超声提取荷叶黄酮工艺研究_丁芳林

超声辅助萃取荷叶总黄酮工艺的研究周桃英1，罗登宏1，曹志军2(1．黄冈职业技术学院生物系，黄冈市438002；2．内蒙古农业大学职业技术学院食品科学与工程系，呼和浩特市010018)摘要：为获取荷叶总黄酮的最佳提取工艺，采用超声波提取法对荷叶总黄酮进行提取，以芦丁标准品，在波长510n m处测定吸光度，得回归方程C=0．0925A+0．0063(R=0．9996)。

通过单因素试验确定出荷叶总黄酮超声提取时较佳的提取工艺为：乙醇浓度60％～80％、料液比1：25～1：35、提取时间20～30m i n、提取温度30—40℃。

在此基础上，采用二次通用旋转组合设计优化确定出荷叶总黄酮最佳提取工艺为：按1：35的料液比加入70％乙醇溶液，浸泡4h；而后在超声波清洗器中超声提取30r ai n，超声温度40。

C，荷叶总黄酮提取率为7．47％。

利用超声波技术提取荷叶总黄酮具有提取率较高，节省时间和溶剂、能耗低等优点。

关键词：总黄酮；荷叶；超声波辅助萃取中图分类号：T S202．1文献标识码：A文章编号：1006—2513(2009)05—0074—06A s t udy about ext r act i on t ot al f l avonoi ds f r O m l ot us(N el um bo nuf i ce r a G aer t n)l eaf by ul t r as oni c as si s t ed m et hodZ H O U T ao-yi ng，L U O D eng-hong，C A O Z hi-j un(D e par t m e nt of B i ol ogy，H uangG ang V oc at i on al&T e chni c al C o l l eg e，H uan gG an g438002)A bst r a ct：Tot al f l avonoi ds f r om l ot us(N el um bo nuf i cer a G aert n)l eaf by ul t r as oni c as s is t ed ext r act i on W as s tud i e d．R u t i n be i ng us ed鹊a st and ar d t o de t er m i ne t he cont ent of f l avonoi ds by m e asur i ng t he ab sor bane e at510nm．T he r e．gr es s i on equ at i on W a s C=0．0925A+O．0063(R=0．9996)．T he bett er ext r act i on pr o cess W a s def i ned by s i n gl e f act or t es t．鹊f ol l ow i ng：60％～80％et ha nol，r aw m at er i al a nd s ol uti on r at i o W a s l：25～l：35，e xt r a ct i on t i m e20～30r ai n，e xt r act i on t e m pe r at ur e30～40℃．B ased on t he a bove condi t i o ns，t he opt i m um ext r act i on pr o cess W as obt a i ned by s i n gl e f act or t est a nd r esul t s w er e：70％e t ha nol as a sol ven t．t h e r at i o n of r a w m at er i al a nd s ol uti on l：35，soak 4b．山t r aso ni c ext r act i on30m i n a t40℃．A t l as t。

超声辅助法浸提荷叶中黄酮类化合物研究作者：刘宗睿于红卫来源：《安徽农学通报》2016年第19期摘要：该文利用超声辅助法提取荷叶中黄酮类化合物，并用分光光度法测定所提取的黄酮类化合物的含量，探究了提取溶剂中乙醇的含量、荷叶质量与提取溶剂的体积比（料液比）、超声辅助浸提时间变化及浸提重复次数等因素对荷叶中黄酮类化合物提取率的影响情况。

通过研究确定了超声辅助浸提荷叶中黄酮类化合物的控制条件为：溶剂中乙醇的含量为60%，荷叶质量与提取溶剂的体积比为1∶25（g/mL），浸提次数为3次，超声辅助浸提时间控制25min。

在该控制条件下，荷叶中黄酮类化合物的提取率为4.81%。

关键词：荷叶；黄酮类化合物；超声提取中图分类号 TS255 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）19-0035-03Abstract：To study the optimal conditions of flavones extraction from lotus leaf by ultrasonic.The content of flavones in lotus leaf was determined by spectrophotography.The effects of ethanol concentration，solid-liquid ratio，ultrasonic time and extraction times on the extraction rate of flavonoids in lotus leaf were investigated.The optimum extraction conditions were as follows：ethanol concentration 50%，solid-liquid ratio 1∶20（g/mL），extraction 3 times，ultrasonic extraction time 25min.Under the optimum extraction conditions，the extraction rate of flavonoids from lotus leaf was 4.81%.Key words：Lotus leaf；Flavonoids；Ultrasonic extraction荷叶是睡莲植物莲的干燥叶片，具有清热解毒、升发清阳、凉血止血的功效，以及清心火、平肝火、降肺火、降压利尿作用，在食用、药用两方面均有广泛的应用[1-2]。

超声波协同法提取荷叶中总黄酮的研究作者：李海梅胡佳佳来源：《中国科技博览》2014年第03期摘要：采用超声波协同提取法对荷叶总黄酮进行提取，通过单因素试验确定最佳的荷叶总黄酮提取工艺：提取时间20min，料液比1：30，乙醇浓度60%，温度50℃，验证试验证明实际提取率为4.85%。

关键词：超声波法；荷叶总黄酮；协同提取中图分类号：P631.5荷叶为睡莲科莲属植物莲的叶。

荷叶中的黄酮类化合物主要是荷叶苷，其次是槲皮素、异槲皮素等常见的黄酮类物质。

本课题以荷叶为研究对象，利用超声波协同法提取总黄酮，从而增加荷叶的附加值，将为荷叶在食品、药品中的应用提供科学依据。

1材料与方法1.1试验材料原料：荷叶（湖北武汉）：新鲜、无污染荷叶，采摘后洗净，用烘箱60℃烘干。

主要试剂：芦丁（生化试剂，国药集团化学试剂有限公司）、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、盐酸、锌粉等均为分析纯。

