二十种常见实验动物模型
- 格式:docx
- 大小:28.20 KB
- 文档页数:19
一、复制方法和应用动物疾病模型的复制,是用人为的方法,使动物在一定的致病因素(物理的、化学的、生物的)作用下,造成动物组织、器官或全身一定损害,出现某些类似人类疾病的功能、代谢、形态结构方面的变化或各种疾病,通过这种手段来研究人类疾病的发生、发展规律,为研究人类疾病的预防、治疗(包括新药物试用)提供理论依据。
所以动物疾病模型的复制,在医学科学研究中占有十分重要的地位。
目前我国生物医学科学研究中,动物疾病模型主要用于三个方面:即实验生物学、实验病理学和实验治疗学(新药筛选亦属于实验治疗学范畴)。
由于研究目的不同,对于疾病模型的要求也有所区别。
如实验病理学,它着重于研究用某种特定方法复制出某些疾病。
整个疾病复制过程,就是它的研究内容,目的是通过疾病的复制去探讨疾病的病因学和发病原。
而实验治疗学则完全不同,疾病的复制仅是它研究的开始,因为它的主要目的是为了阐明在该病的发生发展过程中,某些治疗措施或药物的疗效如何。
诱发性动物模型的复制方法不外是用生物的、物理的、化学的和各种环境因子作用于动物而产生。
生物学因素包括细菌、病毒、寄生虫、细胞、生物毒素、激素等各种致病原,通过接种而使正常动物发生疾病。
如接种细菌、病毒于敏感动物使其产生各种传染病。
目前已知的150余种人畜共患病提供了极有意义的传染病材料。
从流行病学、病理学或并发症等不同角度研究,首先要充分了解动物与人在疾病易感性和临床表现等方面的同异处。
例如轮状病毒可引起婴儿急性坏死性肠类,犬感染轮状病毒后的表现只是亚临床的。
然而严重威胁幼犬的肠道病毒是细小病毒,而人对细小病毒则并不易感。
物理因素是多方面的。
例如在机械力作用下产生各种外伤性脑损伤、骨折等模型,气压变动复制高空病、潜水病;温度改变产生各种烧伤和冻伤;放射线照射可复制各型放射病,引起免疫功能抑制或诱发Spragae-Dawley系大鼠乳腺癌;闪光刺激诱发癫痫模型;噪音刺激引起听源性高血压及改变行为记忆功能等。
100例动物仿生设计1. 鸟类仿生设计: 高效飞行机器人2. 蜘蛛仿生设计: 粘性爪足机器人3. 蚂蚁仿生设计: 自组织机器人4. 萤火虫仿生设计: 光控灯具5. 海豚仿生设计: 水下机器人6. 蝴蝶仿生设计: 自由飞行机器人7. 蛇仿生设计: 灵活机器人8. 熊猫仿生设计: 可爱智能玩具9. 蚊子仿生设计: 无声风扇10. 马仿生设计: 高速交通工具11. 蝙蝠仿生设计: 夜视装置12. 鲸鱼仿生设计: 海洋清扫机器人13. 孔雀仿生设计: 装饰性顶盖材料14. 毛毛虫仿生设计: 移动机器人15. 蜜蜂仿生设计: 自动采蜜机器人16. 鳄鱼仿生设计: 机器人底盘设计17. 猫仿生设计: 柔软机器人控制技术18. 蝴蛾仿生设计: 高效光伏电池板19. 蟋蟀仿生设计: 超声波传感器20. 螃蟹仿生设计: 自适应机器人手爪21. 蜘蛛猴仿生设计: 灵活运动机器人22. 火箭虾仿生设计: 水下推进器23. 刺猬仿生设计: 防爆材料24. 马鞍螺仿生设计: 软体机器人25. 犀牛仿生设计: 装甲车设计26. 鳄鱼皮仿生设计: 防水涂层材料27. 珊瑚仿生设计: 高效过滤装置28. 蝠鲼仿生设计: 高效船体设计29. 雏菊仿生设计: 生态建筑设计30. 