自动生物化学分析仪实验参数设置
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全自动生化分析仪校准规范全自动生化分析仪校准规范(湿式)全自动生化分析仪是临床诊断的重要手段之一 ,其检测结果是否准确对临床疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。
在仪器检测结果精密度良好的前提下,仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤,为此结合国内的相关标准的基础上,就全自动生化分析仪校准的基本要求提出如下建议。
1杂散光的试验方法1.1设定两个单试剂项目,波长设为340nm;1.2设定上述项目的试剂位,分别以蒸馏水和亚硝酸钠标称溶液(50g/L)为试剂和样本,每个项目重复测定5测试;1.3查看反应曲线或反应数据,以最后一点的吸光度作为所测定溶液的吸光度,共得到5个蒸馏水和5个亚硝酸钠标称溶液的吸光度;1.4计算最小的亚硝酸钠溶液吸光度与最大的蒸馏水溶液的吸光度的差值,为杂散光。
1.5应符合标准的要求;当测定波长为340nm时,杂散光应不大于0.5%(或吸光度不小于2.3)。
2吸光度线性范围的试验方法2.1以340nm吸光度不低于2.0(以蒸馏水为空白)的重铬酸钾溶液为原液,用蒸馏水稀释出相对浓度分别为1、2、3、4、5、6、7、8、9和10(原液)的系列溶液;2.2设定一个单试剂项目,波长为340nm,试剂和样本均为待测溶液;通过反应曲线或反应数据查找试剂空白段的吸光度;2.3按照浓度由低到高的顺序,每个浓度重复测定2次;2.4以相对浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,画出散点图;2.5用最小二乘法对所有数据进行线性拟合,按照公式(1)、(2)和(3)计算每一个点的相对偏倚;相对偏倚=100*(A-(a+b*C))/(a+b*C) (1)式中:A为实际测定的吸光度,a为线性拟合的截距,b为线性拟合的斜率。
22b=(nΣA*C-ΣAΣC)/( nΣC-(ΣC)) (2)a=(ΣA/n)-b*(ΣC)/n (3)式中:A为吸光度,C为相对浓度,n为总的测定点数。
2.6应符合标准的要求:线性范围不小于2.0,各测定值的相对偏移不大于?5,。
自动生物化学分析仪实验参数设置全自动生化分析仪的参数就是仪器工作的指令,操作者通过设置正确的参数控制仪器完成一系列复杂而且有序的操作程序。
指挥仪器工作的参数很多,有些参数是在生产过程中设置好的,如机械操作、加试样时间、反应时间安排等,只需选择就可进行工作,我们简称为仪器指令。
操作者需进行的参数设置是指进行某个具体检测项目时的具体操作指令,我们简称为客户指令,主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长、延迟时间、测定时间、控制因素等。
客户指令和仪器指令结合起来,共同完成整个测试。
各种品牌的仪器由各自的厂商设置了不同的仪器指令,我们在设置客户指令之前必须了解厂商设置的仪器指令,才能根据不同的试剂要求设置客户指令。
一、日立7170、7180、7600 P仪器指令0 5 10 15 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2 T3 T4二、日立7060、7080仪器指令0 5 10 150 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45S T1 T2 T3 T4三、日立7150、7600 D仪器指令0 5 10 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50S T1 T2四、奥林帕斯AU600 、AU400、AU640、AU2700、AU5400 仪器指令0 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27S T1 T2五、奥林帕斯AU800 、AU10000 3 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16S R1 R2六、东芝40 FR0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62S T1 T2七、东芝120 FR仪器指令0 5 100 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33S T1 T2八、贝克曼CX4\5\7\90 320 620 920primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rgtreagent blankreaction八、贝克曼LX20-180 0 300 600primary inject rnt SAMPLEsecondary inject rg t Third Inject rgtreagent blankreaction九、客户指令1.样品和试剂量样品和试剂量的确定一般按照实际说明书上的要求比例,并结合仪器特征进行设置。
