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第2节动物细胞工程课时过关·能力提升一、根底稳固1.关于使用动、植物成体的体细胞进展离体培养,以下表达正确的选项是( )2培养箱解析:不管是动物细胞培养还是植物组织培养,最根本的一个要求就是都要在无菌环境条件下进展。
此外,动物细胞培养的培养基是液体培养基,其中的碳源是葡萄糖,培养液中还需要参加一定的动物血清,其气体环境是空气加一定浓度的二氧化碳,以维持培养液的pH。
而植物组织培养的培养基为固体培养基,其碳源为蔗糖,在组织培养的脱分化阶段必须在黑暗条件下进展,再分化过程那么需要一定的光照条件。
动物细胞培养的实质就是细胞的增殖,不能表达细胞的全能性,而植物组织培养表达了植物细胞的全能性。
答案:C2.以下关于动物细胞培养的表达,正确的选项是( )解析:保存接触抑制的细胞在培养瓶壁上只能形成单层细胞。
在培养细胞时由于所有子代细胞来自于一个亲代细胞,所以基因型一般都一样。
二倍体细胞的传代培养在培养10代左右多数会死亡,少数生存下来的细胞在50代左右会大量死亡,只有个别细胞遗传物质改变成为癌细胞,可无限制地传代下去。
答案:D3.以下关于细胞融合的说法,错误的选项是( )A.动、植物细胞的融合之前都需经酶处理B.细胞融合过程依赖细胞膜的功能特点——流动性C.融合后,动、植物细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息D.动、植物细胞融合均需要诱导剂诱导解析:细胞融合的原理是细胞膜的流动性,这是细胞膜的构造特点。
答案:B4.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下可以发育成完整的植株,离体动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体,原因是( )B.动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制,分化潜能变弱解析:动物细胞的全能性随分化程度提高而受限变弱,只能通过核移植实现克隆动物的目的。
答案:B5.某实验室做了以下图所示的实验研究,以下相关表达正确的选项是( )A.与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较低②是诱导干细胞的构造和遗传物质发生稳定性差异的过程C.每个Y细胞只产生一种抗体,故过程③不需用选择性培养基进展筛选④产生的单抗,不需细胞膜上载体蛋白的协助就能释放到细胞外解析:诱导干细胞的全能性比纤维母细胞高,诱导分化过程中遗传物质未发生改变,只是基因的选择性表达。
教案真实问题【问题1】如何用于生理、病理等方面的研究？【讲述】问题提出的背景：研究发现，与正常甲状腺组织相比，NDRG2基因（后面简称N基因）在甲状腺髓样癌细胞中表达水平极低或不表达。
【引导设计实验】研究者推测甲状腺髓样癌的发生与发展可能与N基因的低表达有关。
如何设计实验来验证这一推测呢？请大家用体外培养的甲状腺髓样癌细胞为实验材料，从自变量的施加、因变量的检测和排除无关变量的影响三个方面，来思考一下实验思路。
【实验设计展示】【拓展知识】平板克隆形成实验和细胞划痕实验【演示】实验结果真实问题【问题2】疾病治疗中如何发挥单抗的作用？【讲述】问题提出的背景：埃博拉出血热以及埃博拉病毒【引导分析】科学家采集了多年前感染EV并已康复的甲、乙两人的血液，检测了抗EV-GP抗体的水平，结果如图1。
1.你认为该选择哪位康复者提供的血液来分离经免疫的B细胞制备单抗？2.你能简述一下大致流程么？科学家将制备的多种单抗分别与病毒混合，然后检测病毒对宿主细胞的感染率，得到如下结果。
1.EV表面的糖蛋白EV-GP是引起机体免疫应答的抗原，为何同一抗原会对应多种抗体？2.根据图示结果，你认为对病毒抑制效果最好的是哪两种单抗？3.在临床应用时，你希望上述两种抗体与EV-GP结合位点相同，还是不同？【实验步骤展示】【绘图引导分析】略【资料】，中国科学家分离得到三株抗EV-GP的单克隆抗真实问题【问题3】核移植在家畜遗传改良中的作用？【讲述】问题提出的背景：乳腺炎和口蹄疫是两种分别由细菌和病毒引起的危害奶牛养殖业的严重疾病。
研究者尝试将抗细菌的乳铁蛋白肽基因和抗病毒的人α干扰素基因转给奶牛，培育抗病的奶牛新品种。
【引导设计流程】如果你是研究者，培育思路是什么？会用到哪些生物技术？【培育流程展示】【提问】1.目的基因的受体细胞一般是什么细胞？如何将基因导入该细胞？2.研究者希望培育的转基因奶牛，能够在乳腺中特异性表达乳铁蛋白肽以抵抗乳腺炎，并且在全身细胞内表达人α干扰素以抵抗口蹄疫。
2.3 动物细胞工程（第一课时）编写人陈光教学目标1.了解动物细胞与组织培养的原理、意义及应用。
2.理解动物细胞与组织培养的方法、过程。
3.了解动物体细胞核移植技术的原理和意义。
4.掌握细胞核移植与体细胞克隆的过程和意义。
5.了解克隆技术引发的社会伦理问题。
