外泌体在肿瘤生物治疗中的研究进展_万双双

外泌体功能与临床应用研究进展外泌体，这个看似陌生的词汇，近年来在生物医学领域引起了广泛的关注和研究热潮。

那么，外泌体究竟是什么？它又有着怎样的神奇功能和令人期待的临床应用前景呢？让我们一同走进这个充满奥秘的微观世界。

外泌体是一种由细胞分泌的微小囊泡，直径通常在 30 至 150 纳米之间。

它们就像是细胞之间的“信使”，携带着各种生物活性分子，如蛋白质、脂质、核酸（包括 mRNA、miRNA 等），穿梭于细胞之间，传递着重要的信息。

外泌体的功能多种多样。

首先，它们在细胞间通讯中发挥着关键作用。

通过将特定的分子传递给靶细胞，外泌体能够调节细胞的生理和病理过程。

例如，免疫细胞分泌的外泌体可以激活或抑制其他免疫细胞的功能，从而影响免疫反应的强度和方向。

其次，外泌体参与了组织修复和再生。

在损伤发生时，某些细胞会释放富含生长因子和细胞因子的外泌体，促进受损组织的修复和细胞的增殖分化。

这为治疗各种组织损伤和退行性疾病提供了新的思路。

再者，外泌体还与肿瘤的发生发展密切相关。

肿瘤细胞分泌的外泌体可以改变肿瘤微环境，促进肿瘤细胞的生长、侵袭和转移。

同时，外泌体中的肿瘤特异性标志物也为肿瘤的早期诊断和监测提供了潜在的生物标志物。

在临床应用方面，外泌体的研究取得了令人瞩目的进展。

在肿瘤诊断方面，由于外泌体携带了肿瘤细胞特有的分子信息，检测血液、尿液等体液中的肿瘤来源外泌体，有望实现肿瘤的早期诊断和筛查。

例如，通过分析外泌体中的特定 miRNA 谱，可以区分不同类型的肿瘤，提高诊断的准确性。

在治疗领域，外泌体也展现出了巨大的潜力。

一方面，可以利用工程化的外泌体作为药物载体，将治疗药物精准地递送到病变部位，提高药物的疗效并降低副作用。

另一方面，基于外泌体的免疫治疗也正在成为研究的热点。

通过提取和改造免疫细胞来源的外泌体，增强机体的抗肿瘤免疫反应，为癌症治疗开辟新的途径。

此外，外泌体在心血管疾病、神经系统疾病等领域也有着广阔的应用前景。

外泌体功能与临床应用研究进展外泌体，这个在生物医学领域逐渐崭露头角的名词，正引起越来越多科研人员的关注。

它看似微小，却蕴含着巨大的潜力，为疾病的诊断和治疗带来了新的希望。

外泌体是什么呢？简单来说，外泌体是细胞分泌的一种微小囊泡，直径通常在 30 150 纳米之间。

别看它个头小，里面可装着不少“宝贝”，比如蛋白质、脂质、核酸（包括 mRNA、miRNA 等）。

这些成分可不是随便装进去的，而是经过细胞的精心“挑选”，具有特定的功能和意义。

外泌体的一个重要功能是细胞间的通讯。

它就像是细胞之间传递信息的“信使”，能够在不同细胞之间穿梭，将其所携带的物质传递给靶细胞，从而调节靶细胞的生理活动。

例如，免疫细胞可以通过外泌体向其他免疫细胞传递信号，协调免疫反应；肿瘤细胞也能利用外泌体与周围的细胞进行交流，促进肿瘤的生长、侵袭和转移。

在免疫调节方面，外泌体发挥着不可忽视的作用。

外泌体可以携带免疫调节分子，如细胞因子和抗原，参与免疫细胞的激活、分化和抑制。

一些研究发现，树突状细胞来源的外泌体能够激活 T 细胞，增强免疫应答，这为免疫治疗提供了新的思路。

同时，肿瘤来源的外泌体也可能抑制免疫细胞的功能，帮助肿瘤细胞逃避免疫监视。

外泌体还与心血管疾病密切相关。

心肌细胞分泌的外泌体中含有特定的 miRNA，这些 miRNA 可以调节心肌细胞的存活、增殖和凋亡，影响心血管疾病的发生和发展。

此外，外泌体还能够促进血管生成，在心血管损伤后的修复过程中发挥一定的作用。

在神经系统中，外泌体同样扮演着重要角色。

神经细胞通过外泌体传递神经递质、蛋白质和 miRNA 等物质，维持神经系统的正常功能。

研究表明，外泌体在神经退行性疾病，如阿尔茨海默病和帕金森病中，可能参与了致病蛋白的传播和神经元的损伤。

那么，外泌体在临床应用方面有哪些进展呢？首先，外泌体作为疾病的生物标志物具有很大的潜力。

由于外泌体中包含了反映细胞生理状态的物质，通过检测血液、尿液等体液中的外泌体及其内容物，可以为疾病的早期诊断、病情监测和预后评估提供重要依据。

外泌体的研究进展一、本文概述随着生物医学研究的深入，细胞间的信息交流机制逐渐成为研究的热点。

作为细胞间交流的重要载体，外泌体（Exosomes）的研究在近年来取得了显著的进展。

本文旨在综述外泌体的基本特征、生物学功能及其在疾病诊断和治疗中的应用，同时探讨当前面临的挑战和未来的发展趋势。

我们将简要介绍外泌体的定义、结构特点以及产生机制，帮助读者理解其作为细胞间信息传递的重要角色。

接着，我们将重点讨论外泌体在肿瘤、心血管疾病、神经退行性疾病等医学领域的研究进展，包括外泌体在疾病发生发展中的作用机制，以及作为疾病标志物的潜力。

我们还将关注外泌体在疾病诊断和治疗中的应用前景，如作为药物递送载体、肿瘤疫苗以及生物标志物等方面的研究。

我们将对当前外泌体研究面临的挑战和未来的发展方向进行深入探讨，以期为推动外泌体在生物医学领域的应用提供有益的参考。

二、外泌体的结构与功能外泌体是一种由细胞主动分泌的，直径约为30-150纳米的膜性囊泡，普遍存在于各种体液中，包括血液、尿液、乳汁、脑脊液和细胞培养基等。

这些囊泡在细胞间的物质传递、信息交流以及免疫反应等方面发挥着重要作用。

近年来，随着外泌体研究的深入，其独特的结构和功能逐渐被人们所揭示。

结构上，外泌体由磷脂双分子层膜包裹着内部的水溶液组成，其膜上嵌有多种蛋白质，包括四跨膜蛋白、热休克蛋白、整合素等。

这些蛋白质不仅参与外泌体的形成和分泌过程，还负责将外泌体与靶细胞进行特异性结合，实现精准的物质传递。

外泌体的膜上还含有丰富的糖类和脂质，这些成分对于外泌体的稳定性和功能也至关重要。

功能上，外泌体具有多种生物学活性。

外泌体可以传递信息分子，如mRNA、miRNA、蛋白质等，这些分子在细胞间的信息交流过程中发挥着关键作用。

外泌体可以参与免疫反应，通过传递抗原或免疫调节分子，影响免疫细胞的活性和功能。

外泌体还具有促进血管生成、抑制肿瘤生长等多种生物学活性。

值得一提的是，外泌体的功能与其来源细胞密切相关。

外泌体在肿瘤免疫治疗中的生物学功能和临床应用外泌体是直径约为100nm的小型囊泡，它们广泛存在于各种体液中，包括血液、唾液、眼泪和尿液，并可由各种细胞分泌。

外泌体可以运输蛋白质、脂质、核酸和其他物质，并作为细胞内载体，在调节细胞间通讯中起着关键作用。

外泌体是一种理想的药物递送系统，具有多种优点：如免疫原性低、稳定性好和靶向能力。

外泌体不具有细胞和器官中的复杂性，使其免疫原性较低。

同时，与单个蛋白质或小分子不同，外泌体含有异质分子，可确保外泌体在人体内的良好生物分布、药代动力学和细胞摄取，更容易用于治疗。

外泌体作为各种治疗药物的载体，有效保护了治疗药物在体内的完整性，极大地提高了药物的生物利用度，减少了药物的毒副作用，最大限度地提高了抗肿瘤效率。

外泌体可以以不同的方式用于肿瘤治疗。

肿瘤衍生的外泌体（TEX）作为信使调节肿瘤微环境。

在癌症的初始阶段，肿瘤细胞分泌的外泌体数量显著高于正常细胞，TEX被认为反映了各种癌症的分子特征。

开发减少肿瘤细胞外泌体分泌的疗法可能会更好地抑制肿瘤发生。

外泌体可以通过多种机制发挥其生理活性，包括吞噬作用、胞饮作用、融合和受体或脂筏介导的内吞作用。

这些细胞吸收外泌体的独特机制促进了基于外泌体的癌症疗法的发展。

此外，外泌体在介导肿瘤微环境中肿瘤细胞与TAM之间的细胞间信息传递发挥着重要的功能，这可能为抗肿瘤治疗提供新的靶点。

外泌体作为癌症疫苗抗原和疫苗增效剂众所周知，与正常细胞相比，即使在肿瘤进展的早期阶段，肿瘤细胞也会向血浆和体液中释放更多的外泌体。

TEX 提供免疫刺激或免疫抑制分子，调节免疫细胞的发育、成熟和抗肿瘤能力。

来自TEX的肿瘤相关抗原可以通过树突状细胞（DC）呈递，DC细胞激活肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTL）以诱导抗肿瘤免疫。

