简述蛋白质合成的过程

1．分别说出5种以上RNA的功能？转运RNA tRNA 转运氨基酸核蛋白体RNA rRNA 核蛋白体组成成信使RNA mRNA 蛋白质合成模板不均一核RNA hnRNA 成熟mRNA的前体小核RNA snRNA 参与hnRNA的剪接小胞浆RNA scRNA/7SL-RNA 蛋白质内质网定位合成的信号识别体的组成成分反义RNA anRNA/micRNA 对基因的表达起调节作用核酶Ribozyme RNA 有酶活性的RN2．原核生物与真核生物启动子的主要差别？原核生物TTGACA --- TA TAA T------起始位点-35 -10真核生物增强子---GC ---CAA T----TA TAA—5mGpp—起始位点-110 -70 -253.对天然质粒的人工构建主要表现在哪些方面？天然质粒往往存在着缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：a、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择,通常是抗生素基因。

b、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。

c、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。

d、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。

e、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件4、利用双脱氧末端终止法（Sanger法）测定DNA一级结构的原理与方法？原理是采用核苷酸链终止剂—2，，3，-双脱氧核苷酸终止DNA的延长。

由于它缺少形成3/5/磷酸二脂键所需要的3-OH，一旦参入到DNA链中，此DNA链就不能进一步延长。

根据碱基配对原则，每当DNA聚合酶需要dNMP参入到正常延长的DNA链中时，就有两种可能性，一是参入ddNTP,结果导致脱氧核苷酸链延长的终止；二是参入dNTP,使DNA链仍可继续延长，直至参入下一个ddNTP。

根据这一方法，就可得到一组以ddNTP结尾的长短不一的DNA片段。

方法是分成四组分别为ddAMP、ddGMP、ddCMP、ddTMP反应后，聚丙烯酰胺凝胶电泳按泳带可读出DNA序列5、激活蛋白（CAP）对转录的正调控作用？环腺苷酸（cAMP）受体蛋白CRP（cAMP receptor protein），cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP（cAMPactivated protein ）。

简述蛋白质合成过程
蛋白质合成过程包括以下三个步骤：
1、氨基酸的活化与搬运：氨基酸的活化以及活化氨基酸与tRNA的结合，均由氨酰-tRNA合成酶催化完成。

在此反应中，特异的tRNA3'端CCA上的2'或3'位自由羟基与相应的活化氨基酸以酯键相连接，形成氨酰-tRNA，从而使活化氨基酸能够被搬运至核糖体上参与多肽链的合成。

2、活化氨基酸在核糖体上的缩合：在核糖体上，氨基酸通过脱水缩合形成肽链。

3、多肽链合成后的加工修饰：包括水解修饰、肽键中氨基酸残基侧链的修饰及二硫键的形成等。

《基础生物化学》复习题第一章蛋白质化学1、简述蛋白质的1、2、3、4级结构及维持各级结构的作用力。

蛋白质的一级结构是指蛋白质多肽链中氨基酸的排列顺序以及二硫键的位置。

维持蛋白质一级结构的化学键是肽键。

蛋白质的二级结构是指多肽链主链折叠的有规则重复的构象，不涉及侧链上的原子在空间的排列。

维持二级结构的作用力是主链形成的氢键。

蛋白质的三级结构是指一条多肽链中所有原子和基团的总的三维结构，包括所有主链和侧链的构象。

维持三级结构的作用力主要是次级键，即氢键、范德华力、疏水作用力、离子键等，也包括二硫键。

蛋白质四级结构是指具有三级结构的亚单位通过非工价键彼此缔合在一起的聚集体，维持蛋白质四级结构的作用力是次级键。

2、用实例说明蛋白质的高级结构与功能的关系（1）核糖核酸酶的变性与复性：当天然的核糖核酸酶用变性剂处理后，分子内部的二硫键断裂，肽链失去空间构象呈线形状态时，核糖核酸酶失去催化功能，当除去变性剂后，核糖核酸酶可逐渐恢复原有空间构象，则其催化RNA水解的功能可随之恢复。

（2）血红蛋白的别构效应：血红蛋白是一个含有4个亚基的寡聚蛋白质，具有别构效应，当它未与氧结合时，血红蛋白分子处于紧密型构象状态，不易与氧结合；当氧与血红蛋白分子中1个亚基结合后，会引起该亚基构象改变，这个亚基构象改变又会引起其他3个亚基的构象改变，使整个血红蛋白的结构变得松弛，易于与氧结合，大大加快了氧合速度。

3、名词：氨基酸等电点：使氨基酸处于正负电荷相等即净电荷为零的兼性离子状态时溶液的pH 即为该氨基酸的等电点。

盐析：在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐（如饱和硫酸铵），使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。

第二章核酸化学4、比较DNA、RNA在化学组成、细胞定位及生物功能上的区别。

DNA和RNA的基本结构单位是核苷酸。

核苷酸由一个含氮碱基（嘌呤或嘧啶），一个戊糖（核糖或脱氧核糖）和一个或几个磷酸组成。

DNA和RNA是多聚核苷酸，核苷酸靠磷酸二酯键彼此连接在一起；RNA中的核苷酸残基含有核糖，其嘧啶碱基一般是尿嘧啶和胞嘧啶，而DNA中其核苷酸含有2′-脱氧核糖，其嘧啶碱基一般是胸腺嘧啶和胞嘧啶。

第十二章蛋白质的生物合成一、知识要点（一）蛋白质生物合成体系的重要组分蛋白质生物合成体系的重要组分主要包括mRNA 、tRNA 、rRNA、有关的酶以及几十种蛋白质因子。

其中，mRNA是蛋白质生物合成的直接模板。

tRNA的作用体现在三个方面：3ˊCCA接受氨基酸；反密码子识别mRNA链上的密码子；连接多肽链和核糖体。

rRNA和几十种蛋白质组成合成蛋白质的场所——核糖体。

遗传密码的特点：无标点性、无重叠性；通用性和例外；简并性；变偶性。

（二）蛋白质白质生物合成的过程蛋白质生物合成的过程分四个步骤：氨基酸活化、肽链合成的起始、延伸、终止和释放。

其中，氨基酸活化即氨酰tRNA的合成，反应由特异的氨酰tRNA合成酶催化，在胞液中进行。

氨酰tRNA合成酶既能识别特异的氨基酸，又能辩认携带该氨酰基的一组同功受体tRNA分子。

肽链合成的起始对于大肠杆菌等原核细胞来说，是70S起始复合物的形成。

它需要核糖体30S和50S亚基、带有起始密码子AUG的mRNA、fMet-tRNA f 、起始因子IF1、IF2、IF3（分子量分别为10 000、80 000和21 000的蛋白质）以及GTP和Mg2+的参加。

肽链合成的延伸需要70S起始复合物、氨酰-tRNA、三种延伸因子：一种是热不稳定的EF-Tu，另一种是热稳定的EF-Ts，第三种是依赖GTP的EF-G以及GTP和Mg2+。

