病理切片的特殊染色方法
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1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法【染色方法】(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片;(2)组织切片脱蜡至水;(3)用Van Gieson液染1~5分钟;(4)倾去染液,直接用95%乙醇分化和脱水;(5)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。
2.Masson氏结缔组织三合染色法【染色方法】(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;(2)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;(3)Masson氏染色液中5分钟或更长时间;(4)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;(5)5%磷钨酸水溶液2~3分钟,再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗(6)投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间;(7)再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;(8)脱水、透明和封固。
【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色,胶原纤维染绿色。
【染色方法】(1)石蜡切片、脱蜡至水;(2)0.25%高锰酸钾液3分钟;(3)蒸馏水洗2次;(4)1%草酸漂白即可;(5)蒸馏水洗2次;(6)2.5%铁明矾水溶液媒染5~10分钟,蒸馏水洗多次;(7)二氨氢氧化银浸染1分钟,蒸馏水洗3次;(8)10%甲醛液还原2分钟,蒸馏水洗3次;(9)0.2%氯化金液调色1~2分钟,蒸馏水洗3次;(10)5%硫代硫酸钠固定5分钟;(11)蒸馏水洗,需要时复染;(12)水洗、脱水、透明和封固。
【结果】网状维呈黑色,其他组织呈复染的颜色。
显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法【染色方法】(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;(2)切片入70%乙醇中洗2分钟;(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5~2小时;(4)直接入95%乙醇中分色数秒钟;(5)浸入蒸馏水洗2分钟;(6)用丽春红S液滴染切片5分钟;(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次;(8)将切片在空气中或冷风干燥;(9)二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。
病理学技术—特殊染色最最全总结病理学技术是医学研究领域中的一个重要分支,它利用各种不同的方法和技术,对组织和细胞进行分析和研究。
其中,特殊染色技术是病理学技术中的一个重要组成部分,通过使用不同的染色剂,有助于观察并区分不同的细胞和组织结构,以辅助诊断和研究。
以下是对特殊染色技术的最全总结。
1. PAS染色(Periodic Acid-Schiff染色):PAS染色可以用于检测细胞和组织中的多糖物质,如糖原、粘多糖和黏多糖等。
PAS染色通过一系列的化学反应,将含有醛基的物质氧化,然后与PAS染料反应生成染色物质。
2. 铁染色:铁染色可用于检测细胞和组织中的铁含量,它可以帮助鉴别铁负荷过多或过少的情况。
常用的铁染色方法包括Perls染色和Prussian blue染色。
3.去脂酸和酶染色:去脂酸和酶染色用于检测细胞和组织中的脂质和酶活性。
去脂酸染色通过将组织切片浸泡在油酸中,然后用溴化黄染色,观察脂质的分布情况。
酶染色通过使用特定的染色剂来观察细胞中的酶活性,如碘化物染色用于检测过氧化物酶活性。
4.免疫组织化学染色:免疫组织化学染色是通过使用特异性抗体来检测细胞和组织中的蛋白质和其他分子。
常见的免疫组织化学染色方法包括免疫荧光染色和酶联免疫组化染色。
这些染色技术可以用于确定特定抗原的存在和定位,从而帮助确定疾病的诊断和预后。
5.组织切片染色:组织切片染色是一种常见的特殊染色技术,它可以用于检测细胞和组织中的结构和细胞器。
常用的组织切片染色方法包括伊红染色、苏木素-伊红染色和单色染色等。
6.核酸染色:核酸染色用于检测细胞和组织中的核酸结构和功能,其中最常用的核酸染色方法是荧光原位杂交(FISH)和DAPI染色。
荧光原位杂交可以用来检测染色体异常和基因重排等。