与肿瘤裂解物相比，TEX由于更丰富的免疫刺激成分而增强了疫苗效果。

此外，TEX还含有促进DC摄取各种抗原的功能性标记物。

因此，TEX已成为一种很有前途的抗原来源和肿瘤疫苗的增效剂。

•综述•外泌体在肿瘤中的研究与进展杨延巍　刘彦虹DOI ：10.3877/cma.j.issn.2095-3224.2018.01.014作者单位：150086　哈尔滨医科大学附属第二医院检验科 通信作者：刘彦虹，Email ：liuusa2016@【摘要】　近年来，越来越多的人开始对外泌体进行研究。

外泌体具有传递信息，转录RNA 的功能，其非编码区mRNAs 是肿瘤等疾病发病机制的研究焦点。

大量研究表明，肿瘤细胞可以释放大量外 泌体，产生局部效应和全身反应。

这篇文章中，我们针对外泌体最新研究进行总结，大致归纳为两点：（1）外泌体在肿瘤的生物学功能和机制有着重要作用；（2）外泌体可以作为肿瘤诊断的标志物，并可以监测病情变化。

【关键词】　外泌体；　肿瘤；　标志物Research and progression of exosome in tumor Yang Yanwei, Liu Yanhong. Department of Clinical Laboratory, Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Harbin 150086, China Corresponding author: Liu Yanhong, Email: liuusa2016@【Abstract 】　The past decade has witnessed an exponential increase in research on exosomes. The capability of exosomes to transfer proteins, DNA, mRNA, as well as non-coding RNAs has made them an attractive focus of research into the pathogenesis of different diseases, including cancer. Increasing evidence suggests that tumor cells release a large sum of exosomes, which may not only influence in local microenvironment, but also can exert systemic effects. In this study, we review the current understanding on this topic, roughly divided into two broad facets of exosomes in cancer: (1) exosomes plays an important role in tumor biological function and mechanism; (2) exosomes can be used as a tumor diagnostic markers, and can monitor the condition changes.【Key words 】　Exosomes;　Neoplasms;　Biomarkers外泌体是由多囊泡体（multivesicular bodies ，MVBs ）细胞膜分离出来的小的、具有磷脂双分子层的囊性小泡，主要由脂质，蛋白质和核酸构成［1］。

外泌体在肿瘤发生中的调节作用研究进展吕程程;朱运峰【期刊名称】《中国药理学与毒理学杂志》【年(卷),期】2016(030)007【摘要】外泌体是由多种类型细胞分泌到胞外的纳米级小囊泡，富含蛋白质、mRNA、微RNA（miRNA）、DNA和脂质等生物活性分子，能参与细胞间的物质交换与信息交流，从而影响细胞的生理功能。

外泌体中的活性分子能促进肿瘤血管的新生，对肿瘤的发生、侵袭和迁移具有重要的调节作用。

此外，外泌体在肿瘤的诊治方面也有重要价值。

本文主要综述外泌体的生物学特征及其与肿瘤发生的密切关系，以及外泌体中miRNA在肿瘤诊断和治疗方面应用的研究进展。

%Exosomes are extracellular nanoparticles secreted by multiple types of cells,which are enriched for some bioactive molecules,such as proteins,messcge RNA(mRNA),micro RNA(miRNA), DNA and lipid. These molecules are documented to be involved in the process of intercellular material exchange and signal communication,thus affecting the function of cells. Also,exosomes are considered to participate in tumor angiogenesis,cancer progression and metastasis,but the mechanism remains obscure. Exosomes are of great value for the diagnosis and treatment of tumor. The correlations between exosomes and tumorigenesis and tumor metastasis as well as their clinical applications are summarized in this review.【总页数】7页(P777-783)【作者】吕程程;朱运峰【作者单位】北京交通大学生命科学与生物工程研究院，北京 100044;北京交通大学生命科学与生物工程研究院，北京 100044; 解放军总医院肿瘤中心实验室，北京 100853【正文语种】中文【中图分类】R963【相关文献】1.外泌体在肿瘤发生发展中的研究进展 [J], 陈光2.外泌体在肿瘤发生发展中的作用机制研究进展 [J], 臧明泉;任建琳;靖琳;陶灵佳;桂奕文;阎国良;李宁3.MSCs源性外泌体在肿瘤发生、发展中作用机制的研究进展 [J], 王亚苹;马珊珊;周馨魁;张彦婷;刘红涛;关方霞4.外泌体在肿瘤发生、发展及化疗耐药中作用的研究进展 [J], 戚耀月;邱文生;孙丽斌5.外泌体在肿瘤发生、发展及化疗耐药中作用的研究进展 [J], 戚耀月;邱文生;孙丽斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

外泌体对肿瘤细胞扩散的作用及其机制研究肿瘤是一种危害人类健康的疾病，其有着高度异质性和发散性，尤其是肿瘤细胞的扩散和转移是所有恶性肿瘤的通病，而这一过程是由多因素共同促进的。

近年来，外泌体作为一类具有重要调节功能的纳米颗粒备受关注，其在肿瘤细胞扩散和转移中的作用也成为研究的热点。

本文将对外泌体对肿瘤细胞扩散的作用及其机制进行详细的介绍与分析。

一、外泌体的定义外泌体是由细胞产生的小囊泡状分泌物，其大小在50-200nm之间，外泌体中含有丰富的蛋白质、核酸和脂质等生物分子，是一种具有多重功能的纳米颗粒。

外泌体的生成是通过各种刺激，如细胞程序性死亡、病毒感染或细胞应激等过程中而发生的，其主要的生成途径是通过细胞分泌物质的囊泡化产生的。

二、外泌体在肿瘤细胞扩散和转移中的作用外泌体在肿瘤细胞扩散和转移中发挥的作用主要有两个方面：一是作为信使向周围环境传递信息和调节细胞功能，二是通过介导肿瘤细胞与周围环境的相互作用，促进其扩散和转移。

1、外泌体在调节肿瘤微环境中的作用肿瘤微环境是肿瘤细胞的特定生存环境，其复杂的组成决定了肿瘤细胞的侵袭和转移能力。

外泌体在肿瘤微环境中，通过于周围环境的相互作用，对于肿瘤细胞的生长、分化和转移等过程发挥着重要的调节作用。

外泌体中含有多种活性物质，包括细胞因子、生长因子、基质金属蛋白酶和核酸等，在周围微环境中自由释放的这些物质能够针对环境中的细胞和组织发挥多种生物学效应。

如外泌体释放的TGF-β可以促进肿瘤细胞的上皮-间质转化（EMT）和细胞迁移；外泌体释放的VEGF能够促进肿瘤血管生成，使癌细胞进一步侵袭和转移。

外泌体还能够通过在生长和转移过程中，与周围细胞和组织之间的相互作用，影响其存活和迁移的能力。

外泌体表面的黏附蛋白质与肿瘤微环境中各种细胞表面的黏附分子结合，使肿瘤细胞能够与周围的组织和细胞结合，形成侵袭源和转移点，从而促进肿瘤细胞的侵袭和转移。

2、外泌体在介导肿瘤细胞与周围环境的相互作用中的作用肿瘤细胞在扩散过程中，需要与周围环境中的细胞和基质发生相互作用，进而进入侵袭，如与细胞外基质（ECM）相互作用，使细胞迁移并侵入邻近的组织。

外泌体在肿瘤转移中的作用研究进展肿瘤是世界范围内的健康问题，其转移导致恶性肿瘤死亡率的增加，具有重要的研究价值。

近年来，越来越多的研究表明，外泌体在肿瘤转移中起着重要的作用。

外泌体是一种由多种细胞类型分泌的小膜泡，其大小约为30-100nm，它们含有微RNA、mRNA和蛋白质等分子，能够调控目标细胞的基因表达以及信号传递通路。

外泌体具有多种功能，包括分泌、激活、清除和细胞间通讯等。

肿瘤细胞通过外泌体来传递信息外泌体在肿瘤转移中的作用主要通过肿瘤细胞的信息传递来实现。

肿瘤细胞可以通过外泌体释放的信息来影响目标细胞的行为，从而达到肿瘤细胞转移的目的。

一个能够有效抑制外泌体释放的治疗策略可能有助于防止肿瘤细胞转移。

微RNA在肿瘤转移中起到调节作用外泌体微RNA具有强大的调控功能，在转移过程中具有重要作用。

研究表明，外泌体微RNA能够通过调节目标细胞基因表达来影响其生物学行为，包括增殖、血管生成、侵入和转移。

外泌体表达的微RNA已经成为向肿瘤转移控制的新靶点之一。

外泌体蛋白在肿瘤转移中起到调节作用外泌体蛋白还可以通过不同机制将其负载递送到目标细胞，影响其生物学行为。

外泌体蛋白在肿瘤细胞转移中的作用机制多种多样，涉及各种信号通路的变化，包括细胞粘附、血管生成、转移和免疫抑制等。

外泌体蛋白在防止肿瘤细胞转移中有重要的作用。

外泌体在肿瘤转移中的应用外泌体可以作为肿瘤转移诊断和治疗策略的潜在依据。

外泌体微RNA和蛋白质可以用作肿瘤转移的标志物和预测指标。

同时，肿瘤细胞可以通过调控外泌体释放来控制转移的速度和蔓延性，因此想要防止肿瘤细胞转移，就需要提高大量释放外泌体的抑制剂。

结论外泌体在肿瘤转移中可能扮演重要角色，因此，外泌体的研究可能为肿瘤治疗和诊断提供新的思路。

未来的研究有望深入探索外泌体在肿瘤转移中的作用机制，进一步阐明其可能的应用场景和限制条件。

【综述】BioactMater：外泌体在肿瘤进展、肿瘤疫苗开发和治疗中的作⽤外泌体在癌症的恶性进展中发挥关键功能，同时具备携带货物（包括药物和分⼦信息）到受体细胞的能⼒，使外泌体成为癌症治疗的新⼯具。

