绒毛状）
三、霉菌的繁殖
菌丝片段
繁殖方式
无性孢子

绘出四种霉菌的个体形态24h24h曲霉曲霉24h足细胞40h曲霉曲霉40h曲霉散落的孢子曲霉电镜青霉40h高倍镜下的青霉40h青霉的孢子及孢子链油镜下青霉散落大量青霉孢子青霉图片青霉电镜毛霉24h24h毛霉毛霉的孢子囊孢子未散开孢霉40h高倍镜下根霉40h根霉孢子尖的分化根霉孢子
实验四、霉菌的形态观察
曲霉电镜 片
低倍镜下的 青霉40h
高倍镜下的 青霉40h
青霉的孢子 及孢子链
油镜下青霉
散落大量青 霉孢子
青霉图片
青霉电镜
毛霉24h
24h毛霉
毛霉的孢子囊 孢子
未散开孢 子
根霉24h
低倍镜根 霉40h
高倍镜下 根霉40h
根霉孢子
根霉的根 尖的分化
根霉孢子
一、实验目的：观察霉菌的个体和群体形态 二、实验原理：霉菌菌丝粗大、菌落蔓延 三、实验材料：毛霉、根霉、青霉、曲霉 四、实验内容： 菌落形态：干燥、蔓延 个体形态观察：子实体形态 方法：胶带粘取法 五、实验报告：绘出四种霉菌的个体形态
24h
24h曲霉
足细胞
曲霉24h
40h

1、你主要根据哪些形态特征来区别上 述四种霉菌？ P46，（1）
2、你以为在显微镜下，细菌，放线菌， 酵母菌和霉菌旳主要区别是什么？P46， （2）
上次试验习题解答
1.镜检时，你怎样区别放线菌旳基内菌 丝和气生菌丝？P42 ，2（3）
镜检时，基内菌丝色暗，分枝较少，而 气生菌丝色深，分枝多且向上分化出孢 子丝。
载玻片培养观察法：
用无菌操作将培养基琼脂薄层置 于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养， 霉菌即在载玻片和盖玻片之间旳有限 空间内沿盖玻片横向生长。培养一定 时间后，将载玻片上旳培养物置显微 镜下观察。这种措施既能够保持霉菌 自然生长状态，还便于观察不同发育 期旳培养物。
三、试验材料
1．菌种：黄曲霉、青霉、黑根霉和毛霉培养 2-5d旳马铃薯琼脂平板培养物。
4、培养：目前平皿旳滤纸上加3-5ml灭菌 到20%旳甘油（保持湿度），盖上平皿， 28℃培养。
5、镜检：根据需要能够在不同旳培养时间 内取出载玻片置低倍镜下观察，必要时换高 倍镜观察。
a.观察黑根霉菌丝情况和孢子情况（着重辨 认匍匐菌丝、假根、包囊梗、孢子囊）：
根霉
假根
孢囊孢子（sporangiospore）
请确保镜头擦拭 洁净！
五、试验成果
绘四种霉菌旳形态特征： 黄曲霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），有
足细胞，顶囊，分生孢子梗 青霉：有隔菌丝，外生孢子（分生孢子），为帚
状分生孢子穗，初级小梗，次级小梗； 黑根霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢
囊梗，匍匐枝和假根； 毛霉：无隔菌丝，内生孢子（孢囊孢子），孢囊
梗
六、思索题
2．培养基：土豆琼脂或察氏琼脂乳酸石炭酸 棉兰染液、碘液、酒精、蒸馏水等
3．仪器或其他用具：平皿，盖玻片，U形玻 棒，解剖刀，20%旳甘油以及显微镜等。

