分子生物学》实验17课时

分子生物学实验课程教学大纲课程名称：分子生物学（Molecular Biology）课程编号：1313072215课程类别：专业课总学时数：68 实验时数：18学分：3.5开课单位：生命科学学院生物综合教研室适用专业：生物技术适用对象：本科（四年）一、课程的性质、类型、目的和任务分子生物学实验是生物技术专业一门必修的专业课，涵盖了分子与细胞生物学的许多内容，并与结构基因组学、功能基因组学、蛋白质组学、生物信息学、生物医学、分子病毒学、分子免疫学等学科有着重要的联系。

分子生物学实验课程教学以理论课教学为基础，理论与实践相结合，加深对所学知识的理解，对实验仪器要求较高，因此开设本课程的目的是使学生掌握分子生物学实验设备的操作方法，使学生更加牢固地掌握基础知识，更重要的是培养学生的动手能力和科学研究能力，为学生学习生命科学中的其他相关课程作好基础准备。

同时也使学生具备分子生物学基本的实验技能，学会发现问题和解决问题的能力，为毕业后从事生物学相关的科研和教学工作奠定基础。

本课程的任务是通过实验教学，使学生了解和初步掌握分子生物学实验技术的基本原理和方法，教学内容包括植物基因组DNA的提取、琼脂糖凝胶电泳检测、PCR扩增目的基因及聚丙烯酰胺凝胶电泳等。

在实验内容和方法、技术上进行合理安排，力争让学生在有限的课时中尽可能多地了解和掌握现代分子生物学基本理论和有关实验的基本方法和技术原理，并尽可能多地引进、介绍新的、先进的实验方法和技术，以开阔学生视野，提高学生的动手能力和创造性思维能力，培养高素质的生命科学人才。

二、本课程与其它课程的联系与分工学习和研究分子生物学的目的在于阐明生命活动的化学物质基础，并与其它学科配合，来揭示生命活动的本质和规律。

《生物化学》、《细胞生物学》和《遗传学》是先修课程。

三、课程内容及教学基本要求[1]表示“了解”；[2]表示“理解”或“熟悉”；[3]表示“掌握”；实验一植物基因组DNA的提取植物基因组DNA的提取的目的及原理[1]；植物基因组DNA的提取的实验步骤及操作方法[3]；作业：提取的DNA呈褐色的原因及解决办法？实验二琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳的原理及操作步骤[1]，琼脂糖电泳的实验方法[3]；作业：琼脂糖凝胶电泳中电压如何设置？实验三聚合式酶联反应（PCR）扩增目的基因聚合式酶联反应（PCR）的基本原理、实验基本条件[2]；PCR反应条件的优化和注意事项和应用范围[1]；聚合式酶联反应（PCR）的实验技术[3]；作业：PCR操作防止污染，有哪些注意事项？实验四聚丙烯酰胺凝胶电泳聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理[1]；聚丙烯酰胺凝胶电泳操作步骤和实验方法[3] 作业：预电泳的作用是什么？四、实验方式与要求1．实验前，要求学生预习实验内容，掌握实验目的及设计思路，了解实验步骤。

《生物化学与分子生物学》课程教学大纲(Biochemistry and Molecular Biology)一、课程基本信息课程编号：14232051课程性质：学科专业基础课适用专业：中西医学分：4学分总学时：72学时其中：讲授56学时，实验16学时先修课程：解剖学、组织胚胎、有机化学、医学生物学后续课程：生理学、病理生理学、药理学等临床专业课程授课学期：第2学期选用教材：生物化学与分子生物学[M].北京：科学出版社，2016生物化学实验指导 2016年( 自编教材)必读书目：[1] 周爱儒，生物化学（第八版）[M]. 北京：人民卫生出版社，2013年[2] 陈诗书，医学生物化学（第八版）[M].北京：科学出版社，2009[3] 药立波，医学分子生物学（第八版）[M]. 北京：人民卫生出版社，2014年二、课程教学目标：通过本课程的学习，使学生获得生物大分子的化学组成、结构及其功能等相关知识，在此基础上进一步掌握其代谢过程及其调节规律等生化及分子生物学的基本理论和基本技能，为学习其它后继基础医学和临床医学课程，在分子水平上探讨疾病发生机理，为中西医结合诊断疾病、制定预防和治疗措施等奠定基础。

