CD4和CD8T淋巴细胞检测技术规范
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小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,组织液及相关液体样本中T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)水平。
用纯化的小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8),再与HRP标记的T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
CD4+与CD8+ T淋巴细胞检测1 范围本章规定了用多平台三级程序法与单平台一步法检测全血中得CD4+与CD8+T淋巴细胞。
2 规范性引用文件1997Revised Guidelinesfor PerformingCD4+ T-Cell Determinations in Persons Infectedwith Human ImmunodeficiencyVirus (HIV) MMWR 46(RR—2);1-29 Publication date:01/10/1997。
3 实验室条件3、1人员进行HIV感染者CD4+与CD8+T淋巴细胞检测得人员须具有艾滋病实验室得上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
3。
2 设施与设备3.2.1 样品处理区:生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器(5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl)。
3。
2。
2 流式细胞仪检测区:流式细胞仪3、3功能分区实验室原则上应分为样品处理区与流式细胞仪检测区,各区得功能就是:3、3.1 样品处理区应达到生物安全Ⅱ级(BSL-2)实验室要求,用于样品处理、流式检测样品制备。
3、3、2 流式细胞仪检测区用于制备好得样品上机检测。
4样品采集、运输与接收4、1 样品得采集4、1。
1 选择合适得抗凝剂,分别用于血液学检测与流式细胞仪得免疫表型检测、4.1。
1.1 用于血液学检测得抗凝剂(1) EDTA(1、5±0.15mg/ml血液)。
(2)在血球分析仪生产商允许得时间范围内检测,不超过30h,不检测超出抗凝时间范围得样品。
4。
1。
1。
2用于流式细胞仪免疫表型检测得抗凝剂(1)用K3EDTA抗凝,收集样品应在30h以内,尽早(8h以内)处理。
(2)用ACD或肝素抗凝,收集样品在48h以内,尽早(8h以内)处理。
4、1。
2 静脉采血收集血样,将血液注入一个事先加入适当抗凝剂得试管(用真空试管)。
全国艾滋病检测技术规范第一章样品的采集和处理1 范围本章规定了用于艾滋病病毒(HIV)检测的血清、血浆和全血样品的采集和处理方法,适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、CD4+/CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。
2 规范性引用文件Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2001.16 UNAIDS/01.22E ISBN 9713-92-063-7.3 操作步骤3.1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
常用的血液样品的采集和处理方法如下:3.1.1 血清样品采集和处理3.1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置12h,待血液凝固、血块收缩后再用3、000r/min离心15min,吸出血清备用。
3.1.1.2 如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
3.1.2 抗凝血样品采集和处理3.1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
