磷钼杂多酸光度法测定土壤中微量磷

总磷(TP)测定方法（孔雀绿-磷钼杂多酸分光光度法）一、实验原理在中性条件下用过硫酸钾使试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐，在酸性介质中正磷酸盐与钼酸铵反应，经一系列反应后的物质与显色剂发生显色反应，通过分光光度计测其吸光度，由标准曲线算出总磷含量。

二、适用范围取样消解水样中的总含磷量不超过2μg。

三、实验仪器50.0ml具塞比色管；压力锅（能升温至120℃）；分光光度计（3 cm玻璃比色皿）；各规格移液管。

四、试剂1.钼酸铵（分析纯）溶液：溶解176.5g鉬酸铵（（NH4）6Mo7O24•4H2O）于水中，并稀释至1000ml；2.孔雀绿（分析纯）溶液：加热溶解1.12g孔雀绿于水中，并稀释至100ml；3.显色剂：在40ml钼酸铵溶液中依次加入30ml浓硫酸及36ml孔雀绿溶液，混匀、静置30 min后，经过0.45μm滤膜过滤（现用现配）；4.聚乙烯醇（PVA）溶液：取PVA（聚合度1750±50）1g溶于100ml热水中，滤纸过滤后使用；5.磷酸盐储备液：将磷酸二氢钾于110℃干燥2 h，在干燥器中放冷.称取0.2197g溶解水中，定量转移入1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀释至标线，此溶液磷质量浓度为50.00μg/mL；6.磷酸盐标准使用液：称取1ml贮备液于250ml容量瓶中，用水稀释至标线，此溶液磷质量浓度为0.2μg/mL磷（现用现配）；7.5%过硫酸钾溶液：溶解过硫酸钾5g于水中，并稀释至100ml；8.浓硫酸（分析纯）；五、实验步骤水样预处理：取混匀水样25.0ml于具塞比色管中，加4ml 5%过硫酸钾溶液，加塞并用纱布包扎好，置于压力锅中，于120℃下消解30min，取出放冷，供水中总磷测定。

标准曲线的绘制：于25ml具塞比色管中分别加入磷酸盐标准使用液0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，5.00，10.00ml，加水至25ml，再加入3ml的显色剂及1ml1%PVA溶液，混匀，放置30 min后，于650 nm波长处以试剂空白为参比，进行吸光度测量，得到吸光度-磷含量标准曲线。

磷含量的测定(钼酸铵分光光度法)磷是植物生长和发育所必需的营养元素之一，其含量与作物的产量和质量有着密切的关系。

因此，测定土壤和植物中的磷含量对于进行科学合理的农业生产至关重要。

本文将介绍一种常用的测定磷含量的方法——钼酸铵分光光度法。

一、实验原理钼酸铵分光光度法根据磷酸根离子与钼酸铵在氯酸介质中反应生成黄色的钼酸磷酸铵络合物，并在特定波长下吸收一定量的光，建立了磷含量与吸光度之间的线性关系，从而实现了磷含量的测定。

其反应方程式如下所示：（NH4）6Mo7O24·4H2O + H2PO4- + 3H+ → (NH4)3PO4·12MoO3 + 7H2O二、实验仪器及试剂仪器：可调单色光度计；试剂：1. 氯化铵（NH4Cl）2. 氯化铵钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·4H2O]3. HCl4. 稀氨水。

5. 磷标准溶液（浓度：1.0mg/L）三、实验步骤1. 样品处理土壤样品：取1g左右的干燥土样，加入50mL的氯化铵(HCl-NH4Cl)提取液，放在摇床上振荡2小时，静置3小时后离心5min，取上清液进行磷的测定。

植物样品：使用离心机离心提取物，将离心后的上清液滤过0.45μm的过滤膜。

植物样品的处理方法有所不同，具体可参考《土壤农化分析标准》。

2. 样品测定① 量取分别加入7个不同浓度的磷酸标准溶液（0.0mg/L、0.025mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L、1.0mg/L、5.0mg/L）进行定量校正。

② 取2mL去离子水或样品提取液，加入2mL的NH4Cl-NH4MoO4缓冲液，再加入5mL的HCl调节pH至1，然后用去离子水定容至10mL作为测试样品液。

③ 在可调单色光度计中比较未知浓度试液的吸收光谱与各标准品的吸收光谱，得到相应的吸光度值（A值），并记录下所使用的波长。

3. 结果计算将吸收光谱值A与标准品吸收光谱A0（不含磷酸）进行比较，将样品测得的A值减去A0，得到磷酸根离子的吸光度，然后根据标准曲线进行浓度的计算，最后得到样品中磷含量的浓度。