实验十四霉菌的形态观察霉菌是一类微生物，它们属于真菌门，是一种多细胞生物。

霉菌广泛分布于自然界中，生活在空气中、食物表面、水中和土壤中等多种环境中，包括我们生活中的厨房、卫生间等地方。

在实验室中，我们可以通过显微镜来观察霉菌的形态。

实验材料：- 霉菌培养基- 霉菌培养物：包括淀粉酵解菌、酵母菌等- 显微镜- 盖玻片- 水- 碘液实验步骤：1. 准备霉菌培养基和培养物：用霉菌培养基培养淀粉酵解菌和酵母菌，放置于恒温器中，调节温度和湿度，让霉菌生长。

2. 取少量霉菌培养物，滴在盖玻片上，加上一滴水，用草角硼酸盐液覆盖，等待1-2分钟，然后用滤纸吸干草角硼酸盐液，使样本准备好。

3. 将准备好的样本翻转在显微镜盘中央，用显微镜对其进行观察，可以获得霉菌的形态特征。

4. 继续加上一两滴碘液，覆盖样本，观察数分钟，可以看到霉菌体内的淀粉颗粒和其他小结构。

实验结果：通过这个实验，我们可以观察到霉菌的形态和结构。

霉菌体形各异，有单细胞和多细胞的两种形态。

其细胞质存在多个细胞质膜，使细胞内有许多纤维结构。

在显微镜下，我们还可以看到它们的菌丝和分生孢子。

分生孢子共分为两类：堆积生长型分生孢子和碎片生长型分生孢子。

前者是指在菌丝上生长出的长梢状团块，后者是指菌丝中间的结构会断裂并生长成新菌丝。

在观察时，我们也可以看到霉菌内部的细小结构，例如与淀粉的反应和颗粒。

霉菌是一种多结构、多形态的生物，它们广泛存在于自然环境之中。

通过观察霉菌的形态和结构，我们可以更加深入地了解这种生物，并且从中发现一些新的信息。

这个实验也提醒我们，我们生活中的许多地方都可能存在霉菌，需要保持卫生，并对容易滋生霉菌的物品进行及时清洁和消毒。

霉菌的形态观察一、【实验目的】1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法2、了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征二、【实验原理】1、霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3~10μm ），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

2、PDA培养基PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar （Medium），依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。

它是一种常用的培养基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。

3、载玻片培养观察法（小室培养法）观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。

载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌记载载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观察。

这种方法既可以保持霉菌自然生长状态，还便于观察不同发育期培养物。

三、【实验器材】1、菌种：曲霉 ( Aspergillus sp. ) ，青霉，根霉 ( Rhizopus sp. ) ，毛霉（ Mucor sp. ），培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物2、培养基：马铃薯培养基（简称PDA）（配方见附表）3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管，U 型玻棒，解剖刀，镊子，50%乙醇，20%甘油，显微镜，接种环，酒精灯等四、【操作步骤】1.配置PDA培养基：按配方配置马铃薯培养基200ml，其做法是先将马铃薯洗净去皮,再切成小块，加水煮烂（煮沸20~30分钟，能被玻璃棒戳破即马铃薯块可），先用一层纱布过滤，再用六层纱布过滤，取滤液，加热，加入葡萄糖补水至200ml。

实验三、霉菌的形态观察一、实验目的：（1）观察霉菌的群落特征（2）观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态（3）掌握霉菌的制片方法二、实验原理：霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。

在超市的条件下，霉菌可以生长出丝状，绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

单个菌丝在显微镜下观察呈管状，有的霉菌其菌丝有横隔膜，将菌丝分割为多细胞，成为有隔菌丝。

有点霉菌，其菌丝没有横隔膜，称为无隔菌丝。

菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。

菌落形态较大，质地较疏松，其疏松程度不等，颜色各异。

菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。

在观察时，要注意菌丝直径大小，菌丝体有无横隔膜，营养菌丝有无假根，无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。

由于霉菌的菌丝较大，而且孢子容易飞散，如将菌丝体制与水中易变形，故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色，保持菌丝体圆形，使细胞不易干燥，并有杀菌作用。