近⽇，来⾃芝加哥⼤学的研究⼈员在Bioactive Materials杂志上发表综述，讨论了外泌体的主要成分及其在癌症进展中的作⽤，还回顾了关于外泌体在癌症治疗中作为疫苗和递送载体的潜在作⽤。

外泌体是细胞外囊泡（EVs）的⼀种，直径约 30-100 nm，带有脂质双层膜。

外泌体由包括肿瘤细胞在内的各种细胞类型分泌，并存在于⾎液、脑脊液 (CSF) 和尿液等⽣物体液中。

其他EV通常包括微泡和凋亡⼩体，在⽣物发⽣和标记物表达⽅⾯与外泌体不同。

外泌体以前被认为是垃圾处理器，但现在越来越多的研究认为它们对细胞间通讯⾄关重要，并且在包括肿瘤在内的不同⽣理和病理过程中发挥着关键作⽤。

在癌症中，外泌体参与诱导⾎管⽣成、细胞迁移和增殖、炎症反应、免疫抑制、逃避免疫监视和转移。

外泌体包含⼏种类型的货物，包括蛋⽩质、脂质、酶、转录因⼦、DNA ⽚段、信使 RNA (mRNA)、微⼩ RNA (miRNA) 和长链⾮编码RNA (lncRNA)。

他们可以将这些分⼦转移到基质细胞中，将受体细胞表型调节为适合肿瘤⽣长的类型，促进原发肿瘤的⽣长。

肿瘤微环境 (TME) 在原发肿瘤的⽣长和转移中起着重要作⽤，因为肿瘤细胞可以与邻近和远处的细胞建⽴交流。

TME 包含细胞外基质 (ECM)、内⽪细胞、癌症相关成纤维细胞 (CAF)、免疫细胞和间充质⼲细胞 (MSC) 等。

已知原发性肿瘤细胞衍⽣的外泌体可诱导成纤维细胞转化为肌成纤维细胞，分泌⾦属蛋⽩酶 (MMP)，进⽽降解ECM。

这种降解导致⼀些分⼦的释放促进其他细胞的侵袭。

此外，这些外泌体通过激活TME中的巨噬细胞来刺激新⾎管的形成，从⽽形成炎症⽣态位。

EVs 还可以诱导上⽪间质转化 (EMT)，上⽪细胞失去细胞间粘附并与肿瘤分离，促进肿瘤细胞的扩散。

外泌体的研究进展外泌体是细胞分泌的一种重要物质，由细胞释放到细胞外环境中，参与多种生物学过程。

近年来，随着对外泌体研究的深入，越来越多的学者开始其在医学、生物和材料等领域的应用价值。

本文将对外泌体的研究现状、方法、成果和应用前景进行全面探讨。

一、外泌体的研究现状外泌体是由细胞分泌的一种小泡，直径约30-100纳米，包含多种生物活性物质，如蛋白质、核酸和脂质等。

近年来，随着对外泌体的深入研究，发现其参与了细胞间通信、物质运输等多种生物学过程。

同时，外泌体在疾病诊断、药物研发和组织工程等方面也具有广泛的应用前景。

二、外泌体的研究方法1、实验设计：外泌体的研究涉及细胞生物学、分子生物学、生物化学、医学等多个学科，因此需要进行多学科交叉的实验设计。

2、样本处理：外泌体的提取和纯化是研究外泌体的关键步骤，常用的方法包括超速离心法、免疫磁珠法、聚合物沉淀法等。

3、基因表达分析：采用基因表达谱技术对外泌体中的核酸进行分析，以揭示其基因表达特征。

4、蛋白质组学：运用蛋白质组学技术对外泌体中的蛋白质进行分析，以鉴定其蛋白质种类和功能。

三、外泌体的研究成果1、肿瘤治疗：研究发现，肿瘤细胞释放的外泌体可以传递信号给正常细胞，诱导其恶性转化。

因此，通过研究外泌体在肿瘤发生发展中的作用，有望为肿瘤治疗提供新思路。

2、药物传输：外泌体具有保护和输送物质的特性，可被用作药物载体。

通过加载抗癌药物或其他生物活性物质，外泌体可以实现药物的定向传输，提高疗效并降低副作用。

3、组织工程：外泌体具有调节细胞生长、分化和迁移的能力，因此在组织工程中具有潜在应用价值。

例如，将特定外泌体加载到生物材料中，可以促进组织再生和修复。

4、环境监测：外泌体在细胞间通信和物质运输中发挥重要作用，也参与了环境因素的响应和适应。

通过研究外泌体在环境监测中的作用，可以为环境污染的监测和治理提供新手段。

四、外泌体的应用前景1、生物治疗手段：通过调节外泌体释放的生物活性物质，有望开发新的生物治疗手段，如上文提到的肿瘤治疗和药物传输等。

动物医学进展,2019,40(4):116-120Progress in Veterinary Medicine外泌体在肿瘤及寄生虫病中的应用研究进展李承桓，李佳祺，邢蒙恩，丁莹莹，桑晓宇，冯颖，姜宁，陈启军，杨娜*(沈阳农业大学畜牧兽医学院，辽宁沈阳110866)摘要：外泌体(EVs)也称作胞外囊泡，是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的磷脂双分子层小囊泡。

1983年，研究人员在绵羊网织红细胞中首次发现外泌体，最初认为外泌体只是细胞代谢废物，但随着对其生物来源、物质构成、运输、细胞间信号传导及在体液中分布等方面深入研究，发现外泌体具有多种功能。

近年来研究发现，外泌体在肿瘤早期诊断、肿瘤转移和扩散等方面都扮演重要角色，并且有可能成为新型药物载体应用在肿瘤治疗方面。

随着外泌体功能和生物学特点的深入研究，这种新型药物载体技术也有可能应用到抗寄生虫病，为寄生虫病的治疗提供新思路。

关键词：外泌体；肿瘤；寄生虫中图分类号：S852.7；R730.5文献标识码：A文章编号:1007-5038(2019)04-0116-05外泌体(exosomes,EVs)也称作胞外囊泡，直径约30nm〜100nm,是细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的磷脂双分子层小囊泡。

1983年,Trams E G和Johnstone R M在绵羊网织红细胞中首次发现外泌体，最初认为外泌体只是细胞代谢废物,但随着对其生物来源、物质构成、运输、细胞间信号传导及在体液中分布等方面的深入研究，发现外泌体具有多种功能。

外泌体能够参与机体免疫应答、抗原提呈及蛋白质合成等生理活动，并能在组织细胞间进行物质信息交换，有转运遗传物质的功能。

研究发现，外泌体包裹携带多种物质，如蛋白质和RNA等，其中共发现9769种蛋白质、3408种mRNA和2838种micro RNA(miRNA)[1'2]。

机体分泌的外泌体在不同生理状态下，携带不同的蛋白质和遗传物质。

外泌体lncRNA在肿瘤中的研究进展陈竹;周先果;余红平【摘要】外泌体(exosome)是由细胞内多泡体与细胞膜融合后释放到细胞外基质中的一种直径为30～100 nm的膜性囊泡,广泛分布于各种体液中.其含有蛋白质、核酸(mRNA、miRNA、lncRNA、DNA等)和脂质等物质,是细胞间通讯的重要介质.大量研究表明,外泌体lncRNA在肿瘤的发生、发展、侵袭和转移过程中扮演重要角色.本文就外泌体lncRNA在肿瘤发生发展、诊断、治疗及预后中的研究进展进行综述.【期刊名称】《中国癌症防治杂志》【年(卷),期】2018(010)006【总页数】4页(P484-487)【关键词】肿瘤;外泌体;lncRNA;肿瘤耐药;肿瘤标志物【作者】陈竹;周先果;余红平【作者单位】541001桂林桂林医学院附属医院病理科;530021南宁广西医科大学附属肿瘤医院;530021南宁广西医科大学附属肿瘤医院【正文语种】中文【中图分类】R730.23外泌体（exosome）是机体内大多数细胞分泌的一种具有脂质双层膜、直径为30～100 nm的膜性囊泡［1］。

其广泛分布于各种体液中，可携带和传递蛋白质、核酸（mRNA、miRNA、lncRNA、DNA 等）和脂质等重要物质。

外泌体所包含的这些生物活性成分取决于供体细胞所处的状态，在不同的生理或病理条件下，外泌体中的成分也随之发生变化［2-3］。

大量研究表明，外泌体长链非编码RNA （lncRNA）介导肿瘤细胞间信息交流，在肿瘤诊断和治疗中显示出潜在的应用价值。

外泌体lncRNA是近年来新兴的研究领域，本文就其在肿瘤发生发展、诊断、治疗及预后中的研究进展进行综述。

1 外泌体lncRNA的生物学特性lncRNA为长度大于200 nt的一类RNA分子，虽不参与蛋白质的表达，但能在转录、转录后及表观遗传水平上调控基因的表达［4］。