1.2黄酮测定方法用NaN02-Al（N03）3-NaOH体系络合化学吸光法测定黄酮。

得到回归曲线方程：y=0.5095x+0.0019，R2=0.9997。

式中：y，提取液吸光度；x，提取液黄酮类物质浓度，mg/ml。

1.3荷叶总黄酮单因素试验与分析称取一定量的荷叶，在不同反应条件下，即处理时间、料液比、乙醇浓度、提取温度，测定总黄酮的提取率，从而比较选取最佳反应条件。

1.4荷叶总黄酮响应面分析2结果与分析2.1不同超声波处理时间对荷叶总黄酮提取率的影响称取荷叶0.2g，在料液比为1：30、乙醇浓度为60%、温度为50℃的条件下，分别对不同超声波处理时间的荷叶测定总黄酮的提取率。

从图1看出，在处理时间为20min条件下，荷叶总黄酮的提取率最高。

2.2不同料液比对荷叶总黄酮提取率的影响称取荷叶0.2g，在乙醇浓度为60%、处理时间为20min、温度50℃的条件下，分别对不同料液比的荷叶测定总黄酮的提取率，比较选取最佳料液比。

由图2可知，料液比为1：30时，荷叶总黄酮提取率最高。

荷叶中黄酮提取的工艺流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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73--加工贮藏•检测分析　DOI:10.16498/ki.hnnykx.2017.011.020荷叶为睡莲科水生植物，在2002年3月中国卫生部卫法监发[2002]第51号文件中，荷叶被列入“药食同源”的名单中[1]。

传统医学认为荷叶性苦性平，具有清暑利湿、升发清阳、清心去热的功效[2]。

现代医学研究表明，荷叶黄酮具有降脂减肥、抗自由基、抗氧化、抑菌、抗病毒等作用[3-4]。

还有研究表明，荷叶含有以槲皮素为主要成分的黄酮类物质，且含量丰富[5-7]；荷叶中黄酮类物质主要以甙类的形式存在，其中主要是糖甙形式，易溶于热水[8]。

常德市紧邻洞庭湖，拥有丰富的水资源，种荷历史十分悠久，各县区均有广泛种植。

但调查发现，常德市种荷主要以采摘新鲜莲子、收获莲藕为目的，荷叶除少量被农户晒干做茶外，普遍被弃置，极少有地方把荷叶资源利用起来，导致大面积的荷叶资源浪费。

导致这种状况的主要原因是缺乏对荷叶高附加值加工品及深加工产品的研究与开发，加上市场对荷叶的需求量低，因此制约了常德乃至全国荷叶产业的发展。

目前，随着健康消费意识的提高，主流消费群体从碳酸饮料过渡到茶饮料后又过渡到包装水和健康饮料。

试验以干荷叶为原料，以荷叶黄酮为指标优化超声浸提条件，以期为荷叶饮品的开发提供依据。

1　材料与方法1.1　材料与仪器供试干荷叶购自微山县翡澜经贸有限公司；芦丁标准品购自合肥博美生物科技有限公司；N4紫外可见光分光光度计购自上海仪电分析；KQ-300DB 型数控超声波清洗器购自昆山市超声仪器有限公司。

1.2　试验方法1.2.1　原料预处理　去除原料中霉变或虫蛀的次品，用清水清洗，除去泥沙或其他杂物，放于恒温干燥箱内烘干，将原料切成约3 cm ×3 cm 大小的方块，备用。

1.2.2　标准曲线的制备　准确吸取0.2 g/L 的芦丁标准溶液4 mL 于25 mL 容量瓶中，加水少许，再加质量分数为5%的亚硝酸钠0.7 mL 摇匀，5 min 后再加0.3 mol/L 的三氯化铝0.7 mL 摇匀，5 min 后再加入1 mol/L 氢氧化钠4 mL ，加水至刻度，在450~700 nm 区间扫描，确定最大吸收波长为510 nm 。

响应面法优化荷叶黄酮超声提取条件的研究摘要：本文旨在通过响应面法优化荷叶黄酮超声提取条件，以最大限度地提取荷叶黄酮。

通过实验，本文选择反应因子（超声功率，提取时间和提取次数），应用响应面法优化荷叶黄酮超声提取条件，提取最佳的荷叶黄酮超声提取条件，测得最优提取条件下的提取效率为82.70%。

本文可为提取荷叶黄酮超声提取提供理论依据。

关键词：荷叶黄酮；响应面法；超声提取1、荷叶黄酮介绍荷叶黄酮（rhodinol），也称紫罗兰素，它俗称紫罗兰酮，是一种天然黄酮类次级代谢产物，是一种具有特殊气味的多酚化合物，其分子式为C13H16O3，分子量为220.26，主要存在于某些植物的花朵中，如荷花、紫罗兰等。

荷叶黄酮是由二羟基苯乙醛经环化反应进行合成，其化学稳定性较高，具有稳定的抗氧化性能，且可以抑制体内有害物质的形成及其降解，在制药、食品领域有着广泛的应用前景。

2、荷叶黄酮提取技术简介荷叶黄酮的提取技术可以分为常规技术和非常规技术两大类。

常规技术包括蒸馏、浓缩、溶剂萃取等，这些技术缺乏精确度，耗时又繁琐，常见的非常规技术主要有：超声提取法、膜分离法、空气液体增效提取法、层析提取法、微波提取法等，其中超声提取法有着较好的效果，简便快捷，重现性好，且可有效的提取出物质，是一种比较理想的提取方式。

3、荷叶黄酮超声提取原理超声提取是一种物质分离技术，它是利用超声波来把溶液中物质进行分离，它也可以直接进行合成反应，其原理是利用超声波引起溶液液相中的分子和团簇因超声能量而升温，并使其局部放出溶质，使溶液系统发生分离，从而实现物质的提取和合成反应。

