第三章消毒灭菌与实验室生物安全
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实验室生物安全规章制度第一章总则第一条目的和依据为保障实验室内生物实验的安全性和有效性,遵守国家相关法律法规、标准和规范,制定本规章制度。
第二条适用范围本规章制度适用于实验室内进行生物实验的所有工作人员。
第三条主管单位本实验室生物安全规章制度由实验室主管单位制定并负责实施。
第四条职责与义务所有工作人员都有义务遵守本规章制度,确保实验室内生物实验的安全和有序进行。
第五条管理原则实验室生物安全管理以预防为主,综合管理为辅,不断完善规章制度,提高生物实验的安全性和效率。
第六条安全风险评估实验室内生物实验前必须进行安全风险评估,并根据评估结果确定相应的安全防护措施。
第二章生物实验室的安全要求第七条实验室安全标识实验室内必须摆放安全警示标识,明确标识出禁止、警告、注意和指引信息,提醒工作人员注意安全。
第八条个人防护工作人员进入实验室必须穿戴符合要求的个人防护用品,包括实验服、手套、防护眼镜等。
第九条实验室进出管理实验室内必须有专门的管理人员负责进出实验室的管理,记录工作人员的姓名、时间和目的。
第十条生物实验物品管理实验室内的生物实验物品必须分类归档,定期清点,确保物品数量和质量不会出现差错。
第十一条废弃物品处理实验室内产生的废弃物品必须按照相关规定进行分类、包装和处理,禁止随意丢弃。
第十二条紧急救援程序实验室内必须制定紧急救援程序,明确各类紧急事件的处理流程和责任分工,确保及时有效的应急措施。
第三章生物实验操作规范第十三条操作规范进行生物实验时必须按照操作规范进行,禁止随意操作或违规操作。
第十四条实验设备使用实验设备使用前必须进行检查并确定设备正常运转,使用后要及时清理和维护。
第十五条试剂使用试剂使用时必须按照说明书要求进行,禁止混用或超量使用。
第十六条实验操作记录进行生物实验时必须及时记录实验过程和结果,确保实验数据的准确性和完整性。
第十七条实验结束处理实验结束后必须及时清理实验室环境,归档实验记录,并按照相关规定处理实验废弃物品。
生物安全实验室常规消毒灭菌一、室内空气消毒具备排风净化功能的负压实验室,根据所操作的微生物因子不同,空气可以经高效过滤器过滤后排放,但应采取通风控制系统来防止实验室出现正压。
室内空气经高效过滤器过滤后排到建筑物以外并远离该建筑的进气口。
无排风净化功能的常压实验室,使用可汽化过氧化氢、气体二氧化氯对空间进行气体熏蒸或气溶胶喷雾等方法消毒,同时需做好个人防护与消毒后消毒剂残留的去除处理。
二、室内环境表面消毒若地面、实验台面等被明显污染,应立即用吸液布覆盖,喷洒消毒剂(从外向内)于吸液布上,使吸液布湿透,作用60min 后用清水擦拭干净。
实验台面、桌椅、门把手、生物安全柜和解剖柜台面、侧壁等可用消毒剂喷洒、擦拭。
表面消毒可使用含氯消毒剂,含有500~1 000mg/L有效氯溶液适于普通的环境表面消毒。
当处理高危环境时建议使用5 000mg/L有效氯溶液。
用于金属表面消毒处理时,消毒结束后应尽快使用清水清除表面残余消毒剂。
三、生物安全防护设备的消毒(一)生物安全柜消毒在每次使用前后清除生物安全柜内表面的污染,工作台面和内壁要用中高效消毒剂进行擦拭,不触及送风滤器的扩散板。
75%乙醇消毒后需及时擦净水痕。
采用含氯消毒剂处理后,须用水擦拭干净,防止对生物安全柜的腐蚀。
试剂溢漏或泼洒后,立即消毒污染物及污染的表面。
生物安全柜在移动或更换过滤器之前,要使用汽化过氧化氢、二氧化氯气体或甲醛蒸汽对生物安全柜进行终末消毒。
(二)高效过滤器的消毒采用汽化过氧化氢消毒法或甲醛熏蒸法进行消毒。
消毒器应与排风过滤器排风箱体的消毒接口连接,利用循环气流带动蒸汽循环实现原位消毒。
消毒后可将滤器卸载,装入医用废物塑料袋中,进行压力蒸汽灭菌。
操作时做好个人防护。
(三)个体防护装备的消毒一次性帽子、口罩、手套,使用后应放入废物袋内高压灭菌。
防护鞋、防护眼罩、防护面具(半面具)、防护面罩(含正压面罩)表面用消毒剂喷雾或擦拭消毒,作用到预定时间后清洗晾干备用。
实验室生物安全规章第一章总则第一条为了保护实验室工作者的生命安全和健康,确保实验室内生物实验的安全进行,制定本规章。
第二条实验室生物安全规章适用于所有从事生物实验相关工作的人员,包括实验室工作者、研究人员、技术人员等。
第三条实验室严格遵守国家有关生物安全法律法规,确保实验室内生物实验的合法合规进行。
第四条实验室内的实验材料必须经过安全审批,达到相应的生物安全等级标准后方可使用。
