荧光光度法测定啤酒中的甲醛

一、实验目的1. 了解甲醛的基本性质及其对人体的危害。

2. 掌握甲醛的测定方法，提高实验技能。

3. 熟悉实验仪器的使用方法。

二、实验原理甲醛（化学式：HCHO）是一种无色、有刺激性气味的有毒气体，具有较强的还原性。

甲醛对人体健康有害，长期接触可引起呼吸系统疾病、皮肤病、神经系统疾病等。

本实验采用乙酰丙酮分光光度法测定甲醛浓度。

乙酰丙酮分光光度法：甲醛与乙酰丙酮在碱性条件下反应生成稳定的黄色化合物，该化合物的最大吸收波长为412nm。

通过测定该化合物的吸光度，可计算出甲醛的浓度。

三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外可见分光光度计、蒸馏装置、电加热套、水浴锅、容量瓶、移液管、滴定管、试管等。

2. 试剂：甲醛标准溶液、乙酰丙酮溶液、乙酸铵、冰乙酸、无水乙醇、氢氧化钠、蒸馏水等。

四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取一系列容量瓶，分别加入不同体积的甲醛标准溶液，用蒸馏水稀释至刻度，配制成不同浓度的甲醛溶液。

（2）在pH6的乙酸-乙酸铵缓冲溶液中，加入适量乙酰丙酮溶液，充分混合。

（3）将配制好的甲醛溶液分别加入试管中，在40℃水浴中加热10分钟，使甲醛与乙酰丙酮反应。

（4）用紫外可见分光光度计测定各溶液在412nm处的吸光度。

（5）以甲醛浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

2. 样品测定（1）取一定体积的待测样品，用蒸馏水稀释至一定体积。

（2）按照绘制标准曲线的步骤，测定样品溶液在412nm处的吸光度。

（3）根据标准曲线，计算样品中甲醛的浓度。

五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制标准曲线如图所示。

2. 样品测定（1）样品1：甲醛浓度为0.15mg/L；（2）样品2：甲醛浓度为0.20mg/L；（3）样品3：甲醛浓度为0.10mg/L。

通过实验，测定了三种样品中甲醛的浓度，结果表明，样品中甲醛含量较高，需采取相应措施降低甲醛浓度。

六、实验总结1. 通过本次实验，掌握了甲醛的测定方法，提高了实验技能。

啤酒生产中甲醛残留量的检测与控制随着人们生活水平的提高以及饮品消费的增加，啤酒的生产和消费也迅速发展。

然而，在啤酒生产和加工过程中，甲醛残留问题已成为了一项极其重要的问题。

甲醛是一种有毒、易挥发的有机化合物，如果残留在啤酒中，会对人的健康造成危害，因此，控制啤酒中的甲醛含量也成为了啤酒生产的一项关键工作。

甲醛含量的检测为了控制啤酒中甲醛的含量，啤酒生产企业必须增加对甲醛含量的监测和管理。

目前，啤酒生产企业通常采用高效液相色谱仪（HPLC）进行甲醛残留检测。

这种测试方法具有高灵敏度、高准确性和高精度的优点，可以极大地提高产业的质量管理水平。

同时，根据国家相关标准及追溯体系，对生产过程中甲醛含量进行全程核查，保证生产的每一个环节不出现控制不力的情况。