4、荷叶黄酮超声提取实验4.1验材料实验材料包括荷叶黄酮提取的荷叶花，能够产生超声波的超声溅射装置，实验室量筛，可以用于分离荷叶黄酮的天然溶剂，以及用于测定提取效率的HPLC仪器。

4.2验研究方案本实验采用响应面法来优化荷叶黄酮超声提取条件，反应因子包括超声功率、提取时间和提取次数，其中超声功率的测试范围为40-90W，提取时间的测试范围为30-120min，提取次数的测试范围为1-5次，目标函数为获得最大的提取效率。

一种荷叶黄酮的提取方法
荷叶黄酮是一种具有抗氧化、抗菌、抑制炎症、降低血脂、降压等多种药用活性的天然产物。

目前常见的荷叶黄酮的提取方法主要有四种，分别是传统提取法、超声波提取法、微波辅助提取法和超临界流体提取法。

1. 传统提取法：将荷叶粉末与溶剂（如乙醇、乙醚、水等）进行混合，再进行久煮、浸泡、蒸馏等操作，最后得到荷叶黄酮的溶液。

优点是设备简单、操作方便；缺点是生产周期长、消耗溶剂较多。

2. 超声波提取法：利用超声波的机械振荡和微流体剧烈对撞，破坏细胞壁，提高荷叶黄酮的释放和溶解度。

可以选择适当的溶剂和超声波功率，提高提取效率和品质。

优点是提取时间短、产率高、可在较低温度下进行；缺点是设备复杂、费用较高。

3. 微波辅助提取法：通过微波辐射加热提高荷叶黄酮的释放速率，维持溶剂在较高温度下的液态状态，并加速溶剂与目标物质之间的传质过程。

可选择适当的功率、辐射时间和溶剂体系，提高提取效率。

优点是提取速度快、产率高、操作简便；缺点是对设备要求较高。

4. 超临界流体提取法：将溶剂（如二氧化碳）在超临界状态下与荷叶粉末进行接触，通过调节温度和压力的参数来调控溶剂的溶解能力。

优点是提取效率高、无溶剂残留、产品纯度高；缺点是设备复杂、耗能较高。

综上所述，不同的提取方法各有优缺点，可根据实际需要选择适宜的方法。

在提取荷叶黄酮时，需要注意选择合适的溶剂和提取条件，控制提取时间和温度，以提高提取效率和产品品质。

此外，还可以通过进一步改进提取方法，如联合利用超声波、微波和超临界流体等，提高荷叶黄酮的提取效果。

荷叶中黄酮类化合物的浸提、分离及其抗氧化性研究荷叶是一种药食两用的天然植物原料。

植物黄酮类化合物具有抗氧化、抗衰老、治疗心血管疾病、降血脂等保健功能。

本文主要对荷叶中黄酮类化合物的提取、分离、纯化进行研究,同时对荷叶乙醇提取物的抗氧化性进行考察鉴定。

论文取得如下主要结果: 1.使用三种方法(自然凉干、烘干、低温冻干)对新鲜荷叶进行干燥,结果表明:低温冻干后的荷叶颜色浅绿、味清香、口感纯正、荷叶中黄酮类化合物含量最高,烘干的荷叶效果(色香味和荷叶黄酮含量)次之,自然凉干的荷叶效果最差。

2.通过单因素试验对影响荷叶中黄酮类化合物提取效率的主要因素进行考察,得到荷叶中黄酮类化合物的最佳浸提工艺是:浸提温度80℃,料液比1:30,乙醇溶液浓度70%,浸提时间2h。

在最佳浸提条件下对荷叶浸提三次,荷叶中黄酮类化和物可以基本溶出,荷叶黄酮含量达到36.19mg/g。

3.分别用三种方法分离纯化荷叶乙醇提取物,高速逆流色谱(HSCCC)分离效果最好,Sephdex LH-20柱层析分离效果次之,硅胶柱层析分离效果最差。

结合TLC 分析、颜色反应鉴定可知,荷叶乙醇提取物经HSCCC分离纯化,可以得到纯度很高的黄酮类化合物。

4.通过对荷叶乙醇提取物的定性鉴定,得出荷叶乙醇提取物中主要含有黄酮类化合物,生物碱含量很少,说明荷叶乙醇提取物中的主要功能成分(抗氧化)是黄酮类化合物。

荷叶乙醇提取物具有较强的抗氧化生理活性,为荷叶的保健功效提供理论基础。

5.对荷叶乙醇提取物进行抗氧化研究,试验表明荷叶乙醇提取物表现较强的抗氧化性。

可以显著地消除体外过氧化氢自由基;可以明显地延缓油脂的自动氧化过程;而且随着荷叶提取物浓度的增加,提取物的抗氧化性会随之增强。

超声波辅助法提取植物黄酮的工艺研究作者：常波来源：《价值工程》2018年第33期摘要：为探究植物总黄酮的提取方法，采用热水浸提法、索氏提取法、微波提取法和超声波提取法分别提取了荷叶中总黄酮含量，并优化了超声波辅助法提取甜荞、苦荞、玉米须、荷叶等样品中总黄酮的最佳料液比、提取液体积分数、超声时间、超声温度及超声功率等工艺条件。

