第四章 紫外可见分光光度法

溶剂
乙醚 水
λmax
417 343 238 254 203.5 261 200 225 7000
C2H5CH＝NC5H6 异辛烷 ＝ 苯 水 水
CH3
甲苯
助色团 Auxochromous group
－F<－CH3<－Cl<－Br<－OH<－OCH3<－NH2< － － － － － － －NHCH3< －N(CH3)2 <－NHC6H5<－O－ － －
E带（I，E1） 带 ， E带（K，E2） 带 ， 精细结构 B带（III） 带 ） I带 带 E带 带 II带 带 K带 带 III带 带 B带 带
E1带 E2带 B带 带 180 204 255 6.0x104 8.0x103 2.0x102
苯的同系物的吸收光谱
苯环共轭的影响
B带，λmax 带 苯 萘 蒽 丁省 戊省 256 314 380 480（黄） （ 580（蓝） （
4.1 紫外 可见吸收光谱概述（5） 紫外-可见吸收光谱概述 可见吸收光谱概述（ ）
定量分析基础
标准曲线 标准加入
4.1 紫外 可见吸收光谱概述（6） 紫外-可见吸收光谱概述 可见吸收光谱概述（ ）
电子能级与电子跃迁
HCHO σ σ π σ n
成键轨道： σ、 π 成键轨道： 反键轨道： 、 反键轨道： σ*、π* 非键轨道 ： n
键共轭） （带孤对电子的杂原子与其他π键共轭） 带孤对电子的杂原子与其他 键共轭
n→π* 跃迁 π
ε
λmax/nm
CH3COOH CH3CONH2 CH3N＝NCH3 ＝ CH3－NO2 CH3COCH3 饱和醛酮 204 214 339 280 186 280 280～300 ～

30.01mg→100ml 5→50ml 浓度为30.01ug/ml
E=A / C C为100ml溶液中所含被测物质的重量 （按干燥品或无水物计算），g
（C = 0.003001g ×（1-水分）/ 100ml)
二.鉴别: 按各该品种项下的规定，测定供试品
溶液在有关波长处的最大及最小吸收，有 的并须测定其各最大吸收峰值或最大吸收 与最小吸收的比值，均应符合规定。
在高精度的分析测定中（紫外区尤其 重要），吸收池要挑选配对。因为吸收池 材料本身的吸光特征以及吸收池的光程长 度的精度等对分析结果都有影响。
玻璃吸收池因为能吸收紫外光，故只 能用于320nm以上的可见光区。
石英吸收池因不吸收紫外光而常用 于3０0nm以下的紫外光区，但也可用于 可见光区。
最常用的光路长度为: 1cm的吸收池。
表示方法：
（1）百分吸收系数（E）：
以
E 1% 1cm
表示。
E=A/C(%)×L(cm)
中国药典规定的吸收系数即为
E 1% 1cm
。
在用吸收系数法计算含量时，E11c%m 通常要
大于100
（2）摩尔吸收系数（ε）：
当溶液的浓度（C）为1mol/L,光路长 度（L）为1cm时，相应的吸光度为摩尔吸 收系数，以ε表示。
通常使用的紫外-可见分光光度计的工作波长 范围为190～900nm。
第二节 光吸收基本定律和吸收系数
1.光吸收基本定律： 比尔—郎伯（Beer—Lambert）定律
为光吸收基本定律，是分光光度分析的 理论基础。 Lambert于1730年提出了光 强度与吸收介质厚度的关系。1852年 Beer提出了光强度与吸收介质中吸光物 质浓度之间的关系。
光源为空心阴极灯。每种元素都 有各自的空心阴极灯，因此原子 吸收光谱是锐线光谱。

