葡萄酒中总糖和还原糖的测定精选
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葡萄酒中还原糖和总糖的检测葡萄酒中的主要糖类是葡萄糖和果糖,成熟的葡萄果糖的含量较高,葡萄中只有极少的蔗糖。
生产过程中添加的蔗糖在酸和酵母转化酶的作用下水解成葡萄糖和果糖后被酵母利用,称之为可发酵性糖,不能被酵母利用的称之为非发酵性糖或残糖。
根据还原斐林试剂的能力,又可分为还原糖和非还原糖。
在葡萄酒中残糖主要由戊糖(如阿拉伯糖、鼠李糖、木糖及少量的未发酵的葡萄糖和果糖,约0.1~0.2g/L)组成。
1.高效液相色谱法(1)原理利用氨柱,将样品中的果糖、葡萄糖、蔗糖与其他组分分离。
示差折光检测器进行鉴定,外标法定量。
(2)试剂与仪器①超纯水:经纯水机制出的电阻率达到18ΜΩ或经0.45μm微滤膜过滤的新鲜的重蒸水。
②乙腈—水(75+25):将乙腈和水按75+25的比例混合(或根据仪器情况调整该比例至分离效果最佳),用脱气装置充分脱气后,再用0.45μm的油系过滤膜过滤。
该溶液用做流动相。
③糖标准溶液(含总糖45.000g/L):分别称取干燥的葡萄糖、果糖、蔗糖各1.500g(准确至0.001g),移入100mL容量瓶中,用超纯水定容至刻度。
该溶液含葡萄糖、果糖、蔗糖分别为15.000g/LNH④高效液相色谱仪,示差折光检侧器:色谱柱为150mm× 5.0mm,Shim-paek CLC-2柱。
⑤微过滤膜:0.45μm,油系。
⑥脱气装置(或超声波装置)。
(3)测定步骤①试样的制备:将样品用超纯水稀释至总糖量为45g/L左右,并用0.45μm油系微过滤膜过滤。
②色谱条件如下。
柱温:室温;流动相:乙腈十水(75+25);流速:2mL/min;进样量:20μL③测定:在同样的色谱条件下,将糖标准溶液和处理好的试样分别注入色谱仪。
测定各糖分峰面积,井计算其含量。
n C A A X si sii i ⨯⨯= P G X +=12X =1X Z 05.1+式中1X ——样品中还原糖含量(以葡萄糖计),L g /; 2X ——样品中总糖含量(以葡萄糖计),L g /; G ——样品中的果糖含量,L g /;P ——样品中的葡萄糖含量,L g /;Z ——样品中的蔗糖的含量,L g /;05.1——由蔗糖换算为葡萄糖的系数;i X ——样品中。
葡萄酒(汁)的总糖、还原糖测定1. 必要性监控糖含量对于葡萄酒生产来说至关重要!可以区分酒类型,反映酒风味,利于控制生产,决定工艺参数。
① 葡萄浆果:监测成熟度变化,确定最佳采收期;② 葡萄醪:了解葡萄酒可能的酒度,决定是否人为提高酒度及加糖量; ③ 葡萄酒:了解酒精发酵是否完全,区分酒的类型2. 基础葡萄汁和葡萄酒中的糖,按氧化还原性质分为还原性糖和非还原性糖,二者加和为总糖。
还原糖:能与碱性铜液,汞液发生还原作用的糖;如葡萄糖、果糖等发酵性糖,阿拉伯糖、木糖等非发酵性糖;非还原糖:如蔗糖、海藻糖;残糖(RS ):干型葡萄酒中的非发酵性糖和微量发酵性糖。
3. 测定方法① 比重计法:一般葡萄酒糖度(g/L )=(比重计读数一1000)×2+16先除酒精再恢复到取样体积的葡萄酒糖度(g/L )=(比重计读数一1000)×2-14② 糖量计法③ 光谱法:紫外可见(酶法)④ 色谱法:HPLC⑤ 费林试剂热滴定法:利用某些糖的还原性能,将某些重金属在碱性条 件下迅速还原,然后从被反应的重金属数量来求知糖分的数量。
4. 费林试剂热滴定法(1) 原理:天蓝色氢氧化铜、深蓝色酒石酸钾钠铜,Cu 2+将葡萄糖氧化为葡萄糖酸,Cu 2+被还原为Cu 2O 红色沉淀;酸解以测定总糖。
(2) 次甲基蓝:氧化态时蓝色,还原态时无色;(3) 样品制备① 总糖:将非还原糖酸解为还原糖;稀释酒样——5mL HCl——68℃15min——补水——200 g/L NaOH 中和;② 还原糖:稀释至浓度2~4 g/L.(4) 菲林试剂A 、B 液标定① 预备实验:初步确定费林氏A 、B 液各5mL 能与葡萄糖标液反应的体积; 5 mL A 液 + 5 mL B 液—— 50 mL 水——滴加葡标液致出现红色——次甲基蓝2滴——滴加葡标液致蓝色消失为无色,记录消耗葡标液体积V 0;② 正式试验:精确测定费林氏A 、B 液各5mL 能与葡萄糖标液反应的体积;5 mL A 液 + 5 mL B 液 + (V 0-1)葡标液—— 50 mL 水——沸腾2 min——出现红色加次甲基蓝2滴——1min 内,滴加葡标液致蓝色消失为无色,记录消耗葡标液体积V 1;重复得到V 2、V 3。