百灵鸟仿生设计: 声学材料31. 乌龟仿生设计: 增强型防护壳32. 海胆仿生设计: 自动清洁机器人33. 孔雀蛇仿生设计: 弯曲性传感器34. 蜜蜂虾仿生设计: 微型水下探测器35. 海星仿生设计: 粘附材料36. 姬鱼仿生设计: 水下通信设备37. 猫头鹰仿生设计: 高清红外摄像机38. 刺鼠仿生设计: 防刺高温手套39. 瓢虫仿生设计: 粘性抓取机器人40. 螳螂仿生设计: 自动调整机器人身体41. 象鼻虫仿生设计: 抓取动作优化机器人42. 长颈鹿仿生设计: 高空工作机器人43. 青蛙仿生设计: 弹性跳跃机器人44. 蜜蜂猴仿生设计: 树木攀爬机器人45. 蚌仿生设计: 高强度材料46. 蛤蜊仿生设计: 水下钻探机器人47. 信天翁仿生设计: 高效蓄电池技术48. 鲸鱼胸骨仿生设计: 高张力建筑材料49. 星鼠仿生设计: 灵敏的机器人眼睛50. 海狮仿生设计: 水下侦查机器人51. 雄鹿角仿生设计: 高强度骨材料52. 盾虫仿生设计: 自动消防机器人53. 海豚耳朵仿生设计: 高灵敏度声波传感器54. 比目鱼仿生设计: 底部清扫机器人55. 青蛙腿仿生设计: 弹性跳跃机器人56. 飞鱼仿生设计: 高速水中滑翔机器人57. 斑马仿生设计: 捷足先登的机器人腿部设计58. 圆蛛仿生设计: 高强度特种丝材料59. 雁形飞行仿生设计: 群体飞行机器人60. 灾难蜡螟仿生设计: 原子力反应堆核辐射检测机器人61. 狒狒臀部仿生设计: 进阶型机器人底盘设计62. 神鹿仿生设计: 高武器系统装甲设计63. 地瓜田鼠仿生设计: 土块剥离动作优化机器人手臂64. 狐狸仿生设计: 植物生物感应器件65. 信天翁洗澡行为仿生设计: 水上清洁机器人66. 后拖鱼仿生设计: 极速水面滑行机器人67. 海带藻仿生设计: 太阳能电池板68. 燕子核心仿生设计: 灵活紧凑安全电瓶包69. 梅花鹿仿生设计: 目标检测与跟踪系统设计70. 萤虫尾巴仿生设计: 高亮度照明系统设计71. 浪花翼仿生设计: 高稳定运动控制系统设计72. 雨燕翅膀仿生设计: 高效升力翼型设计73. 狐狸耳朵仿生设计: 高灵敏度声音刺激传感器设计74. 壁虎趾端仿生设计: 高粘附力摩擦材料设计75. 鸳鸯种羽仿生设计: 羽翼颜色变化机制设计76. 热带鱼尾巴仿生设计: 高灵活性水下推进系统设计77. 七彩鸟喉管仿生设计: 高保真声音发射器件设计78. 鳄鱼皮纹仿生设计: 高稳定性摩擦防滑面设计79. 高傲公牛头角仿生设计: 高耐压碰撞材料设计80. 鸵鸟腿部仿生设计: 高刚性高柔韧动力传输设计81. 鱼鳞片层仿生设计: 高灵敏度压力传感系统设计82. 玲珑蜗牛壳仿生设计: 高强度材料83. 螳螂虾钳部仿生设计: 高力保持高速振动剪断系统设计84. 野猪皮毛仿生设计: 高耐磨、高阻尼振动吸收体设计85. 蟾蜍吸盘趾端仿生设计: 高粘附力、高稳定附着体设计86. 蜡螟亮光引诱行为仿生设计: 高功率、大范围、高安全红外波段激光发射设备设计87. 鹦鹉嘴部仿生设计: 高灵敏度、高耐用性声音、触摸、颜色识别传感器设计88. 长腿鹬蚌足部仿生设计: 高远距离、高精度动力传输与定位系统设计89. 熊猫大眼仿生设计: 高感光度、高分辨率、超广角监控影像传感器设计90. 巴布亚毒蛙皮肤仿生设计: 高化学品清洁能力、高抗紫外线诱变性材料设计91. 