牛实验课材料

母牛达到性成熟后，开始周期性发生一系列的性活动现象。如生殖道粘膜充血、水肿、排出粘液；精神兴奋、出现性欲：主动接近公牛、接受公牛或其他母牛爬跨；卵泡发育直至排卵等。以上生理活动统称为发情。把集中表现发情征状的时期称为"发情期"，由一个发情期开始，至下一个发情期开始的期间，称为一个发情周期。

1.母牛发情征状

(1)外阴部变化 由于动情素(雌激素)的作用，发情开始后，外阴部由微肿逐渐变得肿大饱满，柔软而松驰，外唇粘膜充血，潮红而有光泽，皱褶消失。拨开阴唇可见阴道粘膜充血，湿润、有光泽，有粘液溢出。量由少渐多，由稀变稠。俗称"吊线"。在排卵前排出的粘液由透明清亮变成不透明的乳白色。排卵后，发情期结束，一切征状消失，恢复常态。

(2)性兴奋 发情时母牛特别敏感和兴奋不安，耳直立，眼睛闪闪发亮，在运动场(或牧场)内来回走动，不断发出叫声，食欲减少，产奶母牛的日产奶量下降。

(3)性欲 随着发情的进展，性欲越来越强。主动接近公牛或爬跨其他母牛，还常伴有滴尿、低声呻吟等现象。当别的牛爬跨它时，不逃不动，安静地接受爬跨。

(4)排卵 母牛排卵是在性欲结束到结束后18小时，而大多出现在性欲结束，母牛拒绝爬跨后8-12，排卵标志着发情已结束。

2.发情周期

母牛的发情周期平均为21天，处女牛一般少1-2天。母牦牛发情周期平均为20.5天(17-25天)。发情周期受光照、温度、饲养管理、劳役强度、健康状况等因素的影响。根据生理变化特点。将发情周期分为前期、发情期、后期和休情期四个阶段。

(1)发情前期：是发情的准备期。卵巢内黄体消失，新卵泡继续发育，子宫颈和阴道的分泌物由粘稠状逐步变稀，分泌物增多，生殖道开始充血，但尚无明显的发情征状。持续时间为4-7天。

(2)发情期：这是母牛出现旺盛性欲的时期，发情征状明显。从母牛愿意接近公牛开始，经主动接受爬跨至回避爬跨这一时期，叫发情持续期，在家畜中以母牛的发情持续期最短，一般平均为18小时，范围为6-36小时。个别的可持续48小时左右。

母牦牛的发情持续期为12-36小时。发情持续期的长短，受季节、饲养管理、年龄等因素的影响。

母牛的排卵时间是在发情期结束后12-15小时，这是母牛的发情特点之一。

(3)发情后期 是发情现象逐步消失，卵巢排卵，开始形成黄体，子宫颈收缩，阴道粘膜充血肿胀状态逐渐消退。本期持续时间为5-7天。据统计，有60-70％的育成母牛和30-40％的成年母牛在发情后期，有少量血液或混血粘液从阴道流出，属发情时子宫粘膜发生生理变化所致。只要出血量少，颜色正常，则对妊娠无不良影响；或出血量多，色泽暗红或黑紫，是子宫患有疾病的征状。

(4)休情期 也称为间情期或黄体期。其特点是黄体逐渐萎缩，卵泡逐渐发育，从上一次发情过渡到下一次发情。母牛休情持续期一般为6-14天。如果已受孕，休情期则变为妊娠期，周期黄体转为妊娠黄体，直到妊娠结束有不再出现发情。

