第二章2植物组织培养实验室的组成、仪器设备及基本操作

《植物组织培养》教学大纲适用专业：高职应用生物技术等专业总学时：86学时１．课程的性质和任务：植物组织培养是现代植物生物技术的重要分支之一，是人们在无菌条件下利用人工培养基对植物细胞、组织或器官的培养。

这项技术目前已在科研和生产上取得了令人瞩目的进展，该学科在我国高等农林院校植物生产类专业中已被列为一门重要的专业基础课程。

由此可见，不论在理论研究上或在生产实践上，植物组织培养都日益显示出十分重要的作用。

通过对植物组织培养的基础理论和基本方法的学习，使学生较能准确地掌握这门技术并能应用于自己的学习和工作中。

２．教学基本要求：根据《植物组织培养》课程的特点，结合本专业的实际情况，要求以理论教学（即课堂讲授）和实践相结合的教学方式完成该课程的教学任务。

理论教学重点讲授基本概念、基本原理和基本方法（总论）。

至于一些典型植物（主要是园艺作物或观赏植物）的组培理论和组培方法则放在课程实习时加以概述，具体的培养技术有待于同学们在以后的工作中实践。

课堂讲授要求重点突出，条理清晰，层次分明，详略得当。

与此同时，植物组织培养也是一门与生产实际结合比较紧密的课程，相应的实验和实习环节是不可缺少的。

通过参加一定的实验和实习，能进一步提高学生对所学知识的理解，培养和锻炼学生的动手能力和实践技能。

３．理论教学内容第1章绪论教学目的和要求本章要求学生了解植物组织培养的发展简史及研究现状，理解和掌握植物组织培养的有关概念，深刻认识植物组织培养在科学研究与生产实践中的重要作用和地位。

植物组织培养的一般概念教学重点难点植物组织培养概念教学内容§1-1植物组织培养的发展简史1．探索阶段2．奠基阶段3．迅速发展阶段§1-2植物组织培养在科学研究和生产实践中的地位与作用第2章实验室的设计、基本设备及一般操作技术教学目的和要求通过对本章的学习，要求学生对植物组织培养实验室的基本组成、基本设备及基本操作技术能有一个较全面的认识。