结果表明：超声波辅助提取法所得植物总黄酮的得率最高，且操作简单；所提取样品总黄酮得率顺序为：荷叶>苦荞>玉米须>甜荞，其中荷叶中总黄酮得率为0.6677%。

Abstract： In order to explore the extraction method of total flavonoids from plants， the total flavonoids in lotus leaves were extracted by hot water extraction， Soxhlet extraction， microwave extraction and ultrasonic extraction， and the optimum ratio of material to liquid， number of extracted liquids， ultrasonic time， ultrasonic temperature and ultrasonic power of ultrasonic assisted extraction of total flavonoids from sweet glutinous rice， bitter glutinous rice， corn mustard， lotus leaf and other samples were optimized. The results showed that the yield of total flavonoids from the ultrasonic assisted extraction method was the highest and the operation was simple. The order of total flavonoids in the extracted samples was： lotus leaf > bitter glutinous rice > corn mustard > sweet glutinous rice， and the yield of total flavonoids in lotus leaves is 0.6677%.关键词：超声波；甜荞；玉米须；荷叶；苦荞；黄酮Key words： ultrasound；sweet glutinous rice；corn mustard；lotus leaf；bitter glutinous rice；flavonoids中图分类号：TS209 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2018）33-0242-040 引言黄酮类物质广泛存在于蔬菜、药用植物及农产品加工下脚料中的一大类化合物，是植物在生长过程中产生的次级代谢产物。

秋季荷花花瓣中黄酮类化合物的分离鉴定及其抗氧化活性研究随着人们对健康需求的日益增强，植物中的生物活性成分成为人们研究的热点。

荷花作为一种传统的中药材，含有多种生物活性成分，其中黄酮类化合物作为一类具有广泛生物活性的天然化合物，引起了研究者的极大兴趣。

本文以秋季荷花花瓣为原料，采用超声辅助提取法和硅胶柱层析法进行分离纯化，通过紫外光谱、红外光谱、质谱分析等多种手段对黄酮类化合物进行鉴定，并对其抗氧化活性进行研究。

一、实验方法1.荷花花瓣提取物的制备将秋季采集的荷花花瓣粉末加入50% 乙醇中，按照1:10的比例超声提取30min，过滤取提取液，浓缩干燥得到荷花花瓣提取物。

2.黄酮类化合物的分离纯化将荷花花瓣提取物溶于少量的乙醇和水混合溶液中，进行硅胶柱层析分离纯化，收集不同色带的分离物。

3.化合物的鉴定通过紫外光谱、红外光谱、质谱分析等手段对分离得到的化合物进行鉴定。

4.抗氧化活性研究采用DPPH自由基清除实验和总抗氧化力实验对提取物和分离纯化后的化合物进行抗氧化活性研究。

二、实验结果1.荷花花瓣提取物的总黄酮含量采用铝离子染色比色法测定荷花花瓣提取物的总黄酮含量，结果为25.3mg/g。

2.黄酮类化合物的分离纯化通过硅胶柱层析法对荷花花瓣提取物进行分离纯化，分离得到六种黄酮类化合物。

3.化合物的鉴定通过紫外光谱、红外光谱、质谱分析等手段对分离得到的化合物进行鉴定。

其中，4‘-羟基异黄酮、木蝴蝶素、芹菜素和山奈酚A四种化合物的结构鉴定结果如图1所示。

4.抗氧化活性研究采用DPPH自由基清除实验和总抗氧化力实验对提取物和分离纯化后的化合物进行抗氧化活性研究。

结果表明，荷花花瓣提取物和分离纯化后的化合物均具有明显的抗氧化活性，其中以山奈酚A和芹菜素的抗氧化活性最强（图2）。

三、实验结论本实验以秋季荷花花瓣为原料，采用超声辅助提取法和硅胶柱层析法进行分离纯化，成功分离得到了多种黄酮类化合物。

通过紫外光谱、红外光谱、质谱分析等多种手段对其进行鉴定，证实了这些化合物的存在。

第22卷第3期2007年9月安　徽　工　程　科　技　学　院　学　报Journal of Anhui University of T echnology and Science Vol.22.No.3Sep.,2007收稿日期:2007-03-12　基金项目:安徽省教育厅自然科学基金资助项目(2003kj037)作者简介:王岚岚(1965—),女,安徽芜湖人,工程师.文章编号:1672-2477(2007)03-0024-04荷叶黄酮类物质的提取及其抗氧化活性的研究王岚岚,蔡为荣,胡　勇(安徽工程科技学院生物化学工程系,安徽芜湖　241000)摘要:研究了荷叶中黄酮类物质的提取及其对猪油的抗氧化作用.首先,采用单因素实验法确定了从荷叶中提取黄酮类化合物的最佳五因素五水平的选择实验.得出最佳提取条件:以50%的乙醇作提取剂,按1∶25的固液比,温度为40℃,p H 值为5.15,提取时间为90min 。

其次,研究了提取物对猪油的抗氧化作用.将提取液以不同比例添加到猪油中,恒温并定期用Na 2S 2O3-I 2滴定法测油样的过氧化值,结果表明:荷叶中黄酮类化合物对猪油有明显的抗氧化作用,且黄酮类化合物的添加量在实验剂量范围内与其抗氧化性呈正相关;当添加量为0.5%时,荷叶中黄酮类化合物的抗氧化性能可与B HT 相媲美;同时还研究了荷叶提取物与Vc 的协同抗氧化作用,结果表明荷叶黄酮类化合物与Vc 有较好的增效协同效应。

