新型饲料添加剂抗菌肽养殖对虾的效果
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2013年第07期抗菌肽(antibacterial peptide )又称为抗微生物肽或肽抗生素,是生物机体在抵御病原微生物时产生的一类防御性小肽,是生物免疫防御系统的重要组成部分。
抗菌肽因其独特的功能、抗菌机制,在工业、农业、畜牧业、医药业等方面均具有广阔的应用前景。
而抗菌肽在医药方面的应用尤其引人注意。
1抗菌肽在天然免疫中的作用抗菌肽在天然免疫中的作用并不仅局限于杀灭侵入人体的病原微生物,而且在宿主天然免疫反应的不同阶段表现出多种作用。
兔小囊肽对法氏囊指数有显著影响,可以提高肠绒毛长度,提高灭活疫苗和活疫苗的抗体水平,使肠黏膜上皮内淋巴细胞数量明显增加,使肠道及法氏囊组织IgA 阳性物面积系数增加。
烧伤感染的病原菌主要有绿假单胞菌、不动杆菌、金黄色葡萄球菌及部分肠菌等,其中铜绿假单胞菌表现出对多种抗生素的抗药性。
抗菌肽不但对铜绿假单胞菌具有很强的杀灭作用,而且与其他抗生素及溶菌酶具有协同作用,在治疗烧伤感染上有重要意义。
研究表明,多种抗菌肽在适宜的生理浓度、盐、血清的条件下,具有广泛的生物学活性,包括在先天性免疫细胞中与炎症反应、先天性免疫和适应性免疫相关的活性,在单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞中作为先天性免疫和适应性免疫的沟通桥梁。
抗菌肽参与急性炎症有关的宿主天然防御的各个方面,如溶解入侵的细菌,使其释放炎症介质;促进巨噬细胞非调理素吞噬功能,清除细菌;抑制组织纤维蛋白溶解,防止感染扩散,刺激成纤维细胞和上皮细胞的有丝分裂,促进成纤维细胞的生长,促进创伤愈合,在体外可以激活人的淋巴细胞,可清除感染病毒和细菌的细胞以及癌细胞。
2抗菌肽在畜牧业中的应用有报道,柞蚕抗菌肽用于预防及治疗鸡的白痢效果明显。
应用含抗菌肽的柞蚕免疫血淋巴粉添加于断奶仔猪饲料中,饲喂试验结果表明,柞蚕抗菌肽可减轻断奶仔猪的腹泻。
根据马卫明等(2005)的报道,猪小肠抗菌肽对鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、猪致病性沙门氏菌、绿脓杆菌、鱼致病性嗜水气单胞菌等细菌均有不同程度的抑制作用。
抗菌肽及其在饲料中的应用抗菌肽概述1972年,瑞典科学家Boman等首先在果蝇中发现抗菌肽及其免疫功能,随后从惜古比天蚕蛹诱导分离到并命名为cecropin。
此后人们相继从细菌、真菌、两栖类、高等植物、哺乳动物乃至人类中发现并分离获得具有类似性质的活性蛋白。
抗菌肽又称抗微生物肽(antimicrobial peptide)或肽抗生素(peptide antibiotics),在动植物体内分布广泛,是天然免疫防御系统的一部分。
抗菌肽不仅具有广谱抗细菌能力,而且对真菌、病毒、及癌细胞也有作用。
其对畜禽具促生长、保健和治疗疾病的功能,属无毒副作用、无残留、无致细菌耐药性的一类环保型制剂。
具有广阔的应用前景。
抗菌肽的分类抗菌肽按结构、功能大致分为四类:cecropin(天蚕素)类;富含pro残基(脯氨酸)的magainin(蛙皮素);富含gly残基(甘氨酸)的melittin(蜂毒素);富含cys 残基(半胱氨酸)的defensin(防御素)。
抗菌肽按来源一般分为六类:哺乳动物抗菌肽、两栖动物抗菌肽、昆虫抗菌肽、植物抗菌肽、细菌抗菌肽、病毒抗菌肽抗菌肽的结构和特性通常由数十个氨基酸残基组成的碱性小分子多肽,水溶性好,分子量大约为4KD。
含有4个或多于4个带正电荷的氨基酸,N端亲水 C端硫水具有双亲的性质;具有热稳定性,在100℃加热10-15分钟仍能保持其活性。
等电点大于7,表现出较强的阳离子特性。
对较大的离子强度和较高或较低的pH值均具有较强的抗性;具备抵抗胰蛋白酶和胃蛋白酶水解的能力。
抗菌肽的作用机理抗菌肽是以一端插入细菌细胞膜,通过¡°打孔¡±形成一个通道,使细菌细胞膜破裂,原生质¡°泄漏¡±而死亡。
(对于G阴性菌,抗菌肽易与其外膜上的带负电荷脂多糖相互作用,从而破坏外膜结构以穿越内膜,而G阳性菌不具有脂多糖,但其表面由于肽聚糖中的胞壁酸、糖醛酸、磷壁酸和氨基酸羧基的存在而带负电电荷,抗菌肽也能破坏肽聚糖层而穿透质膜)抗菌肽的作用机理抗菌肽的杀菌机制模拟图抗菌肽的杀菌机制模拟图抗菌肽的作用机理特点 1.作用部位的有效性传统抗生素作用是通过消除微生物生长或生存必需的功能实现的,如阻扰细菌蛋白质的合成或者改变酶的活性来达到杀菌目的,而细菌通过改变一种基因就足以对付抗生素的这种进攻。
