微生物镜检及运行判断
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微生物限度检查操作规程《微生物限度检查操作规程》一、目的微生物限度检查是用于确认产品是否符合微生物水平要求的一种分析方法。
本操作规程的目的是制定微生物限度检查的操作步骤,确保检查结果的准确性和可靠性。
二、适用范围本操作规程适用于所有需要进行微生物限度检查的产品,包括食品、医药和化妆品等。
三、操作步骤1. 准备工作:清洁实验室工作台面和仪器设备,准备所需的培养基和试剂,并确保仪器设备的正常运转。
2. 取样:按照产品的取样标准,从不同批次或不同位置进行取样,并确保取样的代表性。
3. 样品制备:将取样的产品进行样品制备,包括稀释、搅拌和过滤等步骤,以便于后续的微生物检查。
4. 培养:将样品接种在适当的培养基上,根据不同的微生物种类和要求进行培养,并进行恒温培养一定时间。
5. 计数:在培养一定时间后,对培养基上的菌落进行计数,并按照标准方法进行结果的记录和确认。
6. 结果判定:将检查结果与产品的微生物限度标准进行比对,根据结果作出是否合格的判定。
7. 结果记录:将微生物限度检查的结果进行记录,包括样品信息、操作步骤、检查结果和判定等信息,并将结果报告给相关部门或供应商。
四、注意事项1. 操作人员应具备一定的微生物检测知识和操作技能,严格按照操作规程执行。
2. 实验室应保持清洁、卫生,并进行定期消毒和验证。
3. 实验室设备应定期维护和校准,确保设备的准确性和可靠性。
4. 所使用的培养基和试剂应符合相关标准,存放在干燥、阴凉、避光的环境中。
5. 检查结果应及时报告,并根据结果采取相应的控制措施。
以上就是《微生物限度检查操作规程》的主要内容,希望能够帮助大家更好地进行微生物限度检查,确保产品质量和安全。
微生物学真菌镜检微生物学是研究微生物的科学,而真菌是微生物学中的一类重要微生物。
真菌是一类具有真核细胞结构的生物,包括了酵母菌、霉菌和伞菌等。
镜检是一种常用的检测手段,可以通过显微镜观察微生物的形态和结构。
因此,微生物学真菌镜检是研究真菌的一种方法,本文将从真菌的特点、真菌镜检方法和应用等方面进行阐述。
一、真菌的特点真菌是一类独特的微生物,与细菌、病毒等其他微生物有着明显的区别。
真菌在形态上多为菌丝状,有时也可以呈现为单细胞的酵母菌。
真菌的细胞壁由纤维素和壳聚糖构成,这也是真菌与细菌的重要区别之一。
此外,真菌在生物学上被归纳为真核生物,与人类和动物的细胞结构相似。
二、真菌镜检的方法真菌镜检是一种通过显微镜观察真菌形态和结构的方法,常用的方法有直接镜检和培养镜检两种。
1. 直接镜检直接镜检是一种简便的真菌镜检方法,适用于临床和实验室的常规检测。
该方法通常采用标本涂片,将待检标本制备成薄片,然后使用染色剂染色,使真菌在显微镜下更容易观察。
常用的染色剂有苏木精、甲苯酚蓝等。
直接镜检可以观察到真菌的菌丝、分生孢子和孢子囊等结构,对于真菌感染的初步判断有很大帮助。
2. 培养镜检培养镜检是一种较为复杂的真菌镜检方法,需要将待检标本进行培养,使真菌生长繁殖,然后再观察其形态和结构。
培养镜检可以确定真菌的种类、判断其对药物的敏感性和抗药性等。
常用的培养基有Sabouraud葡萄糖琼脂培养基、马铃薯葡萄糖琼脂培养基等。
三、真菌镜检的应用真菌镜检在临床和科研中有着广泛的应用。
在临床上,真菌镜检可以帮助医生判断患者是否存在真菌感染,并确定感染的真菌种类。
例如,对于呼吸道感染或皮肤感染的患者,通过镜检可以迅速确定真菌感染的病原菌,从而指导临床治疗。
在科研领域,真菌镜检是研究真菌的基础方法之一,可以观察真菌的形态变化、生长规律和细胞结构,为深入研究真菌提供了重要的实验依据。
四、真菌镜检的局限性尽管真菌镜检是一种常用的检测方法,但也存在一定的局限性。
微生物的筛选与鉴别方法微生物是一类极小的生物体,它们无法被肉眼直接观察,因此鉴别和筛选微生物需要使用特殊的方法。
以下将介绍几种常见的微生物筛选与鉴别方法。
一、灭菌方法在对微生物进行筛选与鉴别之前,首先要对培养基、培养器具等进行灭菌处理,以杀灭混入的其他微生物。
常用的灭菌方法包括高温灭菌、蒸汽灭菌、滤过灭菌等。
二、菌落计数法菌落计数法是微生物筛选与鉴别的常见方法之一、在固体培养基中培养微生物后,通过计算菌落的数量来判断微生物的数量及活性。
菌落计数法能够提供微生物样品中微生物数量的估计值,并能区分不同菌落的微生物种类。
三、生理生化鉴别法生理生化鉴别法是通过观察微生物对特定生理生化特性的反应来鉴别微生物种类。
常用的生理生化鉴别法包括碳源利用能力测试、酸碱生长反应、氧要求性测试等。
这些测试依据微生物对特定物质的利用能力、对酸碱环境的反应以及对氧气的需求来判定微生物种类。
四、形态特征观察法微生物在形态上具有一定特征,通过观察微生物在菌落和细菌涂片中的形态特征,可以初步判断微生物的种类。
形态特征观察法主要包括对细胞形态、胞内结构、胞外结构等的观察。
五、分子生物学鉴别法分子生物学鉴别法是近年来发展起来的一种新的微生物筛选与鉴别方法。
通过对微生物的基因组进行分析,可以获取微生物的遗传信息,并进行微生物种类的鉴别。
常用的分子生物学鉴别法包括PCR、脱氧核糖核酸(DNA)测序等。
六、质谱分析法质谱分析法是通过对微生物样品中的化合物进行质谱分析,通过分析特定化合物的质谱图谱来鉴定微生物的种类。
质谱分析法的优点是能够快速且准确地鉴别微生物种类,但需要仪器设备的支持。