关　键　词:荷叶;提取;黄酮;抗氧化活性中图分类号:S645 文献标识码:A荷叶系睡莲科属植物,生长在水、池塘或湖泊中,在我国南北方均有栽培.《本草纲目》载:“荷时服之,令人瘦劣,单服可以消阳水浮之气”.荷叶除了含有普通植物所共有的碳水化合物、脂类、蛋白质、单宁等常规化学成分外,还含有具有明显生物活性和生理功能的黄酮化合物和生物碱这两大类物质.现代医学研究表明,荷叶黄酮具有抗氧化、抗衰老、清热、降血脂、降胆固醇及治疗心脑血管疾病等药用保健功能[1～5],1991年11月中华人民共和国卫生部将荷叶列入第二批药食两用名单之中[6].有资料表明,荷叶的黄酮类化合物含量非常丰富[7],本文研究荷叶黄酮类化合物对油脂抗氧化活性作用,以便综合利用荷叶这一丰富资源.1　实验部分1.1　材料、试剂与仪器(1)材料:荷叶(购于安徽省芜湖市神山口药材店);猪油(自制).(2)试剂:亚硝酸钠、抗坏血酸、过氧化氢、硫酸亚铁、钼酸钠、氯仿、KI 、冰乙酸、AlCl 3、FeSO 4、Na 2SO 3、无水乙醇、NaO H 、三氯甲烷、乙醇、乙酸、硫酸锂、钨酸钠、硫代硫酸钠、碘化钾,芦丁(生化试剂,上海生化试剂二厂),丁基化羟基甲苯(上海益民食品厂).试剂均为分析纯.水为蒸馏水.(3)仪器:FC104电子天平(上海精科天平厂);酸度计(上海青浦沪西仪器厂);电热恒温培养箱(上海实验仪器总厂);离心机(中外合资深圳天南海化有限公司);数显恒温水浴锅H H -6(国华电器有限公司);721型分光光度计(上海精密仪器有限公司).1.2　实验方法(1)原料的选择与预处理.将购来的荷叶去梗后碎成片状,大小约为10mm ×5mm ,储存以备用.由于市售的植物油中多含有抗氧化剂,干扰检测,所以本实验选用自制的猪油为材料.按照我国《猪油卫生标准》规定,猪油的过氧化值≤16meq/kg.(2)荷叶黄酮的提取.影响荷叶黄酮类化合物浸提效果的因素主要有五个,即提取剂的浓度、固液比、提取p H 、时间和温度,为了进一步研究这五个因素对荷叶黄酮提取率的影响,本实验采用单因素实验法以提取的黄酮含量为指标来确定最佳提取条件.其因素水平见表1.准确称取荷叶碎片5份,每份20g ,分别置于250mL 圆底烧瓶中.分别加入一定浓度的乙醇,于恒温水浴锅内加热回流提取数小时,过滤将滤渣用50mL 同浓度的乙醇洗涤,再过滤,合并两次滤液,将滤液在4000r/min 条件下离心10min ,收集上层清液,定容于100mL 的容量瓶,放入冰箱中作为待测提取物备用.表1　因素水平表A (提取剂浓度)/%B (固液比)C (p H )D (时间)/minE (温度)/℃301∶10 4.036027501∶15 5.159040601∶20 6.8012060701∶257.7415080801∶308.50180100(3)荷叶提取物中黄酮类化合物含量的测定.荷叶黄酮的含量的测定方法用NaNO 2-Al (NO 3)3比色法[8],制作以芦丁为黄酮的标准曲线.图1　芦丁总黄酮的标准曲线精称芦丁0.0175g ,用30%乙醇溶解定容至50mL ,备用.取7支具塞试管,分别加入0mL 、0.5mL 、1.0mL 、1.5mL 、2.0mL 、2.5mL 、3.0mL 芦丁标液,用30%乙醇补足体积至5mL ,混匀器混匀,各加入0.3mL 5%NaNO 2,混匀后静置5min ,加0.3mL 10%Al (NO 3)3,混匀后静置6min ,加入4mL 1mol/LNaO H ,再加入0.4mL 30%乙醇使总体积为10mL ,混匀后静置10min ,在波长510nm 处测定吸光值,制作标准曲线(见图1).测定荷叶提取液的光密度值,从标准曲线上查出荷叶提取液的黄酮类化合物含量[9].(4)荷叶黄酮抗氧化活性的测定.称取3份不等量荷叶提取液样品,用少许60%的乙醇溶解后加入3只装有50g 猪油的100mL 烧杯中搅拌均匀,同时做一份空白样作为对照.将所有试样放入(50±0.5)℃恒温培养箱中,各烧杯加盖一表面皿,每隔一定时间搅拌一次,并交换位置以确保环境条件相同.每隔几天取样测定猪油的过氧化值,并以此来表示猪油的氧化速度,进而衡算提取物的抗氧化性[10].精确称取3g 混匀样品(必要时过滤),置于碘量瓶中加入50mL 乙醇-异辛烷混合液,溶解样品,加入0.5mL 饱和碘化钾溶液,立即加塞摇匀1min ,避光静置反应5min.取出加水30mL ,以0.01mol/L 硫代硫酸钠标准溶液滴定至淡黄色时,加入0.5mL 淀粉指示剂,继续滴定至蓝色消失为终点,同时做一空白实验,按照下式计算:POV =[C ×(V 1-V 0)×1000]/m .式中:V 1为试样用去的Na 2S 2O 3溶液体积;V 0为空白试验用去的Na 2S 2O 3溶液体积;C 为Na 2S 2O 3溶液的浓度;m 为试样的质量.2　结果与讨论2.1　荷叶黄酮最佳提取工艺的确定(1)乙醇质量分数对荷叶黄酮提取率的影响.乙醇溶解性能好,穿透细胞能力强,随着乙醇质量分数的增加提取率增大.当乙醇质量分数达到一定程度时,黄酮类物质溶解度最大,即提取率最高.而后,乙醇质量分数再增加,黄酮类物质的溶解度减小,同时,一些醇溶性杂质,亲脂性强的成分溶出量增加,这些成分与黄酮类物质竞争同乙醇-水分子结合充分导致黄酮类物质的提取率下降.由表2可知,乙醇的最适合质量分数为50%,进一步优化的范围40%～60%.表2　乙醇质量分数对荷叶黄酮提取率的影响乙醇质量分数/%黄酮含量/(g ・100mL -1)乙醇质量分数/%黄酮含量/(g ・100mL -1)300.0168600.0178400.0224700.0152500.0243(2)固液比对荷叶黄酮提取率的影响.固液比实际上是溶剂用量的多少.一般来说,溶剂用量越大,提取率越大,但是,过大的固液比会造成溶剂和能源的浪费并给后工序的浓缩带来困难.当固液比达到一定程度时,再增大固液比,提取率趋于稳定,即一定比例的溶剂已将有效成分基本溶出完全.由表3可得,最适料液比为1∶25.・52・第3期王岚岚,等:荷叶黄酮类物质的提取及其抗氧化活性的研究表3　固液比对荷叶黄酮类物质提取率的影响固液比黄酮含量/(g ・100mL -1)固液比黄酮含量/(g ・100mL -1)1∶100.00931∶250.01301∶150.01031∶300.01271∶200.0123(3)时间对荷叶黄酮提取率的影响由实验结果可知,黄酮类物质提取率随时间不同而不同,当提取达到一定时间时,荷叶内外有效成分浓度达到平衡,提取率最高.但随着时间的进一步延长其提取率有所下降,因为黄酮类物质在溶液中长时间受热可能使部分结构被破坏.但是,如果提取时间过短,黄酮类物质则来不及从荷叶中溶出,影响提取率.由表4可知,时间对荷叶黄酮类化合物提取率的影响并不明显,最适时间为60～90min.表4　时间对荷叶黄酮提取率的影响时间/min黄酮含量/(g ・100mL -1)时间/min 黄酮含量/(g ・100mL -1)600.02611500.0230900.02781800.02211200.0252(4)酸碱度(p H )对荷叶黄酮提取率的影响.用缓冲液配制p H 为4.03、5.15、6.8、7.74、8.50的60%的乙醇溶液浸提荷叶,浸提过程中用2mol/L HCl 和2mol/L 的NaO H 每隔30min 调节一次p H ,使其保持不变,2h 后取出趁热过滤,滤渣用50mL 60%的乙醇洗涤再过滤,合并2次滤液再抽滤.在510nm 处测定其吸光值,数据见表5.由试验结果可看出,酸碱度对荷叶黄酮的提取率影响较大,在本实验中,p H 为5.15时在510nm 处有最大吸收峰,由此我们可以进一步优化p H 的范围为5.0～6.0.表5　酸碱度(p H )对荷叶黄酮提取率的影响酸碱度/p H黄酮含量/(g ・100mL -1)酸碱度/p H黄酮含量/(g ・100mL -1)4.030.03137.740.02845.150.03478.500.02676.800.0316(5)温度对荷叶黄酮提取率的影响.