抗菌肽在水产养殖中的应用作者:孙田革来源:《新农业》2022年第08期随着水产养殖业高密度和集约化养殖模式的迅速发展,对水产养殖动物的疾病防治要求也随之升高。
由于抗生素使用泛滥引起的耐药性、药物残留以及环境破坏问题日益严重,对全球水产养殖业造成了严重影响,甚至严重危害水产养殖业安全、有效发展,所以国内外一直在研究安全高效、无残留、不易产生耐药性、不破坏水体生态系统的抗生素替代品。
抗菌肽作为高效、安全的抗菌药物,不仅可以抗细菌、抗真菌、抗病毒、杀伤肿瘤细胞等,还具有无毒副作用、不易产生耐药性、无残留和无污染等优点,符合水产品安全生产的需要。
抗菌肽是由生物体经一定诱导后所产生的一类具有抗菌活性的多肽物质,其可在机体受到病毒侵害时起到有效作用,同时是生物体免疫防御系统重要的组成部分。
目前已在人类、细菌、动植物中发现该类物质。
抗菌体具有广谱杀菌作用,其中大多数对革兰氏阳性菌有消灭作用,还有一部分对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都起到消灭作用。
2.1 细菌抗菌肽细菌抗菌肽可由革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌分泌,其包括中性肽和阳离子钛。
在细菌中已发现4种类型的抗菌肽,分别是多黏菌素E、短杆菌肽S、乳链菌肽和杆菌肽。
2.2 昆虫抗菌肽昆虫面对细菌感染后会做出反应,同时形成一种高效、快速、短暂的合成抗菌肽。
将其抗菌肽分泌到血淋巴中,会有效抵抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,并大多带有正电荷。
因为昆虫抗菌肽的结构和序列不同,可分为4类,昆虫防御素、富含甘氨酸残基的抗菌肽、富含脯氨酸残基的抗菌肽及天蚕素类。
2.3 水生动物抗菌肽2.3.1 鱼类抗菌肽鱼类抗菌肽是鱼体非特异性免疫系统的重要组成部分,并且是一类分布广泛,数量和种类庞大的小分子蛋白。
在魚体受到伤害或者病原微生物威胁时,可快速产生抗菌肽同时消灭病原微生物。
不同的鱼类抗菌肽其作用机理和分子结构也不同,就算是同一种鱼类,其组织不同抗菌肽的表达也不同。
根据氨基酸序列及结构特征,抗菌肽可分为4种类型,含多个半胱氨酸的α折叠抗菌肽,不含半胱氨酸的α螺旋抗菌肽,经酰胺化、糖基化修饰的抗菌肽以及与组蛋白高度相似的组蛋白样蛋白抗菌肽。
抗菌肽在畜禽养殖中的应用刘春青(山东省济南市畜牧技术推广站250306)摘要:抗菌肽具有来源广泛、热稳定性高、水溶性好、抗菌谱广、不易产生抗药性、绿色环保等特点,有望成为抗生素替代物。
本文介绍抗菌肽的分类及作用机制,查考其在养殖生产中具有提高动物生产性能、改善肠道健康、改善畜产品质量、 提高机体免疫力、防治疾病等作用,最后分析当前限制抗菌肽推广应用的因素。
关键词:抗菌肽;畜禽养殖;抗生素替代物抗生素在畜禽养殖中应用广泛,在动物疫病防治、促进生 产方面起着重要作用。
但因为长期、大量使用抗生素导致细菌产生耐药性,食品安全事件频发,环境污染严重。
寻求一种绿 色、安全、高效的抗生素替代物迫在眉睫。
抗菌肽以其来源广泛、热稳定性高、水溶性好、抗菌谱广、不易产生抗药性、绿 色环保等优势备受关注。
1抗菌肽简介抗菌肽是一种带有正电荷、成两亲性的小分子多肽,易于与带负电荷的微生物膜或其他细胞靶点相互作用,抵御外来致病菌的侵袭,是生物天然免疫防御的重要组成成分,并在动 物、植物、微生物中广泛分布。
1.1 抗菌肽分类自1972年瑞典科学家Boman 等在果蝇体内发现抗菌肽以 来,目前在自然界中共发现了 7000多种抗菌肽。
根据抗菌肽来源可分为植物抗菌肽、 动物抗菌肽、 微生物抗菌肽和人工合 成抗菌肽。
植物抗菌肽是植物在生长过程中产生的小分子多肽,又称为植物防御素,大多对植物病原菌有良好的活性。
动 物抗菌肽又可分为哺乳动物抗菌肽、节肢动物抗菌肽、两栖动 物抗菌肽,鱼类抗菌肽等。
微生物抗菌肽主要有细菌素、酵母 嗜杀毒素和病毒抗菌肽,其中细菌素类占绝大多数。
人工合成抗菌肽在医疗应用方面取得一定成果,人工合成的马盖宁、柞 蚕抗菌肽、肾肝宁胶囊等药物可用于杀死病毒、肿瘤细胞或治 疗肾炎、肝炎叫根据氨基酸的组成和结构特征,可将抗菌肽分为4大类。