3.1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3EDTA或肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3EDTA或枸橼酸钠。
3.1.2.3 用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在48h内分离PBMC和血浆,否则应在2448h内分离血浆和血细胞。
病毒载量测定不同方法对样品的要求见第四章4.1中表2;CD4+/CD8+T淋巴细胞测定样品采集要求见第五章4.1。
3.1.3 采集样品注意事项3.1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测1围本章规定了用多平台三级程序法和单平台一步法检测全血中的CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞。
2规性引用文件1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-Cell Determinations in Persons Infected with Human Immunodeficiency Virus (HIV) MMWR46(RR-2);1-29 Publication date: 01/10/1997。
3实验室条件3.1 人员进行HIV感染者CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞检测的人员须具有艾滋病实验室的上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
3.2设施和设备3.2.1样品处理区:生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器(5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl)。
3.2.2流式细胞仪检测区:流式细胞仪3.3功能分区实验室原则上应分为样品处理区和流式细胞仪检测区,各区的功能是:3.3.1样品处理区应达到生物安全Ⅱ级(BSL-2)实验室要求,用于样品处理、流式检测样品制备。
3.3.2流式细胞仪检测区用于制备好的样品上机检测。
4样品采集、运输和接收4.1样品的采集4.1.1选择合适的抗凝剂,分别用于血液学检测和流式细胞仪的免疫表型检测。
4.1.1.1用于血液学检测的抗凝剂(1)EDTA(1.5±0.15mg/ml血液)。
(2)在血球分析仪生产商允许的时间围检测,不超过30h,不检测超出抗凝时间围的样品。
4.1.1.2用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂(1)用K3EDTA抗凝,收集样品应在30h以,尽早(8h以)处理。
(2)用ACD或肝素抗凝,收集样品在48h以,尽早(8h以)处理。
4.1.2静脉采血收集血样,将血液注入一个事先加入适当抗凝剂的试管(用真空试管)。
CD4+ 与CD8+ T淋巴细胞检测1 范围本章规定了用多平台三级程序法与单平台一步法检测全血中得CD4+与CD8+T淋巴细胞。
2 规范性引用文件1997 Revised Guidelines for Performing CD4+ T-CellDeterminations in Persons Infected with HumanImmunodeficiencyVirus(HIV) MMWR 46(RR—2);1-29 Publication date: 01/10/1997.3 实验室条件3、1人员进行HIV感染者CD4+与CD8+ T淋巴细胞检测得人员须具有艾滋病实验室得上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全及实验操作技术培训。
3、2 设施与设备3、2、1样品处理区:生物安全柜、离心机、冰箱、水浴箱、旋转振荡器、精确移液器(5μl~50μl、20μl~200μl、200μl~1000μl)。
