默克密理博生物制药工艺基础课堂九：Comparability Study to

生物制药工艺学第四章萃取分离法答案一、填空题1、常用的萃取方法有：单级萃取、多级错流萃取、多级逆流萃取;2、影响溶剂萃取的因素：乳化和破乳化、PH的影响、温度和萃取时间的影响、盐析作用的影响、溶剂种类、用量及萃取方式的影响;3、破乳方法有：加入表面活性剂、离心、加电解质、加热、吸附法破乳、高压电破乳、稀释法、超滤、反应萃取;4、常用的破乳剂有：阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂;二、名词解释1、液-液萃取：是指用一种溶剂将物质从另一种溶剂如发酵液中提取出来的方法,根据所用溶剂的性质不同或萃取机制不同,可将液-液萃取分为多种类型;2、萃取：在溶剂萃取中,被提取的溶液称为料液,其中与提取的物质称溶质,而用以进行萃取的溶剂称为萃取剂;料液与萃取剂接触后,料液中的溶质向萃取剂转移的过程称为萃取,达到萃取平衡后,大部分溶质转移到萃取剂中,这种含有溶质的萃取剂溶液称为萃取液,而被萃取出溶质以后的料液称为萃余液;3、反萃取stripping：是将萃取液与反萃取剂含无机酸或碱的水溶液,有时也可以是水相接触,使某种被萃入有机相的溶质转入水相,可把这种过程看作萃取的逆过程;4、分配定律：即在一定温度,一定压力下,某一溶质在互不能相溶的两种溶剂间分配时,达到平衡后,在两相中的活度之比为一常数;5、萃取因素：也称萃取比,其定义为被萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比,通常以E表示;6、萃取率percentage extraction：生产上常用萃取率来表示一种萃取剂对某种溶质的萃取能力,计算萃取效果,其公式为：7、分离因素：在同一萃取体系内两种溶质在同样条件下分配系数的比值;三、问答1、简述溶剂萃取法的优点;答：①操作可连续化,反应速度快,生产周期短；②对热敏物质破坏少；③采用多级萃取时,溶质浓缩倍数大、纯化度高;2、简述选择萃取溶剂应遵守的原则;答：①分配系数愈大愈好,若分配系数未知,则可根据“相似相容”的原则,选择与药物结构相近的溶剂；②选择分离因数大于1的溶剂；③料液与萃取溶剂的互溶度愈小愈好；④尽量选择毒性低的溶剂；⑤溶剂的化学稳定性要高,腐蚀性低,沸点不宜太高,挥发性要小,价格便宜,来源方便,便于回收;第五章沉淀法答案一.填空1.固相析出法主要包括盐析法,有机溶剂沉淀法,等电点沉淀法,结晶法及其它多种沉淀方法等;2.按照一般的习惯,析出物为晶体时称为结晶法,析出物为无定形固体则称为沉淀法;3.影响盐析的因素有：无机盐的种类、溶质蛋白质等种类的影响、蛋白质浓度的影响、温度的影响、pH的影响4. 结晶包括三个过程：1 形成过饱和溶液；2 晶核形成；3 晶体生长;5. 影晶体大小的主要因素,归纳起来与过饱和度、温度、搅拌速度、晶种等直接有关;6. 晶体的质量主要是指晶体的大小、形状和纯度等3个方面二．选择1、在一定的pH和温度下改变离子强度盐浓度进行盐析,称作 AA．K S盐析法 B．β盐析法 C．重复盐析法 D．分部盐析法2、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度 CA．增大 B. 减小 C. 先增大,后减小 D. 先减小,后增大3、盐析法与有机溶剂沉淀法比较,其优点是 BA.分辨率高B.变性作用小C.杂质易除D.沉淀易分离4、当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时,蛋白质溶解度 CA．增大 B. 减小 C. 先增大,后减小 D. 先减小,后增大5、盐析常数Ks是生物大分子的特征常数,它与下列哪种因素关系密切; BA．盐浓度 B. 盐种类 C. 溶质浓度 D介质pH6、将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来,此方法称为 AA．亲和沉淀 B．聚合物沉淀 C．金属离子沉淀 D．盐析沉淀7、将四环素粗品溶于pH2的水中,用氨水调pH4.5—4.6,28－30℃保温,即有四环素沉淀结晶析出 ;此沉淀方法称为 BA．有机溶剂结晶法 B．等电点法 C．透析结晶法 D．盐析结晶法8、影响体大小的主要因素与下列哪些因素无关 DA．过饱和度 B．温度 C．搅拌速度 D．饱和度9、下列沉淀试剂不属于表面活性剂的是 DA．CTAB B．CPC C．SDS D．PEG三名词解释：1. 盐析法：是利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异,通过向溶液中引入一定数量的中性盐,使目的物或杂蛋白以沉淀析出,达到纯化目的的方法;2. Ks盐析：在一定的pH和温度下改变离子强度盐浓度进行盐析,称作Ks盐析法;Ks盐析法多用于提取液的前期分离工作;3．β盐析：在一定离子强度下仅改变pH和温度进行盐析,称作β盐析法;在分离的后期阶段,为了求得较好的分辨率,或者为了达到结晶的目的,有时应用β盐析法;β盐析法由于溶质溶解度变化缓慢且变化幅度小,沉淀分辨率比K S盐析法好;4．亲和沉淀: 利用亲和反应原理,将配基与可溶性的载体偶联后形成载体-配基复合物亲和沉淀剂,该复合物可选择性地与蛋白质结合,在一定条件下沉淀出来;四问答1.什么是盐析作用盐析的原理是什么答：盐析作用：向蛋白质溶液中逐渐加入中性盐,在高盐浓度时,蛋白质溶解度随之减小,发生了盐析作用;产生盐析作用的一个原因是由于盐离子与蛋白质表面具相反电性的离子基团结合,形成离子对,因此盐离子部分中和了蛋白质的电性,使蛋白质分子之间电排斥作用减弱而能相互靠拢,聚集起来;盐析作用的另一个原因是由于中性盐的亲水性比蛋白质大,盐离子在水中发生水化而使蛋白质脱去了水化膜,暴露出疏水区域,由于疏水区域的相互作用,使其沉淀;2.