肽链合成的终止和释放需要三个终止因子RF1、RF2、RF3蛋白的参与。

比较真核细胞蛋白质生物合成与原核细胞的不同。

（三）蛋白质合成后的修饰蛋白质合成后的几种修饰方式：氨基末端的甲酰甲硫氨酸的切除、肽链的折叠、氨基酸残基的修饰、切去一段肽链。

二、习题（一）（一）名词解释1．密码子(codon)2．反义密码子(synonymous codon)3．反密码子(anticodon)4．变偶假说(wobble hypothesis)5．移码突变(frameshift mutant)6．氨基酸同功受体(isoacceptor)7．反义RNA(antisense RNA)8．信号肽(signal peptide)9．简并密码(degenerate code)10．核糖体(ribosome)11．多核糖体(poly some)12．氨酰基部位(aminoacyl site)13．肽酰基部位(peptidy site)14．肽基转移酶(peptidyl transferase)15．氨酰- tRNA合成酶(amino acy-tRNA synthetase)16．蛋白质折叠(protein folding)17．核蛋白体循环(polyribosome)18．锌指(zine finger)19．亮氨酸拉链(leucine zipper)20．顺式作用元件(cis-acting element)21．反式作用因子(trans-acting factor)22．螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix)（二）英文缩写符号1．IF（initiation factor）：2．EF（elongation factor）：3．RF（release factor）：4．hnRNA（heterogeneous nuclear RNA）：5．fMet-tRNA f ：6．Met-tRNA i ：（三）填空题1．蛋白质的生物合成是以______作为模板，______作为运输氨基酸的工具，_____作为合成的场所。