作为一名医学院校的学生，只有具备扎实的以生物化学为立足点的医学基础知识，才能学好医学相关的专业技能和知识，才能更深入理解生理学、病理学等学科的内容。

总之，通过本门课程的学习，学生应能全面、系统地领会和掌握生物化学与分子生物学的基础理论、基本知识和基本技能，为学习其它基础医学课程和临床医学课程奠定基础。

三、理论教学课时安排、课程内容与基本要求教学内容与学时安排第一章绪论1、教学目的与基本要求(1)掌握：生物化学与分子生物学的概念。

(2)熟悉：生物化学与分子生物学研究的主要内容及其与医药学的关系。

(3)了解：生物化学与分子生物学的发展史。

2、教学内容（1学时）(1)生物化学与分子生物学发展简史(2)当代生物化学与分子生物学研究的主要内容：重点阐述当代生物化学的概念，生物化学与分子生物学研究的主要内容。

《分子生物学实验》实验课程教学大纲一、课程基本信息课程名称：分子生物学实验英文名称：Molecular Biology Experiment课程性质：学科及专业基础课课程属性：独立设课适用专业：生物科学（本科）学时学分：18学时，1学分开设学期：第五学期先修课程：生物化学、分子生物学二、课程简介分子生物学是从分子水平研究生物大分子的结构与功能从而阐明生命现象本质的科学。

分子生物学实验课是理论课的延续和实践，是一门针对核酸分子（DNA、RNA、质粒等）以及蛋白质分子而进行的一系列操作，是生物学的前沿及生长点。

分子生物学实验已深入到动物、植物、微生物以及医学等各个领域，已成为生命科学及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。

本课程包括：DNA 的提取、电泳、PCR、质粒提取等实验。

通过这些实验的锻炼，使学生掌握分子生物学实验中最常用的技术，为以后进入科研实验奠定基础。

三、实验课程目的与要求学习本门课程的目的：通过本课程的学习使学生了解DNA、RNA和质粒等核酸分子的理化性质，掌握电泳、PCR等基本的分子生物学操作技能。

通过实验的手段加深对理论知识的理解，并把理论知识应用到实验实践中。

在实验过程中，培养学生形成科学的思维方法，逐渐提高学生分析解决问题的能力，培养其动手能力、独立科研能力和科学、严谨、实事求是的学风，为今后进行后继课程的学习和将来的科学研究工作打下基础。

学习本门课程的要求：理解分子生物学实验原理及实验方案，掌握基本实验方法和技能；掌握各种仪器的使用，了解其性能参数、适应范围及注意事项，通过实验，培养学生观察、比较、分析、综合等科学思维能力，以及独立工作的能力和实事求是的科学作风。

四、考核方式1、实验报告成绩：从实验态度、实验动手能力、实验观察能力、实验报告完成情况四个方面进行考查。

2、出勤占20%，实验报告占40%，实验操作占40%。

五、实验项目、学时分配情况六、实验内容实验一、分子生物学的实验安排及基本实验操作目的要求：1、了解分子生物学实验的安排及常用试剂的配制；2、掌握分子生物学实验基本实验操作。

《分子生物学实验》教学大纲课程编号：课程名称：分子生物学实验选修类型：全院必修课实验学时：36学时总学分：考核方式：课前预习、出勤率、实验报告开课时间：秋季（三年级第一学期）适合专业：生命科学学院各专业实验指导教材及参考书：实验教材：1、自编分子生物学实验教材2、刑婉丽，程京主编，生物芯片技术实验教程，清华大学出版社，2006主要参考书：1、J.萨姆布鲁克主编，分子克隆实验指南（第三版），科学出版社，20062、F.M.奥斯伯，R.布伦特，R.E.金斯顿，D.D.穆尔，J.G.赛德曼，J.A,史密斯，K.斯特拉尔主编，精编分子生物学实验指南（第五版），科学出版社，20083、卢圣栋主编，现代分子生物学实验技术（第二版），中国协和医科大学出版社，1999一、本课程的性质和任务分子生物学是人类从分子水平上揭开生物世界奥秘，以生物化学、细胞生物学、遗传学、微生物学为基础的一门实验学科。