总结起来,微生物筛选与鉴别方法多种多样,常用的方法包括菌落计数法、生理生化鉴别法、形态特征观察法、分子生物学鉴别法以及质谱分析法。
这些方法可以相互结合使用,以提高微生物鉴别的准确性与可靠性。
通过这些方法,可以更好地了解微生物的特性与功能,为进一步的应用研究提供依据。
微生物化验方法
微生物化验的方法有很多,以下为您推荐:
1.琼脂平板培养法:因培养基不同,琼脂平板法分为选择性培养基检测法和显色培养基检测法。
选择性培养基是在培养基中加入选择性抑制剂来抑制非目标微生物生长;显色培养基是在培养基中加入细菌特异性酶的显色底物,以菌落颜色区分目的菌落与非目的菌落。
2.显微镜镜检法:将待测样品中的微生物富集后,于油镜下直接计数。
显微镜镜检法通常与琼脂平板培养法结合使用,通过琼脂平板培养法对菌落进行定性分析,再用显微镜进行定量计数。
3.微生物测试片检测技术:一般情况下,微生物测试片由印有网格的聚丙烯薄膜和覆盖有培养基和显色物质的聚乙烯薄膜组成。
待测样品经过处理后可直接接种在微生物测试片上,然后放置在适宜的温度下培养——使固定在测试片上的显色物质与待检微生物生长产生的特异性酶发生显色反应,形成有颜色的菌落,通过对这些菌落进行计数便可实现检测。
微生物学检查方法
微生物学是研究微生物的生物学科学,其检查方法主要包括以下几种:
1. 复数染色法:利用染色方法将微生物标记出来,常用的染色方法有革兰氏染色法、抗酸染色法等。
2. 培养法:将微生物样本放入适当的培养基中,提供适合其生长的营养物质和环境条件,以培养和分离微生物。
3. 普通显微镜观察法:通过普通显微镜观察微生物的形态、结构和运动情况,常用于初步识别微生物。
4. 分子生物学方法:利用PCR、酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术检测微生物的基因或蛋白质,以确定其种属和性质。
5. 直接读数法:通过显微镜观察、流式细胞术等方法直接计数微生物数量和活性,用于研究微生物的数量和生理状态。
6. 分子识别方法:利用16S rRNA和18S rRNA等基因序列进行分子鉴定,快速准确地识别微生物。
7. 免疫学方法:通过免疫反应检测微生物中的抗原或抗体,以确定其存在和性
质。
除了以上常用的方法外,还有一些特殊的检测方法,如荧光显微镜观察、蛋白质鉴定、质谱分析等,用于特定的微生物检测需求。
微生物的鉴定与鉴别方法微生物是一类微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
它们在自然界中广泛存在,对人类的生活和健康有着重要的影响。
鉴定和鉴别微生物是微生物学研究的基础,也是保障食品安全和公共卫生的重要手段。
本文将介绍一些常用的微生物鉴定和鉴别方法。
一、形态学鉴定法形态学鉴定法是通过观察微生物的形态特征来进行鉴定和鉴别的方法。
在细菌的鉴定中,常用的方法包括显微镜观察细菌形态、染色和培养基特性等。
例如,革兰氏染色可以将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,进一步缩小了鉴定范围。
二、生理生化鉴定法生理生化鉴定法是通过检测微生物的生理和生化特性来进行鉴定和鉴别的方法。
这些特性包括生长要求、代谢产物和酶活性等。
比如,葡萄糖发酵试验可以区分肠道埃希菌和沙门菌,鉴定其是否具有肠道致病性。
三、分子生物学鉴定法分子生物学鉴定法是通过检测微生物的基因组DNA或RNA序列来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括PCR、序列分析和基因芯片等。
PCR技术可以扩增微生物的特定基因片段,通过比对序列来确定微生物的种属和亚种。
这些方法具有高度的准确性和灵敏度,已经成为微生物鉴定的重要手段。
四、免疫学鉴定法免疫学鉴定法是通过检测微生物与宿主之间的免疫反应来进行鉴定和鉴别的方法。
这些方法包括免疫荧光、酶联免疫吸附试验和免疫印迹等。
免疫荧光技术可以通过标记抗体来检测微生物的特定抗原,从而确定微生物的种类和数量。
五、质谱鉴定法质谱鉴定法是通过检测微生物样品中的分子质量来进行鉴定和鉴别的方法。
质谱仪可以将样品分子离子化,并根据其质量-电荷比进行分析和鉴定。
质谱鉴定法具有高度的准确性和灵敏度,已经成为微生物鉴定的重要手段。
总结起来,微生物的鉴定和鉴别方法多种多样,每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中,常常需要结合多种方法进行综合分析,以提高鉴定的准确性和可靠性。
微生物的鉴定和鉴别工作对于食品安全、疾病预防和环境保护等方面都具有重要意义,值得我们继续深入研究和应用。
微生物的镜检及形态分析.染菌判断第四小组实验目的:①: 了解镜检的操作步骤②:能够掌握显微镜的使用③:能够掌握微生物的染菌判断的方法④: 熟练掌握各项操作技能项目的基本方案:①:知道微生物在什么生长阶段镜检是最好②:知道微生物形态分析③:知道几种检测微生物是否染菌方法项目需要的试剂和仪器:试剂:生理盐水,结晶紫,卢哥氏碘液,95%的乙醇,番红,香柏油,二甲苯仪器:光学显微镜项目执行的基本步骤:一:镜检:常规细菌培养18-24h镜检,(固体培养基)整个细菌集落生长已经较标准,当形成了非常典型的菌落观后镜检就可以了。
原则上只要能看见菌落都可以进行染色镜检,但是总体说来,细菌整体进入静止期乃至更长时间,细菌多形性就会更加明显,G+细菌往往被染成G-,影响对细菌形态的观察。