第十一章基因信息的传递一、选择题【A1型题】1.DNA复制的主要方式是A.半保留复制B.全保留复制C.滚环式复制D.混合式复制E.D环复制2.关于原核生物DNA聚合酶Ⅲ的叙述正确的是A.具有5＇—3＇外切酶活性B.具有核酸内切酶活性C.具有3＇—5＇外切酶活性D.底物为NTPE.不需要引物3.原核生物DNA聚合酶Ⅰ不具有下列哪种作用A.聚合DNAB.修复作用C.校读作用D.连接作用E.切除引物4.真核生物DNA聚合酶中，同时具有引物酶活性的是A.DNA聚合酶αB. DNA聚合酶βC. DNA聚合酶γD. DNA聚合酶δE. DNA聚合酶ε5.DNA聚合酶的共同特点不包括A.以dNTP为底物B.有模板依赖性C.聚合方向5＇→3＇D.需引物提供3＇羟基末端E.不耗能6.在原核生物中，RNA引物的水解及DNA片段的延长是依赖于A.核酸酶HB. DNA聚合酶ⅠC. DNA聚合酶ⅡD. DNA聚合酶αE. DNA聚合酶β7.拓扑异构酶的作用是A.解开DNA双螺旋使其易于复制B.使DNA解链时不致于缠结C.使DNA异构为RNA引物D.辨认复制其始点E.稳定分开的DNA双链8.单链结合蛋白（SSB）的生理功能不包括A.连接单链DNAB.参与DNA的复制与修复C.防止DNA单链重新形成双螺旋D.防止单链模板被核酸酶水解E.激活DNA聚合酶9.关于大肠杆菌DNA连接酶的叙述正确的是A.促进DNA形成超螺旋结构B.除去引物，填补空缺C.需ATP供能D.使相邻的两个DNA单链连接E.连接DNA分子上的单链缺口10.原核生物DNA复制需要多种酶参与①DNA聚合酶Ⅲ②DNA解旋酶③DNA聚合酶Ⅰ④引物酶⑤DNA连接酶A.①②③④⑤B.②④①③⑤C.②④⑤①③D.①③②⑤④E.⑤③②①④11.关于DAN复制中生成的冈崎片段A.是前导链上形成的短片段B.是滞后链上形成的短片段C.是前导链模板上形成的短片段D.是滞后链模板上形成的短片段E.前导链和滞后链上都可形成短片段12.端粒酶的作用是A.防止线性DNA分子末端缩短B.促进线性DNA分子重组C.促进DNA超螺旋构象的松解D.促进细胞染色质的分解E.促进细胞染色体的融合13.紫外线辐射造成的DNA损伤，最易形成的二聚体是A.CTC.TTD.TUE.CU14.亚硝酸盐造成DNA损伤是A.形成TT二聚体B.使G的N-7烷化C.使C脱氨成UD.转换T为CE.取代A并异构成G15.DNA点突变的形式不包括A.重排B.转换C.颠换D.缺失E.插入16.不参与DNA损伤修复的酶是A.光复活酶B.引物酶C. DNA聚合酶ⅠD.DNA连接酶E.核酸内切酶17.DNA的切除修复不包括下列哪一步A.识别B.切除C.修补D.异构E.连接18.逆转录的遗传信息流向是A.DNA→DNAB.DNA→RNAC.RNA→DNAD.DNA→蛋白质E.RNA→RNA19.逆转录酶不具有下列那种特性A.存在于致癌的RNA病毒中B.以RNA为模板合成DNAC.RNA聚合酶活性D.RNA酶活性E.可以在新合成的DNA链上合成另一条互补DNA链20.DNA分子中能被转录的链称为A.编码链B.无意义链C.模板链D.互补链E.反义RNA链21.转录与复制有许多相似之处，但不包括A.均需依赖DNA为模板的聚合酶B.以DNA单链为模板C.遵守碱基配对原则D.有特定的起始点E.以RNA为引物22.转录过程中需要A.引物B.dNTPC.RNA聚合酶D.连接酶E.解旋酶23.利福霉素抗结核杆菌的机理是A.与δ亚基结合，抑制RNA聚合酶与模板的结合B.与β亚基结合，阻碍磷酸二酯键的形成C.使RNA聚合酶解聚D.使启动子构象改变E.以上都不是24.真核生物中合成hnRNA的酶是A.RNA聚合酶ⅠB. RNA聚合酶ⅡC. RNA聚合酶ⅢD.核心酶E.以上都不是25.真核生物中合成tRNA的酶是A.RNA聚合酶ⅠB. RNA聚合酶ⅡC. RNA聚合酶ⅢD.核心酶E.以上都不是26.α-鹅膏覃碱可强烈抑制A.蛋白质合成B. hnRNA的合成C.cDNA合成D.45SrRNA合成E.核苷酸合成27.RNA合成的原料是A.dNTPB.dNDPC.NMPD.NTPE.NDP28.新合成的mRNA链的5＇端最常见的核苷酸是A.ATPB.TTPC.GMPD.CTPE.GTP29.真核生物的mRNA帽子结构最常见的是A.GpGB.m6ApppGC.m7GpppGD.pppGmE.GpppA30.外显子是指A.基因突变序列B.mRNA5＇端的非编码序列C.断裂基因中的编码序列D.断裂基因中的非编码序列E.成熟mRNA中的编码序列31.真核细胞hnRNA的内含子切除需A.snRNPB.限制性核酸内切酶C.RNaesPD.RibozymeE.蛋白水解酶32.成熟tRNA分子3＇末端CCA序列的形成A.通过转录合成B.通过剪切加工形成C.由核苷酸转移酶催化合成D.通过碱基修饰形成E.通过基因突变形成33.核酶的特点不包括A.是一种变构酶B.化学本质是核糖核酸C.一级结构在进化上高度保守D.具有自催化剪切作用E.二级结构呈“锤头”或“发夹”状34.能代表多肽链合成起始信号的遗传密码A.UAGB.GAUC.AUGD.UAAE.UGA35.遗传密码的特点不包括A.通用性B.连续性C.特异性D.简并性E.方向性36.参与多肽链释放的蛋白质因子是A.RFB.IFC.eIFD.EF-TuE.EFG37.原核生物翻译时的启动tRNA是A.Met-tRNA MetB. Met-tRNA i MetC.fMet-tRNA i MetD.Arg-tRNA ArgE.Ser-tRNA Ser38.关于氨基酸的活化正确的是A.活化的部位为氨基B.氨基酸与tRNA以肽键相链C.活化反应需GTP供能D.在胞液中进行E.需核糖体参与39.核糖体循环是指A.活化氨基酸缩合形成多肽链的过程B.70S起始复合物的形成过程C.核糖体沿mRNA的相对移动D.核糖体大小亚基的聚合与解聚E.多聚核糖体的形成过程40.多肽链的延长与下列哪中物质无关A.GTPB.转肽酶C.EF-TD.EF-GE.ATP41.能识别终止密码的是A. EF-GB.polyAC.RFD.m7GTPE.IF42.翻译后的加工修饰不包括A.新生肽链的折叠B.N端甲酰蛋氨酸或单氨酸的切除C.氨基酸残基侧链的修饰D.亚基的聚合E.变构剂引起的分子构象改变43.分子病是指A.细胞内低分子化合物浓度异常所致疾病B.蛋白质分子的靶向输送障碍C.基因突变导致蛋白质一级结构和功能的改变D.朊病毒感染引起的疾病E.由于染色体数目改变所致疾病44.关于镰刀型红细胞贫血病的叙述错误的是A.血红蛋白β-链编码基因发生点突变B.血红蛋白β-链第6位残基被谷氨酸取代C.血红蛋白容易互相粘着D.红细胞变成镰刀状E.红细胞极易破裂，产生溶血性贫血45.氯霉素抑制细菌蛋白质生物合成的机制是A.与核糖体大亚基结合，抑制转肽酶活性B.引起密码错读而干扰蛋白质的合成C.激活蛋白激酶使起始因子磷酸化而失活D.与小亚基结合而抑制进位E.通过影响转录来抑制蛋白质的合成46.基因表达中的诱导现象是指A.阻遏物的生成B.细菌利用葡萄糖作碳源C.细菌不能利用乳酸作碳源D.由底物的存在引起酶的合成E.低等生物可以无限制地利用营养物47.操纵子模型主要用于说明A.蛋白质生物合成的机制B.基因表达的调控机制C.DNA的复制机制D.mRNA的成熟机制E.RNA逆转录48.乳糖操纵子的诱导剂是A.乳糖B.葡萄糖C.β-半乳糖苷酶D.果糖E.cAMP49.色氨酸操纵子的控制区不包括：A.增强子B.调节基因C.启动基因D. 操纵基因E.衰减子50.色氨酸操纵子的阻遏剂是A.乳糖B.葡萄糖C.色氨酸合成酶D.σ因子E.色氨酸51.关于同源结构域的叙述错误的是A.至少由两段保守的α-螺旋构成B.螺旋间通过成环连接C.其识别螺旋能识别特异的DNA序列D.其侧链基团能与DNA小沟的碱基相互作用E.能与DNA骨架的磷酸基形成氢键52.关于锌指模体的叙述正确的是A.凡含Zn2+的蛋白质均可形成B. 凡含Zn2+的酶皆可形成C.必须有Zn2+和半胱氨酸或组氨酸形成配位键D.DNA与Zn2+ 结合就可形成E.含有很多半胱氨酸通过二硫键形成【A2型题】53.在一DNA复制体系中,以同位素32P标记的а-磷酸基dNTP为原料合成DNA,从原代起至少在第几代可以得到两条链均带有32P标记的子代DNA双链A.第二代B.第三代C.第四代D.第六代E.第八代54.进行DNA复制试验时,保留全部DNA复制体系成分但以DNA聚合酶Ⅱ代替DNA连接酶,试分析可能会出现什么后果A. DNA高度缠绕,无法作为模板B. DNA被分解成无数片段C. 无RNA引物,复制无法进行D. 随从链的复制无法完成E. 冈崎片段的生成过量55.原核生物DNA复制中① DNA聚合酶Ⅲ②解链酶③ DNA聚合酶④ DNA指导的RNA聚合酶⑤ DNA连接酶⑥ SSB 的作用顺序是A.④、③、①、②、⑤、⑥B.②、③、⑥、④、①、⑤C.④、②、①、⑤、⑥、③D.④、②、⑥、①、③、⑤E.②、⑥、④、①、③、⑤56.利用电子显微镜观察原核生物和真核生物DNA复制过程，都能看到伸展成叉状的复制现象，其可能的原因是A. DNA双链被解链没解开B.拓扑酶发挥作用形成中间体C. 有多个复制起点D.冈崎片段连接的中间体E. 单向复制所致57．真核生物的结构基因是断裂基因，其转录生成的hnRNA在核内经首尾修饰后，再形成套索RNA进行剪接，剪接后的产物是A. tRNAB. snRNAC. snRNPD. mRNAE. rRNA58.原核生物是以RNA聚合酶结合到DNA的启动区作为转录起始的。

生物化学期末复习思考题第一章蛋白质结构与功能1.试从含量及生物学性质说明蛋白质在生命过程中的重要性。

2.组成蛋白质的元素有哪几种?其中哪一种的含量可以看作是蛋白质的特征?此特性在实际上有何用途?3.蛋白质的基本组成单位是什么?蛋白质经过怎样处理才可产生这些基本组成单位?4.自然界中只有20多种氨基酸，其所组成的蛋白质则种类繁多，为什么?5.天然氨基酸在结构上有何特点?氨基酸是否都含有不对称碳原子?都具有旋光性质?6.氨基酸为什么具有两性游离的性质?7.何为兼性离子?8.沉淀蛋白质的方法有哪些?各有何特点?9.蛋白质一、二、三、四级结构及维持各级结构的键或力是什么?10.蛋白质二级结构有哪些主要形式?11.举例说明蛋白质一级结构与功能的关系，空间结构与功能的关系。