甲醛含量的控制为了控制啤酒中甲醛的含量，生产企业必须采取多项措施，如严格控制原料（如麦芽、水、啤酒花等）的质量，确保没有污染。

此外，在酒精发酵过程中，必须严格控制温度、湿度等各项参数的变化，以避免甲醛释放过多。

在生产完成后，啤酒需要经过一定的浸泡、冷却、过滤等工艺过程，同时，在装瓶过程中也应做好清洁和消毒工作，以尽量降低甲醛的残留。

啤酒生产中甲醛残留量的影响因素影响啤酒中甲醛残留的因素非常复杂，主要包括原料、微生物、温度、湿度、时间、水硬度等多个方面。

常见的影响因素有以下几个：1. 麦芽的使用情况。

如果在生产过程中使用了不新鲜的麦芽或者变质的麦芽，则有可能影响啤酒中甲醛的含量。

2. 当前水质的硬度情况。

如果水质太硬或水中的氯气含量过高，也有可能在污染固定条件下增加甲醛的含量。

3. 制造过程中的酒精发酵温度等环境条件。

如果环境条件不安定或者调整不当，也会增加甲醛的含量。

结语从以上针对甲醛残留量进行检测与控制的实践来看，啤酒生产企业必须要加强对原材料与生产环节的管理，并跟进最新水平、合规监管，采取积极有效的控制措施，以确保产品的质量、安全。

在中国市场快速发展的消费环境中，甲醛问题的爆发提示了所有生产者应提高对食品安全的重视程度，同时可以借鉴行业国外的做法，采用更有效、更科学的控制措施，在高质量食品生产中稳健发展，成为受消费者认可的优质啤酒品牌。

酚试剂分光光度法测定啤酒中的醛类物质李广超;沈莉【摘要】采用酚试剂分光光度法测定啤酒中醛类物质的含量,探讨了反应温度、显色时间以及硫酸铁铵用量等因素对测定的影响.实验结果表明,在室温条件下显色时间30 min、硫酸铁铵用量0.4mL时,加标回收率在98.1％～ 102％之间,测定结果令人满意.【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2013(041)019【总页数】3页(P97-98,125)【关键词】酚试剂;甲醛;分光光度法;啤酒【作者】李广超;沈莉【作者单位】江苏师范大学化学化工学院,江苏徐州221116;江苏师范大学化学化工学院,江苏徐州221116【正文语种】中文【中图分类】O657.32市售啤酒中微量的甲醛和乙醛主要来源于两个方面，一是传统工艺中为了加速絮状物的沉淀，在生产过程中添加所致;二是在发酵过程中产生的。

由于酒要经过微生物发酵，只要有新陈代谢就会有甲醛等其它醛类物质的产生。

甲醛超出一定含量则对人体有害，国家标准中规定啤酒中甲醛的最高限量为2.0 mg/L。

目前，甲醛的测定方法主要有酸碱滴定法［1］、分光光度法［2－7］、荧光法［8］和色谱法［9－11］等。

在分光光度法中，乙酰丙酮法、酚试剂法、变色酸法、AHMT法已被列为环境空气中甲醛测定的标准方法(HJ/T 167－2004)。

对于食品中甲醛测定方法的研究报道主要是乙酰丙酮分光光度法和AHMT分光光度法，本文采用酚试剂分光光度法测定了几种市售啤酒中微量醛类物质的含量(以甲醛计)，得到了令人满意的结果。

1 实验部分1.1 主要仪器与试剂实验使用的主要仪器包括:电子调温电热套(HDM－250型)，常州市伟嘉仪器制造有限公司;数显恒温水浴锅(HH－4型)，常州市国华电器有限公司;紫外光栅分光光度计(752型)，上海第三分析仪器厂。

