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DEAE--52纤维素的处理关于DEAE52纤维素的处理只有简单的几步，如下:1.先将干粉的纤维素浸泡在蒸馏水中，一段时间大约3小时左右，我偏爱这个时间，去除杂质，最好抽干一下；2.再用0.5mol/l的HCl溶液浸泡2小时，用去离子水洗净至PH中性，并抽干；3.将抽干的纤维素再浸泡在0.5mol/l的NaOH溶液中2小时，用去离子水洗至中性，抽干。
即可用了对于用过的纤维素，可以重复利用多次，但需要经过再生处理后才可以使用。
再生处理可先用高浓度NaCl (1－2 mol/L)过柱冲洗柱床，以除去DEAE－52阴离子交换纤维所吸附的成份。
然后，再用0.5 mol/L的HCl和NaOH处理，处理方法与预处理完全相同。
DEAE－纤维素的处理及装柱（1）处理本实验采用的是DEAE－纤维素DE 52 是弱酸型阴离子交换剂，具体处理方法为：先将DE52阴离子交换剂干粉浸泡于蒸馏水中，去除杂质；再在0.5N的HCL溶液中浸泡1－2h,再用无离子水或蒸馏水洗至pH值中性或PH4以上，并将其在抽滤漏斗中抽干；将抽干的离子交换剂浸泡在0.5N的NaOH溶液中1－2h，再用无离子水或蒸馏水将其洗至中性。
（2）装柱将层析柱清洗干净垂直固定到层析架上，加1/3体积的无离子水，打开下出液口，水流畅通，即刻将小烧杯中装有适宜浓度的柱材，轻轻倒入层析柱中，凝胶自然慢慢沉降再层析柱底部，凝胶沉积直到离层析柱上端1.5－2cm处，停止装柱。
层析柱上端进液口连接恒流泵，下出口连接蛋白质监测仪，待层析柱的平衡。
（3）平衡在柱层析上样前必须对层析柱进行平衡，所谓平衡就是将层析柱中的溶液用层析过程的缓冲液（洗脱液）置换出来，使层析柱中的缓冲系统与柱层析过程中的系统一致。
其方法是：利用层析柱上端的恒流泵将平衡缓冲液泵入到层析柱内，打开层析柱下端的出口，平衡液流速在0.5-1ml/min，当下出口流出液的PH值与平衡缓冲液的PH值一致时，层析柱达到了平衡。
whatman DE-52纤维素详细使用方法Whatman DE-52纤维素详细使用方法1.引言本文档旨在提供关于Whatman DE-52纤维素的详细使用方法。
DE-52纤维素是一种常用于分离和纯化过程的离子交换纤维素材料。
以下将详细介绍DE-52纤维素的特性、操作步骤以及实验参数的优化建议。
2.DE-52纤维素的特性DE-52纤维素具有以下特性：________●高度可交换的离子交换群：________DE-52纤维素具有一定数量的阴离子交换基团，可与带正电荷的离子相互作用。
●高度交换能力：________DE-52纤维素对多种离子具有可靠的交换性能，适用于多种离子分离和纯化的应用。
3.实验前准备在使用DE-52纤维素之前，需要进行以下实验前准备工作：________3.1 pH调节：________根据实验需要，调节溶液的pH值至所需范围。
3.2 预处理DE-52纤维素：________将DE-52纤维素浸泡在适当的缓冲液中，使其充分湿润。
4.DE-52纤维素的使用步骤详解以下是使用DE-52纤维素进行分离和纯化的详细步骤：________4.1 样品的初步处理●准备待处理的样品溶液，并根据需要进行预处理，如剔除杂质、浓缩等。
4.2 准备DE-52纤维素柱●将经过预处理的DE-52纤维素装填至柱子中。
●使用适当的流速，将缓冲液预冲柱子，以获得平衡的柱子。
4.3 样品的加载●将经过初步处理的样品加载至DE-52纤维素柱子。
●使用适当的流速，逐步洗脱样品。
4.4 洗脱和回收目标物●使用适当的洗脱缓冲液，洗脱并回收目标物。
5.实验参数优化建议为获得最佳效果，可以根据需要进行以下实验参数的优化：________5.1 pH值：________适当调节操作溶液的pH值可改善分离效果。
5.2 柱子尺寸：________选择合适的柱子尺寸以满足样品处理的要求。
5.3 流速：________通过调整流速可影响分离效率和纯化速度。
纤维素的溶解分两步进行：首先是溶剂分子在高速揽拌的机械力作用下快速
进入纤维素非晶区和晶区实现初步的滴胀效应。
随着溶剂分子进入纤维素分子链 空隙的量逐渐累积，纤维素分子链内和链间的氨键被打破断裂。
溶剂分子和纤维 素分子链上游离的居基结合形成新的氨键，直到实现新的稳定平衡体系。
纤维素 在溶剂中润胀程度逐渐扩大，达到无限溶胀时即出现纤维素溶解。