其基木理论和实验技术已经渗透到生命科学的各个领域，并带动和推进了其他许多学科的发展。

分子生物学实验研究的内容主要包括DNA重组转化技术、基因表达调控研究、生物大分子的结构功能研究。

通过本实验课程的开设，可以让学生将基础理论知识与实验技能的实践相结合，培养学生掌握分子生物学实骑常用仪器设备的使用和操作；了解儿种分子生物学实验方法在科研中的应用；初步培养学生从分子水平分析和解决问题的综合能力，为以后的毕业论文和科学研究打下坚实的基础。

二、教学要求与教学方法1、课前预习实验，基本了解实验的基本原理、操作步骤、注意事项和预期结果。

课堂上认真听取老师讲解课件，实验中勇于提出问题，积极动手解决问题，认真、如实记录实验结果，主动查取相关文献完成实验报告。

2、听从老师的指导，爱护仪器设备，遵守实验室安全操作规则。

实验完毕后做好清洁卫生，按照要求安全处理有毒有害的废液和废弃物。

3、本实验课内容主要通过多媒体演示方法进行教学，实验过程要求学生独立动手完成，老师巡视、示范操作方法。

《分子生物学实验》教学大纲一、课程基本信息课程编码：091118B课程名称：分子生物学实验英文名称：experiment of molecular biology课程类别：专业必修课总学时：24总学分：1适用专业：生物科学二、实验课程的性质、目标与任务1. 分子生物学已成为生命科学的基础学科之一，其基本理论和实验技术已渗透到生物学的各个领域并促进了一批新学科的兴起和发展。

目前，以分子生物学为基础的基因克隆重组技术已成为现代生物技术的核心。

因此，在掌握基本分子生物学理论的基础上，为培养学生在分子生物学技术方面的实际动手能力，开设本实验课程。

2. 目标：通过实验原理的讲解和实验操作，使学生初步了解和熟悉现代分子生物学实验的基本原理、操作技能和实际应用，提高学生的创新思维和独立分析问题、解决问题的能力。

3. 通过本课程的实验教学和实验操作，要求学生熟练掌握下列分子生物学实验技术：大肠杆菌感受态细胞的制备和转化，质粒DNA的分离及纯化，琼脂糖凝胶电泳，PCR扩增，DNA重组、转化与检测实验等。

三、实验课程教学基本要求（1）注重分子生物学基础实验技能的掌握与提高，提升学生的动手操作能力；（2）实验课前要预习，明确每次实验的目的、原理与基本步骤；（3）实验过程中要具有严谨科学的态度，尊重事实与实验结果，要善于发现问题、分析问题、解决问题；（4）树立学生之间的交流与合作意识。

四、实验教学内容及要求实验一大肠杆菌感受态细胞的制备【实验类型】基础性实验【目的与要求】掌握大肠杆菌感受态细胞的制备技术。

注意严格无菌操作，在冰上进行。

正确选取对数生长期的大肠杆菌细胞。

【内容提要】感受态是细菌处在容易吸收外源DNA的状态。

选用经过基因改造的生物工程菌株——大肠杆菌DH5a菌株为材料，在0℃、CaCl2低渗溶液处理，细胞壁破坏，细胞成为球型原生质体。

因而具备了吸收外源DNA的能力。

实验操作步骤：1.挑取单菌落，接种培养过夜2.转接培养3.将菌液置冰浴处理4.收集菌体5.CaCl2处理，-70℃保存。

《分子生物学》实验(17课时)（本科）生物科学专业分子生物学实验2013年制订课程代码：学分：1总学时：17先修课程：《生物化学》，《有机化学》等。

开课对象：生物科学专业（本科）一、课程的性质、目的与任务分子生物学已成为生命科学的基础学科之一，其基本理论和实验技术已渗透到生物学的各个领域并促进了一批新学科的兴起和发展。