植物组织培养实验室构建概述植物组织培养实验室是进行植物细胞培养、愈伤组织培养、植物遗传转化等实验的重要场所。

建立一个高效的植物组织培养实验室对于开展植物生物技术研究至关重要。

本文将介绍植物组织培养实验室的构建步骤及相关设备和操作流程。

步骤1. 确定实验室位置植物组织培养实验室应设置在通风良好、光线充足的环境中，并且远离其他实验室以避免交叉污染。

实验室的位置选择也应考虑到未来扩建或改造的可能性。

2. 设计实验室布局实验室布局应合理，设备摆放应符合操作流程，同时要考虑实验室的通风、安全和卫生条件。

实验台、培养室、设备间等区域的划分要清晰明了。

3. 购置必要设备植物组织培养实验室需要配备必要的设备，包括无菌工作台、培养箱、显微镜、离心机、恒温培养箱等。

设备的选择应考虑实验需求和预算。

4. 保障实验室安全实验室安全是第一位的，必须确保实验室的电路、水源等设备安全可靠，设备操作人员应接受相关安全培训，并且定期进行检查和维护。

5. 制定实验操作规程建立完善的实验操作规程是保证实验结果准确可靠的关键。

制定实验操作规程时应考虑到每个操作步骤的细节，包括消毒步骤、培养条件控制等。

6. 建立实验室管理制度建立实验室管理制度有利于实验室的日常管理和运行。

管理制度包括实验室卫生、设备维护、实验记录等方面，确保实验室的正常运转。

操作流程1.准备工作–检查实验室设备是否正常运转。

–准备培养基、试剂和实验器具。

2.植物组织采集–从健康植物中采集需要的组织。

–进行消毒处理。

3.组织培养–将组织放入无菌条件下的培养基中进行培养。

–控制培养条件，如温度、光照等。

4.植物遗传转化–遗传工程操作，将外源基因导入植物组织中。

–过筛、筛选转化株。

5.结果分析–观察转化效果，记录实验数据。

–分析实验结果，撰写实验报告。

结论建立一个高效的植物组织培养实验室需要全面考虑实验室的位置选择、布局设计、设备购置等方面。

制定操作规程、建立管理制度是保证实验室运行的基础。

组培实验仪器配置清单植物组织培养(Planttissueculture)是以植物生理学为基础发展起来的一门新生的生物技术学，科针对此项目，托普云农特整理出组培实验仪器配置清单供新老客户参考。

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植物组培实验室设置条件及器具一、实验室组成二、基本设备三、培养器皿及实验用具四、无菌条件及创设五、无菌操作六、组培的环境条件和营养条件组织培养实验室布局的总体要求基本实验室辅助实验室实验室组成准备室缓冲室无菌操作室培养室细胞生物学实验室温室生化分析实验室基本实验室布局平面图实验台搁架培养架培养架培养架培养架药品及仪器柜无菌台无菌台搁架拉窗冰箱搁架水槽电炉门 4.5m 3.0m 3.5m 4.0m 准备室缓冲室无菌室培养室组织培养准备实验室缓冲室培养室无菌室（一）无菌室（二） 1 冰箱酸度计电炉天平纯水器培养基分装器搅拌器2、灭菌设备蒸汽压力灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒器、紫外灯。

蒸汽压力灭菌锅干热消毒柜无菌瓶顶过滤装置喷雾消毒器（参考图）（参考图）3、无菌操作设备超净工作台无菌接种箱4、细胞培养设备摇床培养架H Z C - 2 5 0 恒温振荡培养箱1 5 0 C 2 5 0 D 光照培养箱5、细胞学鉴定设备光学研究显微镜、实体显微镜、倒置显微镜倒置显微镜光学显微镜1、玻璃器皿三、培养器皿及实验用具培养皿三角瓶培养瓶2、金属材质用具镊子解剖刀接种针无菌条件物理方法：物理灭菌干热、湿热、射线处理、物理除菌、过滤、离心、沉淀等化学方法：消毒剂、抗菌素灭菌1、灭菌方法2、灭菌（1）培养基灭菌：高温高压湿热灭菌法压力在9.8×10 4 —10.8×10 4 Pa 温度在121℃灭菌20—30min （2）玻璃器皿灭菌：蒸汽高压消毒灭菌干热消毒灭菌（3）塑料器皿灭菌：多采用高压蒸汽消毒灭菌（4）金属用具灭菌：灼烧灭菌浸入95%酒精，后置于酒精火焰上灼烧，冷却后使用（5）接种室灭菌空气消毒灭菌接种室超净工作台紫外灯照射70%—75% 的酒精擦洗培养材料的接种紫外灯照射（6）外植体灭菌流水冲洗10—20min 或更长时间70%—75% 酒精中浸泡30s 0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右蒸馏水冲洗4—5次在10%的次氯酸钠、饱和漂白粉浸泡30min左右备用六、无菌操作实验员消毒实验室、无菌台灭菌实验器材的灭菌无菌接种消毒实验台卫生培养室培养1、消毒，更换实验服、帽子与鞋子，进入接种室。