12.什么是蛋白质的等电点?当溶液PH>PI时，溶液中的蛋白质颗粒带什么电荷?13.什么是蛋白质的变性作用?举例说明实际工作中应用和避免蛋白质变性的例子。

14.维持蛋白质胶体稳定性的因素是什么?15.名词解释：肽键、肽键平面、亚基、蛋白质的两性电离和等电点、蛋白质的变性、蛋白质沉淀、变构作用、分子病、盐析。

第二章核酸结构与功能1.试比较RNA和DNA在结构上的异同点。

2.试述DNA双螺旋结构模式的要点及其与DNA生物学功能的关系。

3.试述RNA的种类及其生物学作用。

4.与其它RNA相比较，tRNA分子结构上有哪些特点?5.什么是解链温度?影响特定核酸分子Tm值大小的因素是什么?为什么?6.DNA与RNA分子组成有何差别?7.维持DNA一级结构和空间结构的作用力是什么?8.生物体内重要环化核苷酸有哪两种?功能是什么?9.按5′→3′顺序写出下列核苷酸的互补链。

①GATCCA ②TCCAGC10.试从以下几方面对蛋白质与DNA进行比较：①一级结构②空间结构③主要生理功能11.名词解释：稀有碱基、DNA的一级结构、核酸的变性、复性、Tm值、核酸杂交、第三章酶1.何谓酶?酶作为催化剂有哪些特点?2.辅助因子的化学本质是什么?何谓辅酶和辅基?辅酶与酶蛋白有何关系?3.主要辅酶(辅基)有哪些?它们的主要功能各是什么?4.试述酶作用的机理及影响酶促反应的因素。

生物化学期末考试试题及答案全一、选择题1、以下哪个过程不是生物化学反应？A.糖酵解B.蛋白质合成C.基因表达D.细胞分裂答案：D.细胞分裂。

细胞分裂是细胞复制的过程，不是生物化学反应。

2、下列哪个化合物是生物体内常见的储能物质？A.葡萄糖B.脂肪酸C.氨基酸D.核苷酸答案：B.脂肪酸。

脂肪酸是生物体内常见的储能物质。

3、以下哪个酶不参与糖酵解过程？A.己糖激酶B.磷酸果糖激酶-1C.丙酮酸激酶D.柠檬酸合酶答案：D.柠檬酸合酶。

柠檬酸合酶是三羧酸循环中的关键酶，不参与糖酵解过程。

4、下列哪个基因编码的蛋白质是血红蛋白？A. alpha珠蛋白基因B. beta珠蛋白基因C. gamma珠蛋白基因D. delta珠蛋白基因答案：A. alpha珠蛋白基因。

alpha珠蛋白基因编码的是血红蛋白。

5、下列哪个反应是光合作用中的关键步骤？A.水光解B. C3循环C.卡尔文循环D.电子传递链答案：C.卡尔文循环。

卡尔文循环是光合作用中的关键步骤，它负责将光能转化为化学能并合成有机物。

二、简答题1、简述DNA复制的过程及其意义。

答案：DNA复制的过程包括解旋、合成子链和校对三个阶段。

在解旋阶段，DNA双链打开并形成单链模板；在合成子链阶段，DNA聚合酶按照模板单链的顺序合成互补的子链；在校对阶段，DNA聚合酶和DNA 修复酶共同作用，确保新合成的子链与模板单链准确配对。

DNA复制的意义在于保持遗传信息的连续性和稳定性，确保生命活动的正常进行。

2、简述蛋白质合成的步骤。

答案：蛋白质合成包括转录和翻译两个阶段。

在转录阶段，DNA作为模板合成RNA；在翻译阶段，核糖体按照mRNA的密码子序列合成多肽链，经过折叠和加工形成具有特定功能的蛋白质。

生物化学期末考试试题及答案一、选择题1、以下哪种物质是生物体内能量的主要来源？A.水B.蛋白质C.糖类D.脂肪答案：C.糖类。

2、以下哪种化学反应是生物体内能量释放的主要途径？A.加氧反应B.还原反应C.磷酸化反应D.水解反应答案：C.磷酸化反应。

1．核酸杂交: 在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链。

这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。

这种现象称为核酸分子杂交。

（2分）2．P/O比值：每消耗1mol氧原子时 ADP磷酸化成ATP所需消耗的无机磷的mol数。

3．一碳单位：某些氨基酸在分解代谢过程中产生含有一个碳原子的基因，称为一碳单位。

体内的一碳单位有甲基（—CH3）、甲烯基（—CH2—）、甲炔基（—CH==）、甲酰基（—CHO）、亚氨甲基（—CH==NH）等。

（2分）4．外显子：在断裂基因及其初级转录产物上出现，并表达为成熟RNA的核酸序列。

（2分）5．遗传密码：mRNA分子上从5，至3，方向，由AUG开始，每3个核苷酸为一组，决定肽链上某一个氨基酸或蛋白质合成的起始、终止信号，称为三联体密码。

6．DNA变性: 在某些理化因素作用下，DNA分子互补碱基对之间的氢键断裂，使DNA双螺旋结构松散，变成单链，即为DNA变性。

（2分）7. 糖异生: 由非糖化合物 (乳酸、甘油、生糖氨基酸等)转变为葡萄糖或糖原的过程称为糖异生。

（2分）8. 底物水平磷酸化：ADP或其他核苷二磷酸的磷酸化作用与底物的脱氢作用直接相偶联的反应过程称为底物水平磷酸化。

（2分）9．氨基酸代谢库：食物蛋白质经消化而被吸收的氨基酸(外源性氨基酸)与体内组织蛋白质降解产生的氨基酸(内源性氨基酸)混在一起，分布于体内各处，参与代谢，称为氨基酸代谢库。

（2分）10. 不对称转录: 转录模板DNA双链中，只有一股链可作为模板指引转录，另一股链不能作为模板；模板链并非永远在同一条单链上，不同基因的模板链可交叉分布在两股链上，这种选择性转录方式称为不对称转录。

一. 简答题简述一蛋白质的生物合成：1,氨基酸的活化与搬运——氨基酰TRNA的合成，氨基酸的氨基和羧基反应性不强，需要活化，活化反应：氨基酸先与氨基酸TRNA合成酶形成中间产物再接到TRNA的氨基臂（3'末端CCA-OH上）2，蛋白质合成过程中，核蛋白体循环，肽链合成的起始，在蛋白质起始因子作用下形成起始复合物70SMRNAFMETTRNAFMET3.肽链的延伸，包括进位，转肽，移位，需要延长因子，GTP等的参与。

a对应MRNA上第二CODON的AA-TRNA进A位b在肽基转移酶的催化下，P位的fMET转移到A位的TRNA上，与A位的氨基酸残基的氨基宿和，P位空TRNA掉下，cA位的二肽酰-TRNA移到P位，空出A位，如此，第三四个N个氨基酸的AA-TRNA继续与肽链合成，4肽链合成终止，终止因子识别终止密码，促进P位上肽链水解释放及TRNA的释放，离开RRNA。