实验使用的主要试剂包括:酚试剂(AR.)，国药集团化学试剂有限公司;甲醛 (AR，36% ～38%)，南京化学试剂一厂;硫酸铁铵(AR)，上海化学试剂公司。

CdTe量子点荧光猝灭法测定甲醛周正;康天放;鲁理平【摘要】采用一步水热法合成了水溶性N-乙酰-L-半胱氨酸修饰的碲化镉量子点(NAC-CdTe),基于甲醛对该量子点的荧光猝灭作用,建立了测定甲醛的荧光光谱法.在7.5×10-8mol·L-1 NAC-CdTe-0.01 mol·L-1 Tris-HCl(pH 6.0)体系中加入不同质量浓度的甲醛溶液,反应10 min后,以400 nm为激发波长,于567 nm处测量体系的荧光强度(I).甲醛的质量浓度在5.0×10-6～1.0×10-1 g·L-1内与I0/I(I0为不加甲醛时体系的荧光强度)值呈线性关系,检出限(3s/k)为1.3× 10-6g·L-1.方法用于测定水样中的甲醛,测定结果与乙酰丙酮分光光度法的测定结果相符,加标回收率在98.0％～102％之间,测定值的相对标准偏差(n=5)在1.4％～4.1％之间.%Water-soluble CdTe quantum dots (QDs) modified with N-acetyl-L-cysteine (NAC) are synthetized by one-step hydrothermal method.Based on the fluorescence quenching of formaldehyde to NAC-CdTe QDs,fluorescence spectrometry for determination of formaldehyde wasdeveloped.Formaldehyde with different mass concentration was added into the system with 7.5× 10 8mol · L-1 NAC CdTe and 0.01 mol · L-1 Tris-HC1 (pH 6.0).After reaction for 10 min,the fluorescence intensity (I) of the system was measured at 567 nm with the excitation wavelength of 400 nm.Linear relationship was found between the value of I0/I (I0 was the fluorescence intensity of the system without formaldehyde) with the mass concentration of formaldehyde in the range of 5.0× 10-6-1.0× 10-1 g · L-1,with detection limit (3s/k) of 1.3 × 10-6g · L-1.The poposed method was applied to detemination of formaldehyde in water sample,giving results inconsistent with those obtained by acetylacetone spectrophotometric method.Recovery rates obtained by standard addition method were in the range of 98.0％-102％,and RSDs (n=5)were in the range of 1.4％-4.1％.【期刊名称】《理化检验-化学分册》【年(卷),期】2017(053)009【总页数】6页(P1025-1030)【关键词】荧光猝灭法;甲醛;量子点;碲化镉【作者】周正;康天放;鲁理平【作者单位】北京工业大学环境与能源工程学院区域大气复合污染防治北京市重点试验室,北京100124;北京工业大学环境与能源工程学院区域大气复合污染防治北京市重点试验室,北京100124;北京工业大学环境与能源工程学院区域大气复合污染防治北京市重点试验室,北京100124【正文语种】中文【中图分类】O657.3甲醛是城市生态系统中对人们居住环境质量有重要影响的环境污染物，已被世界卫生组织确认为致癌和致畸物质［1－2］，因此发展和建立快速准确测定微量甲醛的方法具有重要意义。

探讨AHMT分光光度法测定水中甲醛的方法甲醛具有刺激性，是一种无色，易溶于水，醇，醚的气体。

近年来，甲醛的污染及其对人体的伤害越来越严重，甲醛对皮肤和黏膜具有刺激性作用，进入人体后易对人的中枢神经和视网膜造成损害。

生活饮用水及水源水中的甲醛主要来源于化工[1]，合成纤维，染料和木材加工等行业排放的废水及二氧化氯，臭氧消毒处理时有机物发生氧化产生的副产物。

文章采取GB/T5750.10-2006《生活饮用水标准检验方法消毒副产物指标》中的AHMT分光光度测定生活饮用水的甲醛，在此基础上，文章进行了甲醛的开发测定工作研究探讨。

标签：分光光度法；甲醛；分析测定；水1 实验部分1.1 材料与方法（1）分光光度计紫外/可见分光光度计TU-1901。

（2）具塞比色管：10mL。

（3）乙二胺四乙酸二钠-氢氧化钾溶液（100g/L）：称取10.0g乙二胺四乙酸二钠溶于氢氧化钾（5mol/L）溶液中，并稀释至100mL。

（4）盐酸溶液（c（HCl）=0.5mol/L）：吸取2.1mL浓盐酸纯水稀释至50mL。

（5）氢氧化钾溶液（c（KOH）=5mol/L）：称取20g氢氧化钾溶于少量水中溶解，并稀释至100mL。

（6）4-氨基-3-联氨-5巯基-1，2，4-三氮杂茂（AHMT）：称取0.25g AHMT，溶于50mL（0.5mol/L）盐酸溶液中。

（7）高碘酸钾溶液（15g/L）：称取1.5g高碘酸钾，溶于氢氧化钾（0.2mol/L）溶液中（水浴中加热溶解），并稀释至100mL。

（8）甲醛标准溶液：国家环境保护部标准样品研究所甲醛标准样品（编号104119标准值：100mg/L）。

用纯水稀释成1.0？滋g/mL的标准使用液。

（9）甲醛质控样：国家环境保护部标准样品研究所甲醛标准样品（编号204528标准值：1.71mg/L，不确定度±0.08）。

1.2 方法原理（1）原理：水中甲醛与4-氨基-3-联氨-5巯基-1，2，4-三氮杂茂（AHMT）在碱性条件下缩合后，经高碘酸钾氧化成6-巯基-S-三氮杂茂[4，3-b]-S-四氮杂苯紫红色化合物，其颜色深浅与甲醛含量成正比。