植物组织培养实验室的设计与设备首先，植物组织培养实验室的设计应该满足以下要求：1.空间：实验室需要足够的空间容纳各种设备和工作区域。

实验室应该根据实验室的规模设计合理的面积大小，通常一个中小型实验室的面积应该在100-200平方米之间。

2.实验台：实验台是进行实验的主要工作区域，应该设计宽敞、舒适，便于操作和清洁。

实验台上应该有足够的空间来放置显微镜、培养皿、试管和其他实验室用具。

3.显微镜室：实验室中应该设有一个专门的显微镜室，用于观察和分析植物细胞和组织。

显微镜室应该有良好的光线和通风条件，以便在观察过程中获得清晰的图像。

4.无菌区：植物组织培养实验室中的细胞和组织培养工作需要在无菌条件下进行。

因此，实验室应该设置一个无菌区，以防止外部菌和霉菌的污染。

无菌区应该具备空气过滤和紫外线消毒等设备。

5.视频监控系统：为了确保实验操作的安全性和监测工作过程，实验室应该配备视频监控系统，能够记录下实验操作的全过程。

其次，植物组织培养实验室还需要配备适当的设备，以支持实验工作。

以下是一些常见的植物组织培养实验室设备：1.培养箱：培养箱用于控制温度、湿度和光照条件，以提供适合植物生长和繁殖的环境。

培养箱通常配备可调节的温度控制装置和光源。

2.植物生长室：植物生长室用于保持恒定的环境条件，包括温度、湿度和光照。

生长室可以根据不同的植物需求设置不同的生长条件。

3.培养皿和试管：培养皿和试管是进行植物细胞和组织培养的主要容器，用于种植和培养植物细胞和组织。

它们通常是无菌的，以防止污染。

4.高压灭菌器：高压灭菌器用于对培养介质、工具和试剂进行高温高压灭菌处理，以消除外部细菌和霉菌的污染。

5.霉菌培养箱：霉菌培养箱用于培养和繁殖霉菌，以供实验室使用。

这些霉菌可以用来制备蘑菇菌种或用于生产其他植物培养基的配方。

6.显微镜：显微镜是观察和分析植物细胞和组织的主要工具。

实验室应该配备高质量的显微镜，以保证观察到正确而清晰的图像。

植物组织培养技术第一章绪论第二章植物组织培养实验室组成、仪器设备及无菌操作技术第三章植物组织培养基本原理第四章器官培养技术第五章植物胚胎培养第六章花粉及花药培养第七章细胞及原生质体培养第八章组培培养技术在中药学上的应用第一章绪论一、植物组织培养的概念1. 概念植物组织培养（Plant tissue culture）广义上是指无菌条件下，在特定的培养基上对离体的植物器官、组织、细胞和原生质体甚至包括完整植株进行培养的技术。

2.主要特征（1）在培养容器中进行；（2）无菌培养环境，排除了微生物如真菌、细菌以及害虫等的侵入；（3）各种环境因子如营养因子、激素因子以及光照、温度等物理因子处于人工控制之下，并可达到最适条件。

（4）通常打破了正常的植物发育过程和格局；（5）随着单细胞和原生质体培养技术的发展，对植物显微结构进行操作成为可能。

二、植物组织培养类型：根据不同分类的依据可以分为不同类型。

1、根据培养材料不同分为：（1）完整植株培养（Plant Culture）：对幼苗和较大植株等的培养。

（2）胚胎培养（Embryo Culture）：包括成熟胚、幼胚、子房、胚珠等的培养。

（3）器官培养（Organ Culture）：包括离体根、茎、叶、果实、种子、花器官的培养。

（4）组织培养（Tissue Culture）：如分生组织、薄壁组织、输导组织培养。

（5）细胞培养（Cell Culture）：指对单细胞或较小的细胞团进行培养。

（6）原生质体培养（Protoplast Culture）：指对去掉细胞壁后所获得的原生质体进行培养。

2、根据再生途径分为：（1）器官发生途径（Organogenesis）：直接器官发生途径：植物器官可以直接由外植体上诱导。

如茎尖培养。

间接器官发生途径：成熟细胞经过脱分化（dedifferentiation）及再分化（redifferentiation）过程而形成新的组织和器官的过程。

组织培养所需的实验条件和器具图片怎样才能发上来？请帮助！一、植物组织培养全过程：二、植物组织培养常用的设备和器材1、培养室:包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室、缓冲间，是组织培养实验所必须具备的基本条件。

