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课题1 微生物的实验室培养-人教版选修1 生物技术实践教案教学目标•了解微生物实验室培养的基本原理和方法•学习操作无菌实验的技能•熟悉使用化学试剂和实验器材的方法和注意事项教学重点学生能够熟练地进行微生物实验室培养和无菌实验操作，掌握实验过程的基本方法和注意事项。
教学难点如何正确进行微生物实验室培养和无菌实验，保证实验的准确性和安全性。
教学过程一、实验目的和原理1.实验目的：了解微生物实验室培养的基本原理和方法，掌握无菌实验操作技巧，学会使用化学试剂和实验器材。
2.实验原理：微生物实验室培养是把微生物放在适宜的环境中，使其得到营养、生长和繁殖的过程，一般有两种方法：液体培养和固体培养。
无菌实验是指在无微生物干扰和污染的条件下进行实验操作，通常需要采用灭菌和消毒等技术。
二、实验器材和试剂•实验器材：培养皿、试管、移液管、显微镜等。
•试剂：琼脂、磷酸盐缓冲液、蒸馏水、碘酒、70%酒精等。
三、实验步骤1.实验前准备：清洗试管、培养皿等实验器具，准备所需试剂和培养物。
2.培养基制备：称取适量的琼脂和磷酸盐缓冲液，加入蒸馏水，加热至琼脂完全溶解，然后进行灭菌消毒。
3.杂菌检测：将准备好的培养基倒在培养皿上，放置在恒温箱中，观察是否有杂菌的生长。
4.微生物接种：采用无菌技术，将培养物移植至培养基表面和内部，标明不同的培养条件和试验目的。
5.培养条件：培养箱中的温度、湿度和光照条件要根据不同的微生物种类进行调节和控制。
6.观察和记录：观察微生物在培养基上的生长情况和形态特征，进行记录和统计分析。
7.鉴定和鉴别：采用显微镜等检测技术，进行微生物的鉴定和鉴别，以确定其种类和特性。
四、实验注意事项1.操作过程中要注意使用无菌技术，避免微生物污染。
2.实验室要保持干净卫生，经常清洗和消毒实验器材和环境。
3.对于具有毒性的试剂，要注意正确配制和储存，避免误用和事故发生。
4.操作结束后，要清洗和消毒实验器材和实验环境，保证实验室的安全和卫生。
人教版高二生物选修一《课题1微生物的实验室培养》说课稿一、引言大家好，我是XX，今天我将为大家带来一堂关于《微生物的实验室培养》的生物选修课。
本课是高二学生生物选修课中的第一课题，主要介绍微生物在实验室中的培养方法和技术。
通过本课，我们将深入了解微生物的培养过程和相关实验操作，培养学生的动手实践能力和科学思维。
二、教学目标知识目标•了解微生物的实验室培养的意义和目的；•掌握微生物的实验室培养的基本方法；•了解常见的微生物培养基和培养条件。
能力目标•能够正确使用实验仪器和操作技术，完成微生物培养实验；•能够观察和记录微生物的形态和生长情况；•能够分析实验结果并进行科学推理。
情感目标•培养学生良好的科学态度，尊重生命，注重实验室安全；•增强学生对生物科学的兴趣和学习动力；•培养学生的团队合作和沟通能力。
三、教学内容本课的教学内容包括以下几个方面：1. 微生物培养的意义和目的介绍微生物培养的重要性，以及为什么需要进行实验室培养。
通过培养微生物，可以研究其生长情况、形态特征以及代谢过程，有助于深入了解微生物的生物学特性。
2. 微生物的实验室培养方法•准备培养基：介绍常见的培养基种类和配方，包括营养琼脂、肉葡萄糖琼脂等。
指导学生正确配制和消毒培养基。
•转接培养物：教授微生物的无菌转接方法，包括灭菌操作和转接技巧。
•培养条件控制：讲解微生物培养过程中的温度、湿度、氧气、光照等条件控制的重要性，以及如何正确控制这些条件。
3. 实验操作演示和实践通过实验操作演示和实践，让学生亲自进行微生物的实验室培养，以下是实验步骤的简要介绍： - 实验材料准备：介绍实验需要的培养器具和试剂。
- 培养基制备：指导学生根据实验配方制备培养基。
- 灭菌操作：讲解灭菌操作的目的和方法，要求学生正确使用高温灭菌器进行培养基消毒。
-无菌转接：演示无菌转接技术，要求学生熟练掌握转接方法。
- 培养条件控制：指导学生正确调节温度、湿度和光照等条件。
专题2课题1：微生物的实验室培养【课程标准】了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。