由于在溶解的 过程中没有发生化学反应也没有产生新的物质，且纤维素大分子链能在溶液中长 时间稳定存在，和小分子溶液一样也是热力学稳定体系。
故纤维素溶液可称么为 真溶液，而不是胶体溶液。
但是，由于纤维素是大分子聚合物，且其分子链又具 有一定的柔初性，使得纤维素的溶解过程较小分子化合物较为缓慢。
下面我们将 介绍几种纤维素常用的溶解方法。
DEAE-纤维素(52)使用说明书一简介DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。
由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。
它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。
三、应用的注意事项：1) 色谱柱装填1、所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。
填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可.2、在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的20%乙醇。
20%乙醇容易产生气泡，可以在里面加1%吐温避免气泡产生。
也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的20%乙醇，再换成5倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5次左右就可以用于装柱子。
3、此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液完全澄清，就可以开泵用适当的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。
使用的流速要小于装柱子的流速。
4、在装柱子前，填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
2) 蛋白的结合样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致，盐浓度过高或者pH带低也许挂不上，所以要根据自己的样品做适当调整。
3) 蛋白的洗脱这个填料如果采用线性梯度洗脱，柱子的直径和高度比最好是大于10，数值越大越有利于分离，而且样品最好别上太多，可以按约10mg/ml上样，如果采用阶段洗脱的方法，装短粗柱子就可以，上样量也没有限制。
whatman DE-52纤维素详细使用方法Whatman DE-52纤维素使用方法1.简介Whatman DE-52纤维素是一种常用的离子交换纤维素，用于分离和净化蛋白质和其他生物大分子。
本文档将详细介绍其详细使用方法。
2.材料准备●Whatman DE-52纤维素●缓冲液：根据实验需要选择适当的缓冲液。
●清洁的实验室仪器和设备：如瓶子、离心机、pH计等。
●实验用具：如滤纸、滤芯、吸引器等。
3.DE-52纤维素的制备过程●首先，在一个干燥的容器中称取适量的DE-52纤维素。
●将DE-52纤维素与缓冲液混合，并用搅拌棒搅拌均匀。
●观察混合物的颜色和质地，确保DE-52纤维素完全悬浮在缓冲液中。
●将混合物从容器中过滤出来，以除去任何残留颗粒。
●检查过滤的液体，确保没有任何不溶性物质。
4.样品预处理●检查待处理样品的pH值，确保其适合使用DE-52纤维素进行离子交换。
●如果需要，可以调整样品的pH值，以最大限度地提高DE-52纤维素的效果。
5.离子交换过程●将DE-52纤维素的适量加入到预处理样品中，并充分混合。
●让样品与DE-52纤维素充分反应，并保持一定的时间来完成离子交换作用。
●过滤样品，以除去DE-52纤维素和已经发生离子交换的物质。
●收集过滤液，这样您就可以分析或进一步处理纯净的样品了。
6.清洗和保存DE-52纤维素●每次使用后，将DE-52纤维素用适当的溶剂进行清洗，以去除任何残留的样品或杂质。
●定期检查DE-52纤维素的质量，并根据需要进行更换。
●储存DE-52纤维素在干燥、阴凉的地方，远离阳光和高温环境。
附件：●本文档没有附带任何附件。
法律名词及注释：●无。