7.肉眼可见染色:肉眼可见染色是一种用于检测显微镜下不易观察到的细胞和组织结构的染色技术。
常见的肉眼可见染色方法包括钙化染色和淀粉样变染色等。
总结以上所述,特殊染色技术在病理学领域中具有重要的应用意义,通过使用不同的染色剂,可以对细胞和组织进行全面和准确的分析和研究。
病理制片技术——常用特殊染色一、六胺银染色1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。
2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。
3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。
4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配制黏卡染液,将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内,加入5 0%L醇100 rnl混合摇匀,再加入氯化铝0.5g,水浴加温逐渐煮沸并搅动液体,使其充分溶解(注意染液容易外溅),数分钟后,染液由红色变成透明深紫红色,冷却后将液体倒入量筒,再加入50%乙醇至原量,过滤,放人冰箱备用。
2.第二步染色方法:染液使用时原液与蒸馏水比例为1:4稀释.切片厚5 um,脱蜡至水,经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上,染液可以重复使用多次,但要适当延长染色时间.切片水洗后,脱水、透明、封固。
3.图示结果:黏液为红色,胞核为蓝色.4.注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液,4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大,消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1.第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液:盐基性品红溶于乙醇内。
病理切片染色方法
病理切片染色是一种常用的病理学检查方法,可以帮助病理医师观察和诊断疾病。
常用的病理切片染色方法有以下几种:
1. 高尔基染色法:可以染色细胞核为蓝色,细胞质为粉红色,便于观察细胞形态和排列情况。
2. 血液涂片染色:常用的涂片染色方法有吉姆萨染色法、健康那染色法等,可以帮助观察血细胞的类型和数量。
3. 组织切片染色:常用的组织切片染色方法有血红素-伊宁染色法、苏木精-伊宁染色法等,可以染色细胞核和细胞质,以及观察组织结构和病理变化。
4. 免疫组化染色:通过特定抗体与组织中的特定抗原结合,来观察和诊断疾病。
常用的免疫组化染色方法有免疫组织化学染色法、免疫荧光染色法等。
5. 特殊染色:用于染色特定的结构或化合物,例如透明质酸染色、银染色等。
以上是一些常见的病理切片染色方法,根据具体需要和疾病类型,病理医师会选择不同的染色方法来进行诊断和研究。
结缔组织染色法1.1 Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞图表 A 1.1.Mallory染色,显示胶原纤维,A组排列规则1.2. Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞图表 B 1.2 Mssson三色法图表 C 1.2.Masson三色染色胃癌组织中血管平滑肌1.3. 显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞图表 D 4.Weigert间苯二酚法二、胶原纤维染色法2.2. Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核图表E 2.胶原纤维,Van Gieson(V.G.)苦味酸-酸性品红法图心肌梗塞myocardial infarction:心肌梗塞后2个月,van Gieson 染色, 坏死心肌被染成红色的纤维组织所代替,黄色区域为残留的心肌纤维。
2.1 天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法(参照上图)绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色3.1 Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(红液复染)图表 F 3.Gordon-Sweets氢氧化银氨液浸染法3.2 Gomori氏银氨液配制法图表G Gomori氏银氨液配制法四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳图表H 4.GOMORI醛复红染色法五、显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维黄色:背景图表I 4.Weigert间苯二酚法六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或枚红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌图表J 6.1.