第一类为富含两亲性琢-螺旋结构的抗菌肽,如天蚕素和滑爪哇 素。
第二类为具有稳定二硫键的茁-折叠型抗菌肽,如具有广谱抗菌活性的防御素,其对细菌、霉菌、原生生物、有包膜的病 毒有杀灭作用。
2018.5地区嗜水气单胞菌已经对氟苯尼考显现出较高和较为广泛的耐药性;进一步检测的结果显示,有14株菌(58.3%)扩增出耐药基因floR,表明上述菌株抗氟苯尼考多数是由floR 基因引起的。
嗜水气单胞菌对恩诺沙星标准菌的敏感性较高,其最低抑菌浓度为0.008微克/毫升,苏州地区水产源性24株嗜水气单胞菌产生了不同程度的耐药性,66.7%的菌株最低抑菌浓度不低于8.0微克/毫升,为标准菌株的1000倍;更为严重的是,其中的16.7%菌株最低抑菌浓度大于8.0微克/毫升,是标准菌株的1万~10万倍。
通过PCR 扩增耐药基因的检验后发现,qnrB 的检出率为12.5%,qnrS 基因检出率达25.0%,由此可见,qnrB、qnrS 耐药基因是苏州地区水产源性嗜水气单胞菌主要的耐药基因。
值得注意的是,携带有qnrB 基因的菌株最低抑菌浓度均为8微克/毫升;2株最低抑菌浓度为8微克/毫升的菌株同样扩增出了qnrS 基因,这间接反映出该基因正处在由高耐药性菌株向敏感性菌株传递的动态过程,并且22号菌同时扩增出两种耐药基因,说明不同耐药基因也在不同菌株间进行传播;随着时间的推移以及恩诺沙星滥用现象的加剧,耐药基因会加快水平传播的速度。
抗生素的过度使用,不仅会造成细菌耐药能力的增强,而且残留在水产品中的抗生素会被人类食用,导致人体在健康状态下也在使用抗生素,致使人体内菌群失调,影响健康,形成“二次感染”;此外,抗生素会随着养殖废水的排放严重污染河流水域、影响菌群,造成生态的失衡。
所以,减少甚至停止渔用抗生素的使用是未来健康养殖的方向。
随着科技的进步,生物抑菌或抑炎制剂取代抗生素已成为可能;但研发成本相对较高,因而一些高科技生物技术企业起步难、推广难的问题突出。
呼吁国内相关部门加大支助力度,激励科研人员及科技型企业加大研发力度和速度,尽快将科研成果转化成科技生产力,推动无抗药物的产业化,减少抗生素的使用量,实现“无抗”生产的目标。
步7在前缫车间也掀起了一股学技术\勤练兵的生产热潮O3 开展生产操作竞赛,狠抓操作管理为了继续促进缫丝工的操作技术7进一步降低原料茧消耗和提高生丝内在质量72006年2月27日开始为期一个月7总经办联同生产部在前缫车间开展生产操作竞赛活动7对车头工和挡车工进行操作技术攻关O 表1把生产操作竞赛取得的缫折成绩与计划缫折相比较O从表1可以看到7通过狠抓操作管理7原料茧的缫折下降了1kg 7该庄口共有17367.2kg 蚕茧7则节约用茧56.8kg 按70元/kg 蚕茧计算7可为我厂减少3976元的经济损失7为企业增收节支作出了一份贡献O4 结论缫丝工人的缫丝技术对原料茧的消耗产生了较大的影响7而原料茧的消耗又影响了缫丝企业的经济效益7因此7对缫丝技术常抓不懈是缫丝厂的管理重点7一个良好的缫丝操作整体对缫丝厂的经济效益起到促进作用O 因此7缫丝操作技术要狠抓且常抓不懈7才能更好地降低原料茧的消耗7从而更好地促进缫丝厂的经济发展O表1 竞赛与计划的绰折对比单位:kg庄口名称竞赛的缫折成绩生产计划缫折竞赛与计划对比十七庄304305-1新型饲料添加剂抗菌肽养殖对虾的效果黄自然1-3 黄国庆2 张敬炬2 黄永彤2(1华南农业犬学广州510642;2深圳市艺鹏生物工程有限公司深圳518032;3广州市华桑生物工程有限公司广州510520)1 前言2002年7世界卫生组织(WHO >发表公告[1]指出 在牲畜养殖过程中7停止以往惯用的饲料添加剂抗生素的做法7将在不危害动物和农民利益的前提下7可减少对人类健康的威胁O"这份报告是根据丹麦的经验而提出的O 丹麦已成为世界上第一个禁止在牲畜饲料中添加抗生素的国家O 由于饲料中禁用抗生素7则肉类产品更加安全而受到消费者的欢迎O 2003年7张合成[2]对FAO 拟建议养殖水产品中抗生素残留量限量制度的报告7发表了欧洲经济区域\美国\加拿大等批准的决定界限(MRL >中7包括有土霉素\金霉素等为100mg/kg~0.1mg/kg 的水平O 2002年,我国出口的对虾因氯霉素超标(0.2~5ppb),而蒙受重大损失[3]O 2006年7欧盟委员会宣布 全面禁止在动物饲料中添加抗生素7即除治疗目的之外7不得继续在动物饲料广东蚕业40 (3>O 