whatman DE-52纤维素详细使用方法whatman DE-52纤维素详细使用方法1. 简介whatman DE-52纤维素是一种常用的离子交换纤维素，广泛应用于生物化学、分子生物学等领域。
本文将详细介绍whatman DE-52纤维素的使用方法，帮助您更好地利用这一工具进行实验和研究。
2. 理论基础whatman DE-52纤维素是一种离子交换纤维素，其主要作用是实现离子的吸附与洗脱。
其原理是通过静电作用，将具有相反电荷的离子吸附在纤维素上，从而实现分离和纯化的效果。
3. 实验准备在使用whatman DE-52纤维素前，需要进行实验准备工作，包括准备实验材料和设备，以及准备相应的缓冲液、洗脱液等。
3.1 实验材料和设备- whatman DE-52纤维素- 离心管- 移液器- 离心机3.2 缓冲液和洗脱液的准备根据实验需要，准备相应的缓冲液和洗脱液。
缓冲液的pH值和离子浓度应根据要纯化或分离的离子种类和特性进行调整。
4. whatman DE-52纤维素的使用步骤4.1 制备样品将待处理的样品制备好，可以是酶、蛋白质、核酸等。
根据样品的性质，选择适当的缓冲液，将样品溶解在缓冲液中。
4.2 预处理whatman DE-52纤维素将whatman DE-52纤维素用适当的缓冲液进行预处理，可以去除可能的杂质和残留物，提高吸附效果。
方法是将whatman DE-52纤维素放入离心管中，加入适量的缓冲液，轻轻摇晃，然后离心，将上清液倒掉，重复此步骤2-3次。
4.3 样品吸附将处理好的样品加入离心管中，加入预处理好的whatman DE-52纤维素，并轻轻摇晃离心管，使样品和纤维素充分接触和混合。
可以根据需要调整吸附时间和温度。
4.4 洗脱根据实验要求和需要，选择适当的洗脱液进行洗脱。
将洗脱液加入含有样品和纤维素的离心管中，轻轻摇晃，然后进行离心，将上清液收集起来。
4.5 分析与保存将洗脱液收集起来，可以进行进一步的分析实验。
DEAE-纤维素DE-52使用说明DEAE-纤维素(52)使用说明书一简介DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50µm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，它在高流水下保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。
由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。
它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。
三、应用的注意事项：1) 色谱柱装填1、所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。
填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可.2、在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的20%乙醇。
20%乙醇容易产生气泡，可以在里面加1%吐温避免气泡产生。
也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的20%乙醇，再换成5倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5次左右就可以用于装柱子。
3、此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液完全澄清，就可以开泵用适当的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。
使用的流速要小于装柱子的流速。
4、在装柱子前，填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
2) 蛋白的结合样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致，盐浓度过高或者pH带低也许挂不上，所以要根据自己的样品做适当调整。
3) 蛋白的洗脱这个填料如果采用线性梯度洗脱，柱子的直径和高度比最好是大于10，数值越大越有利于分离，而且样品最好别上太多，可以按约10mg/ml上样，如果采用阶段洗脱的方法，装短粗柱子就可以，上样量也没有限制。