3、2、2流式细胞仪检测区:流式细胞仪3、3 功能分区实验室原则上应分为样品处理区与流式细胞仪检测区,各区得功能就是:3、3、1样品处理区应达到生物安全Ⅱ级(BSL—2)实验室要求,用于样品处理、流式检测样品制备.3、3、2流式细胞仪检测区用于制备好得样品上机检测。
4 样品采集、运输与接收4、1样品得采集4、1、1选择合适得抗凝剂,分别用于血液学检测与流式细胞仪得免疫表型检测。
4、1、1、1 用于血液学检测得抗凝剂(1) EDTA(1、5±0、15mg/ml血液)。
(2)在血球分析仪生产商允许得时间范围内检测,不超过30h,不检测超出抗凝时间范围得样品。
4、1、1、2 用于流式细胞仪免疫表型检测得抗凝剂(1)用K3EDTA抗凝,收集样品应在30h以内,尽早(8h以内)处理.(2)用ACD或肝素抗凝,收集样品在48h以内,尽早(8h以内)处理。
4、1、2静脉采血收集血样,将血液注入一个事先加入适当抗凝剂得试管(用真空试管).4、1、2、1 当收集儿童样品时,采用儿童用注射器、小试管。
CD4淋巴细胞即时检测试剂盒基本技术参数CD4淋巴细胞即时检测试剂盒(荧光免疫法)是一种用于快速检测患者体内CD4淋巴细胞数量的试剂盒。
它采用荧光免疫法的原理,通过标记荧光抗体检测样本中的CD4+T淋巴细胞。
下面将介绍该试剂盒的基本技术参数。
1.适用范围:该试剂盒适用于人类体内CD4+T淋巴细胞数量的快速检测。
2.检测原理:采用荧光免疫法,通过标记荧光抗体检测样本中的CD4+T淋巴细胞。
3.检测时间:通常在20-30分钟内完成检测。
4.检测样本:血液样本,通常采用外周全血或血液中的淋巴细胞。
5.检测灵敏度:灵敏度是指试剂盒能够准确检测到的最低CD4+T淋巴细胞浓度。
一般来说,该试剂盒的灵敏度较高,可以检测到低于500个CD4+T淋巴细胞/μL的浓度。
6.准确性:本试剂盒具有较高的准确性,与传统的流式细胞术相比,两种方法对于CD4+T淋巴细胞的检测结果之间的相关性很高。
7.检测范围:一般来说,该试剂盒的检测范围是500-2000个CD4+T 淋巴细胞/μL。
当样本中CD4+T淋巴细胞浓度高于2000个/μL时,需要进行稀释后重新检测。
8.精确度:本试剂盒具有较高的精确度,其重复性和与其他检测方法之间的一致性都得到了验证。
9.操作简便性:该试剂盒操作简便,不需要特殊的仪器设备,只需要简单的操作步骤即可完成检测。
10.储存条件:试剂盒要在2-8℃的冰箱中保存,保证试剂的稳定性。
总结:CD4+T淋巴细胞即时检测试剂盒(荧光免疫法)是一种用于快速检测患者体内CD4+T淋巴细胞数量的试剂盒,具有检测时间短、灵敏度较高、准确性和精确度较高等特点。
它可以有效地辅助医生进行HIV感染、艾滋病和免疫相关疾病的诊断和监测。
t淋巴细胞亚群检测标准一、样本采集1.采样时间:在早晨未接受任何其他处理之前,空腹状态下进行。
2.采样量:2-3ml外周血3.采样方式:静脉采血,使用EDTA抗凝管4.样本处理:采血后立即轻轻摇动抗凝管,使血液与抗凝剂充分混合,避免形成血块。
5.样本保存:采集后的样本应立即送检,或在4℃下冷藏保存,但不得超过48小时。
二、检测方法1.检测原理:采用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)进行T 淋巴细胞亚群的检测。
通过荧光标记的单克隆抗体特异性识别淋巴细胞表面的标志物,将T淋巴细胞分为CD4+和CD8+两个亚群。
2.检测流程:a)预处理样本:将EDTA抗凝的全血样本进行涡旋混合,使红细胞和白细胞充分裂解。
b)抗体标记:向预处理后的样本中加入荧光标记的单克隆抗体,孵育一定时间后洗涤并固定细胞。
c)流式细胞术检测:将标记好的样本通过流式细胞仪进行检测,获取每个淋巴细胞的荧光信号。
d)数据处理与分析:使用软件对获取的荧光信号进行数据处理和分析,得到CD4+和CD8+两个亚群的细胞比例。
三、正常参考值根据正常参考值数据库的数据,正常成年人外周血中T淋巴细胞亚群的正常参考值范围如下:CD4+T细胞:40%-65%CD8+T细胞:20%-40%四、T细胞亚群的识别和计数1.CD4+T细胞的识别:通过流式细胞术检测样本中表达CD4分子的T细胞,以识别CD4+T细胞。
2.CD8+T细胞的识别:通过流式细胞术检测样本中表达CD8分子的T细胞,以识别CD8+T细胞。