磷钨酸苏木素法图表K 6.1.磷钨酸苏木素染色液△早期心肌病变组织染色1.Nagar-Olsen染色法(1974年)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核图各组小鼠心肌组织Nagar-Olsen染色(光学显微镜, ×200)2.Poley显示缺氧心肌染色法(1964年)红色:缺氧心肌紫色:胞核七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核图表L 7.胃贲门腺体胞浆呈PAS阳性八、黏液物质(黏多糖)染色1.Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(ABPAS)染色法(1956)红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质图表M 8.1.AB-PAS染色结肠粘膜图表N 8.1.胃粘膜组织AB-PAS染色40×:2.爱先蓝(PH2.5)法蓝色:唾液酸、弱硫酸化黏液物质、一般粘液红色:胞核不着色:强硫酸化黏液物质图表O 8.2.爱先蓝(PH2.5)染色液图表P 8.2.爱先蓝法图表Q 8.2.爱先蓝法—3、爱先蓝(PH1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:复染后的胞核九、黑色素染色1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景图表R 9.1.Melanin pigment in cells of9.1. malignant melanoma, Fontana-Masson stain.2.Lillie亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织图表S 10.普鲁士蓝染色肝脏普鲁士蓝染色呈蓝色的含铁血黄素颗粒大量沉着在肝实质细胞和库普弗细胞内。
病理制片技术――常用特殊染色1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。
2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1 h,染真菌时间要相对短一些,一般情况下肉眼看到染液变色,切片呈棕色时从温箱取出染色缸,倒掉染液,自来水冲洗1min,用0.25%氯化金调色1 min,水洗后,用3%硫代硫酸钠染5 min,水洗,用苏木精染液浅染,水洗、分化、冲水返蓝,伊红染10 s,最后经脱水、透明、封固。
3.图示结果:基底膜与毛细血管间质性物质、真菌呈棕黑色,核呈蓝色。
4.注葸事项(1)掌握染色温度和时间,如60℃染1 h,80℃染30~40 min。
(2)真菌类染色时间相对要短,染色时间过长,切片染色过深,可用分色剂处理。
二、黏液卡红染色1.第一步准备工作:配制黏卡染液,将称好的胭脂1 g、氢氧化铝1 g倒入瓶内,加入50%L醇100 rnl混合摇匀,再加入氯化铝0.5g,水浴加温逐渐煮沸并搅动液体,使其充分溶解(注意染液容易外溅),数分钟后,染液由红色变成透明深紫红色,冷却后将液体倒入量筒,再加入50%乙醇至原量,过滤,放人冰箱备用。
2.第二步染色方法:染液使用时原液与蒸馏水比例为1:4稀释.切片厚5 um,脱蜡至水,经苏木精染色2 min、水洗、分化、返蓝后进人黏卡液染色2 h以上,染液可以重复使用多次,但要适当延长染色时间.切片水洗后,脱水、透明、封固。
3.图示结果:黏液为红色,胞核为蓝色.4.注意事项(1)染液使用时比例为1份黏卡原液,4份蒸馏水。
(2)用酶消化对照染色特异性很大,消化时间为20 min。
(3)配制黏卡染液时要防止液体溅出。
三、石碳酸品红染色1.第一步准备工作(1)配制盐基性品红饱和液:盐基性品红溶于乙醇内。
内镜下染色意义及方法内镜下染色是一种常用的医学诊断技术,通过给组织标本染上不同颜色的染料,使医生能够更清晰地观察、诊断组织的病理变化。
内镜下染色具有重要的意义,可以帮助医生确定病变的性质、严重程度和分布范围,从而为临床治疗和病理鉴定提供有力的依据。
H&E染色是内镜下染色中最常用的方法。
它包括两种染料,苏木精和伊红。
苏木精染料染色的是细胞的核,呈蓝色或紫色;伊红染料染色的是细胞的胞质,呈粉红色。
通过苏木精和伊红染色的组织切片,医生可以观察到细胞的形态和排列情况,判断组织是否正常、是否存在病变。
特殊染色是一种更具针对性的染色方法,可以帮助医生检测特定的组织成分或病理变化。
常见的特殊染色方法包括:PAS染色、银染色、冰醋酸染色等。