【课题重点】无菌技术的操作【课题难点】无菌技术的操作【基础知识】1．培养基是指-------------------------------------------------------------------------------。
据物理性质将其分为---------------------和----------------------、-----------------------。
据用途分为------------和----------------------。
2．培养基的营养成分包括------------、------------、------------、------------、------------。
3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加------------、培养霉菌时需将培养基PH调至------------、培养细菌时需将PH调至------------、培养厌氧微生物则需提供------------条件。
4．自养型微生物常用的碳源是------------、------------，氮源是------------、------------。
异养型微生物常用的碳源是------------、------------，氮源是------------、------------。
5．消毒是指---------------------------------------------------------------------------------。
灭菌是指------------------------------------------------------。
6．实验室常用的消毒方法有------------------、------------------、------------------。
微生物的实验室培养“微生物的实验室培养”是研究和应用微生物的前提，其中包含的基本操作技术有培养基的制备、无菌技术操作以及纯化培养微生物，是生物科学、医学等领域最基本的实验技术，也是高中生必须掌握的实验操作技术。
因此，“微生物的实验室培养”是高中选修教材中一个非常重要的内容，本文从实验原理、实验操作和实验结果评价等方面提出相应的教学建议。
一、教材分析“微生物的实验室培养”是高中生物选修Ⅰ专题2“微生物的培养与应用”中的第1个课题，旨在为学生实践其他的关于微生物技术的实验做好铺垫，又由于本节内容位于传统的发酵技术之后，所以它是在传统的微生物实践技术的基础上发展起来的，同时又为微生物的应用奠定了基础，因此，可用“承前启后”这个词语来概括本课题的地位。
依据课程标准及教学要求确立本课题教学目标如下：（1）知识目标：列举培养基的种类，说明培养基配方及作用；概述无菌技术。
（2）能力目标：尝试培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
熟练规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。
（3）情感态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培养基，培养纯化大肠杆菌的方法；参与实验过程，体验实验操作领悟实验原理，交流实验体会；形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神。
3.教学重难点：无菌技术的操作由于微生物在自然界分布广泛，在实验室培养微生物除了要为微生物提供合适的营养和环境条件外，还需要确保其他微生物无法混入。
因此，实验时针对培养基、操作者、用于培养的器皿、接种工具等使用不同的方法进行消毒灭菌处理。
在“无菌”的条件下接种和培养，获得纯净培养物，才能成功培养微生物。
可见无菌技术是微生物培养过程的关键。
教学中可联系医疗和生活实际深入理解无菌技术。
二、学情分析授课对象为高二理科普通班的学生，在学习完必修内容之后，已对生物知识有足够的理解和掌握，并对于微生物的认知已达到相关要求。