液体培养基也是这样,培养时间过长或者保存时间过长的细菌培养液或者细菌平板,细菌着色不均或者异染颗粒增多,菌体多形性。
芽孢杆菌必须在芽孢形成后进行镜检,成链细菌也必须把握染色时间和染色方法,以便细菌长链或者特殊形态的观察。
这些都是基于细菌本身生长时间而定。
革用兰染色法(Gramsstain)对样品进行涂片、染色,然后在显微镜下观察微生物的形态特征,根据生产菌与杂菌的特征进行区别、判断是否染菌。
如发现有与生产菌形态特征不一样的其他微生物的存在,就可判断为发生了染菌。
此法检查杂菌最为简单、最直接,也是最常用的检查方法之一。
必要时还可进行芽孢染色或鞭毛染色(显微镜检查法)————镜检方法:①制作标本片:取一片干净的载玻片放在实验台上,用一支滴管吸取菌悬液与载玻片的中央,用干净的盖玻片覆盖在液滴上(注意不要漏气)②将其放在载物台。
在盖玻片上滴一滴香柏油,将油镜移至正中使镜头浸没在油中,刚好贴近载玻片。
用细调节器微向下调③油镜观察完毕,用擦镜纸将镜头的油擦净,另外有擦镜纸蘸少许二甲苯擦镜头,再用擦镜纸擦干。
二:形态分析:微生物的形态结构观察主要是通过染色,在显微镜下对其形状、大小、排列方式、细胞结构(包括细胞壁、细胞膜、细胞核、鞭毛、芽孢等)及染色特性进行观察,直观地了解细菌在形态结构上特性,根据不同微生物在形态结构上的不同达到区别、鉴定微生物的目的。
常见的微生物鉴定方法(一)引言概述:微生物鉴定方法是一种利用生物特性和化学反应来判断微生物种属和类别的技术手段。
它在医学、环境科学、食品安全等领域具有广泛的应用。
本文将介绍常见的微生物鉴定方法,以帮助读者更好地了解和运用这些方法。
正文:一、形态学鉴定方法1. 眼镜检查法:通过裸眼观察微生物的各种形态特征,如颜色、形状、大小等,判断其种属。
2. 显微镜观察法:利用显微镜观察微生物的细胞形态、排列方式、黏附物等特征,进行鉴定。
3. 染色鉴定法:运用染色技术对微生物进行染色,并观察染色后的颜色、形态等变化,以帮助鉴定。
二、生理生化鉴定方法1. 拮抗试验:通过接种不同微生物组合进行拮抗试验,观察是否发生拮抗反应,从而判定其是否属于同一种。
2. 酶活性检测:通过检测微生物体内特定酶的活性,如氧化酶、淀粉酶等,来进行鉴定。
3. 营养代谢检测:通过培养微生物在不同营养基质上的生长情况,了解其对不同营养物质的利用能力,进行鉴定。
三、分子生物学鉴定方法1. PCR技术:利用聚合酶链反应(PCR)扩增微生物DNA片段,通过比对标准数据库中的DNA序列进行鉴定。
2. DNA测序:直接对微生物的基因组DNA进行测序,然后与已有的DNA序列进行比对,来鉴定微生物。
四、免疫学鉴定方法1. 血清学鉴定法:利用微生物分泌的特定抗原与抗体结合反应来鉴定微生物,如凝集反应、免疫层析等。
2. 免疫荧光染色法:利用荧光标记的抗体与微生物特定抗原结合,在显微镜下观察荧光信号,进行鉴定。
五、生物化学鉴定方法1. 脂多糖检测:通过检测微生物产生的脂多糖,来判断其属于革兰氏阴性菌还是阳性菌。
2. 呼气气味检测:通过检测微生物代谢产物中挥发性化合物的气味,来鉴定微生物种类。
总结:微生物鉴定方法是一个多样化的领域,通过不同的技术手段可以对微生物进行准确的鉴定。
形态学鉴定方法、生理生化鉴定方法、分子生物学鉴定方法、免疫学鉴定方法和生物化学鉴定方法都是常见的方法。
微生物检验流程及操作标准微生物检验的流程包括以下步骤:1. 标本采集:根据患者的症状和规章制度正确采集标本,及时将采集到的标本送至检验科进行接种处理。
在运送标本的过程中,需要保持相应的温度和氧气,以防止标本干燥。
2. 镜检:检验人员运用显微镜直接观察标本,辨别相关致病菌的形态与数目,并进行初步判断。
必要时,还需要对标本进行染色后再观察,以对致病菌的性质和来源进行鉴别,更能排除污染因素,使标本致病菌的检出率得到大幅度提升。
3. 分离培养:采集的标本中不可避免地会吸附细菌,如果在镜检环节发现标本上吸附的细菌,就需要对标本实施分离纯化,并将其接种于适宜的培养基上,如显色培养基、血平板培养基、营养琼脂培养基等。
再将空气和温度调整至适合细菌生长的数值,获得便于进一步鉴定的细菌。
4. 细菌鉴定:检验人员通过细菌形态、菌落特点、酶类检测、血清学试验、生化反应等方式鉴定分析分离获得的标本,明确致病原因。
微生物检验的操作标准如下:1. 尽量在病程早期、症状典型以及在使用抗生素之前采集标本。
2. 标本应使用无菌容器盛放。
3. 血液为无菌液体,因此在采集时要避免皮肤的正常菌群污染。
多采用血培养瓶运送,随后放入血培养系统自动培养。
如有报阳则进行下一步检验:涂片镜检报给临床初步结果;需氧和厌氧瓶分别转种血平板,巧克力平板与厌氧血平板等;随后进行菌种鉴定以及药敏试验。
4. 脑脊液标本一般需要进行离心,以富集细胞。
一般检验流程为进行涂片镜检,包括革兰染色,抗酸染色与墨汁染色等。
增菌管进行增菌,分离培养转至血平板,巧克力平板,沙保弱平板等。
5. 痰液镜检一般包括革兰染色与抗酸染色,分离培养多用巧克力平板和血平板。
6. 尿液常做定量检测,取10微升尿液进行连续划线。
7. 粪便常用革兰染色做菌群比检测;分离培养多用麦康凯与SS平板。
8. 各类微生物标本应通过传递窗进行传递。
以上信息仅供参考,建议咨询专业人士获取准确信息。
微生物学检查的方法微生物学是研究微生物的结构、生理、生态、遗传、进化、分布、分类、繁殖、感染机理及与人类、动物、植物等的关系的一门科学。