如何选择盐析所用中性盐1盐析作用要强;一般来说多价阴离子的盐析作用强,有时多价阳离子反而使盐析作用降低;2盐析用盐要有足够大的溶解度,且溶解度受温度影响应尽可能小;这样便于获得高浓度盐溶液,有利于操作,尤其是在较低温度下的操作,不致造成盐结晶析出,影响盐析效果;3盐析用盐在生物学上是惰性的,不致影响蛋白质等生物分子的活性,最好不引入给分离或测定带来麻烦的杂质;4来源丰富、经济;3.有机溶剂沉淀的原理是什么答：亲水性有机溶剂加入溶液后降低了介质的介电常数,使溶质分子之间的静电引力增加,聚集形成沉淀；水溶性有机溶剂本身的水合作用降低了自由水的浓度,压缩了亲水溶质分子表面原有水化层的厚度,降低了它的亲水性,导致脱水凝集;4.有机溶剂沉淀影响沉淀效果的因素有那些答： 1有机溶剂种类及用量2pH的影响3温度无机盐的含量4某些金属离子的助沉淀作用5样品浓度第六章吸附分离法答案一、填空1、吸附剂按其化学结构可分为两大类：一类是有机吸附剂,如活性炭、淀粉、大孔吸附树脂等；另一类是无机吸附剂,如白陶土、氧化铝、硅胶、硅藻土等;2、常用的吸附剂有活性炭、硅胶和白陶土等;3、大孔网状聚合物吸附剂是在树脂聚合时加入惰性致孔剂,待网格骨架固化和链结构单元形成后,用溶剂萃取或蒸馏水洗将致孔剂去掉,形成不受外界环境条件影响的孔隙 ,其孔径远大于2～4nm,可达 100nm ,故称“大孔”;4、大孔网状聚合物吸附剂按骨架的极性强弱,可分为非极性、中等极性、极性和强极性吸附剂四类;二、选择题1、用大网格高聚物吸附剂吸附的弱酸性物质,一般用下列哪种溶液洗脱 DA.水B.高盐C.低pHD. 高pH2、“类似物容易吸附类似物”的原则,一般极性吸附剂适宜于从何种溶剂中吸附极性物质BA.极性溶剂B.非极性溶剂C.水D.溶剂3、“类似物容易吸附类似物”的原则, 一般非极性吸附剂适宜于从下列何种溶剂中吸附非极性物质; AA.极性溶剂B.非极性溶剂C.三氯甲烷D.溶剂4、下列属于无机吸附剂的是： AA.白陶土B.活性炭C.淀粉D.纤维素5、活性炭在下列哪种溶剂中吸附能力最强 AA.水B.甲醇C.乙醇D.三氯甲烷6、关于大孔树脂洗脱条件的说法,错误的是： AA .最常用的是以高级醇、酮或其水溶液解吸;B. 对弱酸性物质可用碱来解吸;C. 对弱碱性物质可用酸来解吸;D.如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时,则常常仅用水洗就能解吸下来;三、名词解释1、2、吸附法adsorption method：指利用吸附作用,将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上,利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异,使目的物和其它物质分离,达到浓缩和提纯目的的方法;3、4、大网格高聚物吸附剂macroreticular adsorbent：在合成树脂时,加入一种惰性组分,它不参与聚合反应,但能和单体互溶,称为致孔剂;待网络骨架固化和链结构单元形成后,用溶剂萃取或水洗蒸馏的方法将致孔剂去掉,就留下了不受外界条件影响的永久孔隙,其孔径远大于2~4nm,可达到100nm甚至1000nm以上,故称“大孔”;与大孔网状离子交换树脂相比,它不含离子交换树脂的功能团,仅保留了多孔的骨架,其性质与活性炭、硅胶等吸附剂相似,称为大孔网状聚合物吸附剂;四、问答题1、简述吸附法的定义和特点;吸附法adsorption method指利用吸附作用,将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上,利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异,使目的物和其它物质分离,达到浓缩和提纯目的的方法;吸附法具有下列特点：1设备简单、操作简便、价廉、安全;2少用或不用有机溶剂,吸附与洗脱过程中pH变化小,较少引起生物活性物质的变性失活;3天然吸附剂特别是无机吸附剂的吸附性能和吸附条件较难控制,吸附选择性差,收率不高,难以连续操作;2、影响吸附的因素有哪些①②吸附剂的特性：吸附现象在界面发生,因此吸附剂比表面积愈大,吸附量愈多;通过活化的方法也可增加吸附剂的吸附容量;另外还要求吸附剂的机械强度好,吸附速度快③④吸附物的性质：能使表面张力降低的物质,易为表面所吸附；一般极性吸附剂易吸附极性物质,非极性吸附剂易吸附非极性物质；溶质从较易溶解的溶剂中被吸附时,吸附量较少；对于同系列物质,吸附量的变化是有规则的；吸附物若能与溶剂形成氢键,则吸附物极易溶于溶剂之中;⑤⑥吸附条件：温度：吸附热越大,温度对吸附的影响越大;PH值：溶液的pH值溶液pH值可控制吸附剂或吸附物解离情况,进而影响吸附量,对蛋白质或酶类等两性物质,一般在等电点附近吸附量最大;盐浓度：溶剂的影响：单溶剂与混合溶剂对吸附作用有不同的影响;⑦⑧吸附物浓度与吸附剂用量一般情况下吸附物浓度大时,吸附量也大;第七章凝胶层析一、填空题1、凝胶层析的分离原理有凝胶层析的分离原理有平衡排除理论、扩散分离理论、流动分离理论;这三种分离原理是互相补充的,在通常情况下平衡排除理论起主导作用；扩散分离理论的作用随流速增加而加强；只有在流速很高时流动分离理论才起作用;2、琼脂糖凝胶的一个特征是分离的分子量范围非常大,其分离范围随着凝胶浓度上升而下降,颗粒强度随浓度上升而提高;3、凝胶粒度的大小对分离效果有直接的影响;一般来说,细粒凝胶柱流速低,洗脱峰窄,分辨率高 ,多用于精制分离等;粗粒凝胶柱流速高,洗脱峰平坦,分辨率低 ,多用于多用于脱盐等;4、在作分级分离时,为了提高分辨率,多采用比样品体积大 25 倍以上的柱体积, 25 以上的柱比,较大吸液量、较细粒的凝胶固定相;5、溶质通过色谱柱时造成的峰加宽效应包括分子扩散、涡流扩散、流动相中传质阻力、固定相中传质阻力;6、葡聚糖凝胶的孔径大小取决于交联度,其越小,凝胶孔径越大；而琼脂糖凝胶的孔径却依赖于琼脂糖浓度;二、选择题1、凝胶层析中,有时溶质的Kd>1,其原因是 BA.