在学习完选修Ⅰ专题1“传统发酵技术的应用”之后，对于微生物的许多生物学特征等掌握更加透彻，也具有相应的逻辑思维以及解决问题的能力，对于本节课内容绝大部分学生可以掌握很透彻。
精选教课教课方案设计| Excellent teaching plan教师学科教课方案[ 20–20学年度第__学期]任教课科： _____________任教年级： _____________任教老师： _____________xx市实验学校精选教课教课方案设计| Excellent teaching plan微生物的实验室培育四川省中江中学校叶秀琼“微生物的实验室培育”是选修 1 的专题 2“微生物的培育与应用”中的第 1 个课题，它是在传统发酵技术的应用的基础上，进一步全面深入学习微生物培育的基础知识和基本操作技术，同时也为微生物应用确定基础，拥有承前启后的重要作用。
在生物技术模块中是学生应当选择的一个重要的操作实验，但因为该课题实验难度很大，多半中学实验室实验器械不足，实验经费紧张，特别是该实验拥有必定风险性（微生物自己就是危险生物），多半学校在选择实验操作课题时都放弃该专题中这个基础实验。
为了使学生更好认识与我们自己关系极为亲密的微生物培育与应用的知识和技术，下边就联合自己的教课实质说说对本课题的教课方案。
1教课目的确定依照课程标准中内容标准“进行微生物的分别和培育”和活动建议“用大肠杆菌为资料进行平面培育．分别菌落” ，联合人教社选修 1 教材和本校实验室条件，确定本课题教课目的以下：知识目标：列举培育基的种类等基础知识，说明培育基配方及作用；概括无菌技术。
能力目标：试试培育基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术。
娴熟规范地进行无菌操作，成功地培育微生物。
感情态度价值观方面：体验制作牛肉膏蛋白胨培育基，培育纯化大肠杆菌的方法；参加实验过程，体验实验操作意会实验原理，沟通实验领会；形成勇于实践、谨慎务实的科学态度和科学精神。
教课重难点：无菌技术的操作。
因为微生物在自然界散布宽泛，在实验室培育微生物除了要为微生物供给适合的营养和环境条件外，还需要保证其余微生物没法混入。
所以，实验时针对培育基、操作者、用于培育的器皿、接种工具等使用不一样的方法进行消毒灭菌办理。
《微生物的实验室培养》教学设计方案（第一课时）一、教学目标1. 知识与技能：理解微生物的观点，掌握实验室培养微生物的基本步骤和方法。
2. 过程与方法：通过实验操作，培养观察、分析和解决问题的能力。
3. 情感态度与价值观：培养对生物科学的兴趣，树立科学精神。
二、教学重难点1. 教学重点：实验室培养微生物的基本步骤，如接种、培养、观察等。
2. 教学难点：微生物的观察和识别，以及实验过程中的安全操作。
三、教学准备1. 实验器械：无菌实验室、培养皿、接种针、牛肉膏培养基等。
2. 实验试剂：牛肉膏培养基的制备，以及无菌水的制备。
3. 实验服装：实验服、口罩、橡胶手套等。
4. 参考教材：高中生物教材及实验室培养微生物的参考书籍。
四、教学过程：本节课是《微生物的实验室培养》的第一课时，教学过程将包括理论教学和实践教学两个部分。
1. 理论教学（1）导入：起首，我会简要介绍微生物的基本观点和其在生物科学中的重要性，让学生对微生物有一个初步的了解。
（2）微生物的分类和特点：进一步讲解不同类型的微生物，包括细菌、真菌、病毒等，以及它们的特点和分类依据。
（3）实验室培养微生物的基本步骤：详细介绍实验室培养微生物的基本步骤，包括样品的采集、处理、接种、培养、观察等。
（4）实验室培养微生物的环境条件：讲解影响微生物发展和繁殖的环境因素，如温度、湿度、光照等。
（5）微生物实验室的安全与防护：强调微生物实验室的安全与防护的重要性，介绍实验室的消毒、个人防护等措施。
2. 实践教学（1）实验目标：让学生明确实验的目标，了解实验的意义。
（2）实验材料和设备：介绍实验所需的各种材料和设备，如试管、培养皿、接种针、恒温箱等。
（3）实验步骤：详细讲解实验的步骤和方法，确保学生能够正确操作。
（4）实验结果观察与记录：引导学生观察实验结果，记录实验数据和现象，加深对理论知识的理解。