终止因子再促进亚基解聚，30S.50S又用于新链合成二. 阐述原核生物DNA复制全过程：1,起始，a识别起始位点，复制开始时，蛋白DnaA识别起始位点，解链酶及引物酶协助识别并结合到模版的起始位点开始引物合成，b松旋酶，解旋酶与复制起点结合，解开双螺旋形成两条局部单链，单链结合蛋白也随即结合到单链cRNA引物合成，RNA聚合酶以DNA链为模版合成RNA引物主导链合成一个底物2.延伸在DNA聚合酶iii的催化下，以模板链3'—5'的核苷酸顺序互补的原则。

在RNA引物的3'-OH末端逐个连接上DNMP直至合成整个前导链和冈崎片段3.终止，aRNA引物的切除和缺口的填补，5'端或冈崎片段5'端的引物由聚合酶i切除并填补bDNA片段连接由DNA连接酶连接三. 什么是操纵子，用原核生物的操纵子模型解释合成酶的阻遏原理操纵子基因表达的协调单位.具有共同控制区和调节系统。

乳糖操纵子（Lacoperon）乳糖不存在,R（I）f repressor结合于Operater,挡住RNA聚合酶的通路，无法转录乳糖为碳源时，乳糖—诱导物，与repressor结合成复合物，不能结合于0,让RNA聚合酶通过操纵区部位，移到结构基因，转录开始。