在微生物学中,常用的检查方法有:培养分离法、显微镜检查法、生化鉴定法、分子生物学方法等。
培养分离法是最基本且常见的微生物学检查方法之一、它的主要目的是将微生物样本放入特定培养基中,利用培养基中的营养物质和适宜的环境条件,使微生物得以生长并分离出单个的菌落。
这种方法可以用来鉴定微生物的种属、研究微生物的生理特性(例如呼吸、产气、产酶等)、筛选生物制剂等。
在培养分离法中,需注意选用合适的培养基、控制适宜的培养条件(温度、气氛、pH值等)以及进行纯培养。
显微镜检查法是一种直接观察微生物形态和结构的方法。
通过使用光学显微镜或电子显微镜,可以观察到微生物的形态特征、大小、结构、有无鞭毛等。
这种方法能够帮助鉴定微生物的种属、观察菌落的形态特征和细胞的细微结构,对于研究微生物的形态变化、结构特点以及它们与生物体的相互作用具有重要意义。
生化鉴定法是根据微生物的代谢特点和生物化学反应来鉴定微生物种属的方法。
它通过测定微生物对特定基质的利用、产酸、产气等生化反应来判断微生物的分类和鉴定。
生化鉴定法主要有氧化发酵试验、碳水化合物利用试验、氨基酸代谢试验、酶反应试验等。
这种方法具有操作简单、结果准确、迅速的优点,广泛应用于微生物鉴定和临床诊断。
分子生物学方法是一种基于微生物核酸(DNA或RNA)的鉴定技术。
它利用PCR扩增、基因序列比对、DNA杂交等技术,通过分析微生物的基因组信息来确定微生物的种属和亲缘关系。
这种方法具有高分辨率、高灵敏度、快速、准确的特点,被广泛用于微生物分类和追溯、致病菌的鉴定以及微生物基因工程研究。
除了以上介绍的方法,还有一些其他的微生物学检查方法。
如荧光显微镜方法、免疫技术方法、流式细胞术、电子显微镜技术和遗传工程技术等。
这些方法在实验室中的应用使得微生物学的研究和应用领域得到了极大的发展,也为微生物学在医学、食品工业、环境监测、农业生产等方面的应用提供了有力的支持。
关于微生物镜检的原理!原生动物与细菌之间存在相互依存的功能关系;原生动物个体大,便于观看;对于环境变化比细菌敏感,更早更简单反映环境的变化。
微生物镜检中对原生动物的种类组成、数量、生长和变化状况的观看,也能反映出细菌的生长和变化状况,即间接地评价污水处理过程和处理效果的好坏,起指导生产的作用。
一、镜检微生物的分类1、形态原生动物门属真核原生生物界,是单细胞的微型动物,由原生质和一个或多个细胞核组成。
原生动物和多细胞动物相同,具有新陈代谢、运动、繁殖、对外界刺激的感应性和对环境的适应性等生理功能。
原生动物个体很小,长度一般在100~300μm之间。
它们都具有细胞膜。
多数种属的细胞膜牢固而富有弹性,从而使原生动物本体保持肯定的体形。
但也有一些种属,例如变形虫,只有一层极薄的原生质膜,不能保持固定的体形。
原生动物一般具有一个或两个以上的细胞核,其外形多种多样,它们在其细胞内产生形态的分化,形成了能够执行各项生命活动和生理功能的胞器。
在运动胞器方面有鞭毛、伪足和纤毛;在养分胞器方面有胞口、胞咽和食物泡;用以排出废料和调整渗透压的胞器有伸缩泡等。
有些种类的原生动物的细胞膜内分布着肌丝,具有收缩变形的功能。
2、养分方式原生动物的养分方式分为以下几类:①动物性养分,以吞食细菌、真菌、藻类或有机颗粒为生,绝大多数原生动物为动物性养分,有些具有胞口、胞咽等摄食器;②植物性养分,在有阳光的条件下,一些含色素的原生动物可利用二氧化碳和水进行光合作用合成碳水化合物,如植物性鞭毛虫,但种类和数量都很少;③腐生性养分,以死的机体或无生命的可溶性有机物质为生;④寄生性养分,以其它生物的机体(即寄主)作为生存的场所,并获得养分和能量。
3、分类1981年国际原生动物学会公布了原生动物分类系统,其中在水处理中常见的有三类:①肉足类,其细胞质可伸缩变动而形成伪足,作为运动和摄食的胞器,运动速度达3μm/s,典型的肉足类为变形虫属、简便虫属、表壳虫属和鳞壳虫属等;②鞭毛类,具有一根或一根以上的鞭毛。
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微生物检测技术的微生物鉴定方法与注意事项随着生物技术和医疗技术的快速发展,微生物检测技术在医药、环境、食品等领域的应用越来越广泛。
微生物鉴定是其中重要的一环,它可以帮助我们确定不同种类的微生物以及它们对环境和人类健康的影响。
本文将介绍微生物检测技术的微生物鉴定方法以及一些注意事项。
一、微生物鉴定方法1. 直接显微镜观察直接显微镜观察是最简单直接的微生物鉴定方法之一。
通过放大镜或显微镜观察微生物的形态、大小、结构等特征,可以初步确定微生物的类型。
这种方法适用于一些常见的微生物,如真菌、细菌和原生动物等。
2. 培养和生长特性观察培养和生长特性观察是一种常用的微生物鉴定方法。
通过将微生物样本培养在适当的培养基上,观察其生长特点、菌落形态和色素等特征,可以初步确定微生物的类型。
这种方法通常需要较长的培养时间,但可以识别更多种类的微生物。
3. 生物化学试剂盒检测生物化学试剂盒检测是一种常用的微生物鉴定方法。
这种方法利用不同微生物在特定条件下产生的酶或代谢产物与试剂盒中的反应物之间的反应,通过观察反应结果判断微生物的种类。
生物化学试剂盒检测方法可快速、准确地鉴定微生物,适用于临床检测和食品安全监测等领域。
4. 分子生物学技术鉴定随着分子生物学技术的发展,分子生物学技术鉴定成为微生物鉴定的重要方法之一。
例如,聚合酶链式反应(PCR)技术可以通过扩增微生物特定的DNA序列,从而确定微生物的种类。