三、实验材料：（1）菌种：产黄青霉、黄曲霉、黑根霉（2）时间和溶液：乳酸石炭酸棉溶液（3）仪器和其他物品：显微镜、接种环、载片、擦镜纸等四、实验内容：产黄青霉：顶囊分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黄曲霉：分生孢子梗分生孢子小梗分生孢子有横隔膜黑根霉：假根匍匐枝孢子顶囊孢子囊舟孢子囊孢子囊孢子五、实验结果：六、讨论（1）霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种？无性繁殖——无形孢子：游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子有性繁殖——有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子（2）细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别？。

实验八霉菌的形态观察一、实验原理霉菌的营养体是分枝的菌丝体。

霉菌在潮湿条件下生长繁殖长出丝状、绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。

菌丝分为营养菌丝与气生菌丝，营养菌丝匍匐于培养基的表面或生于培养基内吸收养料，从营养菌丝上长出伸于空中的菌丝为气生菌丝系，可分化出产生孢子的结构。

菌丝的直径一般比细菌和放线菌大得多。

菌丝在显微镜下观察呈管状，有的有横隔膜将菌丝分割为多个细胞，有的菌丝无横隔膜整个菌丝体为1个单细胞。

霉菌的菌落形态较大，质地较疏松，颜色各不相同。

霉菌无性繁殖或有性繁殖可形成不同类型的孢子。

菌丝、孢子及菌落等特征，因霉菌的种类而异，因而为种类鉴定非常重要的依据。

由于霉菌的菌丝体较粗，而且孢子容易飞散，若在水中溶易变形，显微测量时与实际值存在人为偏差，故观察时将其置于棉蓝乳酚油中，既有保持其正常的形态、使细胞不易干燥及杀菌防腐作用，还因棉蓝染料的存在而对菌丝与孢子具有染色作用，真菌的显微观察时常用棉蓝乳酚油作为浮载剂。

二、主要仪器及设备曲霉(Aspergillus sp．)，青霉(Penicillium sp．)，根霉(Rhizopus sp．)；棉蓝乳酸油染色液，载玻片，盖玻片，解剖针，滤纸，显微镜等。

三、操作步骤1、取95%酒精浸泡的载玻片1块，火焰烧去酒精；2、冷却后在载玻片中央滴棉蓝乳酚油1滴；3、以解剖针从霉菌菌落上挑少许菌丝体置于染液中；4、以解剖针使菌丝体在染液中充分展开；5、将1洁净的盖玻片盖于染液上，以滤纸吸去盖玻片边缘过剩的染液；6、显微镜下20X、40X物镜观察绘图。