2、仪器设备：主要有超净工作台、冰箱、水浴锅、高压蒸汽灭菌锅、烘箱等。

超净工作台高压蒸汽灭菌锅水浴锅3.实验常用用具三、常用药品组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类：1、光照光照是组织培养中的重要外界条件之一，它对外植体生长和分化有很大的影响。

光照对组织培养的影响主要表现在光周期、光照强度（光强）和光质这三个方面。

2、温度温度最重要的作用是决定呼吸的速度和控制植物组织代谢过程的化学反应。

在植物组织培养中，不同植物繁殖的最适温度不同，大约为23～28℃之间，但也有不少例外，差异比较大。

通常低于15℃时，培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞，但高于35℃对生长也不利。

在实际工作中，在考虑某种培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件，如生长在高海拔和较低温度环境的植物，则培养的环境温度可适当低些。

3、湿度植物组织培养中的湿度影响主要有两个方面：一是培养容器内的湿度条件，二是培养室的湿度条件。

培养容器内的湿度主要受培养基的影响，相对湿度可达100%，而培养室的湿度变化随季节而有很大变动，它可以影响培养基的水分蒸发，一般要求70%～80%的相对湿度。

4、培养基的PH值外植体的培养增殖都要求一定的PH值。

通常一般培养基的PH值都在5.6～6.0之间。

如果PH值不适则直接影响外植体对营养物质的吸收，进而影响外植体的脱分化、增殖和器官形成。

不过PH值对不同植物的影响会有差异，有的宜偏酸，有的宜偏碱，在实际工作中，依不同植物而调整。

5、氧和其他气体培养容器中的气体成分会影响到培养物的生长和分化。

氧是植物组织培养必需的，在接种时应避免把整个外植体全部埋入培养基中，以免造成缺氧。

植物组织培养实验室的组成及特点植物组织培养实验室是用于进行植物组织培养的科研实验室，主要用于研究植物生长、发育和遗传变异等方面的问题。

该实验室的组成和特点如下。

一、组成：1. 培养室：用于培养植物组织的主要场所，具备恒温、恒湿、光照等环境条件控制设备，以提供适宜的生长环境。

2. 器械室：用于存放和管理植物组织培养所需的器械、耗材和试剂等。

3. 培养箱：用于在无菌条件下培养植物组织，保证培养过程的无菌性。

4. 植物材料库：用于存放和管理各类植物材料，如种子、离体器官等。

5. 实验台：用于进行植物组织培养实验的操作台，配备显微镜、离心机、培养皿、移液器等实验器材。

6. 数据分析室：用于对实验数据进行统计和分析，以及进行相关的科研文献检索和资料整理。

二、特点：1. 无菌环境：植物组织培养实验室的一个重要特点是要保持无菌环境，以防止外界微生物的污染对实验结果的影响。

因此，实验室内需要进行严格的无菌操作，包括无菌培养箱的使用、培养基的制备和无菌操作技术的掌握等。

2. 精密控制条件：植物组织培养实验室需要精密控制培养环境的温度、湿度、光照等条件，以提供适宜的生长环境。

这样可以促进植物组织的生长和发育，并提高培养效果。

3. 多种培养方法：植物组织培养实验室可以采用多种培养方法，如组织培养、离体培养、原代培养等。

这样可以满足不同研究目的的需求，并开展多样化的实验研究。

4. 多样化的研究内容：植物组织培养实验室的研究内容涉及植物生长、发育、遗传变异、细胞学、生理学、分子生物学等多个方面。

通过培养不同植物组织或植物材料，可以对这些方面进行深入研究，为进一步理解植物的生物学特性提供重要依据。

5. 团队合作和交流：植物组织培养实验室通常由一支研究团队组成，团队成员之间需要密切合作和交流，共同解决实验中遇到的问题，提高实验效率和科研水平。

此外，实验室还需要与其他实验室、学术机构和产业界进行合作和交流，以促进学术交流和科技创新。