另外,测序技术可以通过测定微生物的基因组序列,识别微生物的种类和亚种。
分子生物学技术鉴定方法准确性高,但需要专业设备和操作技巧。
二、微生物鉴定的注意事项1. 样品采集与保存样品采集是微生物鉴定的关键步骤之一。
在采集样品时,应注意避免污染和交叉污染,使用无菌容器和工具,并避免直接接触。
对于不同类型的样品,采集方法和处理方式也不同,应根据具体情况进行。
在样品采集后,应妥善保存,并尽快送往实验室进行检测,避免样品变质或污染。
2. 实验室安全措施在进行微生物鉴定实验时,实验室安全是至关重要的。
微生物检查法方法介绍
微生物检查法是一种通过检测样品中的微生物来判断其卫生质量的方法。
其主要步骤包括取样、样品预处理、培养和观察等步骤。
具体方法如下:
1.取样:选取代表性样品进行检测。
根据不同的检测对象,样品需要按照不同的方法进行取样,比如从自来水龙头取水、从食品表面切取一小块等。
2.样品预处理:样品预处理的目的是去除样品中对微生物检测有干扰的物质,比如毒性物质、工艺杂质等。
常用的样品预处理方法包括均质、过滤或分离等。
3.培养:将样品接种到培养基上,将培养基含有的营养成分提供给微生物,以促进其生长和繁殖。
培养期间需要控制温度、湿度和氧气供应等条件以维持培养的稳定性。
4.观察和计数:观察培养基上的微生物数量、形态、颜色等特征,并进行计数。
通常使用显微镜和计数器完成这一步骤。
值得注意的是,不同的微生物可能需要不同的培养条件、培养基以及观察方法。
在具体的微生物检测工作中,需要根据实际情况进行相应的调整和优化。
图谱】活性污泥微生物镜检,附35种微生物(上)一、微生物镜检概述在活性污泥中占大多数的细菌在进行显微镜观察时有诸多不便,而其中的原后生动物多以单体存在,且以游离细菌作为捕食对象,在活性污泥控制参数及环境变化时,其种类、数量、丰度等变化可用以指示活性污泥性状。
1、镜检注意事项1)取样于曝气池末端采样。
因为在活性污泥中原后生动物种群在曝气池首端常见的为非活性污泥类原生动物占优势,中段是中间性活性污泥原生动物占优势,而末端的最终原生动物以何种类占优势决定了活性污泥生物相所处功能性状。
2)采样样品应为泥水充分混合液;生物相观察用样品不可与其他样品混合。
3)取样器要洗涤干净;样品绝不可放入冷藏、冷冻箱内,需进行保存,应该常温下操作并尽早观察。
2、原后生动物分类1)原生动物通常为单细胞,没有细胞壁,但有分化的细胞器。
通常于水体中常见的有鞭毛纲、肉足纲、纤毛纲(原吸管纲并入)三大类。
鞭毛纲:具有一根或多根鞭毛,一般统称为鞭毛虫。
包括滴虫、侧跳虫、波豆虫、眼虫、内管虫等。
肉足纲:其机体仅有细胞质形成的一层薄膜,体型较小,大多无固定形态。
包括变形虫、太阳虫等。
纤毛纲:身体表面具有纤毛,并以纤毛作为运动和摄食的细胞器。
分为游泳型和固着型。
包括喇叭虫、斜管虫、豆形虫、肾形虫、草履虫、漫游虫、楯纤虫、裂口虫、扭头虫;钟虫、独缩虫、聚缩虫、累枝虫、盖纤虫等。
2)后生动物原生动物以外的多细胞动物,其中微型后生动物需要借助显微镜予以观察。
这类包括轮虫、线虫、寡毛类动物、浮游甲壳动物。
3、生物相变迁活性污泥形成过程中生物相变化情况二、常见原后生动物一览在活性污泥系统中,根据对活性污泥是否有利将原生动物分为非活性污泥类原生动物、中间性活性污泥类原生动物和活性污泥类。
1、非活性污泥类原生动物2、中间性活性污泥类原生动物3、活性污泥类原生动物4、后生动物三、生物相与运行1、活性污泥结构活性污泥絮体的大小、形状、紧密程度、构成絮体的菌胶团细菌与丝状菌的比例及其生长情况能很好地反映污水处理状况。
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微生物镜检实验流程
1、取载玻片用纱布擦干,载玻片的一面用marker笔画一个小圈(用来大致确定菌液滴的位置)。
涂菌的部位在火焰上烤一下,除去油脂。
2、涂片:
液体培养基:左手持菌液试管,在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖;右手持接种环在火焰中烧灼灭菌,等冷却后从试管中沾取菌液一环,在洁净无脂的载玻片上涂直径2mm左右的涂膜,最后将接种环在火焰上烧灼灭菌。
固体培养基:先在载玻片上滴一滴无菌水,再用接种环取少量菌体,涂在载玻片上,使其薄而均匀。
3、晾干:让涂片在空气中自然干燥。
4、固定:让菌膜朝上,通过火焰2-3次固定(以不烫手为宜)。
5、染色:将固定过的涂片放报纸上,滴加草酸铵结晶紫液,染1min。
6、水洗:用水缓慢冲洗涂片上的染色液,用吸水纸吸干。
简单染色结束可观察细胞形态。
7、媒染:滴加1滴碘液,染1min,水洗。
8、脱色:吸去残留水,连续滴加95%乙醇脱色20-30s至流出液无紫色,立即水洗。
9、复染:滴加蕃红复染3-5min,水洗。
至此,革兰氏染色结束。
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微生物镜检操作方法
1.准备样品:首先从培养基或病人体液中获取样品,不同的样品需要不同的处理方法,这需要根据实验目的进行决定。
2.制备镜片:在灭菌条件下,将玻璃切片放入浓酸中或使用火炙法烧制,制成镜片。
3.制备菌液:将样品加入到适当培养基中,培养并增殖细菌,制备菌液。
4.涂片:在干净的台面上将制备好的菌液倒在玻璃片上,用另一块玻璃片压平,使菌液均匀涂布在玻璃片上。