目前，以分子生物学为基础的基因克隆重组技术已成为现代生物技术的核心。

为了适应分子生物学技术的发展，落实培养创新人才的目标，特开展本实验课程，以培养学生的动手能力，加强学生对分子生物学实验技术的理解。

除了增进对分子生物学内容的理解，更重要的是培养学生的实验技能和创新思维设计。

通过实验原理的讲解和实验操作，使学生初步了解和熟悉现代分子生物学实验的基本原理、操作机能和实际应用，提高学生的创新思维和独立分析问题解决问题的能力。

二、实验内容与学时分配实验内容实验类型学时分配比例实验器材清洁灭菌与试剂配制操作 2PCR扩增目的DNA 验证 2 核酸的琼脂糖凝胶电泳与分析验证 2 pET28a质粒在大肠杆菌中的扩增与试剂盒抽提（碱抽提法）综合 4 感受态细胞的制备(CaCl2法）综合 3 pET28a质粒转化大肠杆菌TOP10与鉴定综合 4共17学时配制：100 ml称取1 g溴化乙啶，置于100 ml烧杯中，加入80 ml去离子水后搅拌溶解。

将溶液定容至100 ml后，转移到棕色瓶中。

室温保存。

6×上样缓冲液：0.25%溴酚蓝，0.25%二甲苯青FF，30%甘油。

配制：10 ml溴酚蓝 25 mg二甲苯青FF 25 mg甘油 3 ml用6×TAE缓冲液定溶至10 ml，分装成1 ml/管。

-20℃保存。

其它试剂：DNA样品、DNA Ladder 、琼脂糖3. 0.05mol/l CaCl2溶液：称取0.37g CaCl2·2H2O，溶于50ml重蒸水中，定容至100ml，高压灭菌。