凝胶排斥B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低2、凝胶层析中,有时小分子溶质的Kd<1,其原因是 AA.水合作用B.凝胶吸附C.柱床过长D.流速过低3、在凝胶层析中样品各组分最先淋出的是 BA.分子量最大的B.体积最大的C.分子量最小的D.体积最小的4、为了进一步检查凝胶柱的质量,通常用一种大分子的有色物质溶液过柱,常见的检查物质为蓝色葡聚糖,下面不属于它的作用的是 CA.观察柱床有无沟流B.观察色带是否平整C.测量流速D.测量层析柱的外水体积5、在选用凝胶层析柱时,为了提高分辨率,宜选用的层析柱是 AA.粗且长的B.粗且短的C.细且长的D.细且短的三、名词解释1、全排阻：当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较大的分子完全不能进入颗粒内部,只能从颗粒间隙流过,称“全排阻”;其流经体积最小,等于外水体积V0;2、类分离：将分子量极为悬殊的两类物质分开,如蛋白质与盐类,称作类分离或组分离.选择凝胶时,应使样品中大分子组的分子量大于其排阻限,而小分子组的分子量小于渗入限;大分子的分配系数Kd=0,小分子的Kd=1;3、分级分离：将分子量相差不大的大分子物质加以分离,如分离血清球蛋白与白蛋白,分级分离应尽量使待分离各物质的Kd值相差大些,并使分子量分布不在凝胶分离范围的一侧;4、柱比：层析柱的长度与直径的比值一般称作“柱比”;5、操作压：凝胶层析柱由于进出口之间液位压力差形成的对凝胶颗粒的压力称作“操作压”;6、全渗入：被分离组分的分子量小于该种凝胶的渗入限,其分子可以自由进出凝胶颗粒,这叫做“全渗入”; 其流经体积最大,等于外水体积与内水体积之和,V0 ＋ Vi;7、分离度Rs：式中 Ve1、Ve2——对应于两个峰的淋出体积；W1、W2和σ1、σ2——两个峰宽度和标准偏差;四、问答题1、试述公式Ve=V0+KdVi 各字母的物理意义;答：公式Ve=V0+KdVi中Ve代表被分离组分的流经体积,V0代表外水体积,Vi代表内水体积;Kd称作“排阻系数”或“分配系数”, 它反映了物质分子进入凝胶颗粒的程度;对一定种类规格的凝胶,物质的Kd值为该物质的特征常数;排阻系数：当Kd=1时,洗脱体积Ve=V0+Vi,为全渗入;当Kd=0时,洗脱体积Ve=V0,为全排阻;0＜Kd＜1时,洗脱体积Ve=Vo+KdVi,为部分渗入;2、利用凝胶层析如何测定蛋白质的分子量答：当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长,于是样品各组分即按分子大小顺序而分开,最先淋出的是最大的分子2分;对于一个特定体系凝胶柱,待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式Ve=-KlogM +C先以3个以上最好更多些的已知分子量的标准蛋白过柱,测取各自的Ve值;以Ve作纵坐标,logM作横坐标制作标准曲线2分;在同一测定系统中测取未知物质的Ve值便可由标准曲线求得分子量2分;3、凝胶层析的应用主要有哪些并说明其原理;当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长,于是样品各组分即按分子大小顺序而分开,最先淋出的是最大的分子2分;应用：一、脱盐：脱盐用的凝胶多为大粒度的,高交联度的凝胶;此时溶液中蛋白质等大分子的Kd=0,盐类的Kd=1;由于交联度大,凝胶颗粒的强度较好,加之凝胶粒度大,柱层操作比较便利,流速也高;二、分子量测定：对于一个特定体系凝胶柱,待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式Ve=-KlogM+C先以3个以上最好更多些的已知分子量的标准蛋白过柱,测取各自的Ve值;以Ve作纵坐标,logM作横坐标制作标准曲线;在同一测定系统中测取未知物质的Ve值便可由标准曲线求得分子量;三、分离纯化：根据分子量不同流出先后顺序不同,收集单一洗脱峰的物质,得以纯化;第八章离子交换法一、填空题1、离子交换剂由惰性的不溶性载体、功能基团和平衡离子组成; 平衡离子带正电荷为阳离子交换树脂,平衡离子带负电荷称阴离子交换树脂;2、常见的离子交换剂有离子交换树脂,离子交换纤维素,葡聚糖凝胶离子交换剂等;3、离子交换树脂的基本要求有有尽可能大的交换容量、有良好的交换选择性、化学性质稳定、化学动力学性能好和物理性能好 ;4、影响离子交换选择性的因素主要有离子价与离子水合半径、离子价与离子浓度、交换环境、树脂结构、偶极离子排斥等;5、请写出下列离子交换剂的名称和类型：CM-C的名称是羧甲基纤维素,属于弱酸型阳离子交换纤维素; DEAE-C的名称是二乙基氨基乙基纤维素,属于强碱型阴离子交换纤维素;;6、色谱聚焦chromatofocusing是一种高分辨的新型的蛋白质纯化技术;它是根据蛋白质的等电点,结合离子交换技术的大容量色谱,能分离几百毫克蛋白质样品,洗脱峰被聚焦效应浓缩,分辨率很高,操作简单;7、写出下列离子交换剂类型：732 强酸型阳离子交换树脂 ,724 弱酸型阳离子交换树脂 ,717 强碱型阴离子交换树脂 ,CM-C 阳离子交换纤维素 ,DEAE-C 阴离子交换纤维素 ,PBE94 阴离子交换剂 ;8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中,当柱中某位点之pH 值下降到蛋白质组分 PI等电点值以下时,它因带正电荷而下移 ,如果柱中有两种蛋白组分,pI值较大高者会超过另一组分,移动至柱下部pH较高的位点进行聚焦交换 ;9、影响离子交换选择性的因素有离子水合半径、离子价与离子浓度、交换环境、树脂结构、偶极离子排斥 ;二、选择题1、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时,吸附量很低,这是因为 CA. 