红细胞悬液的配制

红细胞稀释液说明书一、原理：
将血液用稀释液作一定量稀释后,注入计数池在显微镜下计数,然后计算出血液中红细胞数。

二、规格：
1×100m1；3×IOOm1
三、操作：
1、于清洁小试管中加入红细胞稀释液2.0m1o
2、自指端或耳垂准确吸取血液IoU1擦去管外附着的血液，置于红细胞稀释液内，立即混匀。

3、取上述混匀的红细胞悬液加至血球计数池内,静置2~3分钟。

4、用低倍镜计数左上、左下、右上、右下及中央五个中方格，五个中方格总数乘以
0.0IX1012/1即为每升红细胞数。

四、正常参考值：
成人：男:4.0-5.5X1012/1；女：3.5-5.0X1012/1：
新生儿：6-7×1012∕1‹,
五、贮存条件：温度2~25℃,相对湿度40~75%,避光。

六、有效期：一年。

临床常用血液制品的种类及输注方法血液制品是一种可以治疗和预防临床血液疾病的医疗药品。

它们是从献血者的血液中提取、分离、制备而成的。

在临床实践中，常用的血液制品包括红细胞悬液、血小板悬液、新鲜冰冻血浆、凝血因子浓缩剂和人血白蛋白等。

本文将详细介绍这些常用血液制品的种类及其输注方法。

一、红细胞悬液红细胞悬液是一种含有红细胞的血液制品，用于改善贫血患者的血液氧运输能力。

它通常由新鲜献血提供，通过离心分离红细胞，再添加适量的生理盐水或葡萄糖溶液进行稀释，最后进行灭菌和保存。

输注红细胞悬液时，需要注意确认病人的血型和配型是否匹配，以避免输注不合适的血型引发输血反应。

二、血小板悬液血小板悬液主要用于治疗血小板减少性出血、血小板功能障碍等疾病。

它可以通过血小板浓缩和血小板血浆分离而制备而成。

输注血小板悬液时，一般使用血浆呈黄色、透明的包装袋，注意避免剧烈摇晃，以防止血小板受损。

三、新鲜冰冻血浆新鲜冰冻血浆是从新鲜全血中提取并在冷冻保存后制备的一种血液制品。

它含有丰富的凝血因子，可用于急性出血、凝血因子缺乏等临床情况。

输注新鲜冰冻血浆前需要解冻，并在输注前进行冷沉淀清除。

为确保安全，输注时需注意过敏反应的可能性。

四、凝血因子浓缩剂凝血因子浓缩剂是从血浆中提取并制备的一种含有凝血因子的血液制品。

它可用于治疗凝血因子缺乏引起的出血性疾病。

在输注凝血因子浓缩剂前，需要明确病人凝血因子的缺乏类型，以确定使用的浓缩剂种类，并仔细检查过敏史和补充其他辅助治疗手段。

五、人血白蛋白人血白蛋白是一种提取自血浆中的蛋白质制品，具有维持血容量、调节血浆渗透压和增加细胞外液等作用。

它广泛应用于烧伤、感染、手术和创伤等情况下的血容量不足或血浆蛋白减少。

输注人血白蛋白时，需注意其浓度和输注速度，以避免不必要的副作用和风险。

综上所述，临床常用的血液制品有红细胞悬液、血小板悬液、新鲜冰冻血浆、凝血因子浓缩剂和人血白蛋白。

在进行输注时，需密切关注患者的病情、血型配型、过敏史等因素，并根据具体情况选择合适的输注方式和速度。

交叉配血操作规程
1.由血液室(输血室)工作人员采受血者静脉血3ml于普通负压管中,取试管1支加入1ml0.9%NaCL注射液,滴入3滴静脉全血做成3-5%红细胞悬液(洗涤3次).