一、动物细胞与组织培养1．概念：是指在体外模拟动物______________，将动物____________在________、________适宜和________充足的条件下培养，使其继续____________并维持原有结构和功能的技术。
2．材料____________或出生后不久的_____________________________________。
3．动物细胞培养与动物组织培养过程(1)动物细胞培养：无菌条件下取出组织块，用培养液漂洗→用____________等处理，形成分散的__________→细胞______到含有营养液的培养皿中，进行培养→细胞不断分裂，铺满整个培养皿底部，形成一层细胞→将细胞______到新培养液中，继续培养。
(2)动物组织培养：无菌条件下取出组织块，用培养液漂洗→用眼科剪______组织块→用____________冲洗组织块，自然沉降→将组织块移入培养瓶中→使组织块______在培养瓶的______上，在培养液中生长。
二者的主要区别：动物细胞培养过程中需要用____________等使组织块中的细胞______。
4．环境条件：包括____________、pH、______________和____________等。
5．培养基(1)天然培养基：主要取自____________、________________和________等，具有营养价值高、__________的特点。
(2)合成培养基：______________的培养基，具有成分________、便于控制____________的特点，还需加入____________。
第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养基础过关练题组一归纳动物细胞培养的条件1.(2020河北沧州一中高二月考)一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下哪些条件(易错)①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加入血清④温度与动物体温相近⑤需要O2,不需要CO2⑥适宜的渗透压A.①②③④⑤⑥B.①②③④C.①③④⑤⑥D.①②③④⑥2.(2020江苏南通高三一模)在进行动物细胞培养时,需要(易错)A.用胃蛋白酶处理以获得细胞悬液B.充入5%CO2以刺激细胞正常呼吸C.加入经高压蒸汽灭菌的血清以提供营养D.定期更换培养液以清除代谢物题组二理解动物细胞培养的过程3.(2020山东章丘四中高三月考)动物细胞培养的顺序是()①原代培养②传代培养③胰蛋白酶处理组织,形成分散的悬浮细胞A.③①②B.①②③C.②①③D.①③②4.下列有关动物细胞培养的叙述,错误的是()A.细胞通常贴壁生长B.细胞进行有丝分裂和减数分裂C.细胞之间有接触抑制现象D.体外培养的动物细胞的分类:一类悬浮在培养液中生长增殖,另一类贴附于某些基质表面生长增殖5.(2020辽宁六校协作体高二期中)下列关于动物细胞培养的叙述,正确的是()A.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶瓶壁上可形成多层细胞B.传代培养时,贴壁生长的细胞可直接用离心法收集C.细胞的传代培养次数通常是无限的D.动物细胞培养中定期更换培养液可以清除代谢物6.(2020江苏徐州一中高二开学考试)某研究小组为测定药物对体外培养细胞的毒性,准备对某种动物的肝肿瘤细胞(甲)和正常肝细胞(乙)进行细胞培养。
下列说法正确的是(易错)A.在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时,也可用胃蛋白酶处理B.细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是刺激细胞呼吸C.甲、乙细胞在持续的培养过程中,乙会出现停止增殖的现象D.仅用培养肝细胞的培养液也能用来培养乙肝病毒7.(2020云南师大附中高三二模)如图为动物细胞培养过程的示意图。
2.2动物细胞工程
2.2.1动物细胞培养和核移植技术
课时训练7动物细胞培养和核移植技术
1.动物细胞工程常用的技术手段中,最基础的是()。
A.动物细胞培养
B.动物细胞融合
C.单克隆抗体
D.动物细胞核移植
解析:动物细胞工程常用的技术手段主要有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等,其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
答案:A
2.动物体内的细胞不易受到外界细菌、病毒等微生物的感染,原代培养的细胞()。
A.对微生物有一定的防御能力
B.培养环境中可以有一定量的微生物
C.对微生物已失去了防御能力
D.必须生活在无菌条件下,以后的培养对无菌条件的要求不严格
解析:动物体具有一定免疫力,是因为动物体具有非特异性免疫系统和特异性免疫系统,对各种病原微生物有一定的防御能力,而离体的动物细胞失去了对各种微生物的防御能力,因此,动物细胞培养的环境中不能存在微生物,否则,动物细胞就会死亡。