偶极排斥B.离子竞争C. 解离低D. 其它2、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量 CA.羟型阴B.氯型阴C.氢型阳D.钠型阳3、在尼柯尔斯基方程式中,K值为离子交换常数, K＞1说明树脂对交换离子吸引力 ;A. 小于平衡离子B.大于平衡离子C. 等于平衡离子D. 其它三、名词解释1、蛇笼树脂：由丙烯酸或甲基丙烯酸在季胺型阴离子交换树脂如Dowex中聚合而成的一类树脂称蛇笼树脂;它是一种两性树脂,它适宜于从有机物质如甘油水溶液中吸附盐类,再生时用水洗,就可将吸着的离子洗下来;2、尼柯尔斯基方程式：即其中m1、m2及C1、C2分别代表树脂上和溶液中的两种离子的浓度;K值的大小取决于树脂和交换离子的性质,以及交换条件;K＞1时说明离子A1比离子A2对树脂有较大的吸引力；反之,K＜1时树脂对A2的吸引力大于A1;3、偶极离子排斥作用：许多生化物质都是两性物质;其中有些是偶极离子;因为它们即使净电荷为零时,正电中心和负电中心并不重叠,遂成偶极;偶极离子在离子交换过程中的行为是很特殊的;现以氨基酸的离子交换为例;式中由于使用了钠型树脂,被吸附氨基酸的羧基所带的负电荷与树脂磺酸基之负电荷产生排斥力;这就是所谓偶极离子的排斥作用;因此使树脂对氨基酸的吸附量大大降低;四、问答题1、简述离子交换纤维素的特点有哪些答：离子交换纤维素的特点是：离子交换纤维素为开放的长链骨架,大分子物质能自由地在其中扩散和交换,亲水性强,表面积大,吸易附大分子；交换基团稀疏,对大分子的实际交换容量大；吸附力弱,交换和洗脱条件缓和,不易引起变性；分辨力强,能分离复杂的生物大分子混合物;2、请以CM-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些并说出各种方法的洗脱原理;答：无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来;现以羧甲基纤维素为例加以说明,图中H2N-P表示蛋白质,C表示纤维素;1、升高环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与CM-C结合力而被洗脱下来;2、降低环境的pH,使CM-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来;3、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来;3、请以DEAE-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些并说出各种方法的洗脱原理;答：无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来;1、升高环境的pH,使DEAE-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来;2、降低环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与DEAE-C结合力而被洗脱下来;3、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来;4、由下图,利用给出的两种离子交换剂E1,E2分离3种蛋白质P1、P2、P3,用箭头流程图表示并指出E1,E2的类型;E1为阴离子交换剂E2为阳离子交换剂5、下图为离子交换法应用实例,请填写生产工艺流程中的空格可选因素：阴离子交换树脂,阳离子交换树脂, 0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水;简述从“滤液”开始,以后步骤的分离原理答：阳离子交换树脂, 0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水滤液调节到pH2.5时,氨基酸带正电荷,因此选用阳离子交换树脂,之后根据氨基酸等电点的不同,依次用0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水洗脱;酸性氨基酸等电点低,因此用0.05mol/L氨水就可洗脱下来,而碱性氨基酸等电点高,因此需用2mol/L氨水才能将之洗脱下来;第九章亲和纯化技术一、填空题1、亲和层析洗脱方法有非专一性洗脱 , 特殊洗脱, 专一性洗脱;2、亲和力大小除由亲和对本身的解离常数决定外,还受许多因素的影响,其中包括亲和吸附剂微环境、载体空间位阻、载体孔径、配基和配体的浓度、配基结构等;3、亲和层析中常用作分离酶的配基有酶抑制剂 , 辅酶 , 底物和底物结构类似物 ;4、亲和层析中非专一性吸附有离子效应、疏水基团、复合亲和力;5、亲和过滤指的是将亲和层析和膜过滤技术结合运用,它包括亲和错流过滤和亲和膜分离两大方法;二、选择题1、下面关于亲和层析载体的说法错误的是 BA.载体必须能充分功能化;B.载体必须有较好的理化稳定性和生物亲和性,尽量减少非专一性吸附;C.载体必须具有高度的水不溶性和亲水性;。