研究表明，外泌体lncRNA可以稳定地存在于血清、血浆和其他体液中，且不受内源性RNA酶影响［5-6］。

外泌体在肿瘤发展中的作用肿瘤，作为癌症的一种类型，一直以来是困扰着人类的疾病之一。

对于肿瘤的治疗和预防是医学研究的重点，而近年来，外泌体作为一种具有重要生物学功能的质体被广泛研究，其在肿瘤发展中的作用也受到了越来越多的关注。

外泌体，是一种由各种细胞类型所分泌的一种含有膜结构的小型质体。

外泌体的尺寸一般在20-100nm之间，质体内含有许多生物分子，如蛋白质、DNA、RNA 等。

这些分子不仅能够反映外泌体来源细胞的状态，同时也能够影响到相邻细胞的生物功能。

近年来，研究人员发现外泌体在肿瘤细胞的生长、分化、转移等过程中发挥着重要的作用，成为了肿瘤研究的重要热点。

外泌体调节肿瘤细胞周期及增殖外泌体通过与肿瘤细胞相互作用，改变了肿瘤细胞内部的物质代谢，进而影响了细胞的增殖。

研究人员发现，在许多肿瘤组织中，外泌体含量明显增多。

这些外泌体中含有大量与凋亡和增殖有关的生物物质，包括蛋白质、miRNA、lncRNA等。

这些生物物质通过外泌体的释放，影响着周围细胞的生长，从而促进肿瘤细胞的增殖。

此外，部分外泌体还具有直接作用于机体免疫系统的能力。

研究表明，这些质体中含有免疫调节相关的生物分子，这些分子能够干扰机体的免疫系统，让它们无法发挥正常的作用。

外泌体影响肿瘤细胞转移肿瘤细胞转移是全身性恶性肿瘤的关键之一，也是肿瘤治疗中最难以对付的问题之一。

研究人员发现，外泌体在肿瘤细胞转移中发挥着关键作用。

外泌体中的miRNA、lncRNA、蛋白质等生物物质，能够影响到肿瘤细胞的转移能力。

比如，研究表明，细胞外泌体释放的miR-23a和miR-221等miRNA能够调节癌细胞的转移和侵袭能力。

此外，外泌体中的一些蛋白质，如CD9、CD63、CD81等，也能够影响肿瘤细胞的侵袭和转移能力。

这些生物物质能够调节细胞外膜的结构和功能，促进肿瘤细胞的转移和侵袭。

外泌体在肿瘤治疗中的应用由于外泌体对于肿瘤细胞的调节作用，使其在肿瘤治疗中展现出了广阔的应用前景。

㊃综述㊃外泌体l n c R N A在肿瘤中的研究进展*陈晨,商安全,权文强,孙祖俊综述,李冬ә审校同济大学附属同济医院检验科,上海200065摘要:外泌体是肿瘤液态活检的明星分子,作为 胞间通讯 的信使可以在全身体液循环㊂随着科学家们对长链非编码R N A(l n c R N A)的深入研究,发现l n c R N A在表观遗传修饰㊁转录调控与转录后调控等多个层面发挥作用㊂在肿瘤发生㊁发展过程中,外泌体携带的l n c R N A能够改变肿瘤微环境,介导肿瘤细胞增殖㊁转移和耐药,促进血管生成和介导缺氧信号等,在肿瘤诊断㊁疗效监测和预后评估等方面具有广阔的应用前景㊂该文总结外泌体l n c R N A在肿瘤发生㊁发展中的作用,并对外泌体l n c R N A在肿瘤诊断中的临床应用价值进行综述㊂关键词:外泌体;液态活检;l n c R N A;肿瘤D O I:10.3969/j.i s s n.1673-4130.2021.03.025中图法分类号:R730.23文章编号:1673-4130(2021)03-0360-06文献标志码:AR e s e a r c h p r o g r e s s o f e x o s o m a l l n c R N A i n t u m o r*C H E N C h e n,S HA N G A n q u a n,Q U A N W e n q i a n g,S U N Z u j u n,L ID o n gәD e p a r t m e n t o f L a b o r a t o r y M e d i c i n e,T o n g j i H o s p i t a l A f f i l i a t e d t o T o n g j iU n i v e r s i t y,S h a n g h a i200065,C h i n aA b s t r a c t:E x o s o m e s a r e t h e s t a r m o l e c u l e s i n l i q u i d b i o p s i e s o f t u m o r s t h a t c i r c u l a t e t h r o u g h o u t t h e b o d y a s"c e l l c o mm u n i c a t i o n"m e s s e n g e r s.W i t h t h e i n-d e p t h s t u d y o f l o n g n o n c o d i n g R N A(l n c R N A)b y s c i e n-t i s t s,l n c R N A p l a y s a r o l e i n e p i g e n e t i c m o d i f i c a t i o n,t r a n s c r i p t i o n a l r e g u l a t i o n a n d p o s t-t r a n s c r i p t i o n a l r e g u l a-t i o n.I n t h e p r o c e s s o f t u m o r i g e n e s i s a n d d e v e l o p m e n t,e x o s o m a l l n c R N A p l a y s a r o l e i n c h a n g i n g t h e t u m o r m i c r o e n v i r o n m e n t,m e d i a t i n g t h e p r o l i f e r a t i o n,m e t a s t a s i s a n d d r u g r e s i s t a n c e o f t u m o r c e l l s,p r o m o t i n g a n g i o-g e n e s i s a n d m e d i a t i n g h y p o x i a s i g n a l s,a n d h a s a b r o a d p r o s p e c t i n t u m o r d i a g n o s i s,e f f i c a c y m o n i t o r i n g a n d p r o g n o s i s a s s e s s m e n t.T h i s p a p e r w i l l s u mm a r i z e t h e r e g u l a t o r y r o l e o f e x o s o m e l n c R N A i n t u m o r g e n e s i s a n d d e v e l o p m e n t,a n d s u mm a r i z e t h e c l i n i c a l a p p l i c a t i o n v a l u e o f e x o s o m a l l n c R N A i n t u m o r d i a g n o s i s.K e y w o r d s:e x o s o m e;l i q u i d b i o p s i e s;l o n g n o n c o d i n g R N A;t u m o r外泌体是直径为30~150n m的杯形小囊泡,具有特定的表面分子特征[1],其可携带蛋白质㊁脂质和核酸等多种物质在体液中循环,作为 胞间通讯 的载体存在于绝大部份体液中,包括外周血㊁尿液㊁脑脊液㊁唾液㊁泪液㊁滑膜液㊁支气管肺泡灌洗液㊁母乳㊁精液和腹水等[2-4]㊂研究发现,外泌体通过将生物活性分子转移到受体细胞,改变受体细胞的内容物和行为,在肿瘤发生㊁发展过程中发挥改变肿瘤微环境,介导肿瘤细胞增殖㊁转移和耐药,促进血管生成等作用,在细胞间的远距离通讯上具有重大意义[5-7]㊂病理状态下,肿瘤细胞释放外泌体的水平显著升高,并且外泌体的内容物与正常生理状态下相比也会发生显著改变,由于外泌体能够运载物质在全身体液循环,这使得它作为一种新型液态活检标志物备受研究人员的关注㊂外泌体中包含大量非编码R N A,如微小R N A(m i R N A)㊁环状R N A㊁长链非编码R N A(l n-c R N A)等,其中l n c R N A因序列长㊁空间结构复杂,参与表达调控肿瘤发生㊁发展的机制多样[8]而备受关注㊂本文将对外泌体l n c R N A对肿瘤发生㊁发展的调控作用,以及外泌体l n c R N A在肿瘤诊断中的临床应用价值进行综述㊂1外泌体的生化特征外泌体是多泡体与细胞质膜融合后释放到细胞外的脂质双分子层膜性小囊泡,呈杯形,大小相对均一㊂外泌体的密度由它的细胞来源和蛋白质水平决定,为1.15~1.19g/m L㊂外泌体的膜表面具有多种㊃063㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.3*基金项目:国家自然科学基金项目(81873975㊁81802084㊁81974314㊁81902984㊁82072362);上海市医疗卫生系统优秀学科带头人培养计划(2018B R31);上海市自然科学基金项目(19Z R1448800);上海市医学引导类科技支撑计划(19411964800);上海市同济医院临床培育项目[I T J(Z D) 1803㊁I T J(Z D)1905㊁I T J(Q N)1905]㊂ә通信作者,E-m a i l:l i d o n g@t o n g j i.e d u.c n㊂本文引用格式:陈晨,商安全,权文强,等.外泌体l n c R N A在肿瘤中的研究进展[J].国际检验医学杂志,2021,42(3):360-365.特征分子,如凋亡相关基因相互作用蛋白X(A L I X)㊁肿瘤易感基因101(T S G101)㊁四跨膜蛋白超家族(C D9㊁C D63㊁C D81)㊁热休克蛋白(H S P70㊁H S P90)等[9-10]㊂差速超速离心法是目前提取外泌体的 金标准 ,此方法尤其适用于细胞上清液和尿液等大体积液体标本的检测㊂对所得的外泌体进行鉴定是必不可少的实验环节,目前,公认的鉴定方法是从外泌体的物理特征(形态㊁大小和粒径分布)和表面分子成分(标志蛋白)两方面进行的,即通过扫描电镜(S E M)或透射电镜(T E M)技术直接观察外泌体的杯形或凹半球样结构㊂纳米粒径跟踪分析技术(N T A)测定外泌体的粒径范围;免疫印迹法(W e s t e r n b l o t)检测外泌体表面标志蛋白(C D63㊁C D81㊁T S G101等)的存在㊂国际细胞外囊泡协会(I S E V)在2018年发布的指南中明确指出[11],T E M㊁N T A㊁W e s t e r n b l o t是外泌体鉴定必备的3种技术,需要联合使用㊁相互验证从而完成外泌体的鉴定,只有经过严格鉴定的外泌体才能进行下一步的功能研究㊂2l n c R N Al n c R N A是不能编码蛋白㊁长度大于200n t的长链转录本,l n c R N A大多数分布在细胞核,但也有部分分布在细胞质,与m R N A相比,l n c R N A的核定位偏向更为显著[12]㊂起初科学家们认为l n c R N A是基因组转录的 噪声 ,不具有任何生物学功能㊂但是随着转录组测序技术的发展和科学家的深入研究发现,l n-c R N A在表观遗传调控㊁转录调控和转录后调控等多层面调控基因的表达,它参与了细胞分化㊁胚胎发育㊁细胞增殖与凋亡㊁细胞代谢㊁X染色体沉默㊁基因组印记㊁染色质修饰㊁转录激活与抑制㊁核内运输等绝大部份的生理或病理过程[8],因此,l n c R N A具有成为生物标志物和治疗靶标的可能性㊂在序列上,l n c R N A具有低保守性,仅有极少部分的l n c R N A能在人类之外的其他生物中找到㊂在表达上,l