第五条实验室应当建立健全的生物安全管理体系,明确责任分工,确保实验室内生物实验的安全进行。
第六条实验室负责人应当负有生物安全管理责任,对实验室内生物实验进行全面监督和管理。
第七条实验室应当配备专业的生物安全专家,负责指导和监督实验室的生物安全工作。
第八条实验室工作者应当接受相应的生物安全培训,掌握生物实验的安全操作技能。
第二章实验室环境安全第九条实验室应当保持干净整洁,定期进行消毒和清洁,确保实验室内环境的卫生安全。
第十条实验室应当配备必要的通风设备,保证实验室内空气的清新和流通,防止有害气体的积聚。
第十一条实验室应当设立生物废弃物处理区,配备相应的生物废弃物处理设施,确保废弃物得到安全处理。
第十二条实验室应当建立健全的实验室安全防护措施,对生物实验用具、试剂等材料进行安全保护。
第十三条实验室应当配备应急救援设备和药品,训练实验室工作者进行应急救援操作,保障生物实验的安全进行。
第三章生物实验安全第十四条实验室内生物实验必须按照规定的程序进行,切勿擅自改变实验计划。
第十五条实验室内生物实验必须严格遵守实验操作规程,做好实验前的准备工作,保证实验安全进行。
第十六条实验室内生物实验必须遵守实验操作规程,穿着相应的防护服装,戴上口罩、手套等防护用具。
第十七条实验室内生物实验必须做好实验现场的安全隔离措施,防止生物实验材料泄漏和污染。
第十八条实验室内生物实验必须保持实验室内的安静环境,避免产生干扰和误操作。
第十九条实验室内生物实验应当严格按照实验计划进行,不得随意更改或增减实验内容。
《医学微生物学》第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全练习题及答案【知识要点】1.掌握:(1)消毒、灭菌、清洁、防腐、无菌及无菌操作的概念。
(2)消毒灭菌的运用(3)病原微生物实验室的分级2.熟悉:常用的高压蒸气灭菌法、巴氏消毒法等热力杀菌法日光与紫外线杀菌机理及其应用;常用的化学消毒剂的种类及其应用。
实验室感染的控制以及监督和法律责任。
3.了解:热力灭菌法的种类和应用范围;常用化学消毒剂的作用机制及影响作用的因素。
【课程内容】第一节消毒灭菌常用术语第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒与灭菌(一)热力灭菌法(二)辐射杀菌法(三)滤过除菌法(四)超声波消毒法(五)干燥与低温抑菌法二、化学消毒灭菌法(一)化学消毒灭菌法的原理(二)消毒剂的主要种类第三节消毒灭菌的运用一、医疗器械物品的消毒灭菌二、室内空气消毒灭菌三、手和皮肤的消毒四、黏膜消毒五、病人排泄物与分泌物的消毒灭菌六、病人污染物品的消毒七、饮水的消毒八、环境的消毒第四节影响消毒灭菌效果的因素一、微生物的种类二、微生物的物理状态三、微生物的数量四、消毒剂的性质、浓度与作用时间五、温度六、酸碱度七、有机物第五节病原微生物实验室生物安全一、病原微生物的分类二、病原微生物实验室的分级实验室感染的控制以及监督和法律责任【应试习题】一、名词解释1.防腐2.高压蒸气灭菌法3.灭菌4.无菌5.消毒6.抑菌7.巴氏消毒法8. 清洁二、填空题1.化学消毒剂杀菌或抑菌的作用机理是_______、_______和。
2.高压蒸气灭菌法的蒸气压力为_______kg/C㎡,温度达_______℃,维持时间是_______min。
3.紫外线杀菌力最强的波长为_______,常用于无菌室的_______消毒。
4.预防新生儿淋病奈瑟菌感染常用的滴眼剂是_______。
5.消毒手术包常采用的方法是______________________,其温度达到______________,维持时间是_____________________,可去除细菌及___________________。
第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全-临床执业医师考试医学微生物学重点培训讲义第三章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全第一节消毒灭菌的常用术语1、灭菌:杀灭生物体上所有微生物的方法。
2、消毒:杀死物体上或环境中的病原微生物,并不一定能杀死细菌芽胞或非病原微生物的方法。
3、防腐:防止或抑制皮肤表面细菌生长繁殖的方法。
4、无菌:无菌即不存在活菌,多是灭菌的结果。
无菌操作:防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。
5、清洁:减少微生物数量的过程。
第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法:热力、辐射、滤过、干燥和低温等。