5.母牛的发情鉴定

(1)外部观察法 主要通过对母牛个体的观察，视其外部表现和精神状态的变化来判断是否发情和发情的阶段。在生产中外部观察法是发情鉴定最普遍、最基本的方法。一般发情的母牛兴奋不安，来回走动，大声呜叫，爬跨，相互舔嗅后躯和外阴部，安静地接受公牛或其他母牛的爬跨(静立反射)，这是确定母牛发情的最可靠根据。粘液状况及外阴部的变化是判断发情阶段的重要指标。发情前期阴唇开始肿胀，阴门湿润，流出透明如蛋清样的粘液；发情盛期，粘液量逐渐增加，半透明，乳白色或夹有白色碎片，呈牵缕状，悬垂在阴门下方(俗称“吊线”)。发情末期外阴部肿胀稍减退，流出较粗的乳白色混浊柱状粘液，此时是输精配种最佳时期。发情后期，粘液量减少而粘稠，由乳白色逐渐变为浅黄红色。若观察到母牛排出较多的血液(俗称“排红”)，或混血粘液，是发情结束的象征，一般是发情后两天左右。由于多数母牛在夜间发情，因此，在天黑或黎明前进行外部观察，可提高鉴定的准确性。

(2)试情法 利用体质健壮、性欲旺盛而无恶癖的试情公牛(已做过输精管结扎或阴茎扭转术)，令其接近母牛，根据母牛对公牛的亲疏表现，判断其发情程度。

(3)阴道检查法 是用消毒过的阴道开张器或扩张筒，插入母牛阴道内，打开其照明装置，观察阴道粘膜颜色、充血程度，子宫颈口的开张、松弛状态，阴道内部粘液的颜色、粘稠度、量的多少，来判断母牛的发情程度。此法不能确切地判定母牛的排卵时间，且需要必要的设备和器材，因此，生产中不常用，仅在必要时作为发情鉴定的辅助手段。

(4)直肠检查法 直肠检查是用手(戴上手臂形塑料手套，涂上润滑油或水)伸入母牛直肠内，先摸到坚硬索状的子宫颈端外侧，即可摸到卵巢，用手指轻轻触摸卵泡的大小、形状、弹性、卵泡壁的厚薄及液体感等状况，以判断卵泡的发育期和母牛的发情程度。直肠检查是生产中常用的较为准确的发情鉴定方法，还可判断母牛的异常发情(隐性或假发情)及其他生殖道疾病。

作直肠检查一是动作要轻，二是要求检查者具有丰富的实践经验。

人工授精是使用器械将采集的优质精液输入到母畜生殖道内,以代替公母畜自然交配而繁殖后代的一种繁殖技术。实行人工授精,不仅能大大提高优良种公牛的利用率,还能防止传染病的传播,并能有效地避免近交衰退,同时还可进行生殖器官疾病的检查,提高受胎效果,减少疾病传染,节约费用

适深，慢插，轻注，缓出，干净卫生，避免精液倒流

(一) 妊娠期成熟的卵子与成熟的精子在输卵管相遇，结合成为合子，这就是受精。由受精开始，经过胚胎发育，一直到成熟胎儿产出为止，这段时间称为妊娠期。牛的妊娠期是：黄牛（包括黑白花奶牛）２７０～２８５天，平均２８０天；水牛３００～３２０天，平均３１０天左右。妊娠期的长短因牛的品种、个体、年龄、饲养管理条件的不同而有差别。一般早熟品种比晚熟品种短，奶用牛比肉用牛短，黄牛比水牛短，饲养管理条件好的比饲养管理条件差的短。

（三）分娩是指成熟的胎儿、胎衣及其中的水分从子宫腔排出的生理过程。临近分娩的母牛尾根两侧凹陷，特别是经产母牛凹陷更甚，乳房胀大，分娩前一二天内甚至可挤出初乳。外阴部肿胀，阴唇逐渐松弛、柔软，皱努展开，阴道粘膜潮红，有透明的粘液由阴道流出。母牛时起时卧，显得不安，减食或不食，常呈排粪尿状态，头不时回顾腹部。这种情况出现意味着分娩即将来临。这时应加强看护，并做好接产的准备胎儿的产出一般经０．５—４小时，初产母牛产出胎儿的时间常比经产母牛长些。胎儿产出后子宫还在继续收缩，且有轻微的努责，以将胎衣排出。胎衣排出后要及时拿走。胎衣排出的时间一般为５—８小时，最长不应超过１２小时。若超过１２小时后胎衣仍未排出，应按胎衣不下处理。