理化检验2化学分册P TCA(PAR T B:C H EM.ANAL.)2008年　第44卷　5　工作简报衍生气相色谱法测定啤酒中痕量甲醛王　华1,张爱平1,王红卫1,张文国1,方禹之2(1.南通出入境检验检疫局,南通226005;　2.华东师范大学化学系,上海200062)摘　要:以2,42二硝基苯肼作衍生试剂,在稀硫酸溶液中使啤酒样品中的痕量甲醛衍生化,然后用环己烷超声萃取所生成的衍生物先后3次,分取萃取液1μL进行气相色谱测定,采用电子捕获检测器,对气相色谱仪的工作条件作了详述。

由线性回归方程y=85380x+3447(r=0.9999)所示峰面积的积分值与甲醛(实质上为其衍生物)浓度值之间呈线性关系,其相应的线性范围为0.05～0.8mg・L-1,检出限为0.01mg・L-1,在分析啤酒实样的同时对方法的精密度和回收率做了试验,测得其相对标准偏差(n=5)小于0.3%,回收率在99.8%～100.2%之间。

关键词:气相色谱法;衍生化;溶剂萃取;2,42二硝基苯肼;甲醛;啤酒中图分类号:O657 文献标识码:A 文章编号:100124020(2008)0520450203G C Determination of T race Amounts of Formaldehyde in Beer withPre2DerivatizationWANG H ua1,ZHANG Ai2ping1,WANG H ong2w ei1,ZHANG Wen2guo1,FANG Yu2zhi2(1.N antong Ent ry2Ex it I ns pection and Quarantine B ureau,N antong226005,China;2.Dept.of Chemist ry,East China N ormal Universit y,S hanghai200062,China)Abstract:Formaldehyde in beer was derivatized with2,42dinitrophenylhydrazine(2,42DN P H)in dil.H2SO4 and the derivative was extracted ultrasonically with cyclohexane for3times.OneμL of the extract was teken for GC determination with ECD detector.Working condition of the gas chromatograph was given in detail.Linear relationship between the values of integral of peak area and concentration of formaldehyde(essentially its derivative) was obtained as shown by the linear regression equation of y=85380x+3447(r=0.9999),corresponding to the linearity range of0.05-0.8mg・L-1,with a detection limit of0.01mg・L-1.Tests for precision and recovery were performed,giving values of RSD′s(n=5)less than0.3%,and of recovery in the range from99.8%-100.2%.K eyw ords:G as2chromatography;Derivatization;Solvent extraction;2,42Dinitrophenylhydrazine;Formaldehyde;Beer 面对加入W TO之后的国际竞争,产品质量和酿造工艺一直是民族啤酒工艺的“难言之隐”。

