QPCR原理及应用
由于Real-time qPCR的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及RT-PCR的实验，也基本上被real-time qPCR所代替。由于real-time aPCR 输出的数据不同于常规的PCR 电泳检测，很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过次实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑，不知所措。
本文就从real-time qPCR的发展史说起，包括real-time qPCR的原理，实验设计，实际操作，数据分析，常见问题解答五个方面，手把手教你从各个方面了解real-time qPCR，彻底的从菜鸟到高手！
一、Real-time qPCR发展史
Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于常规的PCR的缺点，real-time qPCR由于其操作简便，灵敏度高，重复性好等优点发展非常迅速。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。
在Real-time qPCR技术的发展过程中，定量PCR仪的发展起了至关重要的作用。1995年，美国PE公司（已经并入Invitrogen公司）成功研制了Taqman技术，1996年推出了首台荧光定量PCR检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过Ct值进行数据分析。从而荧光定量PCR获得广泛应用。现在的定量PCR仪有ABI7000、7300、7500，7700、7900HT、StepOnePlusTM、StepOneTM、PRISM@StepOneTM系列；BIO-RAD的CFX96、iCycler iQ5@、MyiQ@、MJ Research
精馏的原理及过程
原理：空气的精馏是利用组成空气的各组分具有不同的挥发度，而在同一温度下各组分的蒸气压不同，将液态空气进行多次部分蒸发和部分冷凝，就能达到分离的目的。
过程：当处于冷凝温度的氧氮混合气接触并穿过比它温度低的液体时，气相与液相之间同时进行热质交换，于是气体要部分冷凝转变成液体并放出冷凝潜热，液体在吸收热量而部分蒸发。在精馏塔中该过程是在筛板中完成的，由于氮氧的沸点不同，氮比氧易蒸发，氧比氮易冷凝。当气体自下而上逐块通过塔板时，氮浓度不断增加，只要有足够的塔板数，在塔顶即可获得高纯度的氮气。反之，当液体自上而下的在塔板内通过时，氧浓度不断增加，这样在塔底获得富氧液空。
空分制氮工艺流程
空气经过滤器吸入离心式压缩机，经三级压缩压力约为0.58Mpa后，进入预冷机组使空气温度降至4 – 8℃，分离出大量的水分由汽水分离器排出，气体进入纯化器去除微水﹑二氧化碳﹑乙炔﹑碳氢化合物。纯化后的洁净气体进入分馏塔经上下换热器与逆流的低温气体换热至约-170℃后进入精馏塔精馏，部分汽体上升至塔顶得到高纯度氮气，部分气体到塔底得到富氧。塔顶氮气大部分经下上换热器换热至常温后经缓冲罐缓冲后送入生产线。一小部分塔顶氮气经冷凝蒸发器冷凝成液态后回流至精馏塔与上升的气体精馏，还有少部分回流液经计量罐进入液氮储槽备用。塔底的富氧液空经节流阀节流至冷凝蒸发器氮气，汽化后的富氧经下换热器参与换热后进入透平膨胀机制冷，为整个设备提供大部分冷量，膨胀后的富氧空气一小部分作为整个装置的密封气体充入冷箱，大部分经下上换热器换热后到纯化器做再生用气。
数字PCR——原理、技术及应用：
《数字PCR——原理、技术及应用》是2017年科学出版社出版图书，作者是彭年才。
内容简介：
数字PCR以聚合酶链式反应的理论和技术体系为基础，结合现代微机电和光学检测技术，实现单分子水平的核酸精确定量检测。数字PCR作为第三代PCR技术，是实时荧光定量PCR原理与现代微机电、微纳制造工程技术相结合的典范。数字PCR的核心是将核酸样品平行划分为大规模单分子水平的微反应单元，然后对众多微反应单元内的靶序列进行扩增和光学检测，实现绝对定量和痕量分析。
本书重点介绍了数字PCR的原理和技术特征、仪器系统、实验设计、数据处理和典型应用及最新科研进展。拓展介绍了一些实验细节、微流控工程知识。
目录：
第1章数字PCR技术概论
第2章数字PCR系统与发展
第3章数字PCR实验设计
第4章数字PCR的数学分析和定量特性研究
第5章数字PCR的应用
第6章数字PCR与其他基因分析技术的对比及其未来
PCR最新技术原理、方法及应用：
《PCR最新技术原理、方法及应用》是2011年化学工业出版社
出版的图书，作者是黄留玉。该书主要讲述了如何应用PCR最新技术来研究新科学。
内容简介：
本书第一版出版以来，受到读者的欢迎。在第一版面世的五年多时间里，随着生命科学研究的深入，又衍生出了一些新的方法。第二版旨在及时地把这些方法介绍给读者。本版新增的内容较多，主要包括： 详细地介绍了芯片PCR、电子PCR和数字PCR及其应用； 增加和丰富了PCR在各领域中的应用； 对一些重要的PCR方法，诸如致突变PCR、免疫PCR、实时荧光定量PCR和PCR在法医学中的应用等章节进行补充更新。
本书是一本关于PCR技术的实验手册，适用与所有从事生命科学研究的科技工作者、教师和研究生阅读参考。
目录：
第一章 绪论1
第二章 扩增已知序列两侧DNA的PCR8
第三章 巢式PCR38
第四章 实时荧光定量PCR52
QPCR原理及应用
由于Real-time qPCR的众多优点，现在已经是生命科学领域的一项常规技术。越来越多的研究文章中涉及RT-PCR的实验，也基本上被real-time qPCR所代替。由于real-time aPCR 输出的数据不同于常规的PCR 电泳检测，很多没有做过real-time qPCR的研究者常常感到高深莫测，不知从何入手；甚至一些做过次实验的研究者也会对数据处理分析感到迷惑，不知所措。
本文就从real-time qPCR的发展史说起，包括real-time qPCR的原理，实验设计，实际操作，数据分析，常见问题解答五个方面，手把手教你从各个方面了解real-time qPCR，彻底的从菜鸟到高手！
一、Real-time qPCR发展史
Real-time qPCR就是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct 值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。由于常规的PCR的缺点，real-time qPCR由于其操作简便，灵敏度高，重复性好等优点发展非常迅速。现在已经涉及到生命科学研究的各个领域，比如基因的差异表达分析，SNP检测，等位基因的检测，药物开发，临床诊断，转基因研究等。
在Real-time qPCR技术的发展过程中，定量PCR仪的发展起了至关重要的作用。1995年，美国PE公司（已经并入Invitrogen公司）成功研制了Taqman技术，1996年推出了首台荧光定量PCR检测系统，通过检测每个循环的荧光强度，通过Ct值进行数据分析。从而荧光定量PCR获得广泛应用。现在的定量PCR仪有ABI7000、7300、7500，7700、7900HT、StepOnePlusTM、StepOneTM、PRISM@StepOneTM系列；BIO-RAD的CFX96、iCycler iQ5@、MyiQ@、MJ Research