23-2823中添加任何抗生素"O禁令中指出H动物饲料是人类食物链中第一环要使制止禁用抗生素的行动更为有效必须从源头把关O"据了解我国在对虾养殖是宣传不宜使用抗生素O但实际上仍然在大量使用这无疑对人的健康有不良影响而且导致出口水产品遭到贸易壁垒的限制而蒙受损失O新型饲料添加剂抗菌肽O2004年已得到农业部转基因生物安全管理部门的批准在对虾养殖生产应用O2002年姜兰[4]报告了重组抗菌肽对多种水产养殖的病原微生物有较好的抑菌作用O如嗜水气单胞菌Aeromons hydrophila温和气单胞菌 A.xobia迟纯爱德华氏菌Edwardsiella tanda梅氏弧菌Vibrio metschnikevi及荧光假单胞菌Pseu! domonas fluorscens等最低有效浓度的4ug/mL O2002~2004年间华南农业大学与深圳市艺鹏生物工程有限公司合作先后有深圳市及海南省对虾养殖场进行抗菌肽养殖对虾的研发并与抗生素金霉素等作对比取得较好的结果O现总结于此文O!"""试验材料与方法2.1 试验材料南美白对虾Litopennaens van! nemei又译凡纳对虾O由试验的对虾养殖场提供O饲料添加剂抗菌肽由深圳市艺鹏生物工程有限公司提供产品符合O/KW SW12~2004质量标准抗菌效价5000单位/mL O2.2 抗菌肽与抗生素金霉素的剂量在对虾幼苗饲喂阶段抗菌肽为2~4ppm水体相当于2~4mL制剂/m3水体金霉素5ppm水体相当于5mg/ m3水体O成虾养殖阶段抗菌肽为2~4mL/kg饲料金霉素为5mg/kg饲料混合后每天投放一次O2.3 调查与管理试验地点分别在广东省深圳市龙岗区双溪口对虾育苗场及海南省三亚市乐东县太阳城对虾良种选育有限公司进行O分仔虾虾苗养殖及成虾养殖两个阶段O按常规进行消毒饲喂及水体管理O虾苗养殖在室内水泥地或黑桶中放养水温28~32C pH7~8氧容量6~8mg/L O饲料由试验场供应水藻轮虫及千年虫兼用部份进口虾料O成虾养殖在虾塘或网箱中放养按常规管理O调查仔虾成虾成活率出苗收获率及体长体重等指标O2.4 抗菌肽制剂的安全性评价按2002年农业部农业转基因安全评价管理条例执行1由深圳市疾病预防与控制中心实施检验及监督O#"""试验结果3.1 抗菌肽对亲虾产卵及卵孵化的影响在海南及深圳虾场应用抗菌肽与金霉素处理每处理为5对亲虾在大黑桶中进行交配产卵将虾卵用虹吸法分离后计算平均每只雌虾产卵数调查累计孵化率O结果见表12O从资料上看抗菌肽2~4ppm组与金霉素组无明显差异略优于对照组平均抗菌肽组孵化率86~87%金霉素组85.7%对照组79.4%O两地试验区对比无显著性差异, P>0.05O广东蚕业第40卷24表!"""""""""""""""""""""抗菌肽养殖南美自对虾幼苗的调查(诲南虾场)3.2 抗菌肽对虾苗养殖的效果在海南及深圳虾场应用抗菌肽及金霉素处理虾苗,每处理为20000尾,分别调查无节幼体~蚤状体~糠虾及仔虾的成活情况O 在处理过程中隔3天换水1/3,补充抗菌肽及金霉素以保持稳定的浓度O 抗菌肽组出苗率为39.75%,金霉素组为36.0%,对照为30%O 试验组之间无显著性差异,均较对照还为优,结果见表3~4O项目抗菌肽(2ppm >抗菌肽(4ppm >金霉素(5ppm >对照供试尾数(尾>20000200002000020000密度(尾/50ml >1-1.51-1.51-1.61-1.5无节幼体(尾/50ml > 5.1 5.0 5.1 5.1蚤状体(尾/50ml > 4.8 4.7 4.6 4.3糠虾(尾/50ml > 3.6 3.5 3.4 3.0仔虾(尾/50ml > 2.1 2.5 2.0 1.6出苗数(尾>8400920080006400出苗率(%>42.046.040.032.0表#""""""""""""""""""""""""抗菌肽对南美自对虾亲虾产卵及孵化的调查(诲南虾场)项目抗菌肽(2ppm >抗菌肽(4ppm >金霉素(5ppm >对照亲虾平均体长(cm >16.415.815.416.2亲虾平均体重(g >43.342.543.043.2产卵量(粒/50mL > 5.1 5.0 4.8 4.9估计产卵量(粒/只>20400200001920017500孵化幼体数(只/50mL > 4.59 4.40 4.08 3.92平均孵化幼体数(粒/只>18300176001630015600孵化率(%>89.788.084.880.0注Z 产卵量(粒/ m 3)=粒/mL>1000000O 用50mL 