（5）实验总结：分析实验结果，总结实验成功或失败的原因，进一步稳固理论知识。
2016 高二生物下册微生物的实验室培养说课稿
说课是教学改革中涌现出来的新生事物，是进行教学研究、教学交流和教学探讨的一种新的教学研究形式，为大家推荐了高二生物下册微生物的实验室培养说课稿，请大家仔细阅读，希望你喜欢。
★教材分析
1.教材内容分析
本节是普通高中生物选修1 生物技术实践专题2《微生物的培养与应用》
课题1《微生物的实验室培养》的内容。
是学生在学习了传统发酵技术的应用，了解到微生物在我们生活中有广泛应用之后，将要学习的一个内容。
本专题要求学生能够掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识;掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和倒平板操作、平板划线法、平板划线操作和稀释涂布平板法等基本操作技术;并可以运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物的分离与培养等实际问题。
在这个专题的3 个课题中，《课题1 微生物的实验室培养》介绍了最基本的微生物技术，是开展其他两个课题的基础。
学生只有掌握了课题1 的内容，才能完成本专题中其他课题的学习。
★学情分析
高二的学生，在之前的学习中并没有学习微生物的基础知识，因此，已知。
专题2 微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养【学习目标】1、知道培养基的种类、营养要素及配制原则。
(重点)2、掌握消毒、灭菌的原理和方法。
(重点)3、学会配制培养基和纯化大肠杆菌的方法。
(重、难点)一、培养基微生物的培养离不开培养基，不同的微生物需要的培养基也有所不同。
1、概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2、分类3、营养成分各种培养基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（生长因子），如维生素、氨基酸和碱基等，以及氧气的要求。
【归纳小结】培养基中的主要成分获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵1、主要内容包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。
无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。
2、方法：消毒和灭菌注意：区别芽孢和孢子1）某些细菌在其生长发育后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽孢。
每个细菌细胞仅形成一个芽孢，故它无繁殖功能。
芽孢有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。
芽孢的休眠能力十分惊人，可保持几年到几十年的生活力。
2）孢子是微生物产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞。
一般是单细胞，个体微小，通常是适应于从不利环境条件中存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能直接发育成新个体。
3、常用的消毒、灭菌手段三、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基，大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。