n c R N A具有时间与空间的特异性,不同组织和发育阶段的l n c R N A表达均会有所差异㊂在结构上,l n c R N A具有m R N A样结构,5'端有7m c的帽子,3'端有或无p o l y A尾[13]㊂根据l n c R N A与编码基因的关系,l n c R N A可分为反义l n c R N A㊁正义l n c R N A㊁内含子l n c R N A㊁基因间l n c R N A㊁重叠转录的l n c R N A和双向l n c R N A[14]㊂l n c R N A虽不能编码蛋白,但是可从转录前修饰㊁转录调控及转录后调控等多种层面调控基因的表达㊂2.1l n c R N A转录前修饰常见的l n c R N A转录前修饰是通过调控D N A甲基化与羟甲基化,以及组蛋白乙酰化与甲基化作用,调控下游分子的转录㊂Z HO U等[15]研究发现,敲减l n c R N A H19可激活S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S A HH)导致S-腺苷同型半胱氨酸(S A H)水平相对降低,使S A H对S-腺苷甲硫氨酸依赖的甲基转移酶的抑制作用减弱,诱导全基因组范围内广泛的甲基化改变㊂l n c R N A中的HO X 转录反义R N A(HO T A I R)可以作为分子支架,与组蛋白修饰复合物P R C2和L S D1/C o R E S T/R E S T相互结合,不同区域的结合发挥特定的功能,介导组蛋白甲基化与去甲基化[16]㊂HO T A I R在实体瘤中普遍过表达,并与肿瘤浸润㊁转移和不良预后相关[17]㊂2.2l n c R N A转录调控l n c R N A在转录水平可促进增强子环化,并诱导转录因子㊁剪接因子结合到靶基因周围,从而影响靶基因的转录与表达㊂l n c R N A L I N o C R的转录可导致鸡溶菌酶基因上游的绝缘子不再与C C C T C-结合因子结合,解除绝缘子对增强子的抑制作用从而促进靶基因表达[18];l n c R N A E v f2还能作为转录因子D L X2的共激活因子,促进D l x5/6增强子的转录表达[19]㊂2.3l n c R N A转录后调控在转录后水平,l n c R N A 可以通过参与m R N A可变剪接和提高m R N A稳定性的方式调控基因表达㊂l n c R N A肺腺癌转移相关转录物1(MA L A T1)在多种癌症中有异常表达,MA L-A T1可以调控丝氨酸/精氨酸剪接因子在剪接斑点中的分布和磷酸化水平,从而改变p r e-m R N A的选择性剪接[20]㊂l n c R N Aβ-分泌酶(B A C E1)-A S通过与B A C E1的m R N A序列部分互补结合,增加B A C E1 m R N A的稳定性,促进β-淀粉样蛋白(Aβ1-42)的合成,Aβ1-42还能正反馈促进B A C E1-A S的转录,最终导致Aβ1-42沉积,引起阿尔茨海默病[21]㊂关于l n-c R N A转录后调控的功能研究目前主要聚焦在竞争性内源R N A机制上,l n c R N A可以作为m i R N A的 分子海绵 ,以碱基互补配对的方式与靶基因竞争性结合m i R N A,从而减弱m i R N A对靶基因的沉默作用,进一步影响m i R N A对下游靶基因的调控,形成一个l n c R N A-m i R N A-m R N A的调控关系,l n c R N A的表达与m R N A的表达通常呈正相关[22]㊂如WU 等[23]发现,间充质干细胞在肿瘤微环境中影响胃癌细胞的耐药,将间充质干细胞与胃癌细胞共培养可诱导l n c R N A H C P5上调,并通过m i R-3619-5p/AM P K/ P G C1α/C E B P B轴促进脂肪酸氧化,提高肿瘤细胞的干性与化疗耐药㊂3外泌体l n c R N A的稳定性与分选机制外泌体作为液体活检的明星分子具有极佳的稳定性㊂不同于循环肿瘤细胞(C T C)需要新鲜标本才能进行研究,外泌体在保存良好的陈旧标本中仍然稳定存在并且可以很容易检出㊂2015年的一项研究表明,从20年前储存在冷库中的血液标本中仍能检测并分离出富含磷脂酰肌醇蛋白聚糖-1(G P C-1)的外泌体[24]㊂G P C-1在胰腺癌发病早期患者的血清外泌体中显著升高,且该指标能将慢性胰腺炎患者和胰腺癌早期㊁晚期患者进行区别,具有一定的诊断特异度和灵敏度㊂外泌体对其内容物具有保护作用㊂有研究人员㊃163㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.3使用R n a s e A处理细胞培养液发现l n c A R S R并无差异,但在同时使用R n a s e A与T r i t o n X-100处理后l n-c A R S R会显著降低[25]㊂R n a s e A可降解R N A,T r i-t o n X-100作为破膜剂,这表明l n c A R S R在细胞培养液中的存在形式是以膜包裹为主,而非直接游离在培养液中,经W e s t e r n b l o t鉴定标志蛋白(T S G101㊁C D9)发现该膜性结构为外泌体㊂在临床标本中,从人体体液中分离得到的裸露的l n c R N A极易受外界因素影响从而发生降解,而外泌体中的l n c R N A却可以在脂质双分子膜层的保护作用下稳定存在㊂研究表明,即使反复冻融,血浆外泌体l n c R N A P T E N P1的表达也没有显著变化[26],这表明l n c R N A在血浆外泌体中是稳定的,一定程度的冻融对外泌体影响不大㊂在常见的尿液标本中,外泌体膜可以保护l n c R N A免于尿液中普遍存在的蛋白酶和R N A酶的降解[3],这种优异的稳定性使得外泌体l n c R N A成为肿瘤诊断的理想生物标志物㊂R N A测序表明,外泌体的R N A表达谱一定程度上可以反映分泌细胞的R N A组成,但是一部分细胞内低表达的l n c R N A在相应外泌体中却富集存在,并且有的转录本只存在于外泌体中,在细胞内无法检测到㊂这表明,外泌体包裹R N A的过程是一种 选择性分选 机制[27-28],外泌体中特异的㊁富集的l n c R N A可能通过外泌体在远端运输,并有效影响受体细胞,进而影响肿瘤的发生与发展㊂然而,这种分选机制目前尚不明确㊂外泌体m i R N A中均存在一个被命名为E X O m o t i f的特定序列(G G A G),该序列可被h n R N-P A1和h n R N P A2B特异性识别,从而调控这些特定的m i R N A进入外泌体㊂h n R N P A2B1也可通过识别一个特定的序列参与l n c R N A的分选[29]㊂4外泌体l n c R N A的肿瘤生物学功能外泌体l n c R N A在肿瘤生物学中具备多种生物学功能㊂肿瘤细胞可分泌携带有肿瘤相关核酸㊁蛋白质的外泌体,并随体液转移至正常细胞,从而使正常细胞向癌细胞发生转变㊂另有研究表明,正常细胞分泌的外泌体l n c R N A也可以转移进癌细胞中,发挥抑癌作用㊂l n c R N A P T E N P1在正常细胞及其分泌的外泌体中表达上调,并且外泌体中的相对表达水平大约是其生产细胞的3倍,但是膀胱癌患者的血浆外泌体中l n c R N A P T E N P1表达下调,并且外泌体P T E N P1的低表达与更高的肿瘤分期㊁分级有关[26]㊂外泌体l n c R N A的肿瘤生物学研究仍处于初级阶段,目前大多数研究探讨了不同l n c R N A在肿瘤中的作用,但关于l n c R N A如何通过外泌体发挥其肿瘤促进作用还有待进一步的研究㊂如K O G U R E等[30]发现, l n c R N A T U C339在肝癌细胞培养液外泌体中高表达,上调或下调l n c R N A T U C339均可影响肿瘤细胞的增殖与转移,然而,该研究并无直接证据证明外泌体中的l n c R N A可以影响肿瘤的发展㊂4.1调节肿瘤微环境与血管生成肿瘤组织微环境和外周循环中均含有丰富的外泌体,其中肿瘤细胞是外泌体最主要的来源,其余外泌体主要来自肿瘤相关巨噬细胞(T AM)[31]㊂研究表明,外泌体来源的l n-c R N A可通过调节肿瘤微环境从而影响肿瘤生长㊁转移㊁侵袭和预后㊂WU等[32]研究发现,T AM外泌体可以抑制人脐静脉内皮细胞(HU V E C)迁移,但是将T AM外泌体与卵巢癌细胞S K O V3外泌体联合刺激HU V E C时发现,S K O V3来源的外泌体可能通过转移l n c R N A远程逆转T AM外泌体对内皮细胞的抑制作用,最终恢复内皮细胞的迁移,反映了外泌体l n-c R N A在肿瘤微环境调控中的强大作用㊂C O N I G L I A R O等[33]研究发现,在肝细胞癌中C D90+癌细胞通过黏附HU V E C可以将外泌体转移至内皮细胞,C D90+癌细胞外泌体中高表达的l n-c R N A H19可促进靶细胞合成与释放血管内皮生长因子,进而促进血管生成㊂L A N G等[34]研究发现, U87MG细胞分泌的富含l i n c-C C A T2的外泌体,通过转运入内皮细胞,使内皮细胞的血管内皮生长因子A 和转化生长因子β(T G F-β)的表达上调,B a x和c a s p a s e-3的表达下调,最终达到促进血管生成㊁减少细胞凋亡的作用㊂4.2缺氧信号转导与上皮间质转化(E MT)缺氧是一个重要的肿瘤病理学因素,肿瘤细胞经常利用低氧信号来维持缺氧状态下的增殖反应,并在缺氧状态下逃避生长停滞㊂T A K AH A S H I等[35]研究发现,l n-c R N A R O R是一种缺氧应答的l n c R N A,并能促进缺血条件下癌细胞的存活,通过外泌体的转移来调节缺氧对细胞间的反应㊂此外,低氧信号常常刺激细胞E MT过程,这是转移的关键调节因子㊂研究表明,许多外泌体l n c R N A影响癌细胞的E MT信号[36]㊂X U E等[37]研究发现,低氧诱导的富含l n c R N A U C A1的5637细胞来源外泌体可促进UMU C2细胞的增殖㊁迁移和侵袭,并诱导E MT㊂B E R R O N D O等[13]研究发现,敲减l n c R N A HO-T A I R会降低膀胱癌细胞的迁移与侵袭能力,且改变E MT相关基因S N A I1㊁Z E B1㊁Z O1㊁MM P1的表达,影响肿瘤进展,并且在膀胱癌患者的尿液外泌体中也发现了富集的l n c R N A HO T A I R,这提示尿液外泌体中的l n c R N A可能成为膀胱癌的无创诊断生物标志物及预后监测指标,是极有研究价值的液体活检分子㊂4.3介导耐药研究发现,外泌体可通过转运l n-c R N A介导受体细胞耐药性的产生[6,36,38]㊂高表达的l n c R N A A F A P1-A S1可通过与A U结合因子1 (A U F1)结合,促进酪氨酸激酶受体2(E R B B2)的翻译,从而诱导乳腺癌细胞曲妥珠单抗耐药,并且由外泌体包裹l n c R N A A F A P1-A S1传递耐药性[38]㊂在舒尼替尼耐药的肾癌癌细胞外泌体中发现一个显著㊃263㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.3升高的l n c R N A A R S R,该l n c R N A可以竞争性结合m i R N A,促进下游靶基因A X L和c-M E T的表达,激活R T K并介导耐药[25]㊂T G F-β可降低肝细胞癌细胞对索拉菲尼的敏感性,有研究发现,使用T G F-β刺激肝癌细胞,其分泌的外泌体中l n c R N A R O R与l n-c R N A V L D L R均升高[35,39]㊂将高表达l n c R N A R O R的肝细胞癌来源的外泌体与H e p G2细胞共培养后发现,H e p G2细胞的l n c R N A R O R也表达升高并获得了较高的化疗耐药性,l n c R N A V L