生物制药工艺学知识点整理1.生化药物生物药物：是利用生物体、生物组织或其成分，综合应用生物学、生物化学、微生物学、免疫学、物理化学和药学的原理与方法进行加工、制造而成的一大类预防、诊断、治疗制品。

生物药物包括从动物、植物、海洋生物、微生物等生物原料制取的各种天然生物活性物质及其人工合成或半合成的天然类似物。

生物药物包括抗生素、生化药物、生物制品。

2.生物制品：用生物学方法（包括基因工程方法）和生化方法制成的，具有免疫学反应或平衡生理作用的药物制剂。

（举例：乙肝疫苗）3.抗体：指机体的免疫系统在抗原刺激下，由B淋巴细胞或记忆细胞增殖分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。

4.配体：指受体具有选择性结合能力的生物性物质包括内源激素外源活性物质等。

5.半合成抗生素：将天然代谢产物用生物、化学或者生化方法进行分子结构改造而制成的各种衍生物。

6.油水分配系数：logP值指某物质在正辛醇（油）和水中的分配系数比值的对数值。

反映了物质在油水两相中的分配情况。

logP值越大，说明该物质越亲油，反之，越小，则越亲水，即水溶性越好。

7.抗生素：是生物在其生命活动过程中产生的、在低微浓度下能选择性地抑制或杀死他种生物技能的化学物质。

（举例：青霉素）8.多肽类生化药物：是以多肽激素和多肽细胞生长调节因子为主的一大类内源性活性成分，如催产素。

9.干扰素：系指由干扰素诱导有关生物细胞所产生的一类高活性、多功能的诱生蛋白质。

这类诱生蛋白质从细胞中产生和释放之后，作用于相应的其它同种生物细胞，并使其获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。

10.药典：药典是一个国家关于药品标准的法典,是国家管理药品生产与质量的依据.药典由国家药典委员会编纂,国家药品监督管理局批准并颁布实施.11.药物的ADMEA: absorption吸收D: distribution分布M: metabolism代谢E: excretion排泄12.医疗用抗生素的特点：难使病原菌产生耐药性，较大的差异毒力，最小抑菌浓度（MIC）要低，抗菌谱要广。