1、牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分2（1）培养基的配制计算：依据培养基配方的比例，计算各成分的用量 ↓称量⎩⎪⎨⎪⎧0.5 g 牛肉膏：比较粘稠，用称量纸称取1 g 蛋白胨：易吸潮，要迅速称取0.5 g NaCl2 g 琼脂↓溶化⎩⎪⎨⎪⎧烧杯＋少量蒸馏水↓微火加热、不断搅拌溶化后加琼脂需不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底 而导致烧杯破裂↓熔化后，补加蒸馏水至100 mL↓调节pH ：1 moL 的NaOH 、pH 试纸，将pH 调为7.4 ～7.6 ↓分装：趁热分装到洁净锥形瓶中 ↓加棉塞：用棉花不用脱脂棉，脱脂棉吸水 ↓包扎：外包牛皮纸，且挂标签 (2)灭菌注入开水：与底架平齐 ↓放待灭菌物品：竖放于灭菌桶中，不要太挤↓加盖密封：排气软管插入排气槽，同时旋紧相对的两个螺栓↓排冷空气：打开排气阀，排除锅内冷空气↓高压灭菌：关上排气阀，压力升至100 kPa，温度为121 ℃，维持15～30 min↓取出灭菌物品：断电后，压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，取出灭菌物品(3)倒平板1、操作要点待培养基冷却至50 ℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行：①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞(如图1)。
《一次性筷子与可循环餐筷表面微生物的分离与计数》说课文稿一．选材及背景介绍本课题选自人教版《生物技术实践》模块，专题二课题1：微生物的实验室培养。
生活中微生物无处不在，我们所使用的物品不可避免地也会携带着肉眼不可见的微生物，这些微生物的存在增加了我们对食品安全问题的担忧。
随着人们生活水平的提高，外出就餐的频率日益增加，就餐过程中餐具及食品卫生是我们一直关注的热点。
如果餐具中的微生物如大肠杆菌超标，可能引发就餐者急性腹泻或其他疾病。
在完成了选修一专题二《课题1 微生物的实验室培养》的学习后，学生们提出了微生物实验生活化的设想。
筛选热点问题后，我们拟定题目：《一次性筷子与可循环餐筷表面微生物的分离与计数》。
实验通过对一次性筷子与可循环餐筷表面微生物的分离与计数，对一次性筷子和可循环使用餐筷的微生物数量有一定的了解，为以后外出就餐中筷子的选择提供参考。
既完成了教学规定的内容，又培养了学生“理性思维”和“科学探究”能力，同时让学生学会关注生活、增强学生的环保意识，一举三得。
二．教学分析1.新课程标准解读内容标准：①阐明“发酵工程中灭菌是获得纯净微生物培养物的前提”。
②阐明无菌技术是在操作过程中，保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。
③概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。
教学提示：通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作获得菌落，使学生理解上述“内容标准”要求的基本内容，并获得知识，掌握微生物操作的基本技能。
2.教材分析“微生物的实验室培养”是研究和应用微生物的前提，其基本操作技术是生物科学、农学、食品科学、医学等领域最基本的实验技术，也是高中生必须掌握的实验操作技术。
“微生物的实验室培养”是高中选修教材中一个非常重要的实验，旨在为学生实践其他的生物技术实验做好铺垫。
本实验内容位于传统的发酵技术之后，是在传统的生物实践技术的基础上发展起来的，也为微生物的应用奠定了基础。
本实验中学生不仅可以复习及运用课题1的理论知识，同时在结果观察中可以提前学习并应用微生物培养和观察的相关内容。
因此，可用“承前启后”这个词语来概括本课题的地位。
3.学情分析在学生眼中，微生物的实验室培养是非常神秘且富有吸引力的，当将实验课题赋予实践时，学生体现出前所未有的浓厚兴趣。
此外，很多学生也存在关于外出就餐时筷子选择困难的现象：微生物在肉眼下不可见，学生们无法做出直观判断。
因此学生很乐意参与完成实验，并期待实验结果给他们一个科学的答案。
在实验之前，学生已经用了一课时的时间学习《微生物的实验室培养》的理论知识及基本操作方法，具备完成实验的能力。