第2章染色体与D N A名词解释原癌基因：细胞内与细胞增殖相关的正常基因,是维持机体正常生命活动所必须的,在进化上高等保守; 当原癌基因的结构或调控区发生变异,基因产物增多或活性增强时,使细胞过度增殖,从而形成肿瘤;半保留复制：以亲代DNA双链为模板以碱基互补方式合成子代DNA,这样新形成的子代DNA中,一条链来自亲代DNA,而另一条链则是新合成的,这种复制方式叫半保留复制;填空题3.在聚合酶链反应中,除了需要模板DNA外,还需加入引物、DNA聚合酶、dNTP和镁离子;4.引起DNA损伤的因素有自发因素、物理因素、化学因素;5.DNA复制时与DNA解链有关的酶和蛋白质有拓扑异构酶Ⅱ、解螺旋酶、单链DNA结合蛋白;6.参与DNA切除修复的酶有DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、特异的核酸内切酶;7.在真核生物中DNA复制的主要酶是DNA聚合酶δ;在原核生物中是DNA聚合酶Ⅲ;8.端粒酶是端粒酶是含一段RNA的逆转录酶;9.DNA的修复方式有错配修复、碱基切除修复、核苷酸切除修复、DNA的直接修复;简述DNA复制的过程DNA的复制过程可被分为3个阶段,即复制的起始、延伸和终止;每个DNA复制的独立单元主要包括复制起始位点和终止位点;DNA复制的起始包括预引发和引发两个阶段;在预引发阶段,DNA解旋解链,形成复制叉,引发体组装；在引发阶段,在引发酶的催化下以DNA链为模板合成一段短的RNA引物;复制时DNA链的延伸由DNA 聚合酶催化,以亲代DNA链为模板,引发体移动,从5′→3′方向聚合子代DNA链;当子链延伸到达终止位点是,DNA复制就终止了,切除RNA引物,填补缺口,在DNA连接酶的催化下将相邻的冈崎片段连接起来形成完整的DNA长链;试述真原核生物的DNA复制的特点的不同之处①真核生物染色体有多个复制起点,多复制眼,呈双向复制,多复制子;原核生物的染色体只有一个复制起点,单复制子也呈双向复制;②真核生物冈崎片段长约200bp比原核生物略短;真核生物DNA复制速度比原核慢,速度为1000～3000bp/min仅为原核生物的1/20～1/50;③真核生物复制的终止在端粒处,原核生物的复制叉相遇时即终止;④真核生物染色体在全部复制完之前起点不再重新开始复制；而在快速生长的原核生物染色体DNA 复制中,起点可以连续发动复制;真核生物快速生长时,往往采用更多的复制起点;⑤真核生物有多种DNA聚合酶,DNA聚合酶δ是真正的复制酶,在PCNA存在下有持续的合成能力;PCNA称为增殖细胞核抗原,相当于大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的β-夹子,RFC蛋白相当于夹子装配器;原核生物的DNA聚合酶有三种DNA聚合酶ⅢDNA的真正复制酶：多亚基酶,含十种亚基,该酶DNA合成的持续能力强;⑥真核生物线性染色体两端有端粒结构,它是由许多成串的重短复序列组成,端粒功能是稳定染色体末段结构,防止染色体间的末端连接,并可补偿滞后链5’-末段在消除RNA引物后造成的空缺,使染色体保持一定长度;端粒酶是含一段RNA的逆转录酶;⑦RPA：真核生物的单链结合蛋白；RNaseH1和MF-1切除RNA引物,DNA聚合酶ε填补缺口;简述半保留复制的生物学意义DNA的复制过程以大肠杆菌为例复制起始：1、拓扑异构酶解开超螺旋;2、Dna A蛋白识别并在ATP存在下结合于四个9bp的重复序列;3、在类组蛋白HU、ATP参与下, Dan A蛋白变性13个bp的重复序列,形成开链复合物;4 、Dna B借助于水解ATP产生的能量在Dna C的帮助下沿5’→3’方向移动,解开DNA双链,形成前引发复合物;5、单链结合蛋白结合于单链;6、引物合成酶Dna G蛋白开始合成RNA引物;链的延长冈崎片段的合成：在DNA聚合酶Ш的催化下,以四种5’ -脱氧核苷三磷酸为底物,在RNA引物的3’端以磷酸二酯键连接上脱氧核糖核苷酸并释放出焦磷酸;DNA链的延伸同时进行前导链和滞后链的合成;两条链方向相反;6、PCR的基本原理PCR是在试管中进行的DNA复制反应,基本原理是依据细胞内DNA半保留复制的机理,以及体外DNA 分子于不同温度下双链和单链可以互相转变的性质,人为地控制体外合成系统的温度,以促使双链DNA变成单链,单链DNA与人工合成的引物退火,然后耐热DNA聚合酶以dNTP为原料使引物沿着单链模板延伸为双链DNA;PCR全过程每一步的转换是通过温度的改变来控制的;需要重复进行DNA模板解链、引物与模板DNA结合、DNA聚合酶催化新生DNA的合成,即高温变性、低温退火、中温延伸３个步骤构成PCR反应的一个循环,此循环的反复进行,就可使目的DNA得以迅速扩增;DNA模板变性：模板双链DNA 单链DNA,94℃;退火：引物＋单链DNA 杂交链,引物的Tm值;引物的延伸：温度至70 ℃左右, Taq DNA聚合酶以４种dNTP为原料,以目的DNA为模板,催化以引物３’末端为起点的5’→3’DNA链延伸反应,形成新生DNA链;新合成的引物延伸链经过变性后又可作为下一轮循环反应的模板PCR,就是如此反复循环,使目的DNA得到高效快速扩增;第三章启动子：是一段位于结构基因5,端上游区的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性;指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段特定的DNA序列;增强子：能强化转录起始的序列称为增强子;转录：以DNA为模板,按照碱基配对原则合成RNA,即将DNA所含的遗传信息传给RNA,形成一条与DNA链互补的RNA的过程;RNA的编辑：是某些RNA,特别是mRNA的一种加工方式,它导致了DNA所编码的遗传信息的改变;外显子Exon ：真核细胞基因DNA中的编码序列,这些序列被转录成RNA并进而翻译为蛋白质;内含子Intron：真核细胞基因DNA中的间插序列,这些序列被转录成RNA,但随即被剪除而不翻译;复制子：生物体的复制单位称为复制子replicon ,是在同一个复制起点控制下的一段DNA序列;转录单元：是一段启动子开始至终止子结束的DNA序列;转录起点：是与新生RNA链的第一个核苷酸相对应的DNA链上的碱基,通常为一个嘌呤;转录开始时模板上的第一个碱基,在原核中常为A或G,而且位置固定;填空1转录的基本过程包括：模板识别,转录起始,转录的延伸,转录的终止;2基因表达包括：转录和翻译两个阶段;3RNA的编辑方式：碱基突变,尿甘酸的缺失和添加;4在原核生物中,-35区与-10区之间的距离大约是16~19bp5帽子结构的功能：〔1〕在翻译中起识别作用〔2〕使mRNA免遭核苷酸的破坏6原核生物只有一种RNA聚合酶而真核生物有三种,每一种都有其特定的功能;聚合酶Ⅰ合成rRNA,聚合酶Ⅱ合成mRNA,聚合酶Ⅲ合成tRNA和5s rRNA;三种聚合酶都是具有多亚基的大的蛋白复合体;7 转录因子通常具有两个独立的结构域：一个结合DNA,一个激活转录;8 在真核细胞mRNA的修饰中,“帽子”结构由甲基组成,“尾”由多聚腺嘌呤组成;9原核生物的绝大部分起启动子都存在共同的序列,即位于-10bp处的区和-35bp处的区,他们都是RNA聚合酶与启动子结合的位点,能与σ因子相互识别而具高度亲和性;真核生物中,在转录起始位点上游-25—-35bp处有区和位于-70--80bp处的区;简答题1增强子的特点〔1〕有远距离效应〔2〕无方向性〔3〕顺势调节〔4〕无物种和基因的特异性〔5〕具有组织的特异性〔6〕有相位性,其作用与DNA的构象有关〔7〕有的增强子可以对外部信号产生反应;2比较DNA复制和转录的异同点相同点：都以DNA链作为模板,合成方向均为5,端到3,端,聚合反应均遵循碱基配对原则,通过核苷酸之间形成的3,,5,—磷酸二酯键使核苷酸键延长;不同点：复制转录模板两条链均被复制模板链转录不对称转录原料Dntp NTP酶DNA聚合酶RNA聚合酶产物子代双链DNA半保留复制mRNA tRNA rRNA配对方式A-T G-C A-U A-T