一般来说,冷提杂质少,热提效率高,速度快.温度升高,分子运动速度加快,渗透扩散,溶解速度加快,同时,高温可以引起细胞膜结构的变化使黄酮类物质由荷叶的外层细胞转移到溶剂中,因此,随着提取温度的升高,黄酮类物质的提取率升高.但是,高温使黄酮类物质的结构氧化破坏导致其提取率下降.温度对荷叶黄酮提取率的影响见表6.表6　温度对荷叶黄酮提取率的影响温度/℃黄酮含量/(g ・100mL -1)温度/℃黄酮含量/(g ・100mL -1)300.0234800.0177400.02711000.0145600.02582.2　荷叶黄酮抗氧化活性的测定(1)不同浓度荷叶黄酮与B H T (0.02%)对猪油的抗氧化作用的比较.可以看出,所有实验组的POV值均低于空白对照组的值,证明荷叶中黄酮类化合物对猪油有一定的抗氧化作用;随着提取液浓度的增加,其对猪油的抗氧化作用增强,两者在实验剂量范围内呈正相关,而且,随着保藏时间的延长,抗氧化效果更加显著.与B H T 的最大限度添加量0.02%为对照,对猪油进行了抗氧化性实验,实验结果见表7.表7　不同浓度提取物与B H T 的抗氧化性能的比较试样POV 值/(meq ・kg -1)0d 2d 5d 11d 13d 空白2.95 5.5312.1315.1620.050.05%提取液 2.95 4.5310.2413.6818.060.2%提取液 2.95 3.7610.0612.5715.470.5%提取液 2.95 3.028.819.9314.020.02%B H T2.953.219.3512.0915.06由表7所示结果看,当黄酮类化合物的添加量为0.5%时,其抗氧化作用可以与人工合成抗氧化剂B H T 相媲美,这显示了荷叶中黄酮类化合物在食用油脂抗氧化方面的巨大潜力.・62・安　徽　工　程　科　技　学　院　学　报2007年(2)荷叶黄酮与Vc (1∶1)的协同抗氧化作用.我们以抗坏血酸为增效剂,与实验提取物混合使用,对猪油进行抗氧化实验,以考察Vc 对荷叶中黄酮的增效作用,实验结果见表8.表8　提取物与增效剂混合的抗氧化性能的比较(POV 值/meq/kg )试样POV 值/(meq ・kg -1)0d 2d 5d 11d 13d 空白 2.95 5.5312.1315.1620.050.05%提取液2.95 4.5310.2413.6818.060.025%提取液+0.025%Vc2.954.646.238.2910.67由表8所示实验结果得出,0.025%黄酮类+0.025%Vc 的抗氧化作用比单独用0.05%黄酮类对猪油的抗氧化作用强,荷叶中黄酮类化合物与Vc 结合使用对猪油有较好的协同抗氧化作用.3　结　论(1)通过以上单因素实验,得出最优化提取工艺条件为:乙醇浓度50%,固液比为1∶25,p H 值为5.15,时间为90min ,温度为40℃;(2)荷叶中黄酮类化合物对猪油具有一定的抗氧化作用,且随着提取液浓度的增加,其对猪油的抗氧化作用逐渐增强,在实验剂量范围内呈正相关.添加0.5%黄酮类化合物的抗氧化效果可与0.02%的人工合成抗氧化剂B H T 相媲美;(3)荷叶中黄酮类化合物与Vc 结合使用对猪油有较好的协同抗氧化作用.参考文献:[1]　蔡为荣.微波提取荷叶黄酮及其清除羟基自由基的研究[J ].食品科学,2004,25(9):1122114.[2]　胡迎芬,孟洁,胡博路,等.厚扑提取物对猪油抗氧化作用的研究[J ].食品科学,2000(7):29231.[3]　张德权,台建祥,付勤,等.生物类黄酮的研究及应用状况[J ].食品与发酵工业,1999(6):52257.[4]　纪丽莲.荷叶中抑菌物质的提取及其抑菌活性的研究[J ].食品科学,1998(8):64266.[5]　杜力军,孙虹,李敏,等.荷叶大豆及其调血脂活性部位的研究[J ].中草药,2000,31(7):5262528.[6]　范继善.实用食品添加剂[M ].天津:天津科学技术出版社,1993:3222333.[7]　黄阿根,周兰香,谢凯舟,等.荷叶黄酮的化学吸光法及高效液相色谱法分析研究[J ].扬州大学学报:自然科学版,2000,3(4):46251.[8]　杨洋.生姜黄酮的提取及其抗氧化活性的研究[J ].食品科学,2002,23(4):45250.[9]　秦红敏,张长铠.竹笋的菌丝培养及其抗菌活性的初步研究[J ].微生物学通报.1999,26(6):3932395.[10]黄涛,张治民.有机化学实验[M ].北京:高等教育出版社,1998.[11]宁正祥.食品成分分析手册[M ].北京:中国轻工业出版社,1998.Extraction and antioxidative activity of bioflavonoid in lotus leavesWAN G Lan 2lan ,CA I Wei 2rong ,Hu Y ong(Dept.of Bioc.&Engn.,Anhui University of Technology and Science ,Wuhu 241000,China )Abstract :The ext raction of bioflavonoid f rom lot us leaves was st udied and t he antioxidant activity of t he extract towards lard was evaluated.First ,t he ext ract conditions were optimized by t he single factor ex 2periment ,such as ext raction solvent density ,ratio of solid to liquid of ext raction ,temperat ure of ext rac 2tion ,p H of ext ractio n and time of ext raction.The optimum conditions of operation were determined as follows :50%alcohol ,solid/liquid ratio 1∶25,extracting for 1.5hours under temperat ure 40℃and p H 5.15.Seco ndly ,t he antioxidant activity of t he ext ract towards lard was assayed by Na 2S 2O 3-I 2tit ration Met hod.The result s showed t hat t he lot us leaves of bioflavonoid was directly p roportional to t he antio x 2idation.When t he concent ration of flavones in lard was 0.5%,t he antioxidative effect was as good as B H T.Meanwhile ,when ascorbic acid was used toget her wit h bioflavonoid ,ascorbic acid shows st ronger synergistic antioxidative activities wit h Lot us leaves bioflavonoid.Key words :Lot us leaves ;Ext raction ;Bioflavonoid ;Antioxidative Activity・72・第3期王岚岚,等:荷叶黄酮类物质的提取及其抗氧化活性的研究。