然而高中学段的学生人数众多、实验参与次数有限并且是第一次使用超净工作台进行无菌操作，实验操作技能并不熟练，因此需要教师在旁边积极辅导，时刻关注。
三．目标及学法指导1.教学目标知识目标：通过配制培养基、灭菌、接种和培养等实验操作分离出不同类型筷子表面的微生物菌落并计数。
能力目标：能用《微生物的实验室培养》的相关知识提出设计思路，提高“理性思维”和“科学探究”的生物学科素养。
情感态度：通过一次性筷子和可循环利用餐筷表面微生物的结果比较，为学生们外出就餐提供适当的参考，同时结合餐筷原材料的问题建立学生的环境保护意识。
2.教学重点通过学生实验练习无菌操作，熟练微生物分离和计数的常用方法；发现实验过程中的问题，设计合理的改进方案。
3.教学难点以班级为单位完成微生物接种的操作并计数。
解决策略：①预先培训实验小组长，在实验过程中充当“助教”工作；②教师演示微量可调移液器使用、倒平板、接种的相关操作。
四．实验器材实验器具：超净工作台、涂布器、微量可调移液器、无菌培养皿（每组7套）、250ml 锥形瓶（每组5个）、酒精灯、火柴、马克笔、餐馆收集到的一次性筷子（密封性好、密封性差或无密封）、可循环使用的餐筷。
实验试剂：牛肉膏蛋白胨固体培养基、100ml无菌水（每组3个）。
五．实验原理我们的生活一直是被各种各样微生物包围，所使用的物品不可避免地也会携带着一定量的微生物。
日常生活中所用的筷子上也携带者大量的微生物，可以通过牛肉膏蛋白胨进行培养。
稀释涂布平板法是一种应用广泛的测定微生物生长繁殖的方法，其特点是能测出微生物样品中的活细胞数。
将待测样品经适当稀释之后，其中的微生物充分分散成单个细胞，取一定量的稀释样液接种到平板上，经过培养由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，即一个单菌落应代表原样品中的一个单细胞。
计数方法采用平板菌落计数法。
由每个单细胞生长繁殖而形成肉眼可见的菌落，统计菌落数后根据无菌水的体积和取样接种量即可换算出样品中含的微生物数。
微生物接种方法还可通过滤膜接种法进行。
首先使样品滤过一种特制的，孔径小于细菌个体的滤膜，然后将滤膜置于培养基上或浸润有液体培养基的垫状物上培养，通过计算在滤膜上形成的菌落数就可知样品中的活菌数。
六．实验教学内容1.牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备（由志愿小组完成）2.微生物的接种与培养：倒平板→筷子上微生物的获得与接种培养。
3.培养。
将接种好的平板倒置于37℃恒温培养箱中培养2-4天。
七．实验教学过程（一）课前准备1.提前1课时完成理论学习。
2.根据教材及情景设计实验：包括原理，目的及操作方案。
3.将学生分为8组，每组5-6人，其中1-6组准备密封性好及密封性差（或无密封）的一次性餐筷各1付，7-8组准备家用或餐馆获得的可循环餐筷，8组学生以此为原材料进行实验。
4.带领志愿小组完成配制培养基，无菌水制备和培养皿及接种工具等的灭菌工作。
5.活动课时间培训实验小组长相关实验操作，尤其是无菌操作过程培训。
（二）教学设计：1.导入新课（1分钟）：情景导入：2007年7月1日，由国家标准化管理委员会和卫生部联合发布的《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）强制性国家标准和13项生活饮用水卫生检验国家标准正式实施。
其中，微生物指标由2项增至6项，其中大肠杆菌要求每公升水中不得超过3个。
质检员如何检测？目的：激发学生的学习兴趣，将抽象实验生活化、具体化。
2.基础知识回顾与过关考查（3分钟）：①考查无菌技术。
②回顾大肠杆菌的纯化培养。
（倒平板操作，接种操作等）③回顾菌落的统计与计数。
目的：在进入实验室操作之前，确保学生从理论上掌握实验的基本操作方法。
同时还可以回归理论，帮助巩固学习基础。
3.PPT呈现基本操作流程（3-5分钟）：目的：让学生进入实验室之前明确实验操作，避免学生进入实验室以后无从下手。
4.实验室进行《一次性筷子与可循环餐筷表面微生物的分离与计数》的操作（25-30分钟）：环节一：牛肉膏蛋白胨固体培养基的制备①按照牛肉膏蛋白胨固体培养基配方配制培养基，121℃、100kPa高压蒸汽灭菌。