秘鲁蓝螳螂翅膀仿生设计: 高稳定紧凑卷曲柔性整平翅膀设计92. 丹尼尔汤姆逊仿生设计: 高抗压衬垫材料93. 缅甸天鹅粳稻仿生设计: 高产性、高耐盐碱地稻种设计94. 特罗索瓦尔传感行为仿生设计: 高帧率、高清晰度、自适应设计95. 牙脂鱼雷舰、救援仿生设计: 高速潜航、高载重、自修复材料设计96. 南极海冰王仿生设计: 高稳定性、高沉降速度、低海底地会材料设计97. 纹饰盾甲游击队仿生设计: 高强度、高韧性、高可调节冰、石子、球体防护材料设计98. 阿尔巴尼亚包层蜂巢电源仿生设计: 高容量、高输出、无线充电电池设计99. 玫瑰鹿长喉口鼻部仿生设计: 高无线电接收性能、高传感性、高体积、高定位精确度传感器设计100. 金头挂科蛤组织仿生设计: 高透明度、高防摔、高适应性蓝光屏材料设计。
实验的动物模型免疫低下易发生口腔溃疡,用免疫诱导口腔溃疡动物模型更接近临床,但这种方法伤害性较大,所以不适合单纯性口腔溃疡;如果是炎症引起的口腔溃疡,创伤性口腔溃疡动物模型较为适合创伤口腔溃疡动物模型:用乙醚麻醉豚鼠,将一小棉球置于直径为5mm的玻璃管一端(使之与管口平齐),再将玻璃管塞棉球一端蘸900g/L苯酚溶液,灼烧豚鼠口腔左侧面颊60s,24h后观察,豚鼠口腔黏膜上均出现直径5mm的溃疡;空白组豚鼠麻醉后,用塞棉球的玻璃管蘸生理盐水后放在豚鼠口腔左侧面颊60s.建立口腔溃疡模型。
组别:空白对照组,模型对照组,阳性对照组(西瓜霜喷雾剂,0.25g/mL),给药对照组(0.5g/mL,0.3g/mL,0.1g/mL,溶剂:灭菌水)体重:270g--300g给药方式:涂抹,一日三次,每次2mL检测指标:1,豚鼠外观、精神状态及食量、饮水量、体重、粪便的观察与测定每日测定大鼠体重、进食量、饮水量,观察粪便性状变化并记录。
2,苯酚损伤后24h及每日观察大鼠颊囊损伤粘膜部位的改变,包括病变出现的时间、性质、口腔溃疡面积等。
3,组织病理学检查。
4,TNF一a、VEGF检测:采取双抗体夹心ELISA法测定。
组织病理学检查。
1. 切片制作取豚鼠的口腔溃疡黏膜组织及对侧正常组织0.5cm×0.5cm×0.1cm,尽可能新鲜,PBS(磷酸盐缓冲液)洗,用4%多聚甲醛(0.1MPBS,PH7.2~7.4含0.1%DEPC)进行固定,系列乙醇脱水(75%乙醇 30min→85%乙醇 30min→95%乙醇(I)30min→95%乙醇(II)30min→100%乙醇(I) 30min→100%乙醇(II)30min)二甲苯置换至石蜡包埋(1/2 二甲苯20min→二甲苯 I20min→二甲苯II10min),浸蜡、包埋。
颊舌向连续5µm 厚石蜡切片,45℃水浴展片,用涂有蛋白甘油的载玻片选择完整的切片进行捞片。
动物模型(定义、分类及注意事项)动物模型是指使用动物作为实验对象来研究人类疾病、药物疗效和生物学机制的科学实验方法。
动物模型在医学研究、药物研发和生物学研究中起着重要的作用。
本文将从定义、分类和注意事项三个方面对动物模型进行详细介绍。
一、定义:动物模型是指使用非人类动物作为研究对象,通过对动物进行实验操作,模拟和研究人类疾病、药物疗效、生物学机制等问题的科学研究方法。
动物模型可以帮助科学家们更好地理解人类疾病的发生机制,评估新药的疗效和安全性,推动医学和生物学的发展。