PAS染色可以显示组织中的糖原、粘多糖和蛋白多糖等,对于检测一些肿瘤和感染性疾病有重要的诊断价值。
银染色可以用于检测神经纤维、纤维蛋白和细菌等,对于诊断一些神经系统疾病、纤维化性疾病以及感染性疾病具有重要的帮助。
冰醋酸染色可以用于检测细胞核酸和细胞质嗜碱性颗粒,对于一些血液病和浆细胞病的诊断具有重要的意义。
免疫组化染色是一种利用抗原和特异性抗体反应的染色方法。
它可以用于检测组织中特定的分子、抗原或细胞标记物。
免疫组化染色常用于癌症的诊断和鉴定,可以帮助医生确定肿瘤的类型、分级和预后。
此外,免疫组化染色还可以用于检测一些传染病的病因学诊断,以及一些自身免疫性疾病的诊断。
内镜下染色在临床医学中具有重要的意义。
它可以帮助医生更准确地判断病变的性质和严重程度,为临床治疗提供科学依据。
同时,内镜下染色还可以帮助医生进行病理鉴定和病因学诊断,对于制定合理的治疗方案和预后评估具有重要的帮助。
内镜下染色的方法简单而灵活,可以根据需要选择不同的染色方法。
在选择染色方法时,应根据病变的性质和需要检测的目标选择合适的染料和染色方法。
同时,内镜下染色的操作要严格遵守规范,确保染色效果的准确性和可靠性。
病理学技术特殊染色总结一、结缔组织染色法Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维蓝褐色:胞核三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞二、胶原纤维染色法Van Gieson(V.G)苦味酸-酸性品红法鲜红色:胶原纤维黄色:肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色:胞核天狼星红(Sirius red)苦味酸染色法红色:胶原纤维绿色:细胞核黄色:其他三、网状纤维染色Gordon-Sweets银氨染色法(梅花开枝图,金色阳光伴树枝)黑色:网状纤维红色:胞核(核固红复染)黄棕色:胶原纤维淡红色:细胞质(伊红复染)四、弹性纤维染色Gomori醛复红染色法*甲醛生理盐水液固定的染色效果最佳紫红色:弹性纤维橘黄色:背景五、弹性、胶原纤维的双重组合染色法蓝绿色:弹性纤维红色:胶原纤维淡黄色:背景六、肌肉组织染色△横纹肌组织染色Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)蓝色:胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维蛋白、横纹肌黄色或玫红色:胶原纤维、网状纤维软骨基质、骨微紫色:粗弹性纤维(有时)紫蓝色或棕黄色:缺血缺氧早期病变的心肌△早期心肌病变组织染色Nagar-Olsen染色法(HBFP)红色:缺氧心肌、红细胞黄色或黄棕色:正常心肌蓝色:细胞核Poley显示缺氧心肌染色法红色:缺氧心肌紫色:胞核绿色:其他组织1七、糖类染色过碘酸-Schiff(PAS)染色法红色:糖原及其他PAS反应阳性物质蓝色:细胞核八、黏液物质(黏多糖)染色Mowry阿尔辛蓝过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法红色:中性黏液物质蓝色:酸性黏液物质紫红色:混合性黏液物质阿尔辛蓝(爱先蓝,PH 2.5)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色或淡然:强硫酸化黏液物质红色:胞核阿尔辛蓝(爱先蓝,PH 1.0)法蓝色:含硫酸黏液物质不着色:非硫酸化酸性黏液物质红色:胞核(如复染)九、黑色素染色Masson-Fontana黑色素银浸染色法黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒红色:胶原纤维浅黄色:背景Lillie硫酸亚铁染色法暗绿色:黑色素浅绿或不着色:背景黄色:肌纤维和背景十、含铁血黄素染色亚铁氰化钾法(Perls blue普鲁士蓝显示三价铁)蓝色:含铁血黄素浅红色:其他组织十一、胆色素染色三氯醋酸染色法绿色:胆色素红色和黄色:其他(复染)十二、脂褐素染色三氯化铁-铁氰化钾法(非特异性)暗蓝色:脂褐素醛品红法(现配现用)深紫色:脂褐素浅黄色:背景十三、脱色素染色通常用来鉴定是否有黑色素存在,3张连续石蜡切片,1张HE,1黑色素染色,1张氧化漂白脱色素十四、纤维蛋白染色Lendrum等MSB染色法*本法的MSB指马休黄猩红蓝法红色:纤维蛋白紫色:陈旧性纤维蛋白蓝色:细胞核黄色:红细胞Gram甲紫染色法蓝黑色:纤维蛋白红色:背景十五、淀粉样物质染色刚果红染色法红色:淀粉样物质蓝色:细胞核Jurgens甲紫染色法红色或紫红色:淀粉样物质蓝色:细胞核十六、真菌染色2Grocott六胺银染色法*真菌均被着色黑褐色:菌丝和孢子红色:细胞核淡绿色:背景高碘酸复红染色法紫红色:真菌浅黄色:红细胞十七、细菌染色一般细菌革兰氏染色(Gram碱性复红结晶紫染色法)蓝色:革兰阳性菌红色:革兰阴性菌红色:细胞核抗酸杆菌Ziehl-Neelsen抗酸杆菌染色法红色:抗