D E A E纤维素使用说明集团文件版本号：（M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988）DEAE-纤维素1 简介DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50μm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。
由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。
它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。
2 填料特征：3 应用的注意事项：3.1 色谱柱装填（1）所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。
填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可。
（2）在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的20%乙醇。
20%乙醇容易产生气泡，可以在里面加1%吐温避免气泡产生。
也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的20%乙醇，再换成5倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5次左右就可以用于装柱子。
（3）此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液完全澄清，就可以开泵用适当的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。
使用的流速要小于装柱子的流速。
（4）在装柱子前，填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
3.2 蛋白的结合样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致，盐浓度过高或者pH带低也许挂不上，所以要根据自己的样品做适当调整。
whatman DE-52纤维素详细使用方法正文：一、概述Whatman DE-52纤维素是一种常用的离子交换剂，广泛应用于生物化学和分析化学领域。
本文将详细介绍Whatman DE-52纤维素的使用方法。
二、实验所需材料1： Whatman DE-52纤维素2：磨砂瓶3：蒸馏水4：试剂5：离心管6：离心机7：显微镜8：高压釜9：透析袋10： pH计三、实验步骤1：准备工作：(1) 清洗实验用具：将磨砂瓶和离心管用蒸馏水彻底清洗。
(2) 准备试剂：根据实验需求准备相应的试剂。
2： DE-52纤维素制备：(1) 将适量的Whatman DE-52纤维素加入磨砂瓶中。
(2) 加入足够的蒸馏水，使纤维素湿润，并轻轻摇晃磨砂瓶使其均匀混合。
(3) 放置一段时间，让纤维素充分膨胀。
3：样品处理：(1) 取适量的要处理的样品，溶解于适量的缓冲液中。
(2) 将处理后的样品倒入含有Whatman DE-52纤维素的磨砂瓶中。
(3) 轻轻摇晃磨砂瓶，使样品与纤维素充分接触。
4：进行离心操作：(1) 将含有样品和纤维素的磨砂瓶放入离心机中。
(2) 将离心机设定至合适的转速和时间进行离心操作。
(3) 离心后，观察离心管中的沉淀情况，并记录。
5：分离和收集：(1) 将离心管倒置，待液体慢慢流出，并将沉淀留在离心管中。
(2) 使用透析袋将离心管中的沉淀取出，并用蒸馏水进行洗涤。
(3) 使用显微镜检查并记录样品的纯度和形态。
6：进一步处理：根据实验需求，可以对样品进行进一步的处理，可使用高压釜等设备进行。
四、附件本文档无附件。
五、法律名词及注释1：离子交换剂：一种可以与离子发生交换作用的物质，用于分离和纯化溶液中的离子。
2：缓冲液：一种溶液，用于稀释或调节样品的pH值，以维持溶液的稳定性。
3：转速和时间：离心机设定的旋转速度和离心时间，可以根据实验需求进行调节。
DEAE-纤维素1 简介DEAE-纤维素，它采用平均粒径为50μm的颗粒型亲水高分子聚合物，表面又用大分子糖链接枝，使它有更高的比表面积和更好的生物兼容性，保持更高载量，同时又具有更好的分辨率。