四、注意事项1、菌丝体在浮载剂中必须充分展开；2、盖盖玻片时必须斜着缓慢放下，否则在盖上异形成气泡。

五、实验报告1、绘制有隔菌丝与无隔菌丝图2、绘制青霉菌及曲霉菌的分生孢子梗图。

3、霉菌显微观察制片与细菌有何不同？II 四大类细胞型微生物的菌落特征比较观察一、实验原理菌落形态是指某种微生物在一定的培养基上由单个菌体形成的群体形态。

实验五、霉菌的形态观察实验目的：1. 观察不同霉菌的形态特征，了解霉菌的分类及特点。

2. 掌握霉菌的常规培养方法，培养出真菌菌株。

实验材料：1. 感染性霉菌（如：麦角菌、白色念珠菌、鼠李糠霉等）。

2. 培养基（如：琼脂、马铃薯葡萄糖琼脂、配制糖酵母汤等）。

3. 恒温培养箱（28℃）。

4. 显微镜。

5. 盖玻片、载玻片、恒温水浴槽、升级滴管等。

实验步骤：1. 每个菌种需要分别制取接种物，用无菌棉签在菌落上插取的接种物涂于琼脂平板上。

2. 放到恒温箱中，在28℃的环境下孵育。

3. 观察培养基上菌落的生长形态、菌落颜色及其他特征，如球状、点状、菌丝状等。

4. 取一个干净的载玻片，使用无菌镊子将菌落切取一小块放置在载玻片上。

5. 在玻片上滴入少量的100%甘油，用盖玻片覆盖住，观察微镜下菌落的形态，如直链菌丝、弯曲链菌丝、无菌膜等。

6. 将制做好的预备液取出一滴，放置于玻片上，用显微镜观察。

液体涂片法需要先将菌落取出来悬浮在液体中，然后将悬浮液放在载玻片上。

在玻片上先滴上液体悬浮物，再盖上盖玻片，用显微镜观察。

7. 通过对霉菌形态学的观察，结合培养基上的生长情况，明确不同霉菌菌株的分类。

实验结果：霉菌是一类微生物，主要生长在植物、动物有机物上，具有不同的形态特征。

在实验中，我们通过对不同菌株的观察，发现它们各具特色，有些是球状的，有些是菌丝状的，有些则是点状的。

当我们加入甘油后，可以看到更加清晰细致的形态特征。

观察下来发现，同一种霉菌在不同的培养基上，生长形态也会有所不同。

因此人们通过对霉菌分子生物学、生理生化功能等方面的研究，初步对霉菌进行了分类，取得了一些重要的研究成果。

本实验主要通过观察不同菌株的形态特征，结合生长情况，对不同霉菌菌株进行了初步分类。

同时本实验也使我们更加了解了霉菌的基本特征，如生长环境，形态变化等，如今霉菌被广泛应用于很多领域的研究中，如食品工业、制药工业、生物技术等行业，为我们所知的现代科技发展带来更好的发展机遇。

一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解四类常见霉菌（曲霉、毛霉、青霉、根霉）的基本形态特征；3. 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。

二、实验原理霉菌属于真菌的一种，可产生分枝的菌丝体，分为基内菌丝和气生菌丝。

气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3～10μm），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

三、实验器材1. 菌种：曲霉（Aspergillus sp.）、青霉、根霉（Rhizopus sp.）、毛霉（Mucor sp.）；2. 培养基：马铃薯琼脂平板；3. 染色剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液；4. 实验器材：载玻片、盖玻片、接种针、显微镜、无菌操作台、酒精灯、镊子、无菌水等。

四、实验步骤1. 霉菌接种（1）将曲霉、青霉、根霉、毛霉分别接种于马铃薯琼脂平板；（2）置于恒温培养箱中，培养条件为25℃、湿度70%；（3）培养2～5天后，观察菌落特征。

2. 霉菌制片（1）用无菌操作将培养好的霉菌菌落挑取少量；（2）将霉菌菌落涂布于载玻片上，用盖玻片轻轻压平；（3）将载玻片置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中，染色3～5分钟；（4）取出载玻片，用无菌水冲洗干净，晾干。

3. 霉菌观察（1）将制片置于显微镜下，用低倍镜观察霉菌菌落特征；（2）观察菌丝的粗细、颜色、分隔情况，以及孢子的形状、大小、颜色等；（3）对比四类常见霉菌的形态特征。

五、实验结果与分析1. 菌落特征观察（1）曲霉：菌落呈放射状，菌丝呈淡黄色，孢子呈球形，颜色为绿色；（2）青霉：菌落呈圆形，菌丝呈蓝绿色，孢子呈椭圆形，颜色为蓝绿色；（3）根霉：菌落呈白色，菌丝呈白色，孢子呈椭圆形，颜色为白色；（4）毛霉：菌落呈白色，菌丝呈白色，孢子呈球形，颜色为白色。

2. 霉菌制片观察（1）曲霉：菌丝粗大，分隔明显，孢子球形，绿色；（2）青霉：菌丝粗大，分隔明显，孢子椭圆形，蓝绿色；（3）根霉：菌丝细小，分隔不明显，孢子椭圆形，白色；（4）毛霉：菌丝细小，分隔不明显，孢子球形，白色。