二、分类:1. 哺乳动物模型:包括小鼠、大鼠、猫、狗、猪、猴等哺乳动物。
哺乳动物模型在医学研究中应用广泛,因为哺乳动物与人类在基因、生理、解剖等方面有较高的相似性,可以更好地模拟人类疾病。
2. 禽类模型:如鸟类模型,主要用于研究鸟类特有的疾病和生物学机制。
3. 无脊椎动物模型:如果蝇、线虫等无脊椎动物模型,由于其生命周期短、繁殖快以及基因组简单等特点,被广泛应用于生物学研究,尤其是基因功能的研究。
4. 鱼类模型:如斑马鱼、鲈鱼等鱼类模型,主要用于研究鱼类特有的疾病和生物学机制。
三、注意事项:1. 遵循伦理规范:在进行动物实验时,必须遵循伦理规范,确保动物的福利和权益不受损害。
研究人员应该尽量减少动物数量,采取无创伤性的实验方法,以及提供良好的饲养条件和环境。
2. 合理选择动物种类:选择合适的动物种类是进行动物模型研究的关键。
应根据研究目的和需要选择与人类相似度高的动物模型,以确保实验结果的可靠性和可重复性。
3. 控制实验条件:在动物实验中,需要严格控制实验条件,如温度、湿度、饲养环境等,以减少实验误差对结果的影响。
4. 数据准确性和可重复性:进行动物模型实验时,应确保数据的准确性和可重复性。
实验结果应进行统计分析,并进行多次实验验证,以确保研究结果的可靠性。
5. 替代方法的使用:在进行动物模型实验时,应尽量使用替代方法,如体外细胞模型、计算机模拟等,以减少对动物的使用,并提高实验效率和可行性。
动物模型(定义、分类及注意事项)动物模型是科学研究中常用的实验手段之一,通过使用动物作为研究对象,可以更好地了解生物学、医学等领域的知识。
本文将从定义、分类及注意事项三个方面对动物模型进行介绍。
一、定义动物模型是指将动物用于科学研究的实验对象。
通过对动物进行实验观察,科学家可以推断出与人类相似的生理、病理过程,从而为人类疾病的预防、治疗提供理论依据。
动物模型一般包括小鼠、大鼠、猪、狗、猴等。
二、分类动物模型可以根据研究目的的不同进行分类,常见的动物模型主要有以下几种:1. 疾病模型:用于研究特定疾病的发生机制、病理过程等。
例如,研究心脏病可以选择猪、狗等动物建立相应的心脏病模型。
2. 行为模型:用于研究动物的行为特征、学习记忆等。
常用的行为模型有小鼠、大鼠等。
3. 转基因模型:通过基因工程技术将人类疾病相关基因导入动物体内,模拟人类疾病的发生和发展过程。
常见的转基因模型有小鼠、猪等。
4. 药物毒性模型:用于评估药物的安全性和毒性。
常用的药物毒性模型有小鼠、大鼠等。
5. 发育模型:用于研究胚胎发育、器官发育等。
常见的发育模型有小鼠、斑马鱼等。
三、注意事项在进行动物模型实验时,需要注意以下几点:1. 伦理问题:动物实验涉及动物福利和伦理问题,必须严格遵守相关法律法规和伦理准则,确保动物受到适当的保护和关爱。
2. 选择合适的动物:根据研究目的选择合适的动物模型,确保研究结果具有可靠性和可重复性。
3. 样本数量:确保样本数量足够,以保证实验结果的统计学意义。
4. 控制实验条件:在进行动物实验时,需要控制实验条件的一致性,以排除其他因素对实验结果的影响。
5. 优化实验方案:尽可能减少动物实验的数量,优化实验方案,选择合适的实验方法和技术手段,以提高实验效率。