荷叶总黄酮的提取工艺研究
薛晓丽
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2009(037)012
【摘要】[目的]为荷叶的大规模开发利用提供技术保证.[方法]采用超声波辅助萃取法对荷叶总黄酮进行提取,并用分光光度法测定其含量,通过单因素及正交试验确定最佳提取工艺.[结果]当乙醇浓度达到60%时,总黄酮收率最大;液料比在10∶1～30∶1时,黄酮的收率随液料比的增大而增加较快,当液料比大于40∶1后,黄酮收率趋于恒定;当作用时间为35 min时,黄酮收率最大,但此时与30 min相比,仅略微增加;提取时适宜的温度应为40 ℃;影响荷叶总黄酮收率的主次因素顺序为乙醇浓度＞超声时间＞液料比＞超声温度.[结论]荷叶总黄酮最佳提取工艺:将荷叶干粉按35∶1的液料比加入浓度60%乙醇水溶液,浸泡24 h,在超声波清洗槽中超声提取35 min,超声温度35 ℃.在该条件下,荷叶总黄酮收率为13.68%.
【总页数】3页(P5500-5501,5503)
【作者】薛晓丽
【作者单位】吉林农业科技学院实验管理中心,吉林吉林,132101
【正文语种】中文
【中图分类】Q946.91
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2.醇法提取荷叶中总黄酮的工艺研究 [J], 何莉萍;何瑜萍
3.机械化学法提取荷叶总黄酮的工艺研究 [J], 高梦祥;郭珊珊
4.荷叶总黄酮的酶法提取工艺研究 [J], 师艳秋;尹春光;王晓强;彭浩;姜洁
5.酶法辅助回流提取荷叶中荷叶碱的工艺研究 [J], 宁娜;韩建军;胡宇莉;邹宗尧;郁建生
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2023-11-15CATALOGUE 目录•引言•荷叶总黄酮提取工艺概述•荷叶总黄酮提取工艺优化•荷叶总黄酮提取工艺验证•结论与展望01引言研究背景研究目的研究意义研究目的和意义02荷叶总黄酮提取工艺概述荷叶总黄酮的化学结构与性质荷叶总黄酮是一种复杂的天然化合物，主要成分为黄酮类化合物，如儿茶素、槲皮素等。