5.定影:将涂有菌液的玻璃片在火焰上短暂加热,以杀死细菌并固定细胞。
6.染色:用不同染料对细胞进行染色,以区分不同种类细菌。
7.观察:将染过色的玻璃片放在显微镜下观察,并做出相应观察和记录。
8.清洗:工作完成后用酒精或去离子水清洗玻璃片和镜头,以保持干净卫生。
微生物形态学检查(微生物学检验基本技术一微生物形态学检查(微生物学检验基本技术一)随着现代医学及相关科学技术的发展,各学科相互交叉和渗透,医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平,许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术,准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物,并对引起感染的微生物进行耐药性监测,为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一,它是细菌分类和鉴定的基础,可根据其形态、结构和染色反应性等,为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小,肉眼不能看到,必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察,其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1.普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源,其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一,即0.2μm,而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油(浸)镜放大1000倍,能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2.暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后,光线不能从中间直接透入,视野呈暗色,当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射,因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3.相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用,改变直射光的光位相和振幅,将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下,当光线透过不染色标本时,由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异,可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4.荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同,主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置,常用高压汞灯作为光源,可发出紫外光或蓝紫光。
关于微生物镜检的实战总结!环保水处理活性污泥法在污水处理领域中占据重要的地位,得到了国内外的广泛研究。
在污水处理过程中,微生物镜检观察了活性污泥的生物相,分析了污水处理过程中生物相群体的变化,对水处理系统的长期正常运行具有重要的指导意义。
1、生物相反应的系统状态其原理是利用活性污泥中的微生物,原生动物和后生动物等生物相在曝气条件下将污水中的有机物氧化分解成CO2+H2O。
一些无机物质,如NH3-N,分解过程中产生的能量用于生长和繁殖微生物本身。
源源不断的污水进入,生物相在污水中不断生长繁殖,最终形成一个相对稳定的具有一定降解功能的生态系统。
这种稳定生态系统的形成得益于生物相良好的生长环境,包括温度、酸碱度、有机负荷、抗生素浓度、供氧等,当污水处理系统中的各控制因素发生变化时,活性污泥中的各种生物相的种类、数量及活性功能也会随之发生相应变化。
在一定程度上,处理系统中活性污泥生物相的变化反映了污水处理系统运行的质量和状态。
因此,通过观察污水处理系统中生物相种群数量和活性污泥数量的变化,可以了解处理系统的运行状况和质量,并可以及时调整处理系统的运行条件以改变生物相,确保处理系统能够继续正常运行。
当前对污水处理系统中生物相观察已经在水处理领域中得到了广泛应用。
2、生物相的观察手法1)活性污泥的沉降性能取新鲜的活性污泥,置于1000毫升的量筒中、静置一定时间,仔细观察污泥的沉降速率、泥水界面是否清洗、上清液是否透明等。
2)活性污泥的生物相观察观察前将所观察的样品混合均匀,用大口径定量移液管(保证容易取到活性污泥)吸取0.05mL样品与载玻片上,盖上盖玻片,置于显微镜下观察。
刚开始在100倍视野下观察,环视整个视野,对样品生物相的大致情况有初步了解,初步掌握絮体的状态、粒径、压密性以及观察到的原、后生动物的种群。
了解生物相中体型最大的生物种类,一定程度上体型最大的生物种类表示出污泥的停留时间。
当100倍视野观察不清晰时,采用400倍视野观察。