G-C引物RNA引物不需要引物DNA复制与转录的异同相同点：都需要模板都以三磷酸核苷酸为底物NTP或dNTP合成方向都是5→’3’不同点转录不需引物；只转录DNA分子中的一个片段称为转录单位或操纵子,operon；双链DNA中只有一条链具有转录活性称为模板链；哪个基因被转录与特定的时间、空间、生理状态有关;RNA聚合酶无校对功能;原核生物与真核生物mRNA的比较1、原核生物mRNA的半衰期短；2、许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在；3、原核生物5’端无帽子结构,3’或只有短的polyA;4、真核生物mRNA5’端有帽子结构,5、绝大多数真核生物mRNA3’具有polyA尾巴,是转录后加上的,是mRNA从核到质转移所必需的形式,提高mRNA的稳定性;大肠杆菌的转录过程：1、识别阶段：RNA聚合酶在σ亚基的引导下结合于启动子上；2、DNA双链局部解开；3、起始阶段：在模板链上通过碱基配对合成最初RNA链；4、延伸阶段：核心酶向前移动,RNA链不断生长；5、终止阶段：RNA聚合酶到达终止子；6、RNA和RNA聚合酶从DNA上脱落;论述题1 真核生物转录的前体hnRNA如何加工为成熟的mRNA真核生物mRNA的结构组成：5,端存在帽子结构,3,端通常具有polyA尾巴,无内含子,部分碱基发生甲基化;①5,端加帽：当RNA聚合酶Ⅱ聚合的转录产物达到25碱基长时,在其5,端加上一个以5,→3,方向相连的7—甲基鸟苷帽,防止5,核苷酸外切酶的攻击,有利于剪接、转运和翻译的进行；②3,端加尾：很多真核生物的hnRNA的3,端经过剪切后再加上多聚A残基即polyA尾巴,这有助于整个分子的稳定；③剪接：在真核生物的mRNA加工过程中,内含子序列被切除,两侧的外显子片段连接;剪接反应在核内进行,需要内含子有5,—GU,AU—3,以及一段分支点序列;其过程是：内含子先以一个具尾的环状分子或套索状分子形式被删除,然后被降解,剪接包括snRNP与保守序列结合,形成剪接体,在其内发生剪接与连接反应；④编辑；⑤甲基化修饰：当序列为5,—RRACX—3,时会在第6位N原子位置发生甲基化;2概括细菌细胞的转录过程转录是通过RNA聚合酶的作用,以一条DNA链为模板产生一条单链RNA过程;步骤如下：⑴与RNA聚合酶全酶的结合：一个RNA聚合酶全酶分子与待转录的DNA编码序列上游的启动子序列松弛的结合;⑵起始：RNA聚合酶往下游移动了几个核苷酸到达启动子的另一段短序列—Pribnow框,紧密地与DNA 结合;DNA上的启动子区域解链,RNA便从Pribnow框下游的几个核苷酸处开始合成,通常是DNA的反义链作为模板,合成几个核苷酸后,δ因子被释放并循环使用,以下步骤不再需要δ因子;⑶延伸：RNA聚合酶核心酶沿着DNA模板移动,使DNA解链,与DNA模板的下一碱基互补核苷三磷酸聚合到链上;RNA聚合酶继续在DNA上移动,RNA链从模板链被释放出来,DNA双螺旋重新形成;⑷当所有编码序列被转录后,RNA聚合酶移动一个终止序列,即终止子;转录复合体解体,RNA聚合酶和新形成的RNA从DNA模板上脱落下来;3、复杂转录单位的原始转录产物的加工方式有几种分别是什么1剪、利用多个5’端转录起始为点或接位点产生不同的蛋白质;2、利用多个加polyA位点和不同的剪接方式产生不同的蛋白质;3、虽无剪接,但有多个转录起始位点或加polyA位点的基因;第四章.SD序列：在原核生物mRNA起始密码AUG上游,存在4~9个富含嘌呤碱的一致性序列,如-AGGAGG-,称为S-D序列;位于原核生物起始密码子上游7-12个核苷酸处的保守区,该序列与16SrRNA3’端反向互补;又称为核蛋白体结合位点ribosomal binding site,RBS正转录调控：负转录调控：填空题1．tRNA的种类有：起始tRNA和延伸tRNA,同工tRNA,校正tRNA;2. tRNA的二级结构为三叶草型,三级结构为倒L型;tRNA结构3.原核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲酰甲硫氨酰—tRNAfMet-tRNA fMet,它携带的氨基酸是甲酰甲硫氨酸fMet,而真核生物蛋白质合成的起始tRNA是甲硫氨酰—tRNAMet-tRNA Met,它携带的氨基酸是甲硫氨酸Met;4．新生肽链每增加一个氨基酸单位都要经过AA-tRNA与核糖体的结合,肽键形成,移位三步反应;5.核糖体的作用位点有：A位点、P位点、E位点;5．在真核生物中蛋白质合成起始时先形成起始因子和起始tRNA复合物,再和40S亚基形成40S起始复合物;6．氨酰tRNA合成酶既能识别氨基酸,又能识别相应的tRNA;7．多肽合成的起始密码子是AUG,而UAA,UAG,UGA是终止密码子;8．遗传密码的特点包括连续性,简并性,摆动性,普遍性与特殊性;9．核酸复制时,DNA聚合酶沿模板链3’→5’方向移动；转录时,RNA聚合酶沿模板链3’→5’方向移动；翻译时,核糖体沿模板链5’→3’方向移动;10．原核生物蛋白质合成形成起始复合物时,其mRNA先与核糖体的30S亚基结合,然后再与结合起始因子和GTP的甲酰甲硫氨酰—tRNA结合,形成30S起始复合物,然后再与50S形成70S起始复合物;简答题：1．简述核糖体的结构及功能特点：答：核糖体的结构：①真核生物：由60S大亚基和40S小亚基组成的80S的核糖体；②原核生物：由50S 大亚基和30S小亚基组成的70S的核糖体功能特点：合成蛋白质 ;在单个核糖体上,包括至少5个功能活性中心,在蛋白质合成过程中,各有专一的识别作用和功能：mRNA的结合部位——小亚基 ,结合或接受AA-tRNA的部位——大亚基A位,结合或接受肽基tRNA部位——大亚基,肽基转移部位——大亚基P位,形成肽键部位转肽酶中心——大亚基E 位;2.简述氨基酸的活化过程答：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化;活化分两步：①活化：aa + ATP+ E→氨基酰-AMP释放出 PPi②转移：氨基酰-AMP转移到 tRNA 并释放出 AMP;3、论述蛋白质的翻译过程;答：蛋白质的翻译即合成过程可分为四个阶段：氨基酸的活化、肽链合成的起始、延伸和终止;①氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量,才能参与蛋白质的合成,活化反应由氨酰tRNA合成酶催化,最终氨基酸连接在tRNA的3’端合成氨酰- tRNA;②肽链合成的起始：核蛋白体大小亚基分离 ,mRNA在小亚基上定位结合,起始氨基酰tRNA与小亚基结合,核蛋白体大亚基结合;③肽链的延伸：肽链的延长是在核蛋白体上连续性循环式进行,每次循环增加一个氨基酸,分为以下三步：一进位:根据mRNA下一组遗传密码指导,使相应氨基酰-tRNA进入核蛋白体A位;二成肽:肽酰转移酶将相邻的两个氨基酸相连形成肽键,该过程不需要能量的输入；三转位：移位酶利用GTP水解释放的能量使核糖体沿mRNA移动一个密码子,释放出空载的tRNA并将新生肽链运至P位点;③肽链合成的的终止与释放：释放因子识别并与终止密码子结合,水解P位上多肽链与tRNA之间的二脂键,接着,新生肽链和tRNA从核糖体上释放,核糖体大、小亚基解体,蛋白质合成结束;4、原核生物翻译的起始过程1核糖体大小亚基分离230s小亚基通过SD序列与mRNA模板相结合3在IF-2和GTP的帮助下fMet-tRNAfMet进入小亚基的P位,tRNA的反密码子与mRNA上密码子配对; 4带有tRNA、mRNA和三个翻译起始因子的小亚基起始复合物与50s的大亚基结合,GTP水解释放翻译起始因子;5、以大肠杆菌为例简述蛋白质合成的过程从以下四个方面详细论述1氨基酸的活化：2肽链合成的起始：3肽链的延生：4肽链合成的终止：第六章乳糖操纵子模型内容1Z、Y、A基因产物由同一条多顺反子mRNA分子所编码;2乳糖操纵子mRNA分子的启动区P位于阻遏基因I与操纵区O之间,不能单独起始半乳糖苷酶和透过酶基因的高效表达;3乳糖操纵子的操纵区是DNA上的一小段序列仅为26bp,是阻遏物的结合位点;4当阻遏物与操纵区相结合时,lacmRNA的转录起始受到抑制;5诱导物通过与阻遏物结合,改变其三维构象,使之不能与操纵区相结合,诱发lac mRNA的合成;乳糖操纵子lac operon的结构1、结构基因1lacZ：编码b －半乳糖苷酶使乳糖水解2lacY：编码b －半乳糖苷透过酶使b －半乳糖苷透过细胞壁、质膜进入细胞内3lacA：编码b －半乳糖苷乙酰转移酶将乙酰基转移到b －半乳糖苷上2、调节基因regulatory gene1概念：其产物参与调控其他结构基因表达的基因2特点：a、可在结构基因群附近、也可远离结构基因b、不仅对同一条DNA链上的结构基因起作用,而且能对不同DNA链上的结构基因起作用3调控蛋白：类型：a、阻遏蛋白repressive