平遥二中有效教学
1 【课题】： 微生物的实验室培养
1．基础知识
1．1 培养基的种类包括 培养基和 培养基等。
〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的
，在配制培养基中用作为
。
【补充】培养基的类型及其应用：
1．2 培养基的化学成分包括 四类营养成分。
〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？
【补充】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
1．3 培养基除满足微生物生长的 、 和 等要求。
【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。
〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 、 和 等营养物质。
〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加 ，培养霉菌时需要将培养基pH调节为 ，培养细菌时需要将pH调节为 。
活动2：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题：
1．4 获得纯净培养物的关键是 。 标准 培养基类型 配制特点 主要应用
物理性质 固体培养基 加入琼脂较多 菌种分离,鉴定,计数
半固体培养基 加入琼脂较少 菌种保存
液体培养基 不加入琼脂 工业生产，连续培养
化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定
天然培养基 由天然成分配制而成，培养基成分不明确 工业生，产降低成本
目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别
一、实训目的
本次实训旨在通过实际操作，掌握微生物培养的基本原理和技能，了解不同微生物的生长特性，学会使用实验室常用仪器设备，并熟悉微生物培养过程中的注意事项。
二、实训时间
2023年X月X日至2023年X月X日
三、实训地点
XX大学微生物实验室
四、实训内容
1. 培养基的制备
- 营养基的选择：根据实验目的选择合适的培养基，如LB培养基、麦芽糖培养基等。
- 培养基的配制：称取适量培养基成分，加入蒸馏水溶解，调pH值，分装于锥形瓶中，121℃高压灭菌20分钟。
2. 微生物接种
- 接种方法：采用平板划线法、涂布法或点接种法等。
- 接种操作：在无菌操作台中，将无菌接种环或接种针在火焰上灼烧灭菌，待冷却后，蘸取适量菌液，按照预定方法接种于培养基平板上。
3. 微生物培养
- 培养条件：根据不同微生物的生长特性，选择合适的温度、湿度、氧气等培养条件。
- 培养时间：根据实验目的，确定培养时间，一般为24小时至7天。
4. 观察与记录
- 观察菌落特征：观察菌落的形态、颜色、大小、边缘等特征，初步判断菌种。
- 记录实验结果：详细记录实验过程中观察到的一切现象，包括菌落特征、培养时间等。 五、实训过程
1. 培养基的制备
- 称取LB培养基成分，加入蒸馏水溶解，调pH值至7.2-7.6，分装于锥形瓶中，121℃高压灭菌20分钟。
2. 微生物接种
- 采用平板划线法接种大肠杆菌于LB培养基平板上。
- 将平板倒置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
3. 微生物培养
- 观察菌落特征，记录实验结果。
六、实训结果与分析
1. 培养基制备成功
- 经过高压灭菌后，培养基无杂菌生长，符合实验要求。
2. 微生物接种成功
- 大肠杆菌在平板上形成典型菌落，菌落特征为圆形、光滑、湿润、乳白色。
3. 微生物培养成功
- 大肠杆菌在37℃恒温培养箱中培养24小时后，菌落生长旺盛，说明培养条件适宜。
专题2 微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
理一理
判一判
1.所有的培养基中都要加入琼脂。(×)
2．微生物在液体培养基表面生长可形成菌落。(×) 3．培养不同微生物的培养基成分完全一样。(×)
4．培养纯净培养物的关键是防止杂菌污染。(√)
5．相对于消毒，灭菌对微生物的杀灭更彻底。(√)
6．无菌操作的对象只要是没有生物活性的材料(如培养基、接种环等)都可采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(×)
7．培养基最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。(√)
8．倒平板后，待平板冷凝之后需将其倒置。(√)
9．若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用。(√)
10．采取平板划线接种法时，每一次划线前都要挑取菌种。(×)
11．对微生物进行计数时最好采用稀释涂布平板法。(√)
12．需要一个不接种的培养基放在相同条件下培养以检验培养基的灭菌是否合格。(√)
悟一悟
1.牛肉膏提供的主要营养是碳源、氮源、磷酸盐和维生素，蛋白胨提供的主要营养是碳源、氮源和维生素。
2．溶化后如需调整pH，应先调节pH，再灭菌。
3．培养基灭菌后要冷却到50 ℃左右时开始倒平板，其原因是琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃会烫手，低于50 ℃时，若不及时操作，琼脂会凝固。
4．倒平板时，要使锥形瓶的瓶口通过火焰。通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
5．平板冷凝后，要将平板倒置。因为平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，又可避免培养基中的水分过快地蒸发。
6．在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，那么这个平板不能用来培养微生物，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。
感悟体会：
练一练
1.[2019·江苏高考题]下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是( )
A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌
课题1 微生物的实验室培养
【学习目标】
知识和技能：
1． 说出培养基的类型、用途和基本成分。
2． 举例说明常用的消毒与灭菌方法。
过程和方法：
阐明培养基配制的方法和接种的方法。
重难提示：培养基的营养成分、无菌操作的基本方法、配制培养基的基本步骤、常用的微生物的接种方法。
【旧知复习】
细胞中的元素和化合物
【自主学习】
一 基础知识
（一）培养基
1.人们按照微生物对 的不同需求，配制出供其 的营养物质。
2.分类方式
标准 培养基类型 配制特点 主要应用
物理性质
培养基 加入琼脂较多 菌种分离,鉴定,计数
培养基 加入琼脂较少 菌种保存
液体培养基 不加入 工业生产，连续培养
化学组成 合成培养基 由已知成分配制而成，培养基成分明确 菌种分类、鉴定
天然培养基 由天然成分配制而成，培养基成分不明确 工业生，产降低成本
目的用途 鉴别培养基 添加某种指示剂或化学药剂 菌种的鉴别
选择培养基 添加（或缺少）某种化学成分 菌种的分离
3.培养基的化学成分包括 四类营养成分。除此之外，培养基还要满足微生物生长对 、特殊营养物质以及 的要求。
4.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供 、 和 等营养物质。
碳源：如糖类等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。
氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。
（二）无菌技术
1.关键 防止 的入侵。围绕如何避免杂菌的污染展开。
2. 无菌技术包括：
（1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 ；
（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 ；