酸杆菌灰蓝色:背景胃幽门螺杆菌Warthin-Starry胃幽门螺杆菌染色法棕黑色或黑色:胃幽门螺杆菌淡黄色:背景十八、螺旋体染色硝酸银染色法黑色或棕黑色:梅毒螺旋体、钩端螺旋体淡黄至淡棕色:背景Ryu碳酸钠碱性复红法红色:螺旋体十九、病毒包涵体染色荧光桃红-酒石黄法亮红色:病毒包涵体蓝褐色:细胞核黄色:背景二十、乙型肝炎表面抗原染色Shikata地衣红染色法(现配现用)棕色:HBsAg阳性醛复红改良染色法紫色:HBsAg阳性红色:结缔组织黄色:红细胞及基质维多利亚蓝染色法蓝绿色:乙型肝炎表面抗原物质红色:细胞核二十一、神经组织染色△神经细胞尼氏体染色方法缓冲亚甲蓝法蓝色:尼氏小体及核仁△神经纤维的染色方法Holmes神经纤维染色黑色:神经纤维灰紫色:背景Bielschowsky神经纤维染色黑色:神经纤维紫色:背景Von Braunmubl神经纤维、扣结、老年斑染色黑色:神经纤维、扣结、老年斑浅灰色:背景Eager退变神经纤维染色黑色:退变神经纤维浅棕色:背景△神经髓鞘的染色方法Weigert-Pal髓鞘染色蓝黑色:髓鞘淡灰色:背景Weil髓鞘染色(石蜡切片理想)蓝黑色:髓鞘淡灰色:背景Kultshitzky髓鞘染色蓝黑色:髓鞘淡黄色:背景3Luxol fast blue髓鞘染色蓝色:髓鞘紫色:核仁、尼氏体变色酸2R—亮绿髓鞘染色深红色:神经髓鞘绿色:轴索、间质不着色:脱髓鞘纤维Marchi退变髓鞘染色方法黑色:退变髓鞘浅棕色:背景△神经胶质细胞染色方法Cajal星形细胞染色紫黑色:原浆性及纤维性星形胶质细胞Weil及Davenport小胶质细胞及少突胶质细胞黑色:神经胶质细胞、少突胶质细胞黄棕色:背景二十二、神经内分泌细胞染色△亲银反应Lillie-Masson二胺银反应法黑色:亲银颗粒细胞红色:细胞核淡灰黄色:背景Gomori-Burtner六胺银法黑色:亲银细胞浅红色:背景△嗜银反应De Grandi改良硝酸银反应法棕黑色:嗜银细胞颗粒红色:细胞核碱性重氮反应法橘红色至红色:嗜银细胞颗粒蓝色:细胞核黄色:胞质二十三、嗜铬细胞染色Giemsa改良染色法红色至紫红色:嗜铬细胞蓝色:皮质细胞粉红色:红细胞Wiesel染色法黄绿色:嗜铬细胞质红色:细胞核蓝色:其他二十四、肥大细胞染色甲苯胺蓝改良染色法紫红色:肥大细胞颗粒蓝色:细胞核醛复红法深紫色:肥大细胞颗粒橘黄色:红细胞黄色:其他组织二十五、DNA染色酸水解—无色品红法紫红色:DNA绿色:细胞质、其他成分甲基绿—派洛宁法紫红色:细胞质和核仁内RNA 绿色或绿蓝色:核内DNA二十六、脂肪染色苏丹法橘红色:中性脂肪蓝色:细胞核油红O染色法深橙红色:中性脂肪蓝色:细胞核4。
1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法
【染色方法】
(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片;
(2)组织切片脱蜡至水;
(3)用Van Gieson液染1~5分钟;
(4)倾去染液,直接用95%乙醇分化和脱水;
(5)无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】胶原纤维呈红色,肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。
2.Masson氏结缔组织三合染色法
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;
(3)Masson氏染色液中5分钟或更长时间;
(4)0.2%冰醋酸水溶液浸泡片刻;
(5)5%磷钨酸水溶液2~3分钟,再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗(6)投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间;
(7)再入0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻;
(8)脱水、透明和封固。
【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色,胶原纤维染绿色。
【染色方法】
(1)石蜡切片、脱蜡至水;
(2)0.25%高锰酸钾液3分钟;
(3)蒸馏水洗2次;
(4)1%草酸漂白即可;
(5)蒸馏水洗2次;
(6)2.5%铁明矾水溶液媒染5~10分钟,蒸馏水洗多次;(7)二氨氢氧化银浸染1分钟,蒸馏水洗3次;
(8)10%甲醛液还原2分钟,蒸馏水洗3次;
(9)0.2%氯化金液调色1~2分钟,蒸馏水洗3次;
(10)5%硫代硫酸钠固定5分钟;
(11)蒸馏水洗,需要时复染;
(12)水洗、脱水、透明和封固。
【结果】网状维呈黑色,其他组织呈复染的颜色。
显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法
【染色方法】
