清风饮的抗炎实验研究

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清风饮的抗炎实验研究

摘要】 目的 通过观察清风饮抗炎、镇痛等药理作用,为其用于治疗鼻炎和新药研发提供科学实验依据。方法 实验选用多种实验性炎症的动物模型,观察药物的抗炎作用。采用热板法、醋酸扭体法进行镇痛作用研究。结果 实验结果表明,清风饮高剂量组能明显减轻角叉菜胶所致的大鼠足趾肿胀(P<0.001);剂量依赖性地抑制小鼠棉球肉芽组织增生(P<0.01);镇痛实验中能延长热痛试验中小鼠舔后足的时间,及明显减少醋酸所致小鼠扭体的反应发生率,其作用呈一定的量效关系。结论 清风饮具有对抗急、慢性炎症作用以及镇痛作用。

【关键词】清风饮 镇痛 抗炎 角叉菜胶

清风饮由防风等8味药组成,是临床使用验方,具有治疗鼻炎的作用,亦可用其加减方治疗唇炎。本文将用动物实验证明其抗炎作用,为其应用和开发提供实验依据。

1 实验材料

1.1动物

动物: Wistar大白鼠,体重200±20克,封闭群,雌雄兼用。昆明种小白鼠,体重20±2克,雌雄兼用。动物合格证号:SCXK(吉)2008--0004。由吉林大学白求恩医学部实验动物中心提供。

1.2 药品和试剂

阳性药阿司匹林,由石家庄神威药业股份有限公司提供(批号:120211)

冰醋酸,由北京北化精细化学药品有限公司提供(批号:110730)

角叉菜胶,由北京精细化学药品有限公司提供 (批号:232—524—2)

1.3 主要器材

752型分光光度计(上海第三分析仪器厂)

YLS-6B智能热板仪(广州非迪生物科技有限公司)

PV-200鼠足跖溶剂测量仪(成都泰盟科技有限公司)

1.4 实验分组

实验动物根据实验需要分组,分别为正常对照组,模型对照组,阳性对照组,清风饮高、中、低剂量组,每组10只。造模时,除正常对照组外,其余各组均根据需要造模,正常对照组予以相同方式给予等量生理盐水。给药时,正常对照组和模型对照组灌服等量生理盐水,阳性对照组大鼠灌服阿司匹林0.16g/kg,小鼠灌服0.23 g/kg,清风饮高(SG)、中(SZ)、低(SD)剂量组大鼠分别灌服20、10、2g/kg生药量,小鼠分别灌服142.5、71.25、14.25g/kg生药量。

2 实验方法

2.1 抗炎实验

2.1.1 对大鼠足肿胀的影响[1]

取大鼠50只,雌雄各半,体重200±20克,随机分为模型对照组、阳性对照组、清风饮高、中、低剂量组,按照1.4方法给药,连续7天,每天1次。末次给药后,用足肿测定仪考察大鼠足跖肿胀率。于1小时后,分别在大鼠右后足皮下注射1%角叉菜胶混悬液0.1ml/只。注射前及注射后1,2,3,4小时分别用足肿测定仪测定大鼠足跖溶剂(ml)。

2.1.2 对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响[1]

选取健康小白鼠60只, 体重为20±2g,雌雄各半, 按照2.1.4方法分组给药,连续灌胃给药5天,每天1次。于末次给药1.5h后,各鼠均尾静脉注射1%伊文思蓝溶液0.1ml/10g,立即腹腔注射0.9%冰醋酸0.2ml/只,15min后脱颈椎处死小鼠,轻擦腹部1min,剖开腹腔用6ml生理盐水分数次冲洗,吸管吸出洗涤液,滤纸滤过,并用生理盐水调整容积至10mL,用离心(3000r/min)离心15min,取上清液于752型分光光度计中(波长600nm)测定吸光度,比较各组的差异,并直接计算抑制率。

2.2 镇痛实验

2.2.1 对小鼠热板痛阈的影响[1]