3.计数方法:采用绝对计数方法,计算每微升血液中CD4+和CD8+T细胞的个数。
每微升血液中含有多少个淋巴细胞,其中有多少个是CD4+或CD8+T细胞。
五、质量控制1.仪器校准:使用流式细胞仪前必须对仪器进行校准,确保数据的准确性和可重复性。
2.试剂质量控制:采用高质量的抗体试剂和荧光标准品,确保检测结果的可靠性。
同时,对抗体试剂进行质量检测和控制,以确保其特异性和灵敏度。
艾滋病T淋巴细胞检测中CD4/CD8比值的正常参考值对感染了HIV病毒的无症状艾滋病感染者及CD4+T淋巴细胞计数高的感染者,至少每六个月进行一次CD4+T淋巴细胞计数检测,以评估疾病进展,判断预后状况是十分有必要的。
T淋巴细胞亚群检测中的CD4、CD8、CD56正常参考值:CD3:60-80%;CD4:35-55%;CD8:20-30%;CD4/CD8比值:1.4-2.T淋巴细胞检测的临床意义1.CD3下降常见于①恶性肿瘤;②自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等;③先天性免疫缺陷病,艾滋病;④接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂。
CD3上升则见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等。
2.CD4淋巴细胞减少:见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
影响正常人CD4的标准,在不同种族,不同民族之间有所差异,综合不同研究机构几项调查结果,在我国正常人的CD4值大致在600-1200之间,影响CD4检测值的因素很多,如1、季节性和昼夜差异:如每日最低水平在中午12点30分,峰值在下午8点30分(JAIDS,1990,3:144)。
2、肾上腺皮质激素对CD4细胞数有较大的影响,短期服用可能使CD4从900 /ul下降到300 /ul.。
3、合并感染HTLV-1的病人可能造成CD4的假性升高。
3.CD8淋巴细胞增多:见于自身免疫病,如SLE、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
4.CD4/CD8比值异常:CD4/CD8的比值做为免疫调节的一项指标,正常值约1.4~2.0,若其比值>2.0或<1.4,表明细胞免疫功能紊乱。
CD4/CD8<1.4常见于①免疫缺陷病,如艾滋病的比值常小于0.5;②恶性肿瘤;③再生障碍性贫血,某些白血病;④某些病毒感染,急性巨细胞病毒感染;⑤其它,SLE肾病、传染性单核细胞增多症、骨髓移植恢复期等。
CD4/CD8>2.0常见于自身免疫性疾病,如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、I型糖尿病等等。
CD4+和CD8+T淋巴细胞检测技术规范1 范围本章规定了CD4+和CD8+T淋巴细胞检测的意义、实验室要求、检测方法、结果报告及质量控制要求。
适用于从事相关检测的各级艾滋病实验室。
2 规范性引用文件《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》(中华人民共和国卫生行业标准,WS293-2008)《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》(人民卫生出版社,2007年12月)《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南(试行)》(中国疾病预防控制中心,2006年2月)《病原微生物实验室生物安全管理条例》(中华人民共和国国务院令第424号,2004年11月12日)3 CD4+ 和CD8+T淋巴细胞检测的意义3.1 HIV感染临床分期CD4+T淋巴细胞数量可评价HIV感染者免疫状况,辅助临床进行疾病分期。
我国《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标CD4+T)将WS293-2008(中华人民共和国卫生行业标准,准》淋巴细胞值作为成人及15岁(含15岁)以上青少年HIV/AIDS 临床分期标准的主要依据之一。