D L R也具有类似的作用㊂以上发现证明了外泌体作为l n c R N A 运输的载体可传递肿瘤细胞的耐药性,这无疑增加了临床用药的难度与风险,关于外泌体l n c R N A与化疗耐药之间的具体作用机制仍需研究人员进一步关注㊂5外泌体l n c R N A与肿瘤诊断外泌体具有运载l n c R N A在全身体液循环的特性,使得外泌体l n c R N A可成为新兴生物标志物,尤其在肿瘤发生㊁发展过程中,外泌体可携带比肿瘤细胞丰度更高的特异性l n c R N A,从而精确地反映肿瘤进程,在临床上具有极高的研究意义与应用价值,见表1㊂如Z H A N G等[40]收集宫颈癌患者和体检健康者的宫颈阴道灌洗液外泌体,结果发现,外泌体中l n-c R N A HO T A I R㊁MA L A T1㊁M E G3在宫颈癌患者中表达显著高于体检健康者㊂因此,宫颈癌患者的阴道灌洗液外泌体中的l n c R N A HO T A I R㊁MA L A T1㊁M E G3具有成为宫颈癌生物标志物的潜力㊂值得注意的是,在目前的研究中,一般共识不建议将单个的外泌体l n c R N A分子作为肿瘤诊断标志物,而是将多个分子作为一组,从而提高诊断的整体可信度㊂在某些标本类型中,如阴道灌洗液和尿液因其无创性且易于收集,尤其是尿液,通过尿液外泌体来研究膀胱癌等泌尿系统肿瘤的发生㊁发展,在肿瘤早期诊断㊁疗效检测及用药指导等方面均有较高的应用价值㊂表1外泌体l n c R N A的肿瘤生物学功能癌症类型标本来源l n c R N A生物学功能参考文献肝细胞癌细胞R O R耐药[35]细胞V L D L R耐药[39]细胞H19血管生成[33]肺癌血清MA L A T-1生物标志物[40]肾癌血清A R S R耐药/生物标志物[25]膀胱癌尿液H O T A I R E MT/生物标志物[13]血浆P T E N P1生物标志物[26]细胞U C A1低氧耐受性[37]胃癌血清H O T T I P生物标志物[36]结直肠癌血清C R N D E-h生物标志物[41]卵巢癌细胞M E G3耐药[42]宫颈癌血清H19生物标志物[43]阴道灌洗液H O T A I R/MA L A T1/M E G3生物标志物[44]前列腺癌尿液P21生物标志物[45]乳腺癌细胞U C A1耐药[46]6展望近年来,C T C㊁循环肿瘤D N A(c t D N A)和外泌体成为液体活检的 三驾马车 [47]㊂C T C在肿瘤初期的数量少,富集效率低,限制了早期肿瘤的阳性检出率;c t D N A的检测技术对标本质量要求高,很难在临床推广和应用;外泌体作为 胞间通讯 的信使可以在全身体液循环,并含有多种脂类㊁蛋白质和核酸,可作为液体活检的较好检测目标㊂随着科学家们对l n c R N A 的深入研究发现,l n c R N A并非基因组 噪声 ,反而在表观遗传修饰㊁转录调控与转录后调控等多个层面发挥功能,虽然不能编码蛋白,但是其编码短肽的能力同样具有重要意义[48]㊂外泌体对l n c R N A的富集和 选择性分选 机制,使得外泌体l n c R N A更具有研究可行性和作为生物标志物的特异性㊂目前,大多数研究仅探讨了l n c R N A在肿瘤发生㊁发展中的作用,对l n c R N A通过外泌体的细胞间运送发挥作用的研究还不深入㊂l n c R N A的二级结构复杂,而目前并没有很好地预测二级结构的生物信息学手段,这使得科研人员无法从结构推测其功能㊂l n c R N A的低保守性㊁结构复杂性㊁表达的时空和组织特异性使其研究更加困难,目前研究主要聚焦于人和动物,在微生物和植物方面的探索鲜见报道㊂外泌体l n c R N A作为一个新兴的分子,未来研究前景十分广阔,随着新技术的应用和发展及科学家们的不断深入探索,将在疾病早期诊断㊁疗效监测和预后评估等方面具有广阔的临床应用前景㊂参考文献[1]K HU S HMA N M,B HA R DWA J A,P A T E L G K,e t a l.E x o s o m a l m a r k e r s(C D63a n d C D9)e x p r e s s i o n p a t t e r n u s i n g i mm u n o h i s t o c h e m i s t r y i n r e s e c t e d m a l i g n a n t a n d n o n m a l i g n a n t p a n c r e a t i c s p e c i m e n s[J].P a n c r e a s,2017,46(6):782-788.[2]L I Y,Z H E N G Q,B A O C,e t a l.C i r c u l a r R N A i s e n r i c h e d㊃363㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.3a n d s t ab l e i n e x o s o m e s:a p r o m i s i n g b i o m a r k e r f o rc a n c e rd i a g n o s i s[J].Ce l l R e s,2015,25(8):981-984.[3]Z HA N Y,D U L,WA N G L,e t a l.E x p r e s s i o n s i g n a t u r e s o f e x o s o m a l l o n g n o n-c o d i n g R N A s i n u r i n e s e r v e a s n o-v e l n o n-i n v a s i v e b i o m a r k e r s f o r d i a g n o s i s a n d r e c u r r e n c e p r e d i c t i o n o f b l a d d e r c a n c e r[J].M o l C a n c e r,2018,17(1): 142.[4]Z HO U R,C H E N K K,Z HA N G J,e t a l.T h e d e c a d e o f e x-o s o m a l l o n g R N A s p e c i e s:a n e m e r g i n g c a n c e r a n t a g o n i s t [J].M o l C a n c e r,2018,17(1):75.[5]C H E N X,L I U J,Z H A N G Q,e t a l.E x o s o m e-m e d i a t e d t r a n s-f e r o f m i R-93-5p f r o m c a n c e r-a s s o c i a t e d f i b r o b l a s t s c o n f e r r a-d i o r e s i s t a n c e i n c o l o r e c t a l c a n c e r c e l l s b y d o w n r eg u l a t i n g F O X A1a n d u p r e g u l a t i n g T G F B3[J].J E x p C l i n C a n c e r R e s, 2020,39(1):65.[6]K I R A V E P,G O N D A L I Y A P,K U L K A R N I B,e t a l.E x o-s o m e m e d i a t e d m i R-155d e l i v e r y c o n f e r s c i s p l a t i n c h e-m o r e s i s t a n c e i n o r a l c a n c e r c e l l s v i a e p i t h e l i a l-m e s e n c h y-m a l t r a n s i t i o n[J].O n c o t a r g e t,2020,11(13):1157-1171.[7]Z A N G X,G U J,Z HA N G J,e t a l.E x o s o m e-t r a n s m i t t e d l n c R N A U F C1p r o m o t e s n o n-s m a l l-c e l l l u n g c a n c e r p r o-g r e s s i o n b y E Z H2-m e d i a t e d e p i g e n e t i c s i l e n c i n g o f P T E Ne x p r e s s i o n[J].C e l l D e a t h D i s,2020,11(4):215.[8]S C HM I T Z S U,G R O T E P,H E R R MA N N B G.M e c h a-n i s m s o f l o n g n o n c o d i n g R N A f u n c t i o n i n d e v e l o p m e n t a n d d i s e a s e[J].C e l l M o l L i f e S c i,2016,73(13):2491-2509.[9]Z HO U H,Y U E N P S,P I S I T K U N T,e t a l.C o l l e c t i o n, s t o r a g e,p r e s e r v a t i o n,a n d n o r m a l i z a t i o n o f h u m a n u r i n a r y e x o s o m e s f o r b i o m a r k e r d i s c o v e r y[J].K i d n e y I n t,2006, 69(8):1471-1476.[10]王萌萌,孔凡虹,宗曾艳,等.外泌体在肿瘤中的作用及前景[J].国际检验医学杂志,2019,40(19):2397-2402.[11]T HÉR Y C,W I TW E R K W,A I K AWA E,e t a l.M i n i m a li n f o r m a t i o n f o r s t u d i e s o f e x t r a c e l l u l a r v e s i c l e s2018(M I S E V2018):a p o s i t i o n s t a t e m e n t o f t h e I n t e r n a t i o n a l S o c i e t y f o r E x t r a c e l l u l a r V e s i c l e s a n d u p d a t e o f t h e M I S-E V2014g u i d e l i n e s[J].J E x t r a c e l l V e s i c l e s,2018,7(1): 1535750.[12]V A N-H E E S C H S,V A N-I T E R S O N M,J A C O B I J,e t a l.E x t e n s i v e l o c a l i z a t i o n o f l o n g n o n c o d i n g R N A s t o t h e c y-t o s o l a n d m o n o-a n d p o l y r i b o s o m a l c o m p l e x e s[J].G e-n o m e B i o l,2014,15(1):R6.