6. 数据分析和解读:对实验结果进行准确的数据分析和解读,避免主观臆断和错误推论。
总结:动物模型作为科学研究的重要工具,可以帮助科学家更好地理解生物学、医学等领域的知识。
一、常用肿瘤模型实验动物介绍:1、BALB/c 小鼠(近交系)特性与用途:◇其发病率低,但对致癌因子敏感。
乳腺肿瘤发生率约为10﹪~20﹪。
◇有一定数量的卵巢、肾上腺和肺部肿瘤的发生,对放射线极度敏感。
易患慢性肺炎。
◇多数个体于6月龄以后出现免疫球蛋白过多症。
主要是IgG1和IgA量的增加。
◇免疫球蛋白的绝对量依饲养条件而异。
腹腔注射矿物油后可引起浆细胞瘤。
◇广泛地应用于肿瘤学、生理学、免疫学、核医学研究,以及单克隆抗体研究和生产等。
2、DBA/2 小鼠(近交系)特征与用途:◇免疫:在普通饲养条件下三月龄鼠血清免疫球蛋白量为1000ug/ml左右,仅相当C57BL/6,C3H/He和BALB/c的1/2。
其中,IgM值较高,而IgG为低值。
在IgG各亚类中,IgG1最高,IgG2最低。
缺乏补体C5。
对鼠斑疹伤寒补体C5较敏感。
◇肿瘤:对DBA/1 的大部分移植瘤有抗性。
雌鼠白血病发病率为34%,雄鼠为18%,经产母鼠乳腺癌发生率为50- 60%,雌雄鼠中均有淋巴瘤生长。
◇微生物和寄生虫:对疟原虫、利什曼原虫有抗力。
对猫后睾吸虫、曼氏血吸虫较敏感。
对白色念球菌有抗力,由于具有Hc0等位基因,对新型隐球菌有抗力。
◇生理:红细胞多。
血压较低。
维生素K缺乏,氯仿和氧化乙烯引起的死亡率高。
肾上腺脂质贮存少,心脏有钙盐沉着。
具低嗜酒性及吗啡嗜好。
对百日咳组织胺易感因子敏感。
◇病理:听源性癫痫发作率在35日龄时为100%,55日龄时为5%,约一半动物肝可出现由巨噬细胞构成的蜡样质的肉芽肿。
3、ICR 小鼠(封闭群)特征与用途:◇适应性强,体格健壮,繁殖力强,生长速度快,实验重复性较好。
◇雌鼠自发性畸胎瘤和管状腺瘤发病率为0%~1%,用氨基甲酸乙酯诱发时,11~16天胚胎期畸胎瘤和管状腺瘤发病率为5.9%,离乳个体管状腺瘤和囊瘤发生率为30%,孕鼠为3%。
◇是国际通用的封闭群小鼠(封闭群又称远交群,是指以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从其外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上)◇是进行免疫药物筛选,复制病理模型较常用的实验动物。
二十种常见实验动物模型一、缺铁性贫血动物模型缺铁性贫血(iron deficiency anemia,IDA)是体内用来合成血红蛋白(HGB)的贮存铁缺乏,HGB合成减少而导致的小细胞低色素性贫血,主要发生于以下情况:(1)铁需求增加而摄入不足,见于饮食中缺铁的婴幼儿、青少年、孕妇和哺乳期妇女。
(2)铁吸收不良,见于胃酸缺乏、小肠粘膜病变、肠道功能紊乱、胃空肠吻合术后以及服用抗酸和H2受体及抗剂等药物等情况。
(3)铁丢失过多,见于反复多次小量失血,如钩虫病、月经量过多等。
IDA是一种多发性疾病,据报道,在多数发展中国家,约2/3的儿童和育龄妇女缺铁,其中1/3患IDA,因此,研究IDA的预防和治疗具有重要的意义。
在这些研究中,缺铁性贫血的动物模型(Animal model of IDA),又是实施研究的基础工具。
