药品生产微生物污染控制与环境监测技术ppt课件

(1) 配制培养基
1．多管发酵法
(2) 初步发酵试验 (3) 平板分离 (4) 复发酵试验
(5) 大肠菌群计数
微生物与环境监测
第一节 水中的微生物监测
三、水的细菌学检验
（三）大肠菌群的测定 2．滤膜法 (1) 将滤膜装在滤器上，用抽滤法过滤定量水样。 (2) 将此滤膜没有细菌的一面贴在品红亚硫酸钠培养基或伊红
微生物与环境监测
第四节 生物传感器
一、生物传感器的原理
微生物与环境监测
第四节 生物传感器
二、 生物传感器的类型
➢ 酶传感器 ➢ 微生物传感器 ➢ 免疫传感器 ➢ DNA传感器
微生物与环境监测
第四节 生物传感器
三、生物传感器在环境检测中的应用
1.水和废水监测 BOD传感器 硝酸盐微生物传感器 酚类微生物传感器 阴离子表面活性剂传感器 水体富营养化监测传感器
二、空气中微生物的种类和分布
空气中的微生物大部分是腐生的种类，但是不同的空气环 境中微生物的种类不同。
有些种类是普遍存在的，如某些霉菌、酵母菌、真菌孢子。细菌主要是来自于 土壤的腐生性种类，常见的为各种球菌、芽孢杆菌、产色素细菌等。
空气中微生物的分布随环境条件及微生物的抵抗力不同而 呈现不同的分布规律。空气中微生物的数目决定于尘埃的总量。 空气中尘埃含量越高，微生物的种类数量越多。
杆菌等病原菌的生理特性较为相似，而且在粪便中数量最多， 检出上技术也较为方便，最合适充当水污染的卫生指标。
微生物与环境监测
第一节 水中的微生物监测
二、大肠菌群及生活饮用水的细菌标准
（二）大肠菌群的生化特征比较 总大肠菌群是对一群需氧及兼性厌氧在37℃培养24h，能分
解乳糖产酸、产气的革兰阴性无芽孢杆菌的统称。 大肠菌群一般包括四种，即大肠埃希杆菌、产气肠杆菌、枸

检
喷雾剂供
查
试品
1.4.2供试品检查
非
无 菌
① 平皿法
平皿法包括倾注法和涂布法
产
品 微 生 物 限 度 检 查
除另有规定外， 取规定量供试 品，按方法适 用性试验确认 的方法进行供 试液制备和菌 数测定，每稀
培养和计数 ：除另有规定外， 胰酪大豆胨琼脂培养基平板 在30～35℃培养3天，沙氏葡 萄糖琼脂培养基平板在20～ 25℃培养5 天，观察菌落生 长情况，点计平板上生长的 所有菌落数，必要时可适当 延长培养时间至7 天进行菌落
微
生
1.3.3计数方法适用性试验
物
限
度
检
查
非 无
1.3 计数培养基适用性检查和供试品计 数方法适用性试验
菌 1.3.1菌液制备及使用
产 品
菌种
微
试验用菌株的传代次数不得超过5
生
代（从菌种保藏中心获得的干燥菌
物
限
种为第0代），并采用适宜的菌种
度
保藏技术进行保存，以保证试验菌
检 查
株的生物学特性
检
查
非
② 薄膜过滤法
无
除另有规定外，按计数方法适用性试
菌
验确认的方法进行供试液制备。取相
产
当于1g、1ml 或10 cm²供试品的供试 液，若供试品所含的菌数较多时，可
品
取适宜稀释级的供试液，照方法适用
微
性试验确认的方法加至适量稀释液中， 立即过滤，冲洗，冲洗后取出滤膜， 培养和计数：培养条件
生
菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基 和计数方法同平皿计数
值报告菌数
非
③ MPN 法
无