量筒测定,计算每50mL 中的虾卵或幼体数,共取样式5次,取平均值O表$%""""""""""""""""""""抗菌肽对南美自对虾亲虾产卵及孵化的调查(深圳虾场)项目抗菌肽(2ppm>抗菌肽(4ppm>金霉素(5ppm>对照亲虾平均体长(cm >14.214.015.114.5亲虾平均体重(g >38.439.539.838.5产卵量(粒/50mL > 4.3 4.0 4.0 3.9估计产卵量(粒/只>17200160001600015600孵化幼体数(只/50mL > 3.65 3.4 3.35 3.08平均孵化幼体数(粒/只>14600136001340012300孵化率(%>84.885.083.778.8新型饲料添加剂抗菌肽养殖对虾的效果25表!"""""""""""""""""""""""""""""抗菌肽饲喂南美自对虾成虾的效果(诲南资料)天数项目抗菌肽基因酵母(4mL/kg饲料>金霉素(lmg/kg>0天投放仔虾(尾>2000020000体长(mm>10~2010~20体重(g/尾>0.03~0.040.03~0.0420天虾数(尾>1850018000体长(mm>30-35平均33.230-35平均32.3体重(g/尾>0.5~0.60.5~0.640天虾数(尾>1600015000体长(mm>45~58平均5245~55平均48体重(g/尾> 2.5~3.0平均2.75 2.4~2.8平均2.6060天虾数(尾>1400013000体长(mm>40~70平均6660~68平均62体重(g/尾> 4.9~5.5平均5.3 4.6~5.0平均5.0虾数(尾>l2600实收l0700实收体长(mm>80~90平均8475~80平均76体重(g/尾>l0~ll.5平均l0.69~l0.5平均9.5收获率(%>62.553.5收获量(kg>13310180天项目抗菌肽(2ppm>抗菌肽(4ppm>金霉素(5mg/L>对照0天尾数(万尾/ m3) 5.0 5.0 5.0 5.0密度(尾/50mL) 2.5 2.5 2.5 2.55天尾数(万尾/ m3) 4.8 4.8 4.9 4.8体长(mm)2-2.22-2.22-2.22-2.210天尾数(万尾/ m3) 3.08 3.0 2.96 2.68体长(mm)32-3.5 3.3-3.6 3.1-3.6 3.0-3.615天尾数(万尾/ m3) 2.74 2.76 2.60 2.56体长(mm)5-65-65-65-620天尾数(万尾/ m3) 2.1 2.06 1.96 1.64体长(mm)6-76-76-76-7出苗尾数(万尾/ m3) 1.76 1.80 1.60 1.50体长(mm)出苗率(%)7-835.27-836.07-832.07-830.0表#""""""""""""""""""""""""""""""""抗菌肽养殖南美自对虾幼苗的调查(深圳虾场)3.3 抗菌肽对对虾养殖的效果在海南及深圳虾场应用抗菌肽及金霉素饲喂南美白对虾,在海南的虾池养殖,投放20000尾仔虾,按常规饲养管理,抗菌肽组为4mL/kg,金霉素组为1mg/kg饲料的剂量,按仔虾体重估计每日投饵量,每天一次O饲喂80天后调查出苗率及收获量,结果列于表5O从收获率以抗菌肽组62.3%,较金霉素组53.5%,增加16%;收获量以抗菌肽组133kg,较金霉素组101kg,增加31%,有显著性差异O 收获率:P<0.05有显著性差异O广东蚕业第40卷26表!""""""""""""""""""""""""""""""抗菌肽饲喂南美自对虾成虾的效果(深圳资料)日期项目抗菌肽基因酵母!4mL/kg饲料"金霉素!0.5mg/kg饲料"0天投放仔虾!尾"20000!800尾/㎡"20000!800尾/㎡"体长!mm"9~l29~l2体重!g/尾"0.03~0.040.03~0.0420天虾数!尾"l9500l8200体长!mm"34.5 2.334.0 3.3体重!g/尾"0.58 0.l20.57 0.ll 存活率!%"97.59l.040天虾数!尾"l7400l6500体长!mm" 5.6 2.85l.3 2.5体重!g/尾" 2.78 0.l9 2.6l 0.88存活率!%"87.082.560天虾数!尾"l5600l4200体长!mm"70.5 3.068.4 2.6体重!g/尾" 5.25 4.8 5.0l 6.6存活率!%"78.07l.080天虾数!