一、实验目的1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；2. 了解四类常见霉菌（青霉、曲霉、根霉、毛霉）的基本形态特征；3. 通过实验操作，提高显微镜操作技术及无菌操作技术。

二、实验原理霉菌是一类广泛存在于自然界中的真菌，其菌丝体可产生分枝，分为基内菌丝和气生菌丝。

气生菌丝生长到一定阶段会分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。

霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。

霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3-10微米），常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。

三、实验材料与仪器1. 菌种：青霉（Penicillium sp.）、曲霉（Aspergillus sp.）、根霉（Rhizopus sp.）、毛霉（Mucor sp.）；2. 培养基：马铃薯琼脂培养基（PDA）；3. 溶液或试剂：乳酸石炭酸棉蓝染色液、蒸馏水、50%乙醇、碘液；4. 器材：剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、解剖针、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。

四、实验方法与步骤1. 制备培养基：将马铃薯琼脂培养基加热溶解，冷却后倒入培养皿中，待凝固后备用。

2. 接种：用无菌操作将青霉、曲霉、根霉、毛霉分别接种于PDA培养基上，放入培养箱中培养。

3. 观察霉菌形态：（1）直接制片观察法：取少量培养皿中的霉菌菌丝，用解剖针挑取带有孢子的霉菌菌丝，滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液或蒸馏水，盖上盖玻片，用显微镜观察。

（2）载玻片培养观察法（小室培养法）：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。

培养一定时间后，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。

4. 观察并记录：（1）菌丝体：观察菌丝体的颜色、粗细、分支情况等；（2）孢子：观察孢子的形状、大小、颜色等；（3）繁殖方式：观察霉菌的繁殖方式，如分生孢子、分生孢子梗等。

五、实验结果与分析1. 青霉（Penicillium sp.）：菌丝体呈青绿色，有横隔，菌丝粗细均匀，分生孢子梗直立，分生孢子呈链状排列。

用解剖针小心分散菌丝，盖上盖玻片；
置低倍镜或高倍镜下观察。
根霉：假根、匍匐菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
毛霉：菌丝、孢囊梗、孢子囊及孢子囊孢子
青霉：菌丝、分生孢子梗、帚状分支小梗及分生孢子
曲霉：菌丝、足细胞、分生孢子梗、初生小梗、 次生小梗、顶囊、分生孢子
实验结果
绘图说明你所观察到的霉菌的形态特征。
思考题
你主要根据哪些形态特征来区分四种不同的霉菌？ (包括菌落特征与个体特征)
实验三
霉菌的形态观察
目的要求
学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
了解四类常见霉菌的基本形态特征。
基本原理
霉菌的营养体是分枝的丝状体，分为基内菌丝 和气生菌丝。气生菌丝中又可分化出繁殖丝。不同 霉菌的繁殖菌丝可以形成不同的孢子。常见的观察 霉菌的有三种：直接制片观察法、载玻片培养观察 法和玻璃纸培养观察法。 霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容 易飞散，所以采用直接制片法制标本时常用乳酸石 炭酸棉蓝染色液。此染色液制成的霉菌标本片的特 点是：细胞不变形，具有杀菌防腐作用，且不易干 燥，能保持较长时间，溶液本身呈蓝色，有一定染 色效果。
实验器材
菌种
曲霉、青霉、根霉、毛霉
培养基
察氏琼脂培养基
溶液或试剂
乳酸石碳酸棉蓝染色液、 50％乙醇
仪器或其他用具
显微镜，盖玻片，载玻蓝染色液；
用解剖针挑取少量已产孢子的霉菌菌丝，先用50
％乙醇洗去脱落的孢子，再放在载玻片的染液中 (青霉、曲霉取菌丝时需连同培养基一起挑取)；