[13]B E R R O N D O C,F L A X J,K U C H E R O V V,e t a l.E x p r e s-s i o n o f t h e l o n g n o n-c o d i n g R N A HO T A I R c o r r e l a t e s w i t h d i s e a s e p r o g r e s s i o n i n b l a d d e r c a n c e r a n d i s c o n-t a i n e d i n b l a d d e r c a n c e r p a t i e n t u r i n a r y e x o s o m e s[J].P L o S O n e,2016,11(1):e0147236.[14]MA L,B A J I C V B,Z HA N G Z.O n t h e c l a s s i f i c a t i o n o fl o n g n o n-c o d i n g R N A s[J].R N A B i o l,2013,10(6):925-933.[15]Z HO U J,Y A N G L,Z HO N G T,e t a l.H19l n c R N A a l t e r sD N A m e t h y l a t i o n g e n o m e w i d e b y r e g u l a t i n g S-a d e n o s y l-h o m o c y s t e i n e h y d r o l a s e[J].N a t C o mm u n,2015,6:10221.[16]WU Y,Z HA N G L,WA N G Y,e t a l.L o n g n o n c o d i n gR N A HO T A I R i n v o l v e m e n t i n c a n c e r[J].T u m o u r B i o l, 2014,35(10):9531-9538.[17]T A N G Q,HA N N S S.HO T A I R:a n o n c o g e n i c l o n g n o n-c od i n g R N A i n h u m a n c a n ce r[J].C e l l P h y s i o l B i o c h e m, 2018,47(3):893-913.[18]W I T HAM J,O U B O U S S A D L,L E F E V R E P F.A N F-κB-d e p e n d e n t d u a l p r o m o t e r-e n h a n c e r i n i t i a t e s t h e l i-p o p o l y s a c c h a r i d e-m e d i a t e d t r a n s c r i p t i o n a l a c t i v a t i o n o f t h e c h i c k e n l y s o z y m e i n m a c r o p h a g e s[J].P L o S O n e, 2013,8(3):e59389.[19]B E R G HO F F E G,C L A R K M F,C H E N S,e t a l.E v f2(D l x6a s)l n c R N A r e g u l a t e s u l t r a c o n s e r v e d e n h a n c e rm e t h y l a t i o n a n d t h e d i f f e r e n t i a l t r a n s c r i p t i o n a l c o n t r o l o fa d j a c e n t g e n e s[J].D e v e l o p m e n t,2013,140(21):4407-4416.[20]T R I P A T H I V,E L L I S J D,S H E N Z,e t a l.T h e n u c l e a r-r e t a i n e d n o n c o d i n g R N A MA L A T1r e g u l a t e s a l t e r n a t i v e s p l i c i n g b y m o d u l a t i n g S R s p l i c i n g f a c t o r p h o s p h o r y l a t i o n [J].M o l C e l l,2010,39(6):925-938.[21]MO D A R R E S I F,F A G H I H I M A,P A T E L N S,e t a l.K n o c k d o w n o f B A C E1-A S n o n p r o t e i n-c o d i n g t r a n s c r i p t m o d u l a t e s b e t a-a m y l o i d-r e l a t e d h i p p o c a m p a l n e u r o g e n e-s i s[J].I n t J A l z h e i m e r s D i s,2011,2011(3):929042.[22]王可,曹新生,石菲,等.长链非编码R N A调控成骨分化作用机制的研究进展[J].解放军医学院学报,2017,38(7):696-699.[23]WU H,L I U B,C H E N Z,e t a l.M S C-i n d u c e d l n c R N AH C P5d r o v e f a t t y a c i d o x i d a t i o n t h r o u g h m i R-3619-5p/AM P K/P G C1α/C E B P B a x i s t o p r o m o t e s t e m n e s s a n dc h e m o-r e s i s t a n c e o f g a s t r i c c a n c e r[J].C e l l D e a t h D i s,2020,11(4):233.[24]M E L O S A,L U E C K E L B,K A H L E R T C,e t a l.G l y p i-c a n-1ide n t if i e s c a n c e r e x o s o m e s a n d d e t e c t s e a r l y p a n c r e-a t i c c a n c e r[J].N a t u r e,2015,523(7559):177-182.[25]Q U L,D I N G J,C H E N C,e t a l.E x o s o m e-t r a n s m i t t e d l n-c A R S R p r o m o t e s s u n i t i n i b r e s i s t a n c e i n r e n a l c a n c e r b y a c t i n g a s a c o m p e t i n g e nd o ge n o u s R N A[J].C a n c e r C e l l, 2016,29(5):653-668.[26]Z H E N G R,D U M,WA N G X,e t a l.E x o s o m e-t r a n s m i t t e d l o n g n o n-c o d i n g R N A P T E N P1s u p p r e s s e s b l a d d e r c a n c-e r p r o g r e s s i o n[J].M o l C a n c e r,2018,17(1):143.[27]E L D H M,E K S T RÖM K,V A L A D I H,e t a l.E x o s o m e sc o mm u n i c a t e p r o t e c t i v e m e s s a g e sd u r i n g o x i d a t i v es t r e s s,p o s s i b l e r o l e o f e x o s o m a l s h u t t l e R N A[J].P L o S O n e,2010,5(12):e15353.[28]C H E N G J,M E N G J,Z HU L,e t a l.E x o s o m a l n o n c o d i n gR N A s i n G l i o m a:b i o l o g i c a l f u n c t i o n s a n d p o t e n t i a l c l i n i-c a l a p p l i c a t i o n s[J].M o l C a n c e r,2020,19(1):66.[29]V I L L A R R O Y A-B E L T R I C,G U T IÉR R E Z-VÁZ Q U E Z C,SÁN C H E Z-C A B O F,e t a l.S u m o y l a t e d h n R N P A2B1c o n-t r o l s t h e s o r t i n g o f m i R N A s i n t o e x o s o m e s t h r o u g h b i n d i n g t o s p e c i f i c m o t i f s[J].N a t C o m m u n,2013,4(1):2980.㊃463㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期I n t J L a b M e d,F e b r u a r y2021,V o l.42,N o.3[30]K O G U R E T ,Y A N I K ,L I N W L ,e t a l .E x t r a c e l l u l a rv e s i c l e -m e d i a t e d t r a n s f e r o f a n o v e l l o n g n o n c o d i n g RN A T U C 339:a m e c h a n i s m o f i n t e r c e l l u l a r s i g n a l i n gi n h u m a n h e pa t o c e l l u l a r c a n c e r [J ].G e n e s C a n c e r ,2013,4(7/8):261-272.[31]C H E N X ,Z HO U J ,L I X ,e t a l .E x o s o m e s d e r i v e d f r o mh y p o x i c e pi t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r c e l l s d e l i v e r m i c r o R N A s t o m a c r o p h a g e s a n d e l i c i t a t u m o r -p r o m o t e d p h e n o t y pe [J ].C a n c e r L e t t ,2018,435(1):80-91.[32]WU Q ,WU X ,Y I N G X ,e t a l .S u p pr e s s i o n o f e n d o t h e l i a l c e l l m i g r a t i o n b y t u m o r a s s o c i a t e d m a c r o p h a ge -d e r i v e d e x o s o m e s i s r e v e r s e d b y e pi t h e l i a l o v a r i a n c a n c e r e x o s o -m a l l n c R N A [J ].C a n c e r C e l l I n t ,2017,17(1):62-68.