图谱】活性污泥微生物镜检,附35种微生物(上)一、微生物镜检概述在活性污泥中占大多数的细菌在进行显微镜观察时有诸多不便,而其中的原后生动物多以单体存在,且以游离细菌作为捕食对象,在活性污泥控制参数及环境变化时,其种类、数量、丰度等变化可用以指示活性污泥性状。
1、镜检注意事项1)取样于曝气池末端采样。
因为在活性污泥中原后生动物种群在曝气池首端常见的为非活性污泥类原生动物占优势,中段是中间性活性污泥原生动物占优势,而末端的最终原生动物以何种类占优势决定了活性污泥生物相所处功能性状。
2)采样样品应为泥水充分混合液;生物相观察用样品不可及其他样品混合。
3)取样器要洗涤干净;样品绝不可放入冷藏、冷冻箱内,需进行保存,应该常温下操作并尽早观察。
2、原后生动物分类1)原生动物通常为单细胞,没有细胞壁,但有分化的细胞器。
通常于水体中常见的有鞭毛纲、肉足纲、纤毛纲(原吸管纲并入)三大类。
鞭毛纲:具有一根或多根鞭毛,一般统称为鞭毛虫。
包括滴虫、侧跳虫、波豆虫、眼虫、内管虫等。
肉足纲:其机体仅有细胞质形成的一层薄膜,体型较小,大多无固定形态。
包括变形虫、太阳虫等。
纤毛纲:身体表面具有纤毛,并以纤毛作为运动和摄食的细胞器。
分为游泳型和固着型。
包括喇叭虫、斜管虫、豆形虫、肾形虫、草履虫、漫游虫、楯纤虫、裂口虫、扭头虫;钟虫、独缩虫、聚缩虫、累枝虫、盖纤虫等。
2)后生动物原生动物以外的多细胞动物,其中微型后生动物需要借助显微镜予以观察。
这类包括轮虫、线虫、寡毛类动物、浮游甲壳动物。
3、生物相变迁活性污泥形成过程中生物相变化情况二、常见原后生动物一览在活性污泥系统中,根据对活性污泥是否有利将原生动物分为非活性污泥类原生动物、中间性活性污泥类原生动物和活性污泥类。
1、非活性污泥类原生动物2、中间性活性污泥类原生动物3、活性污泥类原生动物4、后生动物三、生物相及运行1、活性污泥结构活性污泥絮体的大小、形状、紧密程度、构成絮体的菌胶团细菌及丝状菌的比例及其生长情况能很好地反映污水处理状况。
但需注意的是,在探讨絮体粒径时,状态不同、数值有差别;实际絮体粒径受曝气和搅拌等产生的剪切力影响很大。
新生态污泥菌胶团观察到上图所示菌胶团,表示有机物大量存在,细菌处于显著增殖状态良好的絮体良好的絮体,有压密性,呈深褐色在絮体及絮体之间观察不到针尖状小絮体解体的絮体新生态污泥菌胶团各类细菌形状清晰,而解体后压密性恶化的絮体,细菌类形状已破裂2、通过生物相判断运行1)活性污泥的污泥絮粒大、边缘清淅、结构紧密、呈封闭状,具有良好的吸附和沉降性能;絮粒以菌胶团细菌为骨架,穿插生长一些丝状菌,但丝状菌数量远少于菌胶团细菌,未见游离细菌。
微型动物以固着类纤毛虫为主,如钟虫、盖纤虫、累枝虫等;还可见到楯纤虫在絮粒上爬动,偶尔还可看到少量的游泳型纤毛虫等,轮虫生长活跃。
这是运行正常的污水处理设施的活性污泥生物相,表明污泥沉降及凝聚性能较好,它在二沉池能很快和彻底地进行泥水分离,处理出水效果好。
在形成这种生物相结构时,应加强运行管理,以继续保持这种运行条件2)污泥出现絮体结构松散,絮粒变小,观察到大量的游泳型纤毛虫类(豆形虫属、肾形虫属、草履虫属、波豆虫属、滴虫属)等生物,肉足类生物(变形虫类等)急剧增加的生物相,出现这种生物相时,污泥沉降性差,影响泥水分离。
产生的原因是由于污泥负荷过低,菌胶团细菌体外的多糖类基质会被细菌作为营养物用于维持生命需要,从而使絮体结构松散,絮粒变小。
若同时观察到大量的游离细菌的生物相时,则是由污泥负荷过高引起的,这时污水中的营养物质丰富,促使游离细菌生长很好,絮凝的菌胶团细菌趋于解絮成单个游离菌,以增大同周围环境的比表面,同样使污泥结构松散,絮粒变小。
此外,由于污泥絮粒的解絮或变小容易被微型生物吞噬,使得微型生物因食物充足而大量繁殖。
对由于污泥负荷过低,应采取减少污泥回流量、投加营养物质、缩短泥龄等方法提高污泥负荷运行;对由于污泥负荷过高,则应采取减少进水流量,减少排泥等措施降低污泥负荷运行3)在培菌初期,水中有机物浓度很高,污泥未形成,这时可观察到大量的游离细菌及鞭毛虫,接着出现掠食很强的游泳型纤毛虫;随着培菌的进行,水中有机物浓度不断降低,游离细菌及鞭毛虫数量不断减少,游泳型纤毛虫因食物减少而不断减少,当出现了固着型纤毛虫,标志着污泥基本形成4)活性污泥中累枝虫、楯纤虫、裂口虫、钟虫的数量呈增长趋势时,表明出水水质明显变好;在污泥结构松散、转差时,常可发现游泳型纤毛虫大量增加,出水混浊;处理效果较差时,变形虫及鞭毛虫类原生动物的数量会急剧增加5)出现硫细菌、螺旋体、扭头虫属时,表明溶解氧不足,需要向曝气池内增加供氧量,提高溶解氧浓度;当溶解氧浓度超过5时,出现大量的各种肉足类和轮虫类,这时应减少曝气量硫细菌螺旋体6)当污水浓度和负荷低时,会以游仆虫属、旋口虫属、轮虫属、表壳虫属等生物占优势,标志着硝化正在进行。
出现这种生物相时,应及时提高负荷运行游仆虫7)在活性污泥出现恶化的情况时,通过调整运行环境,出现漫游虫属、斜叶虫属、管叶虫属等生物时,表明活性污泥开始从恶化恢复到正常状态8)就轮虫属而言,从污泥解体开始到还有大量残留絮体存在时,都可见线虫大量出现,及活性污泥老化有关,其表现通常是活性污泥老化的开始阶段,在活性污泥老化进入加速期,则看不到其占优势的现象9)当污泥停留时间长,曝气过量时,处理腐败污水等有机酸多或含油多的污水时,可观察到放线菌出现,它可引起曝气池发泡放线菌3、工艺操作或进水水质变化时,原后生动物表现4、污泥膨胀污泥发生膨胀在活性污泥运行中是十分恼人的。
此时,会使污泥含水率上升,上清液体积减少,活性污泥颜色发生异变。
