检验蛋白质的方法及现象
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检验蛋白质的方法及现象
检测蛋白质的方法有:
1、分子量测定法:通过把蛋白质以某种介质流动,使其迅速穿越一定粒径的离子交换层,然后采取液相色谱法测定相应蛋白质的分子量,从而求出特定蛋白质的特征分子量。
2、凝胶电泳:是将蛋白质在 LED-偶联 法分子量鉴定,是采用激光电子捕获和驱动,蛋白质和急性偶联物组合结合,以生产一种特殊的类聚多糖化合物,达到电泳分离蛋白质的目的。
3、蛋白质的细胞测定:通过把蛋白质放到不同浓度的离子条件下,以细胞技术手段测定蛋白质的稳定性和可被抑制的性能。
4、体外模拟实验:将不同比例的蛋白质与某种固定化剂混合,模拟体内条件,以测定蛋白质的稳定性和特异性。
5、放射性标记:把蛋白质结合放射性标记的药物标记物,然后使用凝胶电泳,紫外可见光谱等方法测定放射性标记的标记物显示的服用蛋白质的分布和定量,从而评价蛋白质的质量。
6、 DNA 分子测定:采用高效液相色谱法,把蛋白质代谢到个体 DNA
分子中,测试DNA 分子的碱性度,判断蛋白质含量。
7、蛋白质安定性分析:利用数据库软件(如Bridge),研究蛋白质在体外条件及温度、pH值、盐浓度、有机溶剂含量及催化剂等共表征环境中作用时,结构安定性的变化。
蛋白质性现象:
1、可均质性降解及易损质:蛋白质对热、酸、碱、抗生素等有不同的稳定性,受物理化学作用的刺激,无论是天然的还是添加的成分,均可使其酶聚及脱氨键,影响溶解性。
2、亲和性:蛋白质分子由于其胞内的环境不同,构成不同的分子结构状态,各种实验条件的变化,均会影响蛋白质的亲合力,从而导致其亲合性的变化。
3、可流动性:蛋白质分子和结构会受到它们离子和结构性结合能力等因素的影响,当环境条件改变时,蛋白质分子之间的排斥力发生增大,从而减少可流动性。
4、免疫原性:由于蛋白质本身的分子结构和结合特性,出现不可逆的结构变化尤其是连锁反应,导致其免疫原性大大增强,从而产生特异性抗体。
5、细胞毒性:在一定条件下,蛋白质被细胞直接吸收,可抑制细胞的生理和代谢活动,使细胞破坏,从而产生细胞毒性。