尾"l3900l2l00体长!mm"88.5 2.885 3.2体重!g/尾"7.24 0.80 6.88 0.94存活率!%"69.560.5虾数!尾"l3l00实收ll200实收l00天体长!mm"95 2.892 3.4体重!g/尾"l0.8 2.29.50 2.5存活率!%"65.556.0收获量!kg"l4l.5ll6.4在深圳虾场采用网箱养殖#虾池60>l5m#深l.5~l.8m#水体消毒及管理按常规进行$网箱用浮动式悬挂于池中#按每㎡面积投入仔虾800尾的标准#抗菌肽组为4mL/kg饲料$金霉素组为0.5mg/kg饲料的剂量#按仔虾体重估计每日投料量#每天一次$饲喂ll0天后调查出苗率及收获量$结果列于表6$从出苗率以抗菌肽组为65.5%#较金霉素组56.0%#增加l3.3%#收获量以抗菌肽组l4l.3kg#较金霉素组ll6.4kg#增加l2.8%#有显著性差异$收获率P<0.05有显著性差异$2004年#海南省扩大试验#在文昌市对虾养殖场进行$抗菌肽4mL/kg#金霉素l0mg/kg为剂量加入饲料中饲喂# ll0天后调查效果#列表7#结果抗菌肽组收获率为65.3 7.2#较金霉素组56.2 8.2%%#提高l6.7%$收获率有显著性差异#P<0.05%其它数据无显著性差异P>0.05$新型饲料添加剂抗菌肽养殖对虾的效果273.4 抗菌肽安全性评价转抗菌肽基因在酵母中表达 通过发酵而得到抗菌肽产品 作为饲料添加剂应用南美白对虾的养殖 根据农业部转基因生物安全管理系例[5] 经过中间试验\环境释放\生产性试验及生产应用等四个阶段的申报O 由深圳市疾病预防控制中心实施检测和监督O 认为G 抗菌肽无毒副作用 在对虾体\水体及废弃物等末检出活的酵母 在对虾体内无药物残留nO G 三致n 试验均为阴性O 2004年 农业部转基因生物安全办批准生产应用 农基安证字<2004>第27号O抗菌肽制品在对虾的饲料或水体中能对水中的微生物加以控制 使致病微生物如弧菌等均能杀灭 通过饲料摄入虾体内能提高免疫力和促进生长的作用O 因此能提高出苗率 增加体重的效果O 抗菌肽代替金霉素等抗生素在对虾养殖应用有广阔开发前景O参考文献l. WHO, Impacts of antimicrobiat growth termination in Denmark (J), FoulumDenmark,WHO/CDS/2FK/2003 l :l-272. 张合成 FAO 拟建立养殖水产品抗生素残留量制度<J > 中国水产 2003 4:8-ll3. G 氯霉素n 风波<J> 中国水产 2002 7:l2-l74. 姜兰 白俊杰 邓国成 黄自然等O 重组抗菌肽的制备及共对水产养殖中常见病原微生物的抑制效果<J > 中国水产科学 2002 9<2>:l52-l555. 农业部公告 转基因生物安全管理条例 200l区别放养尾数<尾>饲养天数<d>平均体长<mm>平均体重<g>收获率<%>抗菌肽<4mL/kg >l2>l04ll095.2 2.8l0.8 2.265.5 7.2金霉素<l0mg/kg >l2>l04ll092.5 4.29.5 2.356.2 8.2表7 抗菌肽饲喂南美自对虾成虾的效果(诲南文吕虾场)不同处理对虫草菌生长效果的影响潘少茜陈卫东吴娱明刘学铭邹宇晓陈智毅施英(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,广州510610)冬虫夏草简称冬虫草 具有益肺肾 补精髓 止血化痰\抗菌\平喘\强心\降压等功能O 其主要成分除脂肪\精蛋白\精纤维\碳水化合物和水分以外 尚含有虫草酸\冬虫草素和维生素Bl2等 营养和药用价很高O 由于天然的冬虫草产量越来越少 人工培养冬虫夏草替代品已成为科研部门的热点课题O 本所早就开始广东蚕业40 <3>:28-3l。
抗菌肽及其在畜牧业中的应用摘要抗菌肽是阳离子型活性肽,目前发现抗菌肽或类似抗菌肽的小分子肽类广泛存在于昆虫、两栖类、水产动物、哺乳动物及植物中,这种内源性抗菌肽经诱导而合成,在机体抵抗病原的入侵方面起着重要的作用,具有分子量小、热稳定性好、无免疫原性、抗菌谱广等特点。
从抗菌肽的分类、作用机理、应用等几个方面综述了抗菌肽的研究状况及其在畜牧业中的应用。
关键词抗菌肽;作用机理;进展;应用抗菌肽(antibacterial peptides)又称抗微生物肽(peptide antibiotics),是生物体在抵抗病原微生物的防御反应过程中产生的一种具有抗微生物小分子多肽。