其中对值影响大的丝状菌有021N型球衣菌、微丝菌、发硫菌、1701型、0961型等;在食品废水中,引起固液分离故障的有021N型球衣菌、0041型等球衣菌属当溶解氧浓度低时,可观察到从絮体表面伸出021N型丝状菌这是引起污泥膨胀的代表性细菌,在低溶解氧浓度下出现发硫菌微丝菌0041型四、实际问题解答1这是最近的镜检图片,求各位说说污泥的性状,测沉降比时,污泥全部上浮,3个小时后污泥又降到量筒底这是接触氧化池的污泥,沉淀池池面上漂着一层污泥,测沉降比时污泥层在上面,水在下面取出的水样上层漂着许多土黄色污泥颗粒,感觉上和脂肪粒一样答:表观看污泥还行但最后一张图片看最后一张有丝状菌,并且一张镜检中有气泡存在,应是污泥上浮的原因o1看镜检的情况,有轮虫,钟虫表壳虫,情况正常o2关于丝状菌,不要镜检看到丝状菌就可怕的要死,其实污泥中没有丝状菌,污泥的活性才没有到最佳状态o3应该是污泥中的气泡所致,如果好氧池的污泥和的去除率没有影响,就不用管它,一直曝气,它不会怎么样,反而是注意缺氧池的情况,反硝化的效果如何?如果想调整,就是先把曝气降下来,然后再升上去需要把握度2我今天早上做了镜检,对微生物了解不多,麻烦各位说下图中两种生物是我这次镜检发现的最多的,但是我不知道它们是什么,也不知道它们的出现代表什么意义这是放大倍数看到的另外我还看到一只轮虫,活性不高,基本没有动静,还有表壳虫(1只),很小一只,变形虫(2到3只)也有,不过很小这几天的污泥感觉有点奇怪,变少了很多,30只有25%,昨天24%,今天早上取样的时候发现二沉池有浮泥,黄色,一大块一大块的,打散后很快就沉下去从这几样能看出曝气池有哪些问题?答:鬃毛虫和藻类,污泥停留时间过长,污泥负荷低,污泥有老化迹象3镜检,大家来看一下污泥情况,先分析一下菌胶团情况,再分析原后生动物,总体评价一下污泥状况这是含有80%成分的印染废水,现在的镜相取得生化沉淀污泥,看起来还不错,但是我取了生化混合液镜检后,惨不忍睹,菌胶团细碎得很,原后生动物没有这么多,镜检取泥以那个为准混合液还是沉淀污泥,我自己认为混合液,各位怎么看?图1图2图3图4图5图6答:镜检污泥一般是曝气池末端取混合液,在低倍显微镜下计数菌胶团要注意观察颜色深浅、密实程度及是否有新生污泥比较松散,是不是负荷比较低造成的;图5那个是摩门虫,它一般是在污泥过了良好期,趋向污泥解体的时候出现图2及图3都是累枝虫,图4是钟虫;菌胶团看上去一般,有部分新生菌胶团;图2这样大脑壳的累枝虫,通常会出现在污泥状况即将开始走下坡路的时候,但此时池面看上去效果会非常好,如果此时不注意调整工艺,很快会走下坡路,出水变浑浊;在进行累枝虫计数时,一个脑壳算一个此外,镜检看的是趋势,不是一两天的变化情况4第一个会来回伸缩,跟钟虫差不多,也是快速缩回,慢慢伸出,好像是在一个管子里,头部有好多触角,头部附近有碎屑在打旋第二个全身比较圆,并且全身有毛,头部稍小,尾部比较大,尾部有两根刺一样的东西答:图2是鼠鼬虫,在低负荷时出现,污泥解体发生时远比轮虫能更多观察到5最近在污泥培养,添加甲醇营养源,镜检发现绿色小虫子,请问是什么?答:通常带颜色的多半是藻类没有特别的指示意义,当然水不好的时候是不会有藻类繁殖的6最近镜检时发现两种新虫,想问都是什么?答:漫游虫比较明确了,另一个除了大家说的表壳虫,也有可能是被盖玻片压得变形的钟虫或轮虫(个头上看表壳虫没有这么大)7想问下中间的微生物是什么虫?答:该原生动物为表壳虫,在污水处理中的表壳虫多生活在负荷较低的状态下,通常食微比小于0.1的时候会出现,且溶解氧高,污泥有老化的趋势;大量出现可基本确定为食微比低,少量出现为基本现象8以下图片是活性污泥的镜检图片,现在污泥有问题,丝状菌比较多这样的污泥怎么样改善好呢?印染废水,污泥量为2500~3000,30=100%,溶解氧2~4答:丝状菌看上去不少,不消灭丝状菌,系统早晚要受冲击;消灭丝状菌时系统出水也要受影响。
可以试下投加次氯酸钠,投加浓度可以从10开始,没效果加大浓度系统小的话,可以考虑将全部污泥置换,短期效果最快9造纸废水,由于生化池上面泡沫较多,加大了曝气,最近几天发现生化池和二沉池上都是浮泥,活性污泥发白,沉降比98%最近钟虫和纤毛虫明显减少,仍有发现极少数的轮虫,有之前没怎么见过的一种虫较多,形态是:身体很柔软,有点像葫芦,游的很快,尾部有两根须,模样很凶不知道是什么虫?该怎么办呢?答:个人认为是污泥老化了,污泥负荷低,曝气量大微生物没有足够的营养物质导致微生物饿死,上面一层是死泥,建议加大排泥另外沉降比98%,污泥膨胀了,可能是过低导致丝状菌大量繁殖,丝状菌在碳氮磷比不合理的情况下,是优势菌种对造纸废水的各个指标是多少不清楚,建议是加大排泥,减少曝气量10以下是镜检微生物的图,这种微生物存在,能够表示对生化培养有利吗?400倍观察,**那个大虫子,有鞭毛助其游动,视野中还有很多小黑点在跑动答:个头大的像是游仆虫、小黑点是楯纤虫吧,此虫出现说明处理效果比较好;此虫会吃一些脱离污泥絮团的游离絮体,会使出水水质变得更加清澈;活动的小点点越多,对培养越有利,说明新生的微生物越多上述问题就是引导大家辨别问题里的微生物,比如:了解了昨天的图谱和今天的运行判定,就上述图片能认识几个,当然,能全部认得你就更厉害啦!微水会小结:活性污泥系统的处理效果及系统内微生物的种类数量代谢等有着密切关系在运行管理中,为微生物提供一个良好的环境,发挥微生物的能力,并通过生物相观察来指导运行,有助于及早发现问题,用以工艺参数调整。