[33]C O N I G L I A R O A ,C O S T A V ,L O D I C O A ,e t a l .C D 90+l i v e r c a n c e r c e l l s m o d u l a t e e n d o t h e l i a l c e l l p h e n o t y pe t h r o u g h t h e r e l e a s e of e x o s o m e s c o n t a i n i ng H19l n c R N A [J ].M o l C a n c e r ,2015,14(1):155.[34]L A N G H L ,HU G W ,Z HA N G B ,e t a l .G l i o m a c e l l s e n -h a n c e a n g i o g e n e s i s a n d i n h i b i t e n d o t h e l i a l c e l l a p o pt o s i s t h r o u g h t h e r e l e a s e o f e x o s o m e s t h a t c o n t a i n l o n g no n -c o d i n g R N A C C A T 2[J ].O n c o l R e p,2017,38(2):785-798.[35]T A K A HA S H I K ,Y A N I K ,K O G U R E T ,e t a l .E x t r a c e l -l u l a r v e s i c l e -m e d i a t e d t r a n s f e r o f l o n g n o n -c o d i n g RN A R O R m o d u l a t e s c h e m o s e n s i t i v i t y i n h u m a n h e pa t o c e l l u l a r c a n c e r [J ].F E B S O pe n B i o ,2014,4:458-467.[36]WA N G J ,L V B ,S U Y ,e t a l .E x o s o m e -m e d i a t e d t r a n sf e ro f l n c R N A HO T T I P p r o m o t e s c i s pl a t i n r e s i s t a n c e i n g a s -t r i c c a n c e r c e l l s b y r e g u l a t i n g HMG A1/m i R -218A x i s [J ].O n c o T a r ge t s T h e r ,2019,12:11325-11338.[37]X U E M ,C H E N W ,X I A N G A ,e t a l .H y po x i c e x o s o m e s f a c i l i t a t e b l a d d e r t u m o r g r o w t h a n d d e v e l o p m e n t t h r o u gh t r a n s f e r r i n g l o n g n o n -c o d i n g RN A -U C A 1[J ].M o l C a n c -e r ,2017,16(1):143.[38]HA N M ,G U Y ,L U P ,e t a l .E x o s o m e -m e d i a t e d l n c R N AA F A P 1-A S 1p r o m o t e s t r a s t u z u m a b r e s i s t a n c e t h r o u gh b i n d i n g w i t h A U F 1a n d a c t i v a t i n g E R B B 2t r a n s l a t i o n [J ].M o l C a n c e r ,2020,19(1):26.[39]T A K A HA S H I K ,Y A N I K ,WO O D J ,e t a l .I n v o l v e m e n to f e x t r a c e l l u l a r v e s i c l e l o n g n o n c o d i n g RN A (l i n c -V L D -L R )i n t u m o r c e l l r e s p o n s e s t o c h e m o t h e r a p y [J ].M o l C a n c e r R e s ,2014,12(10):1377-1387.[40]Z HA N G R ,X I A Y ,WA N G Z ,e t a l .S e r u m l o n g no n c o d -i n g R N A MA L A T -1p r o t e c t e d b y e x o s o m e s i s u p -r e gu l a -t e d a n d p r o m o t e s c e l l p r o l i f e r a t i o n a n d m i gr a t i o n i n n o n -s m a l l c e l l l u n g c a n c e r [J ].B i o c h e m B i o p h ys R e s C o m -m u n ,2017,490(2):406-414.[41]L I U T ,Z HA N G X ,G A O S ,e t a l .E x o s o m a l l o n g no n c o d -i n g RN A C R N D E -h a s a n o v e l s e r u m -b a s e d b i o m a r k e r f o r d i a g n o s i s a n d p r o g n o s i s o f c o l o r e c t a l c a n c e r [J ].O n c o -t a r ge t ,2016,7(51):85551-85563.[42]Z HA N G J ,L I U J ,X U X ,e t a l .C u r c u m i n s u p pr e s s e s c i s -p l a t i n r e s i s t a n c e d e v e l o p m e n t p a r t l y v i a m o d u l a t i n g ex -t r a c e l l u l a r v e s i c l e -m e d i a t e d t r a n s f e r o f M E G 3a n d m i R -214i n o v a r i a n c a n c e r [J ].C a n c e r C h e m o t h e r P h a r m a c o l,2017,79(3):479-487.[43]I E M P R I D E E T .L o n g n o n -c o d i n g RN A H 19e n h a n c e s c e l l p r o l i f e r a t i o n a n d a n c h o r a g e -i n d e pe n d e n t g r o w t h of c e r v i c a l c a n c e r c e l l l i n e s [J ].E x p B i o l M e d (M a y w o o d ),2017,242(2):184-193.[44]Z HA N G J ,L I U S C ,L U O X H ,e t a l .E x o s o m a l l o n gn o n c o d i n g R N A s a r e d i f f e r e n t i a l l y e x pr e s s e d i n t h e c e r v i -c o v a g i n a l l a v a g e s a m pl e s o f c e r v i c a l c a n c e r p a t i e n t s [J ].J C l i n L a b A n a l ,2016,30(6):1116-1121.[45]I S I N M ,U Y S A L E R E ,ÖZ G ÜR E ,e t a l .E x o s o m a l l n -c R N A -p 21l e v e l s m a y h e l p t o d i s t i n gu i s h p r o s t a t e c a n c e r f r o m b e n i gn d i s e a s e [J ].F r o n t G e n e t ,2015,6(1):168.[46]X U C G ,Y A N G M F ,R E N Y Q ,e t a l .E x o s o m e s m e d i a -t e d t r a n s f e r o f l n c R N A U C A 1r e s u l t s i n i n c r e a s e d t a m o x -i f e n r e s i s t a n c e i n b r e a s t c a n c e r c e l l s [J ].E u r R e v M e dP h a r m a c o l S c i ,2016,20(20):4362-4368.[47]李海霞,涂建成,任丽,等.液体活检在临床肿瘤诊疗中的应用及挑战[J ].国际检验医学杂志,2019,40(20):2433-2438.[48]WU P ,MO Y ,P E N G M ,e t a l .E m e r g i n g ro l e o f t u m o r -r e l a t e d f u n c t i o n a l p e p t i d e s e n c o d e d b y ln c R N A a n d c i r -c R N A [J ].M o l C a n c e r ,2020,19(1):22.(收稿日期:2020-04-26 修回日期:2020-08-19)㊃综 述㊃非侵入性生物标志物微小R N A 在感染性疾病中的研究进展*谢可心,李福兴,张玉琳综述,赵卫东ә审校大理大学临床医学院,云南大理671000摘 要:微小R N A (m i R N A )是一类新发现的非编码小R N A 分子,主要在转录水平调节细胞的增殖㊁分化㊃563㊃国际检验医学杂志2021年2月第42卷第3期 I n t J L a b M e d ,F e b r u a r y 2021,V o l .42,N o .3*基金项目:国家自然科学基金项目(81960363);云南省教育厅基金项目(2019Y 0284);大理大学博士科研基金项目(K Y B S 201721)㊂ә通信作者,E -m a i l :w d z h a o @d a l i .e d u .c n㊂ 本文引用格式:谢可心,李福兴,张玉琳,等.非侵入性生物标志物微小R N A 在感染性疾病中的研究进展[J ].国际检验医学杂志,2021,42(3):365-370.。