荷叶总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

荷叶总黄酮的化学结构决定其具有水溶性和吸光性等物理性质。

荷叶总黄酮的生物活性与药理作用030201原料处理溶剂提取分离纯化工艺优化荷叶总黄酮的提取工艺流程03荷叶总黄酮提取工艺优化提取溶剂的选择与优化提取温度高温可以加速黄酮的溶解和提取，但过高的温度可能会破坏黄酮的化学结构。

提取时间提取时间也是影响提取效果的因素，过长或过短的提取时间都可能影响黄酮的提取效果。

提取温度与时间的确定提取工艺参数的优化与控制工艺流程荷叶总黄酮的提取工艺流程包括预处理、浸泡、提取、过滤、浓缩等步骤，每个步骤都可能影响最终的提取效果。

工艺参数控制在提取过程中，需要严格控制工艺参数，如温度、时间、搅拌速度等，以确保提取效果的一致性和稳定性。

04荷叶总黄酮提取工艺验证重复性验证重复性验证实验设计重复性验证数据分析稳定性验证稳定性验证实验设计稳定性验证数据分析提取工艺的实际应用验证实际应用验证为了确保提取工艺在实际应用中的可行性，需要将该工艺应用到实际生产中，并对产品进行质量检测和评估。

如果产品符合相关质量标准，说明该工艺具有实际应用价值。

要点一要点二实际应用验证实验设计为了确保实验结果的可靠性，需要采用随机化方法进行实验设计，如随机选取荷叶原料、随机选择实验操作者等。

同时，还需要对实验过程进行详细记录，包括原料称量、溶剂配制、提取时间等。

实际应用验证数据分析对实际应用过程中提取得到的荷叶总黄酮进行质量检测和评估，可以得出产品的各项质量指标，如纯度、产量等。

如果这些指标均符合要求，说明该提取工艺具有实际应用价值。

科技创新论文（设计）题目：关于荷叶黄酮提取工艺的研究目录摘要 (3)1.前言 (3)2.实验材料与方法 (4)2.1材料 (4)2.1.1实验材料 (4)2.1.2 实验试剂 (4)2.1.3 实验仪器 (4)2.2实验方法 (4)2.2.1 材料处理 (4)2.2.2 1%的硝酸铝溶液的配制 (4)2.2.3不同温度、时间下的荷叶提取物溶液的组合设计 (5)2.2.4荷叶提取物溶液与硝酸铝进行显色反应 (6)2.2.5测试荷叶提取物溶液的分光度值 (6)2.2.6大量提取荷叶中的黄酮成分 (6)2.2.7黄酮的保存 (6)2.2.8高压灭菌.............................................. 错误！未定义书签。

3、实验结果与分析 (6)3.1确定提取荷叶中黄酮的最佳温度及时间 (6)3.2分析提取荷叶中黄酮成分的方法 (6)4.讨论 (7)5.参考文献 (7)关于荷叶黄酮提取工艺的研究摘要：分析了荷叶中活性成分及其生理功能，并对荷叶中的黄酮进行提取。

本实验通过热水提取法来提取荷叶中的黄酮，设置了75。

C、80。

C、85。

C三个温度梯度及1h、1.5h、2h的时间梯度，用显色反应和测试荷叶提取物的吸光度值来确定提取黄酮的最佳温度及时间。

通过实际实验操作，得出提取荷叶黄酮的最佳温度为80。

C，最佳时间为2h。

关键词：荷叶黄酮；提取；最佳温度；最佳时间Abstract: T h i s a r t i c l e a n a l y z e d t h e a c t i v e c om p o n e n t s a n d p h y s i o l o g i c a l f u n c t i o n s o f L o t u s l e a and collect the Flavo of Lotus led . This experiment through the hotwater extraction method to extract the lotus leaf flavonoids, set up three temperature-75。

荷叶总黄酮提取工艺研究作者：游林红揭晶杨明利来源：《现代农业科技》2014年第06期摘要以荷叶为原料，采用乙醇水浴浸提对其中总黄酮的提取工艺进行了研究。

通过单因素试验和正交试验，确定出各因素对总黄酮得率的影响顺序为：B（料液比）>D（乙醇浓度）>A（提取温度）>C（提取时间），从而得到乙醇提取荷叶总黄酮的最佳工艺条件为：提取时间90 min、乙醇浓度80%、料液比1∶40（g∶mL）、提取温度40 ℃。

正交试验表明，重现性和稳定性试验与正交试验所得的结果一致。

该研究为荷叶总黄酮的开发利用提供了新的方法与依据，具有很重要的现实意义。

关键词荷叶；总黄酮；提取工艺中图分类号 R284.2 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2014）06-0097-02Study on the Extraction Technology of Flavonoids from Lotus LeavesYOU Lin-hong JIE Jing * YANG Ming-li CAI You-sheng（Department of Pharmaceutical Engineering，Wuhan Bioengineering Institute，Wuhan Hubei 430415）Abstract Taking lotus leaf as raw material，using ethanol water bath extraction on the extraction process of total flavonoids was studied. Through single factor test and orthogonal test，the various factors on the yield of total flavonoids of order：B（the ratio of material to liquid）>D（ethanol concentration）>A（extraction temperature）>C（extraction time）.In order to get the best technological conditions of extracting the total flavonoids from lotus leaf ethanol as：extraction time was 90 min，ethanol concentration was 80%，ratio of solid-liquid was 1∶40（g∶mL），extraction temperature was 40 ℃.Orthogonal test results showed that the reproducibility and stability test were the same as orthogonal test results.This study provided a new method and basis for the development and utilization of the total flavonoids from lotus leaf，and it′s had very important practical significance.Key words lotus leaves；total flavonoids；extraction process荷叶（Folium Nelumbinis）为睡莲科植物莲（Nelumbo nuciferea Gaertn）的干燥叶，为我国民间常用中药材。