protein与操纵元件结合后能减弱或阻止所调控基因转录的调控蛋白b、激活蛋白activating protein：与操纵元件结合后能增强或启动所调控基因转录的调控蛋白3、操纵元件operator1与启动子邻近或与启动子部分序列重叠2具有回文结构,能形成十字形结构;3与不同构像的蛋白质结合,可以分别起阻遏或激活基因表达的作用4、启动子promoter是指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列;1-10序列--- Pribnow盒：TATAAT；2-35bp序列：TTGACA操纵子至少有一个启动子,一般在第一个结构基因5’上游,控制整个结构基因群的转录5、终止子terminator是给予RNA聚合酶转录终止信号的DNA序列1不依赖ρ因子的终止子2依赖ρ因子的终止子在一个操纵元中至少在结构基因群最后一个基因的后面有一个终止子大肠杆菌乳糖操纵子lactose operon包括3个结构基因：Z、Y和A,以及启动子、控制子和阻遏子等;转录的调控是在启动区和操纵区进行的;LacI——阻抑蛋白, LacZ——β-糖苷酶,LacY——透性酶,LacA——转乙酰基酶;三种酶的功能：①. β-半乳糖酶：将乳糖分解成半乳糖和葡萄糖②. 渗透酶：增加糖的渗透,易于摄取乳糖和半乳糖③. 转乙酰酶：β-半乳糖转变成乙酰半乳糖lac 操纵子小结通常情况葡萄糖供应正常阻遏蛋白与操纵序列结合,基因不转录;细胞外的乳糖通过透性酶吸收到细胞内；细胞内的β-半乳糖苷酶将乳糖转变为异乳糖;异乳糖结合到乳糖阻抑物上使之从操纵序列上脱离,聚合酶迅速开始lacZYA基因的转录;这就是负控诱导;然而,还需要细菌生长系统中缺少葡萄糖,使cAMP含量增加,才有足够量的cAMP与CRP结合形成CRP-cAMP复合物结合于Plac上游;使DNA双螺旋发生弯曲,转录才可以有效地进行;组氨酸操纵子：与His降解代谢有关的两组酶类被称为hut酶histidine utilizing enzyme,控制这些酶合成的操纵子被称为hut operon;由一个多重调节的操纵子控制,有两个启动子,两个操纵区及两个正调控蛋白;转录后调控一、翻译起始的调控遗传信息的翻译起始于mRNA上的核糖体结合位点RBS——起始密子AUG上游的一段非翻译区;在RBS中有SD序列,与核糖体16S rRNA的3’端互补配对,促使核糖体与mRNA相结合;RBS的结合强度取决于SD序列的结构及与AUG的距离;SD与AUG相距一般以4～10核苷酸为佳,9核苷酸最佳;二、mRNA稳定性对转录水平的影响所有细胞都有一系列核酸酶,用来清除无用的mRNA;一个典型的mRNA半衰期为2-3min;mRNA分子被降解的可能性取决于其二级结构;SD序列的微小变化,往往会导致表达效率成百上千倍的差异,这是由于核苷酸的变化改变了形成mRNA 5’端二级结构的自由能,影响了30S亚基与mRNA的结合,从而造成了蛋白质合成效率上的差异;三、蛋白质的调控作用细菌中有些mRNA结合蛋白可激活靶基因的翻译;相反,mRNA特异性抑制蛋白则通过与核糖体竞争性结合mRNA分子来抑制翻译的起始;大肠杆菌中的核糖体蛋白就存在翻译抑制现象;四、反义RNA的调节作用RNA调节是原核基因表达转录后调节的另一种重要机制;细菌相应环境压力的改变,会产生一些非编码小RNA分子,能与mRNA中的特定序列配对并改变其构象,导致翻译过程的开启或关闭等作用;第七八章操纵子operon：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区包括启动子和操纵基因以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位,所转录的RNA为多顺反子;在原核生物中,若干结构基因可串联在一起,其表达受到同一调控系统的调控,这种基因的组织形式称为操纵子;反式作用因子trans-acting factor：能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上,参与调控靶基因转录效率的蛋白质;弱化子：在trp mRNA 5’端有一个长162bp的mRNA片段被称为前导区,其中123～150位碱基序列如果缺失,trp基因表达可提高6-10倍;mRNA合成起始以后,除非培养基中完全没有色氨酸,转录总是在这个区域终止,产生一个仅有140个核苷酸的RNA分子,终止trp基因转录;这个区域被称为弱化子,该区mRNA 可通过自我配对形成茎-环结构;顺式作用元件cis-acting element影响自身基因表达活性的非编码DNA序列;断裂基因splite gene：真核生物结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成,去除非编码区再连接后,可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质,这些基因称为断裂基因;基因的分子生物学定义：产生一条多肽链或功能RNA所必需的全部核苷酸序列;基因表达的时间特异性：基因表达的空间特异性：填空题1、真核生物中反式作用因子的DNA结合结构域有：螺旋－转角－螺旋,碱性－螺旋-环-螺旋,锌指,碱性－亮氨酸拉链,同源域蛋白;2、转录调节因子按功能可以分为：基本转录因子和特异转录因子;3、真核生物有3类RNA聚合酶,负责转录rRNA基因的RNA聚合酶是：RNA聚合酶I4、典型的原核启动子的四个特征是：转录起始位点,原核基因转录起始位点通常是嘌呤,-10区,-35区;5、乳糖操纵子的结构结构基因有：lacZ,lacY,lacA;问答题1、乳糖操纵子的作用机制;答：1乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I;2阻遏蛋白的负性调节：没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶;所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控; 3CAP的正性调节：在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶;4协调调节：乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调,互相制约;2、原核和真核生物基因表达调控的比较;答：相同点：都具有转录水平的调控和转录后水平的调控,并且也以转录水平的调控最为重要；真核结构基因的上游和下游也存在着许多特异的调控成分,并依靠特异蛋白因子与这些调控成分的结合与否控制着基因是否转录不同点：原核的染色质是裸露的DNA,而真核的染色质则是由DNA与组蛋白紧密结合形成的核小体;原核中染色质的结构对基因的表达没有明显的调控作用,而在真核中这种作用是明显的;在原核基因转录的调控中,既有激活物的调控,也有阻遏物的调控,二者等同重要;在真核生物中虽然也有正调控成分和负调控成分,但迄今已知的主要是正调控;原核基因转录和翻译是偶联的,而真核生物的转录和翻译不是偶联的, RNA在细胞核中合成,只有经转运穿过核膜,到达细胞质后,才能被翻译成蛋白质;使得真核基因的表达有多种转录的调控机制;原核生物细胞内基因表达基本一致,且对于外界环境条件变化的反应也基本相同;真核生物大都是多细胞的复杂有机体,在个体发育中由一个受精卵逐步分化形成不同的细胞类型和各种组织,分化是不同基因表达的结果,在不同发育阶段和不同细胞类型中,基因的时空表达受到严密的调控;32、真核生物转录后水平的调控机制1、5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义：5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解;2、mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用3、mRNA运输的控制4、典型的DNA重组实验通常包含哪些步骤1提取供体生物的目的基因或称外源基因,酶接连接到另一DNA分子上克隆载体,形成一个新的重组DNA分子;2将这个重组DNA分子转入受体细胞并在受体细胞中复制保存,这个过程称为转化;3对那些吸收了重组DNA的受体细胞进行筛选和鉴定;4对含有重组DNA的细胞进行大量培养,检测外援基因是否表达;。