实验七：土壤无机磷的测定一、实验方法及目的采用SMT法测定土壤无机磷；掌握土壤无机磷的测定方法及分光光度法。

二、实验原理1）样品的前处理：用1mol/L的HCL溶液将土壤中无机磷转移到提取液中。

2）提取液中正磷酸盐的测定：在酸性条件下，试液中的P（正磷酸盐）与钼酸形成配合物-磷钼杂多酸（又叫磷钼酸杂聚配合物）。

H3PO4 + 12H2MoO4 = H3P(Mo3O10)4 + 12H2O P多时呈黄色，少时无色在一定酸度下，加入还原剂后，杂多酸中的Mo 被还原，产生特殊兰色（钼兰），其中一部分Mo6+被还原成Mo5+或Mo3+，或Mo3+、Mo5+都有。

在钼兰的吸收光谱曲线中有两个吸收峰(660nm或880nm)。

测定时可以根据分光光度计的性能选用。

我国国标采用700nm波长。

三、实验仪器与药品1仪器：多用调速振荡器，离心机，分光光度计。

2试剂：1）1mol•L-1HCl溶液：准确移取83.3ml浓HCl溶于定容至1L；2）（1+1）硫酸溶液3）磷标准贮备液（50.0 μg.mL-1）：称取0.2197±0.001g于110℃干燥2h在干燥器中放冷的磷酸二氢钾(KH2PO4)，用水溶解后转移至1000mL容量瓶中，加入大约800mL水、加5mL1+1硫酸用水稀释至标线并混匀。

1.00mL此标准溶液含50.0 μg磷。

4）抗坏血酸（10%）：溶解10g抗坏血酸(C6H8O6)于水中，并稀释至100mL。

此溶液贮于棕色的试剂瓶中，在冷处可稳定几周。

如不变色可长时间使用。

5）钼酸盐溶液：溶解13g钼酸铵[(NH4)6Mo7O24•4H2O]于100mL水中。

溶解0.35g酒石酸锑钾[KSbC4H4O7•½H2O]于100mL水中。

在不断搅拌下把钼酸铵溶液徐徐加到300mL硫酸(1+1)中，加酒石酸锑钾溶液并且混合均匀。

此溶液贮存于棕色试剂瓶中，在冷处可保存二个月。

6）过100目筛土样0.2g。

孔雀绿-磷钼杂多酸分光光度法是一种基于孔雀绿和磷钼杂多酸之间的化学反应而建立的一种分光光度法，用于测定痕量金属离子。

该方法具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点，被广泛应用于环境、食品、医药等领域。

原理
孔雀绿是一种具有芳香族结构的有机染料，在酸性溶液中与磷钼杂多酸反应生成蓝绿色的络合物。

络合物的颜色强度与金属离子的浓度成正比。

因此，可以通过测定络合物的吸光度来定量测定金属离子。

试剂
孔雀绿溶液：将0.100 g孔雀绿溶解于100 mL乙醇中。

磷钼杂多酸溶液：将1.000 g磷钼酸铵溶解于100 mL水中，然后加入0.5 mL浓硫酸。

标准金属离子溶液：将适量的金属盐溶解于水中，配制成一定浓度的标准溶液。

操作步骤
1. 取一定体积的待测样品，加入适量的孔雀绿溶液和磷钼杂多酸溶液。

2. 充分混合后，静置一定时间，使络合物完全生成。

3. 用分光光度计测定络合物的吸光度，以波长为610 nm为最大吸收波长。

4. 根据吸光度与金属离子浓度的关系，计算出待测样品中金属离子的含量。

注意事项
孔雀绿和磷钼杂多酸溶液应现配现用，不能久置。

络合物的颜色强度受酸度的影响，因此应严格控制溶液的酸度。

络合物的颜色强度也受温度的影响，因此应在恒温条件下进行测定。

应用
该方法被广泛应用于环境、食品、医药等领域。

例如，该方法可用于测定水体中的痕量金属离子，以评估水体的污染程度；也可用于测定食品中的痕量金属离子，以保证食品的安全；还可用于测定药品中的痕量金属离子，以确保药品的质量。

浅析钮磷钮蓝分光光度法测定上壤中磷含量磷在生物圈内的分布很广泛，在地壳中含量丰富，列元素含虽的前10位，并广泛存在于动、植物组织中，也是人体含量较多的元素之一，稍次于钙列第6位。