自动生化分析仪的分析参数设置自动生化分析仪是一种把生化分析中的取样、加试剂、去干扰物、混合、恒温反应、自动监测、数据处理以及实验后清洗等步骤进行自动化操作的仪器,它完全模仿并代替了手工操作,目前已经成为医疗机构进行临床诊断所必可不少的仪器之一。
它的应用大大提高了生化检验的准确性、精密度和工作效率,适应了临床医学发展对检验医学的要求,然而这一切不仅需要生化分析仪的技术基础,也需要仪器内每个项目都有一组最优化的分析参数。
并且目前大多数生化分析仪为开放式,封闭式的仪器一般也会另外留一些检测项目的空白通道由用户自己设定分析参数,因此我们有必要了解生化分析仪各个分析参数的基本含义以及设置方法。
1.试验名称常以项目的英文缩写来设置,如总蛋白设置为TP,白蛋白设置为ALB等。
2.方法类型生化分析仪常用的方法有终点法、连续监测法、比浊法等,根据被检物质的检测原理等选择其中一种分析方法。
2.1终点法又称为平衡法,是基于反应达到平衡时反应产物的吸收光谱特征及其对光吸收强度的大小对物质进行定量分析的一类方法,有一点终点法和两点终点法两类。
一点终点法的特点是使用一种或两种试剂,当待测物与试剂反应达到终点时,测定混合溶液的吸光度来计算待测物的浓度,该法常用的有总蛋白双缩脲法、白蛋白溴甲酚绿法、葡萄糖氧化酶法等,手工操作的大多数方法都是一点终点法。
两点终点法也称固定时间法,如果是单试剂分析,当测定波长同干扰物质的吸收光谱有重叠时,通过选用两点终点法可消除样品空白引起的干扰,其分析过程是在样品与试剂混合后经过一段延滞期读取一个点A1,一定时间后再读取A2,然后比较标准和测定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待测物的浓度。
肌酐苦味酸法就是一个典型的单试剂两点法的例子。
如果是双试剂分析,选用二点终点分析法除了可消除样品空白引起的干扰外,还可消除内源性干扰物质的干扰,其分析过程是加入试剂1后读取A1,加入试剂2后读取A2,A1相当于读出样品空白值,A2才是实际呈色反应,然后比较标准和测定的ΔA(ΔA=A2-A1)值,求得待测物的浓度。
全自动生化分析仪操作规程
《全自动生化分析仪操作规程》
一、操作前准备
1.1 确认仪器和相关设备处于正常工作状态。
1.2 准备好所需的试剂和标准品。
1.3 充分了解要测试的样本类型和相关信息。
二、开机操作
2.1 按照仪器说明书正确开启仪器。
2.2 确认仪器在开机自检过程中无异常情况。
三、准备样本
3.1 根据实验要求,采用适当的方法准备样本。
3.2 将样本按照仪器规定的方式装入样本架。
四、设置参数
4.1 根据测试要求,在仪器界面上设置相应的测试项目和参数。
4.2 确认参数设置无误。
五、开始测试
5.1 点击“开始测试”按钮,使仪器开始自动测试样本。
5.2 保持仪器在测试过程中不受外界干扰。
六、检查结果
6.1 测试结束后,查看仪器上显示的测试结果。
6.2 确认结果无误后,将结果记录。
七、清洁和关机
7.1 根据仪器说明书,将仪器内部和外部进行清洁。
7.2 关闭仪器,并根据要求进行仪器的维护和保养工作。
八、安全注意事项
8.1 在操作过程中,遵守相关的安全规定,避免造成身体和仪器损坏。
8.2 对于化学试剂的操作,必须做好相应的防护措施。
以上规程是全自动生化分析仪的基本操作流程,操作人员必须按照规程准确操作,以确保测试结果的准确性和安全性。
自动生物化学分析仪实验参数设置
全自动生化分析仪的参数就是仪器工作的指令,操作者通过设置正确的参数控制仪器完成一系列复杂而且有序的操作程序。
指挥仪器工作的参数很多,有些参数是在生产过程中设置好的,如机械操作、加试样时间、反应时间安排等,只需选择就可进行工作,我们简称为仪器指令。
操作者需进行的参数设置是指进行某个具体检测项目时的具体操作指令,我们简称为客户指令,主要包括样品量、试剂量、测定方法、校正方法、反应时间、测定波长、延迟时间、测定时间、控制因素等。
客户指令和仪器指令结合起来,共同完成整个测试。
各种品牌的仪器由各自的厂商设置了不同的仪器指令,我们在设置客户指令之前必须了解厂商设置的仪器指令,才能根据不同的试剂要求设置客户指令。
一、日立7170、7180、7600 P仪器指令