分子生物学实验课程分子生物学实验课程是生物学专业中非常重要的一门实践课程。

通过这门课程的学习和实践，可以使学生熟悉和掌握分子生物学的基本理论和实验技术，培养学生的实验操作能力、科学研究思维和解决实际问题的能力。

在分子生物学实验课程中，学生将学习到许多基本的实验技术和方法，比如DNA提取、PCR扩增、基因克隆、蛋白质表达与纯化、基因组测序等。

这些实验方法是分子生物学研究的基础，掌握了这些方法，学生就可以进一步开展各种生物学研究。

在实验的过程中，学生需要仔细阅读实验操作步骤，并按照要求准备实验材料，如提取试剂、制备琼脂糖凝胶、配制PCR反应体系等。

在实验中，学生需要严格按照实验操作规程进行操作，注意实验室安全，保证实验的准确性和可重复性。

实验过程中，学生还需要进行实验数据的记录和分析。

这些数据包括实验操作的时间、实验结果的观察和记录等。

通过对实验数据的分析，可以得出实验结果，验证实验目的，进一步探讨实验结果的意义。

在分子生物学实验中，学生还会接触到许多常用的实验仪器和设备，如离心机、PCR仪、电泳仪、显微镜等。

学生需要了解这些仪器和设备的基本原理和操作方法，掌握它们的正确使用和日常维护。

除了基本的实验技术和仪器使用，分子生物学实验课程还注重培养学生的实验设计和创新能力。

学生需要在老师的指导下，根据实验目的和问题，设计实验方案，确定实验变量和控制组，合理安排实验步骤。

在实验过程中，学生还需要灵活调整实验方法和参数，解决实验中的问题和困难。

分子生物学实验课程的学习不仅仅是为了掌握实验技术和方法，更重要的是培养学生的科学研究思维和解决实际问题的能力。

在实验中，学生需要思考实验结果的原因和意义，探索实验结果背后的生物学机理。

通过实验课程的学习，学生可以深入了解生物学的基本原理和现代研究进展，为今后的科学研究和职业发展打下坚实的基础。

分子生物学实验课程是生物学专业中非常重要的一门实践课程。

通过这门课程的学习和实践，可以使学生掌握分子生物学的基本理论和实验技术，培养学生的实验操作能力、科学研究思维和解决实际问题的能力。

教师学科教案[ 20 – 20 学年度第__学期]任教学科：_____________任教年级：_____________任教老师：_____________xx市实验学校分子生物学实验室实验目录实验1 质粒DNA的提取、酶切与电泳实验2 大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA分子转化实验3 聚合酶链式反应扩增DNA片段实验4 植物基因组DNA提取及电泳实验5 植物RNA提取及电泳实验6 RT-PCR技术实验7 外源基因在原核细胞中的表达及分析实验8 DNA重组体的构建与筛选《分子生物学实验》教学大纲英文名称： Molecular Biology Experiments学分：1 学时：32教学对象：生物工程专业、生物科学专业、生物技术专业教学目的：在开设的理论课程的基础上，结合实验课程的教学，使学生能较全面系统的掌握分子生物学的基本操作，拓宽专业知识面，加深对专业知识的理解，强化动手能力。

基本要求：了解分子生物学的实验操作原理，掌握有关实验仪器的使用方法。

实验内容：实验1. 质粒DNA的提取、酶切与电泳（8 学时）基本要求:通过学习碱变性抽提法对大肠杆菌中的质粒的抽提，掌握质粒DNA 的小量制备方法，了解碱裂解法制备质粒DNA 的原理。

进一步了解限制性内切酶的特性及酶切反应过程，掌握DNA 的酶切技术。

重点:掌握质粒DNA 的小量制备方法，了解碱裂解法制备质粒DNA 的原理。

进一步了解限制性内切酶的特性，掌握DNA 的酶切技术。

难点:掌握质粒DNA 的小量制备方法及DNA 的酶切技术。

实验2. 大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA分子转化（4 学时）基本要求:了解细菌基因组DNA 的提取的目的，原理，掌握细菌基因组DNA 的提取的实验步骤及操作方法重点:掌握细菌基因组DNA 的提取的实验步骤及操作方法难点:掌握细菌基因组DNA 的提取的实验步骤及操作方法实验3. 聚合酶链式反应扩增DNA片段（4 学时）基本要求:了解大肠杆菌感受态细胞的制备原理及转化反应的目的，应用范围及操作过程，掌握重组DNA 质粒转化大肠杆菌的操作技术。

《分子生物学大实验》实践教学大纲一、课程基本信息1. 课程编号：1117045072. 课程类别：集中实践课程3. 课程性质：必修课4. 学时/学分：2周/2学分5. 先修课程：分子生物学基因工程发酵工程细胞工程6. 适用专业：生物制药本科二、课程目标及学生应达到的能力本课程是生物工程专业的一门必修实践课程。

目前，以分子生物学为基础的基因克隆重组技术已成为现代生物技术的核心。

因此，本实践课程通过从基因分离、目的基因克隆及鉴定等一系列的实验，帮助学生巩固和掌握有关分子生物学和基因工程的相关理论与实验方法，提高学生操作技能、及独立分析问题、解决问题的能力，为学生从事分子生物学技术方面的相关研究奠定实践基础。

具体课程目标及能力要求如下：课程目标1:学生掌握下列主要的分子生物学实验技术：质粒DNA的分离及纯化，PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳，DNA重组、大肠杆菌感受态细胞的制备和转化，转化与检测实验等。

课程目标2:使学生熟悉现代分子生物学实验的基本原理、操作技能，能够理论联系实际学会应用，提高学生独立分析问题、解决问题的能力。

本课程采用实验教学方法，2-3人一组操作，结合小组讨论与集体讨论、分子生物学相关实验小技巧介绍等多种教学手段，要求学生认真预习，熟悉实验的内容，了解所用的仪器用具；实验中严格按操作规程进行，仔细观察，及时记录实验现象及结果，认真做好每一天的实验报告：实验结束后仔细分析和总结实验结果，帮助学生通过本实践课程的学习全面地掌握分子生物学的基本实验方法与技能以及实验设计的思路，提高学生从事科学研究的综合素质。

五、课程的考核环节1、评定方法本课程要求学生对每次实验进行认真学习操作，详细观察和记录，实验结束后形成完整实验资料和结果分析，在此基础上撰写完整的实验报告，作为实验考核的主要依据；同时，每次实验由指导老师对操作环节进行等级评定。

实验成绩按照考勤占10%,实验操作占40%,实验报告成绩占50%o 实验成绩分：优、良、中、及格、不及格五级评定。