生物制药工艺学名词解释：第一章：1. 药品：一定剂型和规格的药物并赋予一定的形式（如包装），而且经过有关部门的批准，有明确的作用用途。

药物：能影响机体生理、生化和病理过程，用以预防、诊断、治疗疾病和计划生育的化学物质。

2. 生物药物Biopharmaceuticals：以生物体、生物组织或其成份为原料综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。

3. 生物活性Biological activity,Bioactivity：对活组织如疫苗有影响的特性。

4. 酶工程enzyme engineering：酶学与工程学互相渗透结合，发展形成的生物技术，它是从应用目的出发，研究酶和应用酶的特异催化功能，并通过工程化过程将相应原料转化成所需产物的技术。

5. 固定化酶immobilized enzyme：是指借助于物理和化学的方法把酶束缚在一定空间内并具有催化活性的酶制剂。

6. 组合生物合成combinatorial biosynthesis（组合生物学combinatorial biology）：应用基因重组技术重新组合微生物药物的基因簇，产生一些非天然的化合物。

7. 药物基因组学：一门研究个人的基因遗传如何影响身体对药物反应的科学。

8. 凝聚作用coagulation：指在电解质作用下，胶粒粒子的扩散双电子层排斥电位降低，破坏了胶体系统的分散状态，使胶体粒子发生聚集的过程。

9. 萃取extraction：将物质从基质中分离出来的过程。

一般指有机溶剂将物质从水相转移到有机相的过程。

10. 反萃取stripping/back extraction：将萃取液与反萃取剂相接触，使某种被萃入有机相的溶质转入水相的过程。

11. 萃取因素/萃取比：萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比。

12. 分离因素separation factor：在同一萃取体系内两种溶质在同样条件下分配系数的比值。

13. 双相萃取技术two-aqueous phase extraction：利用不同的高分子溶液相互混合可产两相或多相系统，静置平衡后，分成互不相溶的两个水相，利用物质在互不相溶的两水相间分配系数的差异来进行萃取的方法。