3.2HIV感染儿童免疫抑制分级和治疗辅助指标CD4+T淋巴细胞百分数可以作为儿童免疫抑制分级指标,可以作为儿童临床治疗分期和辅助条件。
3.3 疾病进展监测《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》推荐对无症状HIV感染者及CD4+T淋巴细胞计数高的感染者每六个月进行一次CD4+ T淋巴细胞计数检测,以评估疾病进展,判断预后状况。
3.4 机会性感染的风险评估机会性感染是艾滋病患者死亡的主要原因,CD4+T淋巴细胞可评估HIV感染者机会性感染的风险,辅助判断是否进行预防性治疗(如当CD4+ T淋巴细胞<200/μl时,应给予抗肺孢子菌肺炎的预防性治疗。
3.5 抗病毒治疗适应症选择及疗效评价《国家免费艾滋病抗病毒药物治疗手册(第二版)》将CD4+T 淋巴细胞数量作为是否开始抗病毒治疗的重要实验室指标之一,并规定治疗后定期检测CD4+T淋巴细胞数量,判断免疫系统恢复情况。
3.6 CD8+T淋巴细胞为抑制性/细胞毒性T细胞,HIV感染比值下降。
CD4/CD8细胞数量增加,导致CD8+T者.4 CD4+ 和CD8+T淋巴细胞检测实验室要求4.1 人员淋巴细胞检测的人员CD8+THIV/AIDS进行患者CD4+和须具有上岗资格,并接受过省级以上艾滋病实验室安全培训、检测技术、质量控制和仪器厂家提供的培训。
4.2 设施和设备样品准备区:生物安全柜、离心机、冰箱、恒温孵4.2.1 ~l、20μ~精确移液器(5μl50μl/箱水浴箱、旋转振荡器、)。
~μl1000μl、200μl200 4.2.2 样品检测分析区:流式细胞仪、打印机。
功能分区4.3实验室原则上应分为样品准备区和样品检测区,各区的功能为:)实验室要求,样品准备区应达到生物安全Ⅱ级(BSL-2 用于样品制备。
样品检测区用于制备好的样品在流式细胞仪上检测。
CD8+T常规CD4+ 和淋巴细胞检测的方法和程序55.1 样品采集、运输和接收 5.1.1 样品的采集选择合适的抗凝剂,用于血液学检测或流式细胞5.1.1.1仪的免疫表型检测。
(1)用于血液学检测的抗凝剂:KEDTA或KEDTA抗凝23管,在血球分析仪生产商允许的样品采集时间范围内检测。
(2)用于流式细胞仪免疫表型检测的抗凝剂:K2EDTA、K3EDTA、酸性枸橼酸葡萄糖溶液(ACD)或肝素抗凝。
一般要求48小时内染色,染色后6小时内分析。
如采血后24小时内染色,则可在染色后24小时内分析。
如果利用CD45单克隆抗体和侧向光设淋巴细胞门,可检测放置72小时的样品。
5.1.1.2 采血管上注明样品编号、采集日期等信息。
5.1.1.3 采集静脉血,注入已加入适当抗凝剂的采血管(有条件者最好用真空采血管)。
采血后立即握住试管两端,垂直颠倒混匀数次,防止血液凝固。
5.1.2 样品运输5.1.2.1 运输感染者样品至检测地点应符合国家《病原微生物实验室生物安全管理条例》相关要求。
5.1.2.2 在室温(18~25℃)保存和运输样品,避免极端温度(结冰或大于37℃)。
高温季节,需用隔热容器盛装样品,并将其置于有冰袋和吸热物质的容器中。
5.1.3 样品接收5.1.3.1 专人接收样品,检查样品质量、数量并核对标识。
溶血、凝血或结冰的样品应视为不合格样品,超5.1.3.2 过检测允许时间的样品不可检测。
5.1.3.3 如果样品运输过程中温度超出室温范围(18~25℃),但没有明显的溶血或结冰,可以处理样品,但要在工作表的报告上注明温度条件。
不能立即加热或冷冻样品以使其达到室温,否则会影响免疫表型检测结果。
5.2 方法目前,CD4+和CD8+T淋巴细胞计数的方法分为两大类,一类是应用流式细胞仪测定法,另一类是非流式细胞仪测定法。
常用的淋巴细胞计数检测方法为自动检测方法,包括流式细胞仪(主要有多平台法和单平台法)和专门的细胞计数仪。
5.2.1 流式细胞仪检测方法5.2.1.1 双平台方法是一种细胞群体的绝对计数方法,利用血球计数仪检测淋巴细胞数量,再根据流式细胞仪得到的细胞群体百分比,计算得到每微升的淋巴细胞数量,这种方法叫做双平台方法。
双平台法需要两种仪器,由于仪器有系统误差,计算结果的重复性和准确性影响因素较多,用这种方法进行CD4+和CD8+ T淋巴细胞计数时,不同实验室差异很大。