(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;
(2)切片入70%乙醇中洗2分钟;
(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5~2小时;
(4)直接入95%乙醇中分色数秒钟;
(5)浸入蒸馏水洗2分钟;
(6)用丽春红S液滴染切片5分钟;
(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次;
(8)将切片在空气中或冷风干燥;
(9)二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。
【染色方法】
(1)冰冻切片厚度8~15μm;
(2)Harris苏木素,染约1分钟;
(3)自来水洗后,用0.5%盐酸乙醇分化,再水洗直至胞核返蓝为止;
(4)蒸馏水洗后移入70%乙醇内浸洗一下;
(5)浸入苏丹III染液中约30分钟或更长时间(如果置于56℃温箱中可适当缩短时间);
(6)在70%乙醇分化数秒钟;
(7)待切片在空气中稍凉干或用冷风机吹干;
(8)及时用明胶甘油封片。
【结果】脂肪呈橘红色,脂肪酸不着色,胞核淡蓝色。
高碘酸-Schiff(Periodic acid Schiff,PAS)染色法
【染色方法】
(1)切片脱蜡至蒸馏水;
(2)浸入高碘酸氧化液中10~20分钟;
(3)蒸馏水洗2次;
(4)Schiff液染色10~30分钟;
(5)流水冲洗5分钟;
(6)用苏木素染细胞核3~5分钟;
(7)在盐酸酒精中分化,自来水洗至细胞核变蓝为止;
(8)脱水、透明和封固。
【结果】糖原和粘蛋白呈紫红色,细胞核染蓝色,霉菌也呈紫红色等。
【染色方法】
(1)切片入二甲苯,后递次向下直到入水;
(2)3%冰醋酸溶液3分钟;
(3)在奥辛兰溶液中染5分钟;
(4)入3%冰醋酸3分钟,蒸馏水洗(3次);
(5)用1%过碘酸处理10分钟,蒸馏水洗;
(6)入Schiff液10~30分钟;
(7)流动自来水洗10分钟;
(8)逐级酒精脱水,二甲苯透明;
(9)中性树胶封固。
【结果】酸性粘多糖染兰色;中性粘蛋白染品红色;中性和酸性粘蛋白混合物染紫色。
Mallory磷钨酸-苏木素染色法PTAH
【染色方法】
(1)切片脱蜡至水;
(2)在酸性高锰酸钾液中氧化5~10分钟;
(3)自来水充分洗,蒸馏水洗2次;
(4)用1%草酸液漂白2分钟;
(5)自来水洗,蒸馏水洗2次;
(6)浸入MalloryPTAH液中12~48小时;
(7)直接用95%乙醇分化;
(8)无水乙醇急速脱水,二甲苯透明和树胶封固。
【结果】胞核、纤维、肌肉、神经胶质纤维、纤维素、横纹肌等均呈蓝色;胶质纤维、网状纤维、软骨基质及骨呈黄色或玫瑰红色;粗弹力纤维有时被染成微紫色;有缺血缺氧早期病变的心肌呈紫蓝色或棕黄色。
【染色方法】
(1)石蜡切片,脱蜡至水;
(2)在1%刚果红水溶液中1小时或更长时间;
(3)投入饱和碳酸锂水溶液中15秒钟;
(4)用80%酒精分化,直至无多余燃料溜下为止;
(5)水洗后用苏木素进行核染色;
(6)等干后进行二甲苯透明和树胶封固。
【结果】淀粉样物质呈红色,细胞核呈兰色。
【染色方法】
(1)中性甲醛固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水;
(2)0.2mol/L醋酸缓冲液洗2次;
(3)将切片置入1%硝酸银液内1小时左右(温箱56℃);
(4)直接把切片取出,立即浸入显影液内2~3分钟;
(5)将切片浸入56℃蒸馏水中洗1~2分钟;
(6)蒸馏水洗1次;
(7)无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。
【结果】胃幽门弯曲菌呈棕黑色或黑色,背景呈淡黄色。
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)用1%甲苯胺蓝水溶液置于50~60℃温箱内浸染20~40分钟;
(3)蒸馏水稍洗;
(4)95%乙醇迅速分化;
(5)无水乙醇脱水,二甲笨透明,中性树胶封固。
【结果】尼氏小体紫蓝色,胞核棕红色。
【染色方法】
(1)石蜡切片厚6μm,脱蜡至水;
(2)投入新鲜配置的20%盐酸和10%亚铁氰化钾等量混合液(用前过滤)中30分钟,必要时可延长时间;
(3)蒸馏水洗;
(4)在0.5%的碱性品红(溶剂为50%酒精)进行1分钟对比染色;
(5)在95%酒精中分化后晾干,透明,封固。
【结果】含铁血黄素呈蓝色,血棕色素呈红色。
【染色方法】
(1)石蜡切片,脱蜡至水;
(2)投入硝酸银染色液中,并置于暗处12~18小时;(3)蒸馏水洗2分钟;
(4)以0.2%氯化金水溶液增色5-10分钟;
(5)蒸馏水洗;
(6)投入5%硫代硫酸钠水溶液2分钟;
(7)自来水洗;
(8)如需复染,可用苏木素-伊红染色法;
(9)酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
【结果】黑色素呈黑色。