1. 生物制药中，以下哪种技术主要用于生产重组蛋白？A. 发酵技术B. 萃取技术C. 蒸馏技术D. 过滤技术2. 在生物制药过程中，GMP代表什么？A. Good Manufacturing PracticeB. General Manufacturing ProtocolC. Global Manufacturing ProgramD. Good Management Procedure3. 以下哪项不是生物制药的常见原料？A. 微生物B. 植物细胞C. 石油D. 动物细胞4. 生物制药中的“上游工艺”主要指的是什么？A. 产品包装B. 产品销售C. 细胞培养D. 产品分析5. “下游工艺”在生物制药中主要涉及哪些步骤？A. 细胞培养B. 产品纯化C. 产品研发D. 市场推广6. 生物制药中，以下哪种方法常用于蛋白质的纯化？A. 离子交换层析B. 超声波处理C. 冷冻干燥D. 高压均质7. 在生物制药中，哪种技术用于检测产品的无菌状态？A. PCRB. ELISAC. 微生物培养D. 高效液相色谱8. 生物制药工艺中，以下哪项是质量控制的关键环节？A. 产品包装B. 原料采购C. 产品检验D. 市场营销9. 生物制药企业中，以下哪个部门负责确保生产过程符合GMP标准？A. 研发部门B. 生产部门C. 质量保证部门D. 销售部门10. 在生物制药中，以下哪种细胞培养技术可以提高产量？A. 悬浮培养B. 贴壁培养C. 固态培养D. 液态培养11. 生物制药中，以下哪种技术用于检测产品的活性？A. 紫外-可见光谱B. 质谱分析C. 生物活性测定D. 核磁共振12. 在生物制药工艺中，以下哪项是确保产品质量的关键因素？A. 生产速度B. 生产成本C. 生产环境D. 生产规模13. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的稳定性测试？A. 加速稳定性测试B. 微生物检测C. 化学分析D. 物理检测14. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的最终包装？A. 无菌灌装B. 手工包装C. 机械包装D. 真空包装15. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的灭菌？A. 高温灭菌B. 化学灭菌C. 辐射灭菌D. 过滤灭菌16. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的保存？A. 冷藏B. 常温保存C. 冷冻保存D. 干燥保存17. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的标签和说明书的制作？A. 印刷技术B. 电子制作C. 手工制作D. 机械制作18. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的运输？A. 航空运输B. 陆地运输C. 海运D. 管道运输19. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的销售和分发？A. 电子商务B. 传统零售C. 直销D. 代理销售20. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的市场推广？A. 广告宣传B. 学术推广C. 网络营销D. 展会推广21. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的售后服务？A. 客户服务B. 技术支持C. 产品维修D. 产品更新22. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的回收和处理？A. 环保处理B. 废物回收C. 产品销毁D. 产品再利用23. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的研发？A. 基因工程B. 化学合成C. 物理加工D. 生物发酵24. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的临床试验？A. 随机对照试验B. 开放试验C. 单盲试验D. 双盲试验25. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的注册和审批？A. 药品注册B. 药品审批C. 药品监管D. 药品评估26. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量控制？A. 自动化生产B. 手工生产C. 半自动化生产D. 全自动化生产27. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的安全和有效性评估？A. 毒理学评估B. 药效学评估C. 药代动力学评估D. 临床评估28. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量保证？A. 质量管理体系B. 生产管理体系C. 供应链管理体系D. 风险管理体系29. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量改进？A. 持续改进B. 质量改进C. 生产改进D. 技术改进30. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量监控？A. 实时监控B. 定期监控C. 随机监控D. 全面监控31. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量分析？A. 统计分析B. 数据分析C. 质量分析D. 生产分析32. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量优化？A. 过程优化B. 质量优化C. 生产优化D. 技术优化33. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量控制？A. 自动化控制B. 手工控制C. 半自动化控制D. 全自动化控制34. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量保证？A. 质量保证体系B. 生产保证体系C. 供应链保证体系D. 风险保证体系35. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量改进？A. 持续改进技术B. 质量改进技术C. 生产改进技术D. 技术改进技术36. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量监控？A. 实时监控技术B. 定期监控技术C. 随机监控技术D. 全面监控技术37. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量分析？A. 统计分析技术B. 数据分析技术C. 质量分析技术D. 生产分析技术38. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量优化？A. 过程优化技术B. 质量优化技术C. 生产优化技术D. 技术优化技术39. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量控制？A. 自动化控制技术B. 手工控制技术C. 半自动化控制技术D. 全自动化控制技术40. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量保证？A. 质量保证技术B. 生产保证技术C. 供应链保证技术D. 风险保证技术41. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量改进？A. 持续改进方法B. 质量改进方法C. 生产改进方法D. 技术改进方法42. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量监控？A. 实时监控方法B. 定期监控方法C. 随机监控方法D. 全面监控方法43. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量分析？A. 统计分析方法B. 数据分析方法C. 质量分析方法D. 生产分析方法44. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量优化？A. 过程优化方法B. 质量优化方法C. 生产优化方法D. 技术优化方法45. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量控制？A. 自动化控制方法B. 手工控制方法C. 半自动化控制方法D. 全自动化控制方法46. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量保证？A. 质量保证方法B. 生产保证方法C. 供应链保证方法D. 风险保证方法47. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量改进？A. 持续改进策略B. 质量改进策略C. 生产改进策略D. 技术改进策略48. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量监控？A. 实时监控策略B. 定期监控策略C. 随机监控策略D. 全面监控策略49. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量分析？A. 统计分析策略B. 数据分析策略C. 质量分析策略D. 生产分析策略50. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量优化？A. 过程优化策略B. 质量优化策略C. 生产优化策略D. 技术优化策略51. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量控制？A. 自动化控制策略B. 手工控制策略C. 半自动化控制策略D. 全自动化控制策略52. 在生物制药中，以下哪种方法用于产品的生产和质量保证？A. 质量保证策略B. 生产保证策略C. 供应链保证策略D. 风险保证策略53. 生物制药中，以下哪种技术用于产品的生产和质量改进？A. 持续改进方案B. 质量改进方案C. 生产改进方案D. 技术改进方案答案：1. A2. A3. C4. C5. B6. A7. C8. C9. C10. A11. C12. C13. A14. A15. D16. C17. A18. A19. A20. A21. A22. A23. A24. A25. A26. A27. A28. A29. A30. A31. A32. A33. A34. A35. A36. A37. A38. A39. A40. A41. A42. A43. A44. A45. A46. A47. A48. A49. A50. A51. A52. A53. A。