这种方法最大的缺点在于操作步骤复杂,操作人员多、费时,因此,很难将变异水平减小到最低。
5.2.1.2 单平台方法是相对双平台法而言的,即应用三色、四色流式试剂配以内参绝对计数微球,加上流式细胞仪淋巴.细胞亚群获取和分析软件,一步即可获得T细胞亚群的相对数(百分比)和绝对数。
通过使用已知数量的参考微球为内参,可以直接报告绝对计数,即通过获取的目标细胞与参考微球的比例、参考微球数量和样品体积,得到每微升的淋巴细胞数量。
单平台法最大程度地减少了多个仪器检测带来的检测误差,细胞绝对计数结果的重复性和准确性都得到了良好的保证。
5.2.2 非流式细胞仪测定法5.2.2.1 Cyto-Spheres方法CD4+计数试剂盒包含CD4+微球试剂,即包被有单克隆抗体的惰性乳胶微球,可以通过光学显微镜鉴别和手工计数新鲜全血中CD4+T淋巴细胞的绝对数。
其原理是人和动物的T淋巴细胞表面有红细胞受体,因此红细胞可以粘附到T淋巴细胞的周围而形成玫瑰花样的细胞团。
在红细胞中,以绵羊红细胞最为常用。
5.2.2.2 Dynabeads方法以免疫磁珠细胞分离方法为基础,使用包被CD4+和CD8+抗体的Dynabeads磁珠,从全血中捕获分离CD4+和CD8+T淋巴细胞;另一种CD14微球用来阻隔单核细胞。
用龙胆紫和胎盘兰染色分离出来的CD4+T淋巴细胞,在光学显微镜下或自动细胞计数仪上计数。
5.3 实验资料的记录5.3.1 及时、准确地记录实验结果。
实验记录中应包括以下内容:日期、操作者、所有5.3.2 样品信息、实验内容、过程(步骤)、结果及有无事故等。
5.3.3 所有实验资料应统一由专人负责,按固定格式记录在案。
5.3.4 计算机生成的实验结果,存档备案;定期将计算机结果文档备份并备案保存。
5.4 结果报告5.4.1 多平台法用淋巴细胞总数(来自于WBC及分类)乘以淋巴细胞亚群百分率(从流式细胞仪数据中得到),计算绝对数值。
5.4.2 单平台法由计算机软件直接出结果并打印出报告单,报告单的内容包括如下结果:CD45+ Abs Cnt;CD3+ Abs Cnt;CD3+CD4+ %T Lym;CD45+CD4+ Abs Cnt;CD3+CD8+ %T Lym;CD3+CD8+ Abs Cnt;Th/Ts及其正常参考值范围。
5.4.3 结果报告单中应附有正常值参考范围(例如,CD4+T 淋巴细胞绝对数和百分数)。
注意用于CD4+T淋巴细胞检测的不同仪器有不同的正常值范围,成人及不同年龄段儿童正常值范围亦不相同。
最好由国家或省市级实验室建立当地人群的成人和儿童正常值参考范围以供参考。
按照实验结果填淋巴细胞检测报告单,单平台法检测结果CD8+和T写CD4+ 。
《CD4+T淋巴细胞检测结果报告》7 报告格式参见附表报告单经复核人复核签字及签发,加盖检验专用章5.4.4个工作日内发出报告。
3后发出。
应在检测完成后5.4.5 报告发放时,可经挂号邮寄或直接交给送检人。
6 质量控制6.1 CD4+ 和CD8+T淋巴细胞检测的质量控制包括室内质量控制(简称室内质控)和外部质量控制(简称外部质控)。
6.2 室内质控要求工作人员做好仪器质控和过程质控。
6.2.1 仪器质控为应用仪器生产厂家的质控品校准仪器,每次开机应先进行质控品检测,质控品通过测试后方可检测样品。
6.2.2 过程质控主要包括试剂质控、样品质控和数据质控。
6.2.2.1 试剂质控要求所用试剂应在有效期内等。
6.2.2.2 样品质控包括正确的样品采集、运输、接收、贮存、处理、分析方法以及室内质控的应用。
稳定的全血样品可用于室内质控。
通过每日绘制质控图检查实验质量,帮助分析和判断样品处理、仪器的准备和分析是否均处于最佳状态。
6.2.2.3 数据质控包括正确的数据分析、结果报告、数据储存及对数据的可靠性分析。
6.3 外部质控是有组织地系统质控测量。
是由具有外部考核经历,并且检测质量获得改进的实验室之间进行相互质量参比,从而提高实验室结果的可比性,确保在所有实验室淋巴细胞检测都有良好的高度一致的结果。
国家艾滋CD4+T.病参比实验室负责制订和发展外部质控相关技术标准,并负责组织检验能力验证(PT)计划的实施,每年至少2次,每次2-5支质控品。
有条件的实验室可参加国际认可机构的质控。