㈠热力灭菌法:分为干热灭菌和湿热灭菌1、干热灭菌法:一般细菌繁殖体在干燥状态下,80-100℃经1小时可被杀死,芽胞则需要更高温度才能被杀死。
①焚烧:废弃物、尸体②灼烧:接种环、试管口③干烤:(160~170℃,2h)利用干烤箱灭菌,一般加热至171℃经1h或160℃ 2h或1 21℃ 16h。
适用于高温下不变质、不损害、不蒸发的器皿(如:玻璃器皿)。
④红外线(0.7~1000um波长的电磁波):医疗器械2、湿热灭菌法:最常用,在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好,因为:ⅰ湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性;ⅱ湿热的穿透力比干热大;ⅲ湿热的蒸汽有潜热效应存在。
①巴氏消毒法:用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物,以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法(61.1-62.8 ℃ 30min 或71.7℃15-30s,主要用于牛乳消毒和酒类)。
②煮沸法(100 ℃,5min)食具、注射器等消毒③流动蒸汽消毒法(100 ℃ 15-30min)④间歇蒸汽灭菌法(100 ℃ 5-30min,37 ℃24h×3天)⑤高压蒸汽灭菌法:*压力—103.4KPa(1.05Kg/cm2)*温度—121.3 ℃*时间—15-20min*效果—杀灭包括芽孢在内所有微生物*应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品㈡辐射杀菌法:①紫外线:波长240—300nm的紫外线具有杀菌作用,其中以265—266nm最强。
第3章消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全一、选择题【A型题】1.杀灭包括芽胞的所有微生物的方法称作:A.消毒B.无菌C.灭菌D.灭活E.防腐2.判断彻底灭菌的依据是:A.细菌繁殖体被完全消灭B.芽胞被完全消灭C.细菌菌毛蛋白变性D.鞭毛蛋白被破坏E.细菌的荚膜被破坏3.热力灭菌的方法中,效力最强的是:A.煮沸法B.干烤C.巴氏消毒法D.使用流通蒸气E.使用103.4kPa高压蒸气4.去除血清标本中污染的细菌常用:A.巴氏消毒法B.紫外线照射法C.煮沸法D.滤过除菌法E.高压蒸气灭菌法5.外科手术敷料使用前宜采用的灭菌方法是:A.干烤B.巴氏消毒法C.紫外线照射法D.流动蒸气消毒法E.高压蒸气灭菌法6.将牛乳加热71.7℃经15-30s的目的是:A.消毒B.灭菌C.防腐D.灭活病毒E.保鲜7.细胞培养用24孔塑料板适用下列哪种杀菌法?A.煮沸法B.紫外线照射法C.红外线照射法D.高压蒸气灭菌法E.间歇灭菌法8.紫外线的杀菌机制是:A.破坏细菌DNA构型B.破坏酶系统C.破坏菌体蛋白D.干扰蛋白质合成E.破坏RNA9.紫外线杀菌的最佳波长为:A.200nmB.265nmC.300nmD.560nmE.650nm10.属于表面活性剂的消毒剂是:A.高锰酸钾B.来苏C.甲醛D.0.05%~0.1%杜灭芬E.龙胆紫11.漂白粉属于:A.酚类消毒剂B.醇类消毒剂C.氧化剂消毒剂D.表面活性剂E.酸碱类12.用于除菌的薄膜滤菌器,其滤膜孔径应为:A.O.12~0.25μmB.O.22~0.45μmC.O.52~0.65μmD.0.72~0.85μmE.O.95~1.0μm 【X型题】1.可以杀灭芽胞的方法是:A.煮沸法2小时B.巴氏消毒法C.流动蒸气消毒法15~30分钟D.间歇蒸气灭菌法E.高压蒸气灭菌法2.关于紫外线杀菌,正确的叙述是:A.其杀菌与波长有关B.可直接破坏细菌的DNA构型C.穿透力弱,故适用于空气或物体表面消毒 D.可杀死细菌的芽胞 E.波长265~266m杀菌作用最强3.化学消毒剂的杀菌机制是:A.促使菌体蛋白变性B.破坏细菌DNA构型C.干扰细菌的酶系统和代谢D.损伤菌细胞膜 F.使菌体蛋白凝固4.影响消毒剂消毒效果的因素有:A.消毒剂浓度、性质与作用时间B.温度C.酸碱度D.菌种与生长期E.环境中有机物和其他因素的影响5.在温度和时间相同的情况下,湿热杀菌效力比干热杀菌效力大的原因是:A.湿热中细菌菌体蛋白较易凝固B.湿热灭菌能够杀死细菌芽胞C.湿热蒸气的穿透力比干热强D.湿热灭菌对细菌DNA损害较大E.湿热的蒸气有潜热存在二、填空题1.消毒与灭菌的方法一般可分为和两大类。