常见的IDA动物模型的构建技术如下:实验动物:一般选用SD大鼠,4周龄,雌雄不拘,体重65g左右,HGB≥130g/L。
建模方法:低铁饲料加多次少量放血法。
低铁饲料一般参照AOAC 配方配制,采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁,饲料中的含铁量是诱导SD大鼠形成缺铁性贫血模型的关键,现有研究表明,饲喂含铁量<15.63mg/Kg的饲料35天,SD大鼠出现典型IDA表现,而饲喂含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁,但并不表现贫血症状。
建模时一般采用去离子水作为动物饮水,以排除饮水中铁离子的影响。
少量多次放血主要用于模拟反复多次小量失血导致的铁丢失,还可以加速贫血的形成。
放血一般在低铁饲料饲喂2周后进行,常用尾静脉放血法,1~1.5ml/次,2次/周。
模型指标:(1)HGB≤100g/L;(2)血象:红细胞体积较正常红细胞偏小,大小不一,中心淡染区扩大,MCV减小、MCHC降低;(3)血清铁(SI)降低,常小于10μmol/L,血清总铁结合力(TIBC)增高,常大于60μmol/L。
需要指出的是,以上模型不能用于铁吸收不良相关IDA的防治研究。
根据具体的研究需要,也可以适当调整建模方法。
二、白血病动物模型用免疫耐受性强的人类胎儿骨片植入重症联合免疫缺陷病(SCID)小鼠皮下,出于人类造血细胞与造血微环境均植入小鼠,建立具有人类造血功能的SCID小鼠模型称为SCID-hu小鼠。
再将髓系白血病患者的骨髓细胞植入SCID-hu小鼠皮下的人类胎儿骨片内,植入的髓系白血病细胞选择性生长在SCID-hu小鼠体内的人类造血微环境中,即为人类髓系白血病的小鼠模型。
SCID小鼠是由于其scid所致。
T、B淋巴细胞功能联合缺陷,这种小鼠能接受人类器官移植物。
造模方法:(1) SCID-hu小鼠:CB-17 scid/scid 繁殖的近交小鼠(SCID),6~8周龄时用抗生素处理。
在无菌条件下,从19~23 妊娠周龄的胎儿取出股骨和胫骨,剪成5mm×5 mm×l0 mm的骨片,植入SCID小鼠皮下,并从每个胎儿供体制备胸腺细胞用于检测同种异体HLA。
(2) 白血病细胞注射:急性髓性白血病患者骨髓细胞(0.4~2) ×104个活细胞(常用冻存解冻后的细胞)悬浮于含10%胎牛血清的RPMI1640培养液20 d,用微注射器将细胞悬液直接注射人6~8周前植入SCID-hu小鼠的人胎骨片内。
选择移植骨与白血病细胞的供体是HLA同种异型,便于追踪人肋骨移植片中细胞的来源。
白血病细胞的体内传代:将已生长有白血病细胞的骨移植片再制备细胞悬液,取(0.5~2)×106个活细胞,注入第2个SCID-hu受体小鼠的移植骨片内。
处理小鼠MHC-I(主要组织相容性复合体I类)抗原的单抗,直接与染料荧光素异硫氰化物或藻红蛋白结合,用流式细胞仪将细胞分类并分析细胞来源。
胎骨植入后2~3周时,骨片内有坏死与纤维化,CFU-GM与BFU -E减少,未见造血中心;移植4~5周时,骨片内出现由淋巴系与未成熟的髓系细胞组成的造血中心;6~8周后,植入胎骨片结构与正常胎儿造造血骨髓类似,并能维持正常造血达20周。