啤酒质量指标检测方法1、啤酒原麦汁浓度的测定比重瓶法GB 4928-91 啤酒试验方法中第9 条啤酒原麦汁浓度的试验方法1．1 范围本方法采用比重瓶法测定啤酒的真正浓度结合采用其它方法所测得的啤酒酒精度通过计算获得啤酒的原麦汁浓度本方法适用于各种类型啤酒中原麦汁浓度的测定以原麦汁含量的质量百分数即%m/m 表示测定值保留一位小数1.2 原理啤酒经加热蒸发蒸去酒精后的残液用水恢复至原重然后用比重瓶测定20 时残液的比重2020 D 经查比重与浸出物含量对照表即可得出试样中浸出物含量的质量百分数即为真正浓度啤酒的酒精度可用比重瓶测定法或其它仪器分析方法测得原麦汁浓度则通过计算获得1.3 仪器3.1 瓷蒸发皿3.2 高精度恒温水浴20 时精度为0.13.3 附温度计比重瓶25mL3.4 感量为0.1mg 的分析天平1.4 试样制备称取100.0g 酒样于已知质量的瓷蒸发皿中于沸水浴上蒸发至原体积的1/3 取下冷却加水恢复至残液原重100.0g 混匀备用1.5 操作步骤5.1 比重瓶空重的测定将比重瓶洗净干燥称量反复操作直至恒量记录比重瓶空重(m)5.2 比重瓶水重的测定将煮沸并冷却至15 左右的蒸馏水注满已恒量的比重瓶插上带温度计的瓶塞瓶中应无气泡立即浸于20 0.1 的高精度恒温水浴中,待内容物温度达到20 ,并保持1520min不变后,用滤纸吸去溢出支管的水,立即盖好小帽取出比重瓶迅速擦干后称量记录比重瓶和水的质量(m1)5.3 酒样残液比重的测定用酒样残液冲洗比重瓶2 3 次然后装满此样品按5.2 同样操作记录比重瓶和酒样残液的质量并计算酒样残液的比重2020 D 经查比重与浸出物含量对照表即可得出试样中浸出物含量的质量百分数即真正浓度n1.6 结果计算式中X 原麦汁浓度% m/mA 酒精含量% m/mn 真正浓度% m/m7 精密度同一样品的两次测定值之差不得超过0.1% m/m2、啤酒酒精度的测定2.1实验原理：用小火将啤酒中的酒精蒸馏出来，收集馏出液。

如何测定溶液中的甲醛甲醛测定的测定方法主要有分光光度法、色谱法、电化学法、化学滴定法等，此处仅就其中的一些主要方法介绍如下：1.分光光度法分光光度法测定的主要方法有乙酰丙酮法、铬变酸法、MBTH法、付品红法、AHMT法等几种。

1.1乙酰丙酮法乙酰丙酮法原理是利用甲醛与乙酰丙酮及氨生成黄色化合物二乙酰基二氢卢剔啶后，412nm下进行分光光度测定。

此法最大的优点是操作简便，性能稳定，误差小，不受乙醛的干扰，有色溶液可稳定存在12hr，；缺点是灵敏度较低，最低检出浓度为0.25mg/L，仅适用于较高浓度甲醛的测定；方法缺点是反应较慢，需要约60min；SO2对测定存在干扰(使用NaHSO3作为保护剂则可以消除)。

该方法非常传统，应用极为广泛。

1.2变色酸法(CTA法)变色酸法也称铬变酸法,甲醛在浓硫酸溶液中可与变色酸(1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸)作用形成紫色化合物，该化合物最大吸收波长在580nm处，可用分光光度法进行分析测定。

改变变色酸浓度和采用不同的采样手段，可满足不同浓度甲醛检测需要。

用0.1%变色酸-86%硫酸溶液作吸收液,检测限可达20μg/L；用1％亚硫酸钠溶液吸收甲醛，变色酸浓度改为5％，方法更稳定、更灵敏。

该法的优点是操作简便、快速灵敏；缺点是在浓硫酸介质中进行，不易控制，且醛类、烯类化合物及NO2等对测定有干扰。

1.3酚试剂法酚试剂法原理是甲醛与酚试剂反应生成嗪，嗪在酸性溶液中被高铁离子氧化形成蓝绿色化合物，颜色深浅与甲醛含量成正比，该化合物在660nm处摩尔吸光系数ε可达7.0×104,该法对甲醛的测定非常灵敏最低检测限为0.015mg/L。

方法的缺点是乙醛、丙醛的存在会对测定结果产生干扰；反应受温度限制，室温低于15，显色不完全，20～35时15min显色最完全，放置4小时，吸收情况稳定不变。

1.4副品红法(PRA)副品红法原理是在甲醛存在下，亚硫酸根离子与副品红生成紫色络合物，其最大吸收峰在570nm处，检测限为50μg/L。