由于比表面积大，平衡和洗脱的时间也更短。
它经过接枝即使是纯化病毒，质粒等超大分子的物质，载量基本保持不变。
本产品物理和化学稳定性好，使用寿命长，操作方便。
2 填料特征：3 应用的注意事项：色谱柱装填（1）所需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样，液体最好做脱气处理。
填料可直接称量需要的量用缓冲液溶涨一小时装柱即可。
（2）在柱子下端加入20%乙醇，以除去柱子中的空气，关闭柱子出口，在柱内保留少量的20%乙醇。
20%乙醇容易产生气泡，可以在里面加1%吐温避免气泡产生。
也可以换成纯水装柱子，但是需要把填料中的20%乙醇也换成纯水，具体的方法取需要体积的填料在抽滤漏斗上进行，也可以小心倾去填料上的20%乙醇，再换成5倍体积的纯水，反复沉淀去上清，5次左右就可以用于装柱子。
（3）此填料颗粒比较细，所以一定要注意柱子要选择合适的筛网，不能漏，也可以取点填料加到筛网上试试，如果没有问题再将填料连续倒入柱子时，要用玻璃棒的紧靠柱子内壁引流，以减少气泡的产生，让填料先自然沉降到填料体积不再变化，而填料和上面的液体很好分层，上层溶液完全澄清，就可以开泵用适当的流速压柱子，填料体积不再变化后，再把转换头紧顶在填料上就可以平衡柱子使用。
使用的流速要小于装柱子的流速。
（4）在装柱子前，填料从冰箱中取出至少要室温放置2-3个小时，这样避免装柱子时由于温度变化而使柱子中产生气泡。
蛋白的结合样品的盐浓度和pH要尽量和平衡柱子的缓冲液一致，盐浓度过高或者pH带低也许挂不上，所以要根据自己的样品做适当调整。
蛋白的洗脱这个填料如果采用线性梯度洗脱，柱子的直径和高度比最好是大于10，数值越大越有利于分离，而且样品最好别上太多，可以按约10mg/ml上样，如果采用阶段洗脱的方法，装短粗柱子就可以，上样量也没有限制。
whatman DE-52纤维素详细使用方法whatman DE-52纤维素详细使用方法介绍whatman DE-52纤维素是一种常用于色素分离和蛋白质纯化的吸附剂。
它具有高吸附能力和较低的非特异性吸附性能，适用于许多不同类型的生物分子的分离和纯化。
原理whatman DE-52纤维素基于纤维素的磷酸基团，可以通过离子交换的原理与带有相反电荷的生物分子结合。
纤维素本身的多孔性结构提供了较大的表面积，可以增加吸附的效率。
使用方法以下是whatman DE-52纤维素的详细使用方法：1. 准备工作：准备所需的实验材料，包括DE-52纤维素、洗涤缓冲液、样品等。
提前将DE-52纤维素活化，在使用前用洗涤缓冲液进行悬浮和混匀。
调整样品的pH值和离子浓度以适应DE-52纤维素的吸附条件。
2. 准备柱子：将合适尺寸的柱子准备好，可以使用预装的柱子或自制柱子。
在柱子中加入纤维素，根据需要的纯化程度和产量确定纤维素的用量。
3. 样品处理：将样品加入洗涤缓冲液中，使样品与纤维素充分混合。
在混合样品和纤维素的过程中，避免剧烈搅拌，以防止样品的分解和降解。
4. 样品加载：将样品缓慢地加载到纤维素柱中，以避免产生气泡和杂质。
根据纤维素的吸附能力和样品的特性，确定样品与纤维素的接触时间。
5. 洗涤：使用洗涤缓冲液将未结合的杂质从柱子中洗脱。
可以根据需要重复洗涤步骤，直到样品基本纯净。
6. Elution（洗脱）：使用适当的洗脱缓冲液将目标分子从纤维素柱中洗脱。
根据样品和纤维素的亲和性，确定最佳的洗脱缓冲液和条件。
7. 收集：将洗脱的目标分子收集到收集管中。
根据需要，可以使用不同的收集管来收集不同洗脱峰的物质。
8. 分析：对收集的目标分子进行分析，例如测定其浓度、纯度等。
注意事项操作过程中要保持洗涤缓冲液和洗脱缓冲液的卫生和纯净。
严格控制样品的pH值和离子浓度，以避免对吸附和洗脱步骤的影响。
确保所使用的仪器和设备的清洁和维护，以保证实验的准确性和可重复性。
1) 硫酸铵沉淀后直接过疏水柱，应该用多大浓度的硫酸铵平衡柱子啊看你蛋白情况了,一般也就2M左右吧.挂不住就提高浓度,挂太牢就适当降低盐浓度,一般要根据实验决定.我一般就用苯基琼脂糖凝胶,一般纯化IgG用0.7M硫酸铵就可以挂住.你有个贴子中说在纯化过程中上样的样品中pH和盐浓度,以及种类等组分一定要平衡缓冲液完全相同至少相当。