生物制药工艺学重点知识一、名词解释1、物理吸附：吸附剂和吸附物之间的作用力是通过分子间引力产生的吸附。

2、盐析：向溶液中加入一定量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀的形式析出。

3、双水相：由两个水相组成的分层体系。

4、浓差极化：外源压力迫使分子量较小的溶质通过薄膜，而使大分子被截留在薄膜表面，并逐渐形成浓度梯度。

5、超临界流体：指处于超临界温度和超临界压力以上的特殊液体。

6、萃取：利用化合物在两种互不相容的溶剂中溶解度的不同，使化合物从一种溶剂中转移到另一溶剂。

7、临界胶束浓度：胶束形成时所需表面活性剂的最低浓度。

8、亲和层析：利用生物体中多数大分子物质具有与某些相应的分子专一性可逆结合的特性而建立的分离纯化技术。

9、过饱和溶液：溶质浓度超过溶解度时，该溶液称为过饱和溶液。

二、填空题1、发酵液常用的固液分离方法--过滤-和-离心分离。

2、离心分离的类型可分为--萃取分离法--、固相析出分离法--和--吸附分离法--。

3、影响盐析的因素--无机盐种类--、--溶质种类--、--蛋白质浓度--、--温度--、PH--。

4、离子交换层析中，洗脱方法是--静态洗脱--、--动态洗脱--。

5、在分子筛凝胶层析中，当Kd=0 时，为--全排阻--，Kd=1时，为--全渗透--，当Kd=（0~1）时，为部分渗透。

6、离子交换剂的组成分为：--骨架部分--、活性基团--、--可交换例子--。

7、盐析操作的常用方法--分层盐析法--、--重复盐析法--、反抽提法--。

8、采用离心沉降进行分离时，离心机转速为1800r/min，则距转轴20cm处的离心强度为--2012.4g--。

9、超临界流体的特点是：与气体有相同的--黏度--，和液体有相同的--密度--。

10、常见的膜分离方法：--透析--、超滤技术--、--微孔膜过滤技术--。

三、不定项选择1、当两种不同聚合物的溶液相混合时，有可能存在哪些情况（AC ）【答案不确定】A.完全混溶B.相分离C.凝聚D.不确定E.与两者比例有关2、离心沉降设备有（BDE ）【答案不确定】A.瓶式离心机B.管式离心机C.多室式离心机D.碟片式离心机E螺旋离心机3、在膜分离过程中，采用非对称膜，其优点是（ABE ）【答案不确定】A.提高通量B.增加机械强度C.容量赌塞D.提高分离精度E.提高收率4、乙醇作为有机溶剂沉淀蛋白过程中，哪些因素影响沉淀效果（ABCDE ）A.温度B.乙醇浓度C.PHD.蛋白质种类E.蛋白质浓度5、影响高速晶体大小的因素有（ACD ）【答案不确定】A.过饱和度B.温度C.搅拌速度D.晶种E.压力6、浓度为0.3 mol/L 的(NH4)2SO4溶液的离心强度为（ A ）【答案不确定】A. 0.9 mol/LB. 0.6 mol/LC. 0.3 mol/LD. 1.8 mol/LE.不确定7、Cohn 公式中，与K有关的因素为（DE ）A.温度B.PHC.离子强度D.蛋白种类E.盐的种类9、反胶束萃取过程中，影响效率的因素有（ABCDE ）【答案不确定】A.PHB.温度C.表面活性剂种类D.离子强度E.亲和反胶束萃取10、以静压力差为推动的膜分离过程有（ABD ）【答案不确定】A.微滤B.超滤C.纳滤D.反渗透E.膜蒸馏12、影响粒子在离心力场中沉降速度的因素有（）【答案不确定】A.粒子大小B.粒子形状C.料液黏度D.转速E.转轴半径13、在有机萃取过程中，为消除乳化现象可采用的措施有（ABDE ）【答案不确定】A.稀释B.加热C.搅拌D.改变PHE.加热电解质16、盐析公式中，与K有关的因素为（DE ）A.温度B.PHC.离子强度D.蛋白种类E.盐的种类20、采用密度梯度离心的作用是（ABCD ）A.提供良好的分离环境B.增加分离层次C.提高分辨率D.减弱对流影响E.增加密度四、问答题1、说明发酵液预处理的目的，并说明其主要方法。

复习整理——根据课件后的小结和复习思考题整理第一章生物药物概述生物药物 Biopharmaceutics：是以生物体、生物组织或其成份为原料（包括组织、细胞、细胞器、细胞成分、代谢、排泄物）综合应用生物学、物理化学与现代药学的原理与方法加工制成的药物。

生物药物的特性一、药理学(pharmacology)特性：1、活性强: 体内存在的天然活性物质。

2、治疗针对性强,基于生理生化机制。

3、毒副作用一般较少，营养价值高。

4、可能具免疫原性或产生过敏反应。

二、理化特性：1. 含量低、杂质多、工艺复杂、收率低、技术要求高；2. 组成结构复杂，具严格空间结构，才有生物活性。

对多种物理、化学、生物学因素不稳定。

3. 活性高，有效剂量小，对制品的有效性，安全性要严格要求（包括标准品的制订）。

微生物药物：微生物药物是一类特异的天然有机化合物，包括微生物的次级代谢产物，初级代谢产物和微生物结构物质，还包括借助微生物转化（microbial transformation）产生的用化学方法难以全合成的药物或中间体。

生化药物：指从生物体（动物、植物、微生物）中获得的天然存在的生化活性物质，其有效成分和化学本质多数比较清楚。

生物制品：一般把采用DNA重组技术或单克隆抗体技术或其他生物技术制造的蛋白质、抗体或核酸类药物统称为生物技术药物(biotech drug)，在我国又统称为生物制品。

蛋白质工程(protein engineering)：利用基因工程手段，包括基因的定点突变和基因表达对蛋白质进行改造，以期获得性质和功能更加完善的蛋白质分子。

RNA干涉（ RNA interference,RNAi）：是指在生物体细胞内，dsRNA(双链RNA)引起同源mRNA的特异性降解，因而抑制相应基因表达的过程。

1.生物药物有哪几类？重组DNA药物、基因药物、天然生物药物、合成半合成生物药物2.DNA重组药物与基因药物有什么区别？3.生物药物有哪些作用特点？4.DNA重组药物主要有哪几类？举例说明之5.术语：药物与药品，生物药物，DNA重组药物，基因药物，反义药物，核酸疫苗，RNAi药物Medicine(remedy)：用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理功能、促进机体康复保健的物质，有4大类：预防药、治疗药、诊断药和康复保健药。