选取痛阈值在10-30秒的合格小鼠50只,雌性,体重20±2克,随机分为正常对照组、阳性对照组、清风饮高、中、低剂量组,按照2.1.4方法给药。连续7天,每天1次。末次给药后,把各小鼠放在55℃±0.5℃热板上,以到出现舔后足的动作所经历的时间作为小鼠热板痛阈指标,给药后30min测痛阈,以给药后痛阈减去给药前痛阈的差作为痛阈提高值。

2.2.2 对小鼠腹腔注射冰醋酸所致疼痛的影响[1]

取健康小鼠50只,随机分5组,每组动物10只。随机分为模型对照组、阳性对照组、清风饮高、中、低剂量组,按照2.1.4方法给药。连续7天,每天1次。末次给药后1小时将各组动物按0.1ml/10g体重腹腔注射0.6%冰醋酸,注射后立即观察15分钟内各动物因疼痛引起的扭体次数,计算抑制率。

对照组扭体次均数—给药组扭体次均数

抑制率= ———————————————— ×100% 对照组扭体次均数

3 实验结果

表1 清风饮对大鼠角叉菜胶性足肿胀的影响(x-±s,n=10)

组别 剂量g/kg 致炎后不同时间足肿胀程度(mm)

1h 2h 3h 4h

模型对照组 0.42±0.02 0.63±0.05 0.64±0.03 0.74±0.01

阳性对照组 0.16 0.18±0.01*** 0.32±0.01*** 0.39±0.03*** 0.43±0.02***

SG组 20 0.21±0.03*** 0.35±0.01*** 0.46±0.04*** 0.49±0.06***

SZ组 10 0.32±0.03* 0.47±0.08* 0.55±0.09* 0.66±0.03

SD组 2 0.38±0.86 0.57±0.50 0.59±0.64 0.72±0.52

注:与模型对照组比较* P<0.05,*** P<0.001。

由表1结果表明清风饮具有一定的抗炎作用。

表2 清风饮对小鼠腹腔毛细血管通透性的影响(x-±s,n=10)

组别 剂量(g/kg) OD值

空白对照组 0.38±0.1519

模型对照组 0.62±0.1687△△△

阳性对照组 0.23 0.37±0.1393***

SG组 142.5 0.45±0.0932**

SZ组 71.25 0.49±0.0887*

SD组 14.25 0.55±0.2431

注:与正常对照组比较△△△P<0.001;与模型对照组比较* P<0.05,** P<0.

01,*** P<0.001。

表2结果显示清风饮高剂量能明显抑制醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性亢进,具有一定的抗炎作用。

表3 对小鼠热板痛阈值的影响 (x-±s,n=10)

组别 剂量(g/kg) 给药前痛阈值 (s) 给药后痛阈值(s) 痛阈提高值

正常对照组 24.5±3.6 25.0±3.0 0.5±0.1 阳性对照组 0.23 24.2±2.3 42.6±3.2 18.4±0.2***

SG组 142.5 25.7±5.3 39.5±7.2 13.8±0.2***

SZ组 71.25 23.6±4.9 32.1±2.2 8.5±0.2**

SD组 14.25 25.8±5.7 28.8±4.7 3.0±0.7*

注:与模型对照组比较 *P<0.05,**P<0.01,*** P<0.001。

表3结果显示清风饮有对抗电刺激法所致的小鼠疼痛作用,延长了热板痛阈值。

表4 清风饮对小鼠扭体反应的影响(x-±s,n=10)

组别 剂量(g/kg) 小鼠扭体次数 抑制率(%)

模型对照组 30.83±6.20

阳性对照组 0.23 10.58±2.12*** 66.40

SG组 142.5 12.42±3.57** 59.71

SZ组 71.25 18.67±7.34** 39.44

SD组 14.25 23.72±5.27* 23.06

注:与模型对照组比较* P<0.05,** P<0.01, *** P<0.001。

表4结果显示清风饮高剂量组具有较强的抑制醋酸所致的小鼠疼痛的作用。

4 讨论

综上所述,清风饮具有抗炎、止痛、提高免疫功能等多方面的药理活性,证实了本品治疗鼻炎的有效性,为下期临床治疗鼻炎提供实验依据和理论基础,作为中成药物研发,具有广泛的开发前景。

参 考 文 献

[1] 徐淑云.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社, 1992:693-703,201-206.