磷存在于人体所有细胞中，是维持件骼和牙齿健康的必要物质，几乎参与所有生理上的化学反应。

磷还是使心脏有规律跳动、维持肾脏正常机能和传达神经刺激的重要物质。

缺少磷，烟酸不能被吸收。

磷的正常机能需要维生素D(维生素食品)和钙(钙食品)来维持。

环境污染源中的磷主要来自化肥、冶炼、合成洗涤剂等行业，生活污水中也常含有较大量磷。

磷对上壤的污染主要是人为污染，来源于人类过量施用农药、化肥及污水灌溉等。

土壤污染具有隐蔽性，即从开始污染到导致后果有一个长期、间接、逐步积累的过程。

了解上壤中磷含量，对土壤的科学利用有一定的参考价值。

1方法原理将上壤环境样品用硝酸、氢氟酸分解，以髙氯酸、硫酸氧化磷。

硫酸冒烟处理后，以盐酸溶解盐类，用氨水使氢氧化铁和磷酸铁共沉淀而与基体中大部分铝分离。

以硫酸溶解沉淀，在硫酸介质中，用硫代硫酸钠还原高价碎，磷与硝酸钮、铝酸彼形成三元配合物，用抗坏血酸还原后，生成钮磷铝彼蓝，用分光光度计于波长700nm处测量貝吸光度。

2试剂(1)氢氟酸:二1. 15g/mLo(2)高氯酸:=1.67g/mL0(3)氨水:二0. 90g/mL o(4)硫酸:=1.84g/mLo(5)硝酸:=1.51g/mLo(6)盐酸:=1.19g/mLo(7)抗坏血酸溶液:称取抗坏血酸10g,用100mL蒸餾水溶解，混匀。

用时现配。

(8)硫酸铁彼溶液:称取硫酸铁披90g,用lOOmL蒸餾水溶解，混匀。

(9)硫代硫酸钠溶液:1L水中含20g无水硫代硫酸钠，用时现配。

(10)硝酸钮溶液:称取30g硝酸钮，加入lOOmL浓硝酸，待完全溶解后，加入900mL蒸懈水、4g尿素，混匀。

(11)铝酸彼溶液:称取15g铝酸鞍，置于400mL烧杯中，加入200mL蒸镭水，温热溶解, 过滤后加入800mL蒸镭水，混匀。

孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法测磷酸盐方法孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法测磷酸盐方法引言近年来，随着环境污染日益严重，磷酸盐在水体和土壤中的含量成为环境监测和水质评估的重要指标之一。

而孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法作为一种常用的磷酸盐测定方法，具有操作简单、灵敏度高、准确性好等特点，被广泛应用于环境科学领域。

方法以下是使用孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法测定磷酸盐的步骤：1.试样制备：–收集要测定的水样，确保样品的代表性。

–根据样品的含量，选择适当的容器进行保存。

–如有需要，进行必要的前处理，如过滤去除悬浮固体物等。

2.标准曲线制备：–准备一系列浓度已知的磷酸盐标准溶液。

–使用孔雀绿磷钼杂多酸试剂对标准溶液进行反应，并通过光度计测定吸光度。

–绘制标准曲线，以溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标。

3.测定样品：–取适量的水样，并与适量的孔雀绿磷钼杂多酸试剂反应。

–使用光度计测定该体系的吸光度，并在标准曲线上找到对应的磷酸盐浓度。

4.结果计算：–利用标准曲线，根据样品吸光度找到对应的磷酸盐浓度。

–如有需要，进行单位转换等计算。

优点使用孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法测定磷酸盐具有以下优点：•操作简单：方法步骤简单明了，无需复杂的仪器设备。

•灵敏度高：孔雀绿磷钼杂多酸试剂对磷酸盐有良好的选择性和敏感性。

•准确性好：标准曲线的制备使结果能够定量，结果准确可靠。

•应用广泛：该方法适用于水体、土壤等多种样品类型，可以满足不同环境监测的需求。

局限性虽然孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法具有一定的优点，但也存在一些局限性：•干扰物质：部分样品可能含有干扰物质，这些物质可能对测定结果产生影响，需要进行适当的前处理或选择其他方法进行校正。

•操作条件：方法的结果受到操作条件的影响，如温度、pH值等。

需严格控制这些条件，以确保结果的准确性。

•标准曲线制备：标准曲线的制备需要一定的实验操作和时间，需要在实验室环境下进行。

结论孔雀绿磷钼杂多酸分光光度法是测定磷酸盐含量的常用方法之一，具有操作简单、灵敏度高、准确性好等优点。