用MEM-43(人类细胞抗原的特异抗体)与Ly5.1(小鼠血细胞的特异抗体)检测,植入骨片的细胞中人类细胞占70%以上,而小鼠细胞仅占5%~20%。
胎儿骨片内的人类基质细胞可刺激人的造血干细胞的增殖与分化,以维持正常造血。
将人的急性髓性白血病细胞注入SCID-hu小鼠的一块胎骨片内,4~6周后,胎儿骨片内的正常造血细胞被急性白血病细胞的增殖所取代,而且还选择性地转移到植入的其他胎骨片内。
该模型是人类白血病细胞生长在小鼠体内的人类造血微环境中,因此能更精确地用来研究人类自血病发病机制与对新疗法的评价,是目前研究白血病的最佳动物模型。
该模型的建立原理与方法也适用于其他白血病与恶性肿瘤动物模型的建立。
但应注意植入小鼠的胎儿骨片与成人骨舱造血钉些不同。
三、支气管哮喘动物模型支气管哮喘是一种由肥大细胞、嗜酸性粒细胞和T细胞等参与的慢性气道炎症,伴有气道反应性增高及结构重建的疾病。
对于敏感的人群,这种炎症引起喘鸣反复发作、呼吸困难、胸闷和咳嗽,尤其好发于夜间或清晨。
这些症状常与广泛而有变动的气道阻塞相关,也可因气道对某些刺激物反应性增高而发生。
国内目前使用的动物模型多数是卵蛋白致敏的豚鼠哮喘模型, 卵蛋白作为致敏原进入动物体后,其可溶性抗原成分可以刺激机体产生IgE抗体,使机体致敏。
当动物再次接触卵蛋白时,由IgE介导发生抗原抗体反应,使炎症细胞脱颗粒,释放活性化学物质,作用于支气管引起哮喘。
实验对象:雄性豚鼠建模方法:1.抓取豚鼠,腹腔注射10%卵清蛋白1ml/只致敏(由实验技术室老师在实验进行前15天预先注射)。
2.致敏后第15天,雾化吸入1%卵清蛋白(最好是当天配制)60s激发,观察动物呼吸和一般情况,有无咳嗽、呼吸加深加快、烦躁不安等症状。
随后继续吸入10~30min,直至出现上述症状为止。
3.把动物放入含5g钠石灰的缺氧瓶中,用凡士林涂在瓶塞周围,塞紧瓶塞,连通水银检压计。
记录时间和室内温度,每隔3min记录水银面刻度1次,直至动物死亡。
记录死亡时间,计算出耗氧率。
4.迅速从缺氧瓶中取出动物,仰卧固定在大鼠手术台上。
在颈部正中做切口,用止血钳分离气管周围组织,下面穿线备用。
在气管甲状软骨下作倒“T”字型切口,插入连接三通管的气管插管并结扎固定。
5.用注射器抽取生理盐水4ml,从气管插管的三通管处注入肺部,改变豚鼠体位,尽可能使生理盐水冲洗到每一肺叶。
然后回抽,收集支气管-肺泡灌洗液。
6.将收集到的BALF放入小试管,2000r/min×5min离心。
弃去上清,用1 ml生理盐水重新溶解沉淀,并轻轻摇晃混匀,进行白细胞和嗜酸性粒细胞计数。
观察指标:1.观察动物呼吸情况和一般状况,有无呼吸加深加快、咳嗽、呼吸困难和烦躁不安等。
2.BALF中白细胞和嗜酸性粒细胞计数。
3.测定豚鼠耗氧量。
四、感染性休克动物模型常见的感染性休克是由革兰氏阴性杆菌感染引起并通过大量产生的内毒素导致休克。
本实验通过静脉注射内毒素,导致动物急性感染性休克。
实验对象:家兔建模方法:1.抓取家兔并称重,3%戊巴比妥钠1ml/kg耳缘静脉麻醉,仰卧固定在家兔手术台上。
2.剪去颈部被毛,作颈正中切口,分离气管,做气管插管。
分离右侧颈总动脉和左侧颈外静脉,穿线备用。
3. 剪去下腹部被毛,切开皮肤,沿腹白线打开腹腔。
暴露膀胱,分离两侧输尿管,结扎尿道口并进行膀胱插管,连接上记滴器。