0 5 10 15 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50
S T1 T2 T3 T4
二、日立7060、7080仪器指令
0 5 10 15
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45
S T1 T2 T3 T4
三、日立7150、7600 D仪器指令
0 5 10 0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50
S T1 T2
四、奥林帕斯AU600 、AU400、AU640、AU2700、AU5400 仪器指令
0 3 10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27
S T1 T2
五、奥林帕斯AU800 、AU1000
0 3 10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16
S R1 R2
六、东芝40 FR
0 5 10
0 1 2 3 4 5 6 7 9 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62
S T1 T2
七、东芝120 FR仪器指令
0 5 10
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33
S T1 T2
八、贝克曼CX4\5\7\9
0 320 620 920
primary inject rnt SAMPLE
secondary inject rgt
reagent blank
reaction
八、贝克曼LX20
-180 0 300 600
primary inject rnt SAMPLE
secondary inject rg t Third Inject rgt
reagent blank
reaction
九、客户指令
1.样品和试剂量
样品和试剂量的确定一般按照实际说明书上的要求比例,并结合仪器特征进行设置。
一起的特征有:样品和试剂的最小加样量及加样范围、最大、最小反应液量的体积等。
亦可根据手工法按比例缩减或者重新设计。
但要考虑到检测灵敏度、线性范围,尽可能将样品稀释倍数大些,以降低样品中其他成分的影响。
2.试剂的选择
▲单试剂法:在反应过程中仅加入一次试剂,读取反应一定时间的吸光度
▲双试剂法:检测试剂分两步加入,第一步先加入1试剂去除干扰物质。
在加入1试剂后读取1次吸光度(此时试剂与标本不发生反应,吸光度为标本和试剂所产生),再加入2试剂,反应一定时间后再读取一次吸光度,依两次吸光度之差计算结果。
3. 测定方法的选择
全自动生化仪一般有几种固定的测定方法,常用为一点终点法(1Point End )、两点终点法(2Point End )、连续监测法(Rate )。
4. 波长选择
▲单波长:当反应体系中待测组分的吸收峰与其他共存物质吸收波长无重叠时选用,一般选择物质的最大吸收波长
附近。
▲双波长:用两个不同波长测定,一般用于溶液共存物质有吸收波长重叠时,主波长选择同单波长法,副波长选择原则是共存物质在主波长和副波长吸光率越接近越好。
5. 分析时间的选择
生化分析的时间是某一项目所特有的,根据所采用的测定方法不同而异。
一点终点法的总蛋白为10分钟,清蛋白为1分钟。
速率法用两个时间点,延迟时间和测定时间,如ALT 延迟时间1-2分钟,测定时间3分钟。
反应时间应根据说明书要求和试验观察,做合理的选择。
各种仪器表达试验时间的方法不同,在测定时也应结合。
6. 校正方法的选择
▲两点校正(Line ):自用一个浓度的标准品和试剂空白进行校正的方法,该法要求反应必须符合郎伯-比尔定律,即标准曲线呈线性。
▲多点校正(Spline):多个具有浓度梯度的标准品用非线性法进行校正,适用于标准曲线呈各种曲线形式的项目。
▲量程法:根据标准物质吸光度同样品吸光度的比值计算标准物质含量
k A A A ⨯=⨯=
样品标准品
样品标准品浓度样品浓度
一般用于酶学测定,先求出标准指示物质的摩尔吸光系数,根据吸光度的变化速率估计酶促反应产生指示物质的速度,来计算酶活性。
k A
L v V A L U ⨯∆=⨯⨯⨯⨯∆=min
10min /6ε
式中:V ——反应体系体积(ml ) ε——摩尔吸光系数法 v ——样品量(ml )
L ——比色杯光径 ΔA ——吸光度变化 7. 反应方向的选择
反应使吸光度上升的选择正向反应,是吸光度下降的选择负向反应。
8. 反应吸光度限制
根据说明要求选择不同的吸光度限制。
选择吸光度的上下限,规定反应的吸光度不超出此范围。
日立7170客户参数设置屏幕。