答案:C
3.在克隆猪的培育过程中,将猪M(基因型为Aa)的体细胞核移入猪N(基因型为aa)的去核卵子中,然后在雌猪L(基因型为AA)体内发育成熟。
产出的幼猪基因型为()。
A.AA
B.Aa
C.aa
D.Aaa
答案:B
4.离体的植物组织或细胞在适当培养条件下能够发育成完整的植株,离体的动物体细胞却没有发育成动物的成熟个体,原因是()。
A.动物细胞内没有成套的遗传物质
B.动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱
C.动物细胞的细胞核太小
D.动物细胞的全能性低于植物细胞
解析:动物细胞的全能性随动物细胞分化程度的提高而受到限制,分化潜能变弱,只能通过核移植实现克隆动物的目的。
答案:B
5.动物细胞培养与植物组织培养的重要区别在于()。
A.培养基不同
B.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C.动物细胞可以传代培养,而植物细胞不能
D.动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
解析:由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分,而植物组织培养则不需要加上述物质。
答案:A
6.在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础(二倍体核型),通常采用()。
A.10代以内细胞
B.10~20代细胞
C.10~50代细胞
D.50代以上细胞
解析:10代以内的细胞的遗传物质没有发生改变,所以能保证供体细胞正常的遗传基础。
答案:A
7.英国科学家应用哪一种关键的细胞工程技术,培育出著名的克隆绵羊——“多利”()。
A.细胞和组织培养
B.细胞融合
C.动物胚胎移植
D.动物体细胞核移植
解析:克隆绵羊——“多利”的培育过程利用了动物细胞工程中的动物体细胞核移植、胚胎移植等技术手段,其中动物体细胞核移植是最关键的。
答案:D
8.有关动物细胞培养的叙述中正确的是()。
A.动物细胞培养前要用胃蛋白酶使细胞分散
B.动物细胞培养的主要目的是获得大量的细胞分泌蛋白
C.细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D.动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
解析:通常将健康动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理以后的细胞的初次培养,称为原代培养。
贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞继续增殖,这种培养即为传代培养。
胃蛋白酶的最适pH大约在1.5左右,不适合做细胞培养时分散细胞的酶,动物细胞培养利用了细胞有丝分裂的原理,获得大量的具有相同遗传特性的细胞。
答案:D
9.下列有关核移植的说法错误的是()。
A.用核移植得到的动物称为克隆动物
B.核移植的受体细胞最好是受精卵
C.核移植可以充分发挥优良种畜的生殖潜力
D.核移植得到的克隆动物属于无性生殖
解析:核移植的受体细胞应该是减数第二次分裂中期的卵母细胞,相对受精卵来说,减数第二次分裂中期的卵母细胞细胞质所含的物质更有利于细胞核全能性的表达。
答案:B
10.某研究小组进行药物实验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。
供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。
请回答下列有关动物细胞培养的问题。
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其他培养条件均相同。
一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量。
(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是。
细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长。
药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更。
若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的。
(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的或合成水平的差异,确定Y的药效。
答案:(1)多
(2)血清可以补充合成培养基中缺乏的营养物质维持培养液的pH
(3)停止多胰蛋白酶
(4)抗生素
(5)Y mRNA蛋白质。