2.取试管两支,标主次侧,主侧加病人血清2滴,加供血者3-5%红细胞悬液(洗涤)1滴,次侧管反之.
3.各加LIM0.7ml,混合均匀后,再加Polbrene溶液2滴,并混合均匀.
4.用TDL-80-2B普通离心机,离心条件为:3400rpm,离心10秒),然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体.
5.轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做.
6.最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并同进观察结果.如果在30秒-1分钟内凝集散开,代表是Polbrene由引起的非特异性聚集,配血结果相合;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合.如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察.
注意事项
1.可以用含EDTA血浆代替血清使用.
2.试剂使用前请回复室温再行操作.
3.在冬天室温极低的情况下,操作交叉配血试验,某些病人血清中可
能含有寒冷凝集素等因至少,而导致假阳性的结果的出现,若有此怀疑,建议在滴入Resuspending时,将试管立即放入37摄氏度水浴中,轻轻转动试管混合,并在30秒内观察结果.
4.本室所用TDL-80-2B离心机,其相当离心力所对应转速为3400rpm.。

溶血实验1.浓度2.溶液配制D-PBS：Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline3.方法⑴新鲜血液2ml至用抗凝剂肝素预处理的采血管中。

⑵加入4ml D-PBS，10000g离心5min。

⑶弃上清，补加D-PBS至10ml，混匀后10000g离心5min。

⑷重复⑶4次，至上清澄清透明。

⑸加入20ml D-PBS重悬红细胞。

⑹将0.2ml红细胞悬液与0.8ml材料工作液混合。

以加0.8ml水作为阳性对照组，0.8ml D-PBS为阴性对照组。

⑺各组设4个平行，4h后，10016g离心5min，各取样品100ul至96孔板测定577nm吸光度，以655nm吸光度为参考。

溶血率% =[(OD样品-OD阴性)/(OD阳性–OD阴性)]×100%取健康非吸烟男性志愿者静脉血3 ml。

取2 ml血液，加入4 ml PBS，涡旋混匀。

4 ℃，10020 g离心10 min。

小心移除上清，补加PBS至10 ml，混匀后离心，PBS重复处理5次至上清澄清透明。

最后将红细胞用PBS定容至20 ml重悬混匀。

用PBS配制三种HAP纳米粒子的梯度工作液：100 µg/ml，50 µg/ml，25 µg/ml，12.5 µg/ml，6.25 µg/ml。

用0.2 ml上述红细胞重悬液与0.8 ml纳米粒子工作液混合，得到纳米粒子的终浓度为80 µg/ml，40 µg/ml，20 µg/ml，10 µg/ml，5 µg/ml。