我想试试你说的硫酸铵沉淀后直接过疏水柱，那我是不是要先确定复溶后样品的盐浓度再确定平衡缓冲液的盐浓度啊，如果是我怎么检测样品的盐浓度啊其实差不多就可以,也不一定特别严格,例如疏水盐浓度你的样品的盐高于平衡的也可以,但是别相差太多,尤其不能样品的盐浓度小于平衡缓冲液,这样也许挂不住,或者会产生沉淀.而缓冲液和盐浓度不同混合也许会产生沉淀,所以要小心,而一样的缓冲液体系和盐浓度可以避免这样的问题.硫酸铵沉淀后的样品,如果是上清按盐浓度稀释到你缓冲液盐浓度就可以,如果是沉淀,直接用缓冲液去溶解,沉淀里的盐可以忽略.最好的办法你可以用电导的方法去检测,只要样品的电导和你的平衡缓冲液一样就可以了.2)我在用镍柱亲和纯化后，蛋白已经比较纯了，仅在银染时能看见微弱的杂带（目的蛋白约25KD，杂蛋白约40KD)。
但我还想试试能不能完全去除杂带。
此前试过分子筛没效果，所以想试试离子交换。
想请教一下，在变性条件下可以做离子交换吗？和复性后再做比起来哪个效果好呢？非常感谢！！浓度太低一些杂带是很难出现的,所以这样的纯度很难说,我觉得得浓度高到25mg/ml左右,这样做电泳才能看得清楚些到底纯不纯.如果你是变性条件下做凝胶过滤没有意义,因为这时候蛋白是链状分子或者是不蜷曲的,不是球型,所以在这样的柱子中没有办法使他们分离,你最好的方法是优化你的亲和纯化条件,也可以在纯化前做好预处理,如果是包涵体,可以用分级沉淀的方法来初纯,亲和柱子的缓冲液中加点土温或者用pH洗脱和咪唑洗脱的方法配合,同时用阶段洗脱的方法,一般都能做得很好,用试剂盒的方法或者线性洗脱的方法有时候很难得到好的效果,你也许可以参考我们的方法,你留下邮箱我给你发一份做参考吧.我觉得离子交换也不一定好,在脲这样的变性剂下可以做离子交换,但是效果也不一定好,我觉得还是优化亲和条件更有意义.此外浓度太低很难纯化.3)重组蛋白A琼脂糖凝胶FF能一次纯化大量血清IgG吗？如几十毫升。
壳寡糖（COS）来源广泛、安全无毒、水溶性好，具有降低血脂、抗氧化、抑菌、抗癌肿瘤、提高免疫力等多种生物活性［1-2］。
由甲壳素脱乙酰基制得的壳聚糖分子量大，其应用受到很大限制，而酶法降解壳聚糖反应条件温和且易控制、安全性高、环境污染少［3-5］。
因此，在前人研究基础之上，本研究采用纤维素酶代替成本昂贵的专一性酶降解壳聚糖，通过正交实验，得最佳降解工艺条件，为壳寡糖的制备提供新思路。
1材料与方法1.1实验材料壳聚糖（批号：181211A，脱乙酰度> 95％），某生物科技有限公司；纤维素酶DE-52（产品编号：C8350-100，From Whatman4057-200），北京索莱宝科技有限公司；D-氨基葡萄糖盐酸盐（批号：HL180930Y），山东莱州市海力生物制品有限公司；再生纤维素透析膜（货号：QABO-SP132592-1m截留分子量1000），上海安谱实验科技股份有限公司；冰乙酸，无水乙酸钠，氢氧化钠，无水乙醇，3，5-二硝基水杨酸，焦亚硫酸钠，酒石酸钾钠，苯酚。
1.2仪器设备电子天平，电热恒温鼓风干燥箱，紫外分光光度计，pH计，旋转粘度计。
1.3实验方法溶液的配制。
0.2mol/L醋酸配制：吸取11.3mL冰醋酸溶液于1L容量瓶中，加蒸馏水定容，配制成0.2mol/L的醋酸溶液。
0.2mol/L的醋酸钠的配制：准确称量16.2g无水醋酸钠溶于蒸馏水中，移液至1L的容量瓶中定容，配成0.2mol/L的醋酸钠溶液。
pH5.2醋酸-醋酸钠缓冲溶液配制：吸取0.2mol/L的醋酸溶液和0.2mol/L的醋酸钠溶液混合配制缓冲溶液，用pH计测量pH在5.2。
壳聚糖溶液的配制：准确称取1.0g壳聚糖原料溶于100mL醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，配制成pH5.2的1.0%的壳聚糖溶液。
酶液的配制：准确称取0.4g纤维素酶溶于100mL 的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中，配制成pH5.2的4g/L的酶液。
DNS试剂的配制：准确称取7.5g 3，5-二硝基水杨酸（DNS试剂）和14.0g氢氧化钠充分溶解于1000mL水中，加入216.0g酒石酸钾钠、5.6mL预先在50℃水中溶化的苯酚和6.0g焦亚硫酸钠，充分溶解后，盛于棕色瓶中，放置5d稳定后，即可使用。
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