1972年,瑞典科学家Boman等首先在果蝇中发现抗菌肽及其免疫功能[1],随后首先从惜古比天蚕蛹诱导分离到具有抗菌活性的多肽,命名为Cecropins。
迄今为止,已在许多生物中发现300多种这样的内源性抗菌肽,可大致分为4类:cecropins(杀菌肽)、富含Pro残基的magainins(蛙皮素)、富含Gly残基的melittins (蜂毒素)和富含Cys残基的defensins(防御素)。
这些抗菌肽除了具有广谱的抗菌活性外,同时还有高效的抗真菌和(或)抗病毒和(或)原虫和(或)抗肿瘤活性[2-3]。
因此,这些肽类抗菌物质显示了在医学和农业上潜在的研究和应用价值。
1抗菌肽的特点1.1抗菌肽的理化特点抗菌肽的理化性质现已基本清楚,其相对分子质量一般在4KD左右,它是生物先天免疫防卫系统的一个重要组成部分[1]。
多数抗菌肽的相对分子质量低、水溶性好、等电点大于7,表现出较强的阳离子特征。
在家蚕抗菌肽的稳定性试验中发现,家蚕抗菌肽在121℃、1.5×105Pa的高温高压处理30min,抗菌肽仍保持原有活性,说明抗菌肽具有对热稳定的特性[4]。
同时还发现抗菌肽对弱酸弱碱的耐受性较强,但对胰蛋白酶和蛋白酶K非常敏感,易被水解。
1.2抗菌肽的结构特点抗菌肽具有广谱抗菌和其他优良的特性,与它自身的结构特点密不可分。
抗菌肽新型预混合剂饲养南美白对虾的效果试验
欧阳冰;黄永彤;黄自然;陈志斌
【期刊名称】《广东饲料》
【年(卷),期】2013(022)008
【摘要】用抗菌肽预混合剂替代禁用药物和抗生素防治鱼虾类疾病,应用于南美白对虾亲虾产卵及孵化均有提高,应用于虾苗养殖、成虾养殖也有较明显的效果,试验组个体体长、体重虽比对照组大,但差异并不显著,试验面积合计30亩,平均每亩收获对虾137.3 kg,对照面积合计30亩,平均每亩收获对虾113.7 kg,平均每亩增收对虾23.6kg,增产20.1%,增产效果明显.使用方法简便,易为水产养殖户接受.【总页数】3页(P22-24)
【作者】欧阳冰;黄永彤;黄自然;陈志斌
【作者单位】中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380;暨南大学医药生物技术研究开发中心,广东广州510630;华南农业大学,广东广州510642;中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东广州510380
【正文语种】中文
【中图分类】S968.22
【相关文献】
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抗菌肽在水产养殖中的应用摘要:抗菌肽一般是由7~100个氨基酸组成的小分子多肽,具有广谱抗菌、抗真菌、抗病毒、抗寄生虫、抗原虫、抑杀肿瘤细胞和调节免疫等多种生物学活性,在水产健康养殖中具有广阔的应用前景。
文章综述了抗菌肽的生物学活性以及在水产养殖中的应用,阐述了国内外的研究进展。
关键词:抗菌肽;生物学活性;水产养殖抗菌肽(AntibacterialPeptide,AMPs)又叫宿主防御肽(HostDefencePeptide,HDPs),通常是由7~100个氨基酸组成的小分子多肽[1],是生物体天然免疫防御系统的一个重要组成部分[2],也是各种生物抵御入侵病原体的第一道防线[3]。
抗菌肽具有广谱抗细菌[4]、抗真菌[5]、抗病毒[6]、抗寄生虫[7]、抑杀肿瘤细胞[8]和免疫调节[9]等生物学活性。
抗菌肽广泛存在于哺乳动物、两栖动物、鱼、植物、昆虫、棘皮动物、甲壳类动物、真菌和细菌中[10]。
据APD抗菌肽数据库报道(截至2019年11月),已经有3056种天然抗菌肽被鉴定、分离出来,其中来自细菌344种、古细菌5种、原虫8种、真菌20种、植物352种、动物2327种[11]。
抗菌肽与抗生素相比,具有不易产生耐药性、对宿主毒性最小、广谱活性、快速杀灭等优点[12-13]。
这些特性使抗菌肽被认为是克服抗生素耐药性的最佳替代者[10],是战胜细菌的新武器[1]。
近年来,抗菌肽及其应用研究已成为医学、农业、食品领域的研究热点之一。
在水产养殖中应用各种抗菌肽,可以提高水产动物的生产性能、消化酶活性、抗氧化和免疫功能。
1抗菌肽的生物学活性研究表明,天然AMPs对革兰氏阴性和革兰氏阳性细菌、真菌、病毒和真核寄生虫具有广谱活性[14-16]。
1.1抗细菌活性。