一、分光光度计的主要部件 1. 光源
对光源基本要求：足够光强、稳定、 连续辐射且强度随波长变化小。
钨及碘钨灯：340～2500 nm，多 用在可见光区；
氢灯和氘灯：160～375 nm，多用 在紫外区。
2. 单色器
单色器的用途就是把混合光变成 单色光，由入射狭缝、准直镜、色散 元件、聚焦元件和出口狭缝组成。常 用的色散元件有棱镜和光栅。
对于光谱分析，可测量的最小分析信 号xL为
xL xb ksb
空白试验 多次测量 的平均值
根据一定 置信度确 定的系数
空白试验 多次测量 的标准差
与 xL xb ksb 相对应的浓
度或量即为检出限L
L xL xb ksb
S
S
方法的灵敏度
2. 标准比较法
该法是标准曲线法的简化，即只
配制一个浓度为cs的标准溶液，并测量 其吸 光度 ， 求 出吸 收系 数 k， 然 后 由
Aa2
Ab2
a
2
lca
b
2
lcb
cb
Aa2b
a
2
lca
l
b
2
1. 解方程组
Aa1b
Aa1
Ab1
a
1
lca
b
1
lcb
Aa2b
Aa2
Ab2
a
2
lca
b
2
lcb
2. 双波长法—等吸收点法
测定b组分时，选择b组分的最大吸收波长作测定波长 1，由b的峰顶向横坐标作垂线与a吸收曲线的一侧相 交，从相交点作横坐标的平行线与a吸收曲线的另一 侧相交，交点所对应的波长为参比波长2 。在1和2 处分别测量吸光度 A1ab与 ，然后相减求 Aab 。

第四章紫外可见分光光度法单选题：1. 有色络合物的摩尔吸光系数，与下面因素中有关系的量是：（1）比色池厚度；（2）有色络合物浓度；（3）吸收池材料；（4）入射光波长。

2. 在紫外吸收光谱曲线中，能用来定性的参数是：（1）最大吸收峰的吸光度；（2）最大吸收峰的波长；（3）最大吸收峰处的摩尔吸光系数；（4）最大吸收峰的波长及其摩尔吸光系数。

3. 物质与电磁辐射相互作用后，产生紫外-可见吸收光谱，这是因为：（1）分子的振动；（2）分子的转动；（3）原子核外层电子的跃迁；（4）原子核内层电子的跃迁。

4. 紫外吸收光谱中R吸收带是下列哪一跃迁产生的？（1）n→π*；（2）π→π*；（3）σ→σ*；（4）n→σ*。

5. 下列有机化合物紫外吸收波长λmax最长的是：（1）C2H6；（2）C2H4；（3）CH2=CH-CH=CH2；（4）CH2=CH-CH=CH-CH=CH2。

6. 异丙叉丙酮CH3-CO-CH=C(CH3)-CH3的n→π*跃迁谱带在（）中的波长最长：（1）水；（2）甲醇；（3）丙酮；（4）正己烷。

7. 助色团对谱带的影响是使谱带：（1）波长变长；（2）波长变短；（3）波长不变；（4）谱带蓝移。

8. 测定纯金属钴中微量锰时，在酸性溶液中，用KIO4氧化Mn2+为MnO4-后进行光度测定。

若用纯金属锰标液在同样条件下作工作曲线，那么，工作曲线的参比溶液应为：（1）含钴的溶液；（2）含钴和KIO4的溶液；（3）含锰且加KIO4的溶液；（4）蒸馏水。

9. 测定纯金属钴中微量锰时，在酸性溶液中，用KIO4氧化Mn2+为MnO4-后进行光度测定。

这时测定试样金属钴中的锰含量时，其参比溶液应选择为：（1）KIO4溶液；（2）蒸馏水；（3）EDTA水溶液；（4）不含KIO4的试样溶液。

10. 用异烟酸-吡唑啉酮光度法测定CN-含量时，测得cM浓度的透光率为T。

当CN-浓度由cM变为0.5cM时，在同样测量条件下的透光率应为：（1）T1/2；（2）T2；（3）T3；（4）T4。