0.2 ml红细胞悬液与0.8 ml PBS混匀为阴性对照，0.2 ml红细胞悬液与0.8 ml无菌三次水混匀为阳性对照，各组设3个平行。

涡旋混匀后，于37 ℃孵育3 h，10020 g离心10 min，各样取100 µl上清，于570 nm 处测吸光度值。

去白细胞悬浮红细胞的制备1.引言1.1 概述概述部分的内容可以如下所述：悬浮在血液中的白细胞和红细胞在医学研究和临床应用中扮演着重要的角色。

然而，由于它们的不同特性和功能，分离和纯化这两类细胞成为了许多研究者和临床医生共同面临的挑战。

本文旨在探讨一种用于制备去白细胞悬浮红细胞的方法，以解决这一问题。

白细胞是免疫系统中的重要组成部分，其主要功能是抵御外来病原体和维持机体内环境的稳定。

然而，在某些疾病状态下，白细胞的数量和/或活性可能会过高，导致炎症反应或组织损伤。

因此，有时需要将白细胞与其他细胞类型分开，以便进一步研究或治疗。

与之相反，红细胞是负责氧气和二氧化碳的运输，以及维持机体血液酸碱平衡的关键细胞。

然而，在某些疾病情况下，如白血病或白细胞增多症，白细胞可能会大量存在于红细胞悬浮液中，影响血液功能和治疗效果。

因此，将红细胞从白细胞中分离出来具有重要的临床意义。

本文将重点介绍一种用于制备去白细胞悬浮红细胞的方法。

这种方法基于细胞的不同大小、形状和密度，利用离心、梯度离心和洗涤等步骤，来实现红细胞与白细胞的有效分离。

我们将详细描述每个步骤的操作方法和所需的实验条件。

最后，我们将通过实验结果和临床案例来评估该方法的可行性和应用前景。

我们希望这种方法能够为研究人员和临床医生提供一个可靠的工具，以便更好地理解和应对与白细胞和红细胞相关的疾病。

通过去除白细胞，我们可以更好地研究红细胞的功能和特性，为疾病的诊断和治疗提供新的思路和方法。

1.2 文章结构文章结构部分的内容可以按照以下方式编写：文章结构:本文主要分为引言、正文和结论三个部分。

1. 引言：在引言部分，我们将对制备去白细胞悬浮红细胞的重要性进行概述，并介绍本文的结构和目的。

2. 正文：正文部分将分为两个要点来详细介绍去白细胞悬浮红细胞的制备方法和技术。

2.1 第一个要点：在第一个要点中，我们将介绍传统的去白细胞悬浮红细胞的制备方法，包括离心法、沉降法等，并对其原理和步骤进行详细解释。

卡式ABO血型操作方法
1.把血型卡放入离心机内转3分钟，同时，待检标本离心。

2.把待检标本用生理盐水配成浓度为1%的红细胞悬液。

1ML生理盐水+10uL压积红红细胞
3.将反定型A、B、O红细胞悬液分别配成浓度为1%的红细胞悬液。

生理盐水：红细胞=3:1 例：3滴生理盐水+1滴红细胞
4.第一孔到第四孔和最后一个孔分别加25ul的待检标本的红细胞悬液。

5.在第五孔到最后一孔分别加入25ul 待检标本血浆，然后对应加入25ulA、B、O
1%的红细胞悬液
6.将血型卡静置3分钟，放离心机内，配平离心。

7.观察结果。

结果解释：红细胞在凝胶柱上方为凝集，下方为不凝集。

对可疑情况，积极讨论。

盐水法配血操作规程盐水法配血是一种常用的配血方法，通过在供者血样与受者红细胞悬液中加入不同浓度的盐水溶液来观察凝集反应，判断供者与受者血型是否相容。

下面是盐水法配血的操作规程。

一、实验前准备1. 准备好所需试剂和仪器设备，如盐水溶液、试管、试管架、洗瓶、一次性手套、试管盒等。

2. 校对血型试剂，确保其有效期内，并按照说明书稀释好。

二、操作步骤1. 标记试管用玻璃笔或细标签标记试管，并分别写上供者和受者的信息。

2. 制备供者血样取一滴供者的血液于洗净的试管内，加入一滴净化水，用试管尾轻轻混匀。

3. 制备受者红细胞悬液取一滴受者的血液于洗净的试管内，加入适量的盐水溶液，用试管尾轻轻混匀。

4. 加盐水溶液以1:2、1:4、1:8的比例分别将0.9%的盐水溶液加入供者和受者的试管中，使总体积约为1ml。

轻轻摇动试管，使溶液充分混合。