打开电脑,启动BL-420E生物机能记录系统,选择实验模块:“泌尿实验”中的“影响尿生成的因素”,进行每分钟尿量记滴。
4.从耳缘静脉注入1%肝素1ml/kg,进行全身肝素化。
5.在右侧腹直肌旁做纵形切口,钝性分离肌肉,打开腹腔。
将一段游离度较大的回肠袢轻轻拉出,平展于事先已注入37℃生理盐水的观察微循环的恒温灌流盒内,用显微镜观察肠系膜微循环。
6.进行右侧颈总动脉插管,连接BL-420E生物机能系统1通道,记录血压。
7.进行左侧颈外静脉插管,插管约插入5~6cm。
通过三通管连接压力传感器,如果观察到压力数值降为负值且随呼吸上下波动,记录数值,为中心静脉压。
三通管另一侧连接静脉输液装置。
稳定5min,记录一段正常各项指标。
8.静脉注射精制内毒素(E coli 0111B4)1ml/kg或粗制内毒素(灭活的大肠杆菌E)8000亿细菌/kg,观察并记录注射后5min、10min、15min、20min、30min、60min各指标变化。
9.60min后,快速从静脉输入生理盐水20ml/kg,并在生理盐水中加入654-2 5mg/kg,观察并记录各指标变化。
观察指标:呼吸频率与幅度、血压、皮肤粘膜颜色和小血管、中心静脉压、尿量、肠系膜微循环(包括:微循环中微血管的流速,口径和每个低倍镜视野下开放的毛细血管数目)。
五、肝硬化动物模型选体重150-200g的Wistar大鼠,将D-氨基半乳糖配制成10%的生理盐水溶液,用1NNaOH将pH调节至7.0,以250mg/kg的剂量行腹内注射,每天一次,每周6天,约半年左右即可形成肝硬化。
在复制过程中,自股动脉取血作肝功能试验,包括血清蛋白测定、浊度试验、转氨酶、乳酸脱氢酶(LDH)、单胺氧化酶(MAO)、5'-核苷酸酶(5'-NA)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)及胆硷酯酶。
分批处死动物进行尸解,观察腹水,心、肝、脾、肺肾等器官形态,用4%甲醛溶液固定,石蜡包埋,切片厚5微米,进行HE、网状纤维(Gordon与Sweet法)、胶原纤维(Van Gieson 法)及弹力纤维(Weiger法)染色。
在采用上述剂量D-氨基半乳糖长期多次注入大鼠腹腔时,动物耐受性较好。
逐渐出现进食活动减少,有时解稀糖大便,腹部较为膨隆。
半年内与对照组相比,实验组体重平均增长显著延缓。
尸检时可见腹腔内有腹水,0-20ml不等。
心、脾、肺、肾、无明显改变。
与对照组相比,早期肝明显增大、重量增加,色泽较灰黄,以后体积逐渐缩小,质地变硬,边缘较钝,肝表面可见弥漫性分布的细颗粒状结节,结节大小不一,直径约为0.5-1.5mm,结节间可见弥漫分布的纤维间隔,间隔一般较细小,其凹凸程度随病变而加深。
切片HE染色、光镜下检查,在注射氨基半乳糖5个月后,肝小叶结构开始紊乱,形成大小不等的肝细胞团,有的仍见好的中央静脉,但其周围门脉区胆管上皮高度增生,其间夹有残留的个别肝细胞及少量单核多核白细胞及褐色素沉着。
随着病程的延长,增生的胆管及纤维母细胞向四周呈星芒状伸展,有的与中央静脉相连。
一般肝细胞变性坏死少见,大多呈增生表现。
Gordon与Sweet 法染色显示肝细胞团中网状纤维少见而周围组织中存在着大量疏松的网状纤维。