②待培养基温度冷却至55～60℃（不烫手为宜）。
每个实验小组分别给7套无菌培养皿倒平板。
倒平板的方法是：右手持盛牛肉膏蛋白胨培养基的三角瓶置酒精灯火焰旁边，用左手将试管塞轻轻地拔出，试管口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住试管塞。
左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速倒入培养基约15 mL，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上10分钟以上，待凝后即为平板。
图 1 志愿小组配制培养基图 2 倒平板操作环节二：筷子上微生物的获得与接种培养①点燃酒精灯，将不同种类的筷子在100ml无菌水中充分搅匀，获得微生物溶液。
图 3 提取筷子表面微生物图 4 接种菌悬液②用微量可调移液器吸取0.1ml微生物溶液转移到平板培养基上，每种溶液接种2-3个培养基。
涂布器酒精灯上灭菌后冷却，在培养基表面轻轻地涂布均匀。
做好标记后将培养皿平放于实验台上室温下静置10～15min。
此外，为了观察是否有杂菌污染，每组需要涂布滴加无菌水的空白平板作为对照。
（要求每位学生至少涂一个平板）图 5 稀释涂布平板操作③培养。
将接种好的平板倒置于37℃恒温培养箱中培养2-4天。
图 6 恒温培养箱培养微生物环节三：观察与计数①培养2-4天后，取出培养皿，统计几个平板菌落数的平均值X。
②依据平板上加入菌液量Y mL，得到筷子表面的细菌数（个/mL）＝X/100Y。
图7 学生实验结果实验结果分析：①密封性较好的一次性筷子与可循环餐筷表面微生物数量较少，但密封较差或无密封的一次性筷子上微生物的数量较多。
②学生统计菌落时容易漏记，借助菌落计数器统计数据更加精确。
③接菌量为0.1ml时，培养基上出现的微生物数量总体过少，计数偏差较大。
5.整理实验器材，擦拭超净工作台台面（2分钟）。
目的：从中学生时代开始，让学生养成良好的实验习惯，为以后科研工作打好基础。
6.实验总结（5分钟）：①教师总结操作过程中的问题。
②布置观察任务，并根据观察结果撰写实验报告：分析一次性筷子和可循环餐筷哪个更健康。
随后通过对筷子的选择问题引发学生对环境问题思考。
目的：及时发现并了解学生实验过程中的疑惑和错误，及时纠正和解答。
八．实验方案改进学生总结实验并反思，提出以下问题：（1）筷子表面微生物未彻底提取；（2）各平板长出的菌落普遍较少且平行组之间差异较大。
教师和学生查阅资料和文献做如下改进：1.摇床分离表面微生物：首先将筷子样品分成小段，置于无菌水中，随后放入摇床中摇晃2分钟，使筷子表面微生物能够充分溶入无菌水中。
图七摇床培养箱图8 摇床培养箱获得菌悬液2.采用“滤膜法”对菌种进行富集：滤膜过滤法本身是针对不能采用高温灭菌的物质（如胎牛血清培养液）所使用的一种灭菌方法，过滤器核心为孔径小于细菌个体的滤膜，经过过滤器过滤之后，过滤液中的微生物留在滤膜上。
因此利用成本较低的针筒式细菌过滤器过滤适当体积的样品溶液，筷子上的微生物就被富集在滤膜上。
图9 针筒式细菌过滤器富集微生物3.接种采用“滤膜接种法”：将滤膜置于牛肉膏蛋白胨固体培养基上进行培养，通过计算在滤膜上形成的菌落数就可知样品中的活菌数。
图10 滤膜法接种微生物改进后的实验操作：环节一：与前面操作方法一致。
环节二：筷子上微生物的获得与接种培养①点燃酒精灯，将不同种类的筷子截断置于100ml无菌水中，密封后放入摇床中18℃、260rmp/min、2min，获得微生物溶液。
②在超净工作台中用已灭菌的针筒分别吸取1ml、2ml、5ml溶液，连接在过滤器上进行过滤，随后取出滤膜，将滤膜覆盖在培养基上1min移除滤膜（或不移除滤膜），并做标记。
专题二课题1：微生物的实验室培养说课稿③培养。
与前面操作方法一致。
环节三：与前面操作方法一致。
九．实验效果、反思与评价本节课是一节以生活实验为外衣，教材专业实验为核心的课程。
实验中充分发挥了学生的主动性，让学生在进行实验操作、训练相关技能的同时掌握了抽象的概念。