析
• 需要进行趋势分析的数据包括：
– 空气样 (沉降菌 / 浮游菌 / 悬浮粒子) – 表面样 – 人员样 – 产品直接接触的压缩空气 – 水系统 (生物载荷 / TOC / 电导率 / 内毒素) – 压差 / 温度 / 湿度 – 微生物鉴定
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趋势分析
• 趋势分析至少需要4个数据点 • 为了确认区域/设备是运行于控制范围内，应在规定的时
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环境监测项目
• 洁净区域所需要进行的环境监测项目主要包括: – 悬浮粒子测试 – 沉降菌(定性监测) – 浮游菌(定量监测) – 表面微生物 – 温度和湿度 (房间) – 房间或者区域间的压差 – 风速(层流台、生物安全柜)
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悬浮粒子监测
• 监测标准 • GB/T 16292 / ISO 14644-1
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悬浮粒子取样位置的选择
• 洁净区（室）空气悬浮粒子、浮游菌及沉降菌的最 少取样点数
• GB/T 16292 - 16294 • ISO 14644-1 • 空态或静态测试：悬浮粒子采样点数目及其布置应力求 均匀，并不得少于最少采样点数目
• 动态测试：悬浮粒子采样点数目及其布置应根据产品的 生产及工艺关键操作区设置
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环境污染的控制
• 洁净状态的维持通常依靠以下几类屏障 – 高标准卫生(消毒清洁、个人卫生、洁净区行为规范) – 洁净室消毒清洗程序 – 气闸和更衣程序 – 防护性着装(头罩、护目镜、操作服、脚套、手套) – HVAC系统
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环境污染的控制
• 要达到洁净区域有效环境控制，要求： – 合理的洁净区域设计和设备选择 – 合理的操作流程和清洁/消毒/维护/监控流程 – 人员对SOP的严格执行
间间隔下进行趋势分析。基于质量风险控制的原则，设 置趋势分析的频率、需要进行评估的数据的范围

•所使用的设备系统必须经过验证，培养基 必须用恰当的方法制备，所有规程必须以 书面方式确定并遵照执行。
•取样点的选择和监测频率。 •警戒和纠偏标准 •建立书面文件体系以确定偏差 •对超警戒和/或纠偏数据所做的任何措施都
应该有一个反馈机制来进行跟踪。所有数 据应当进行记录和趋势分析。
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洁净环境生产区域表面消毒技术
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清洗过程设计
·清洗剂和清洗机制 ·清洗参数 ·清洗方法 ·可去除的污物 ·需要清洗的设备 ·残留限值
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清洗-案例分析
手工清洗 将清洗剂按照体积比配制成相应浓度的
溶液，现将清洗剂和水按照相应的体积分 别量好，然后将清洗剂缓慢的倒入量好体 积的水中，并轻轻搅拌直到均匀。配制好 的溶液可以进行零部件和小器具的清洗， 可以采用尼龙刷或洁净抹布进行清洗擦拭。 如果油污或残留较重，可以采用提高相应 的清洗剂浓度来达到清洗效果。
暴露一段时间之后的 湿设备更换零部件或 者容器/密封装置
限制无菌核心干扰 浮游粒子通过HEPA过滤 液体无菌过滤（0.2µm） 组分蒸汽灭菌或辐射灭菌
热氢氧化钠溶液 高温（＞200℃）根据时间 决定
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污染的来源与控制—人员
A/B级洁净区：应当用头罩将所有头发以及 胡须等相关部位全部遮盖，头罩应当塞进 衣领内，应当戴口罩以防散发飞沫，必要 时戴防护目镜。应当戴经灭菌且无颗粒物 （如滑石粉）散发的橡胶或塑料手套，穿 经灭菌或消毒的脚套，裤腿应当塞进脚套 内，袖口应当塞进手套内。工作服应为灭 菌的连体工作服，不脱落纤维或微粒，并 能滞留身体散发的微粒。 应当按照操作规程更衣和洗手，尽可能减少 对洁净区的污染或将污染物带入洁净区。 风箱效应