目前,关于抗菌肽的抗菌活性研究最多[17]。
多数抗菌肽通过攻击细胞膜而杀死细菌[18],而一些抗菌肽则通过抑制细胞内途径如DNA复制和蛋白质合成等来杀死细[19]。
关键词:抗菌肽;水产养殖;生物活性功能1980年,世界上第一个抗菌肽是由瑞典科学家发现的,定名为Cecropins。
抗菌肽是具有抗菌活性的一类多肽物。
人们进一步研究发现抗微生物肽是最适合的抗生素替代品,其具有广谱抗菌活性,并能迅速杀灭病原体,包括革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌、病毒等,而且副作用小、稳定性和溶解性强,在水产养殖方面具有良好的发展前景。
一、抗菌肽的分类抗菌肽广泛分布于自然界中,种类丰富多样,为了方便区分,我们可以根据抗菌肽的来源、功能、结构分别进行分类。
抗菌肽在植物、哺乳动物、两栖动物、海洋生物、昆虫、细菌和真菌等各种生物中均有分布,因此,可以根据其来源将其分为五种;而根据抗菌肽对细菌、寄生虫、原虫、病毒、真菌及肿瘤的广泛生物学抗性功能的不同又可以分为五种;由于抗菌肽化学结构的不同,有的富含某种氨基酸,有的含等量半胱氨酸,有的不含半胱氨酸的线性抗菌肽,又可以分为三种。
二、抗菌肽的作用机制抗菌肽对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有杀菌作用,其独特的广谱抗菌特性是传统抗生素不能与之比较的,这也是抗菌肽的优势所在。
抗菌肽具有独特的结构,通过中和电荷与细菌细胞膜的相互作用,从而穿透并杀死细菌,这是一个非常复杂的过程,研究学者们将其主要分为两部分,一是抗菌肽的膜透化作用,二是抗菌肽与细菌胞质内靶目标的作用。
(一)抗菌肽的膜透化作用首先,抗菌肽是一种含有较多正电荷氨基酸的两性分子,其正电荷区域可以与细菌细胞膜上的负电荷通过静电引力相互作用,选择性结合细菌外膜,抗菌肽的疏水端进入细胞膜的磷脂分子层中,从而改变脂质膜结构,使细胞形成空洞。
抗菌肽两端的疏水性氨基酸决定着多肽与细菌磷脂膜紧密结合,因此,可以使细胞膜上的蛋白质分子和磷脂分子结构紊乱,这是抗菌肽作用的关键。
(二)抗菌肽与细菌胞质内靶目标的作用抗菌肽通过作用改变了细胞膜的通透性后并没有结束,这只是一个中间过程,随后抗菌肽可以进入细胞内,与细胞内的其他物质结合,从而干扰代谢,完成杀菌作用。
肽子抗菌肽简介肽子抗菌肽是无毒副作用、无药物残留、无环境污染的绿色饲料添加剂,可以避免抗生素在肉奶蛋中残留,有利于禽畜产品质量的改善,有利于人的健康。
又能避免诱发耐药性病菌的产生,防止交叉感染而引起的恶性循环,在农牧业可持续性发展及生态环境保护中均有长远的经济效益及社会效益。
产品特点肽子抗菌肽是由枯草芽孢杆菌产生的含38个氨基酸残基的短肽,具有以下特点:1. 耐酸性能好:在胃酸环境中稳定,保证抗菌肽不被胃酸降解消化;2. 热稳定性好:能耐120℃高温,适合与各种饲料混合造粒;3. 抗菌谱广:至少有113种以上的细菌均能被抗菌肽所杀灭;4. 水溶性好:易溶于水,可与饲料混合,也可用于饮用水中,使用极其方便;5. 安全性高:目前未发现抗菌肽有任何毒副作用,使用无残留、无耐药性现象;6. 作用快速:抗菌肽分子较小,当机体受到侵犯时,几分钟内就能发挥作用。
产品机理肽子抗菌肽是通过蛋白凝聚效应,将其一端插入细菌细胞膜打孔形成一个通道,使细菌原生质泄漏出来导致细菌死亡。
不易产生抗药性,是其特点。
产品成分抗菌肽≥30000 单位/g。
用法用量1. 拌料按饲料重量计的添加量为0.1-0.3‰,即每吨饲料添加本品100-300克。
2. 饮水200克抗菌肽溶于1000升水中,按3毫升/15公斤体重灌服。
也可按50-150克/吨配于饮用水中饮用。
产品优势产品案例1.抗菌肽喂养仔猪的效果2.抗菌肽喂养肉猪的效果2007年8月,生产的抗菌肽在湛江市雷州县陈先生的猪场应用饲喂肉猪2批,共864头。
经28-30天的试验。
与同期抗生素加中草药组对比。
存活率94.8%,体重平均26.4kg/头,耗料24.6kg/头与对照区抗生素加中草药组无明显差异。
仔猪腹泻率则为3.6%,抗生素加中草药为8.8%。
3.抗菌肽其他养殖的效果抗菌肽饲料添加剂应用于小鸡、对虾、罗非鱼的的养殖,代替抗生素,预防疾病,小鸡存活率达到98.6%,较抗生素对照组提高4.9%;对虾存活率达到62.5%,较抗生素对照组提高了15.1%;罗非鱼的存活率达到87.8%,较抗生素对照组提高了4.1%。