市售葡萄酒中还原糖测定的实验方案《市售葡萄酒中还原糖测定的实验方案》一、实验目的测定市售葡萄酒中的还原糖含量,以便评估其品质和甜度,为消费者提供参考。
二、实验原理还原糖与费林试剂在加热条件下反应,生成砖红色沉淀。
通过测定沉淀的吸光度,可以计算出样品中的还原糖含量。
三、实验材料1. 费林试剂:甲液(质量浓度为0.1g/mL的氢氧化钠溶液),乙液(质量浓度为0.05g/mL的硫酸铜溶液)。
2. 葡萄酒样品:市售多种葡萄酒。
3. 蒸馏水:用于稀释样品和清洗仪器。
4. 75%乙醇:用于清洗仪器。
5. 电子天平:精确到0.01g。
6. 玻璃棒、烧杯、试管、容量瓶等实验室常用玻璃仪器。
四、实验步骤1. 准备费林试剂:将甲液和乙液等量混合均匀,现配现用。
2. 样品处理:取适量葡萄酒样品,用蒸馏水稀释至10mL。
3. 测定吸光度:取稀释后的样品1mL,加入2mL费林试剂,振荡均匀后放入水浴锅中加热至沸腾,维持2分钟。
冷却后,使用分光光度计测定样品在520nm波长下的吸光度。
4. 计算还原糖含量:根据标准曲线,计算出样品中的还原糖含量。
五、实验注意事项1. 实验过程中需严格控制温度和时间,确保测定结果准确。
2. 费林试剂需现配现用,避免长时间放置影响测定结果。
3. 加热过程中需不断振荡试管,使反应充分进行。
4. 测定吸光度时,确保仪器清洁,避免误差。
六、实验结果与分析1. 通过对市售葡萄酒样品的测定,得到不同葡萄酒的还原糖含量数据。
2. 分析还原糖含量与葡萄酒品质、甜度的关系,为消费者提供参考。
七、实验报告1. 记录实验过程中所用的样品、试剂、仪器等详细信息。
2. 描绘实验结果数据,并进行简要分析。
3. 提出实验中可能存在的问题及改进措施。
4. 撰写实验总结,概括实验成果及意义。
葡萄酒酿制过程中还原糖、总酸及酒精度的测定方法一、还原糖的测定在葡萄酒发酵前,测定葡萄的还原糖含量,以确定要添加的糖含量;发酵之后测定酒中的残糖含量。
1、测定方法:裴林试剂热滴定法(1)裴林氏A 、B 液标定预备试验:取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中,加50mL 水,摇匀,在电炉上加热沸,在沸腾状态下用制备好的葡萄糖标准溶液滴定,当溶液的蓝色将消失呈红色时,加2滴甲基蓝指示液,继续滴至蓝色消失,记录消耗的葡萄糖标准溶液的体积(V1ml)。
正式试验:取裴林氏A 、B 液各5.00mL 于250mL 三角瓶中,加50mL 水和比预备试验少1ml 葡萄糖标准溶液,加热至沸,并保持2min ,加2滴次甲基蓝指示液,在沸腾态下于1min 内用葡萄糖标准溶液滴至终点(消耗葡萄糖标准液,记录消耗的葡萄糖标准溶液的总体积。
(2)样品的测定预备试验:裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样 在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失,记录体积。
正式试验:裴林试剂A 、B 液各5ml 250ml 三角瓶中 加水50ml 加入7.5ml 试样+比预备试验少1ml 的葡标液,在沸腾状态下用5g/l 的葡萄糖标液滴定至 蓝色消失成红色时 加2滴亚甲基兰指示剂 继续滴定至蓝色消失,记录体积。
结果计算:总糖或还原糖含量g/l =稀释倍数)(取样体积测定试样消耗的葡标液标定消耗的葡标液葡标液⨯-⨯V V V C 2、试剂的配制及仪器需求(1)斐林试剂配制方法将36.4g CuSO4.5H2O 溶于200mL 水中,用0.5mL 浓硫酸酸化,再用水稀释到500mL 待用;取173g 酒石酸钾钠KNaC4H4O6.4H2O ,71g NaOH 固体溶于400mL 水中,再稀释到500mL .使用时取等体积两溶液混合。