5. 静置观察把试管放入试管架上，静置5分钟，观察凝集情况。

6. 结果判定观察供者与受者试管中是否出现凝集现象，根据凝集的程度判断血型的相容性。

- 无凝集：相容，可进行输血。

- 片状凝集：相容，可进行输血，但需留意可能存在特殊抗体。

- 线状凝集：不相容，不可进行输血。

7. 清理试管将用过的试管放入洗瓶中，用水冲洗干净，清理试管架。

8. 记录结果根据观察结果，将配血结果记录在相关数据表格中，包括供者和受者的血型信息、凝集情况以及对应的相容性。

三、注意事项1. 操作时要严格按照标准操作规程进行，避免操作失误。

2. 手套和试管架等工具要彻底清洁干净，确保实验的准确性和结果可靠性。

3. 配血试验要进行双重确认，避免操作失误和结果错误。

4. 注意个人防护，避免接触到供者的血液，以避免传染病的传播。

5. 根据实际需要，可进行不同浓度溶液的稀释和配制，以满足不同试验的要求。

通过盐水法配血操作规程，可以判断供者与受者的血型相容性，为临床输血提供可靠的依据，确保输血安全性和有效性。

病毒血凝与血凝抑制实验报告一、实验目的本次实验旨在研究病毒的血凝现象以及血凝抑制反应，以深入了解病毒的特性和相关的免疫学机制。

通过实验，掌握病毒血凝与血凝抑制实验的操作方法和结果判断，为病毒的检测、诊断以及疫苗研发提供实验依据。

二、实验原理（一）病毒血凝现象某些病毒表面具有能够与红细胞表面受体结合的血凝素，从而使红细胞发生凝集。

这种凝集现象可以在显微镜下观察到，并且凝集的程度与病毒的浓度有关。

（二）血凝抑制反应当特异性抗体与病毒表面的血凝素结合后，会阻断病毒与红细胞的结合，从而抑制血凝现象的发生。

通过检测血清中抗体对血凝的抑制作用，可以判断血清中是否存在特异性抗体以及抗体的效价。

三、实验材料（一）病毒株选用已知血凝特性的病毒株，如流感病毒、新城疫病毒等。

（二）红细胞新鲜采集的鸡、豚鼠或人“O”型红细胞。

（三）血清待检血清和已知阳性、阴性对照血清。

（四）试剂磷酸盐缓冲液（PBS）、生理盐水等。

（五）器材96 孔微量血凝板、移液器、离心机、显微镜等。

四、实验步骤（一）红细胞悬液的制备1、采集新鲜血液，加入抗凝剂。

2、离心去除血浆，用生理盐水洗涤红细胞 3 5 次，直至上清液无色。

3、最后用生理盐水将红细胞配制成 1%的悬液备用。

（二）病毒血凝滴度的测定1、在 96 孔微量血凝板中，从第 1 孔至第 12 孔，每孔加入25μL PBS。

2、在第 1 孔中加入25μL 病毒液，然后从第 1 孔吸取25μL 病毒液至第 2 孔，依次倍比稀释至第 11 孔，从第 11 孔吸取25μL 弃去。

3、每孔加入25μL 1%红细胞悬液，轻轻振荡混匀，室温静置 30 60 分钟。

4、观察血凝结果，以出现“＋＋”凝集的最高稀释度作为病毒的血凝滴度。

（三）血凝抑制实验1、取已测定血凝滴度的病毒液，按照 4 个血凝单位/25μL 的量加入 96 孔微量血凝板的第 1 孔至第 10 孔，第 11 孔为病毒对照，第 12 孔为红细胞对照。

盐水介质交叉配血步骤
（1）取试管两支，用0.9%生理盐水分别配受血者和供血者5%红细胞悬液（取分离血清后受血者底层红细胞50ul与0.9%生理盐水1mL，取分离血清后供血者底层红细胞50ul 与0.9%生理盐1mL）
主侧：受血者血清100uL＋供血者红细胞悬液50uL
次侧：供血者血清100uL＋受血者红细胞悬液50uL
混匀，离心机离心1分钟，轻轻晃动试管，肉眼观察结果。

（2）结果判定
1．肉眼观察，如果试管中出现任何红细胞凝集或溶血，则判读为阳性，无凝集为阴性。

2．对于不能明显判定为阴性而并未达到阳性凝集的反应，可通过显微镜进一步判读，镜下有红细胞凝集的为阳性反应，无凝集的为阴性。

3．如果试验在室温进行，若有凝集产生，可置37℃放置2分钟后观察凝块是否散开，以排除冷凝集素造成的凝集影响测定结果。