繁殖新技术

一、牛冻精受精

牛人工受精是指通过人为的方法，将公牛的精液采集出来，经过适当的处理（稀释、冷冻保存等）再输入母牛的生殖器内，使卵子受精以繁殖后代。

二、同情发情

同期发情又叫做同步发情或发情控制技术。它是利用某些激素认为地控制并调整若干（供、受体）母牛在一定时间内集中发情，它可以对控制的母牛不经过发情检查即在预定时间内同时受精。现行的同期发情技术有两种途径，都是通过控制黄体——延长或缩短其寿命，降低孕酮水平，使母牛摆脱孕激素控制的时间一致，从而导致卵泡同时发育，达到同期发情的目的。这项技术主要用于胚胎移植和规模化胚胎生产。

三、胚胎移植

► 胚胎移植是对经超数排卵处理的供体母牛，用手术或非手术手段从其输卵管或子宫内取出若干早期胚胎，移植到经过同期发情处理的另外一群受体母牛的相同部位，以达到产生供体牛后代的目的。

4诱导双胎

1．遗传选择双胎

2．外源激素的诱导

3胚胎移植

转基因技术

• 转基因技术是将外源DNA导入细胞，并使其在后代中得到表达的技术。所导入的可以是单个有功能的基因或是基因簇。

• 转基因技术的一般步骤包括：1.分离、克隆和重组外源基因（目标基因）；2.将外源基因导入受精卵的细胞核中；3.将转基因受精卵移植到子宫内，完成胚胎发育；4.部分后代细胞携带有转入的外源基因，可以利用这些动物个体培育新的品系。

克隆或核移植

 所谓克隆就是动物的无性繁殖，克隆动物就是不通过受精过程而获得新的动物个体的方法。

 主要的操作过程是：1.将卵母细胞或受精卵的细胞核除去；2.用微注射法注入另一动物体细胞的细胞核；3在体外培养一定时间后，像胚胎移植一样将转核细胞移植到子宫，完成发育。

提高牛繁殖力措施

1、 加强选种选配 有计划地选择使用不同优秀种公牛的精液输配，选用细管冻精，应遵循“大配大、小配小、不大不小配中间”的原则，以免发生难产。

2、 合理配制平衡日粮 首先，日粮要保持一定的能量浓度，尤其是高产奶牛在产后常出现能量负平衡现象，导致产后发情时间延长及受胎率降低。可通过增加草食粮采食量增加能量是有限的，有效选择是增加脂肪含量以提高日粮能量浓度，保证奶牛良好的繁殖机能。 其次，供给适宜的蛋白质水平，在生产中应根据奶牛体重、生理阶段和产奶量制定合理的蛋白质水平，同时保证日粮能供给适当的可降解碳水化合物，使之与瘤胃降解蛋白质有适当平衡，一般高产奶牛日粮蛋白质水平为18%-19％。’ 此外，注重矿物质元素和维生素添加，钙摄取量每天为75克／头，钙鳞比例为1.5:1，VA3000-4000单位／千克（干物质），VE25-50单位／千克（千物质），可提高奶牛受胎率。 饲料中有毒物质对奶牛正常生殖有很大危害，如棉酚、芥子苷，某些牧草中的植物雌激素，应尽量少用这类饲料。

3、加强日常管理 尽可能的避免炎热或严寒，特别是在炎热夏季，可采取牛舍周围栽树、种草，牛舍搭凉棚遮阴、牛舍内安风扇通风、水浴等措施，加强防暑降温措施。避免妊娠牛受到惊吓和任意驱打。 做好奶牛出生日期、父母编号、发情、配种、和产犊日期，不但有助于人工输精工作的进行，而且避免错配、漏配、误配情况发生，还有助于牧场管理者或其他输精人员作为参考、比较、判断的依据， 详细的资料往往能反映出一些规律性的问题，为分析母牛繁殖性能，提高繁殖力提供线索。 围产期是牛群生产力和收益的关键控制点，处于围产期的牛，极易受细菌感染，造成子宫炎症，因此要保持牛舍干燥、卫生，合理实施助产，尽量降低母牛产后胎衣不下，做好产后子宫净化工作，减少生殖道疾病的发生。

4、提高奶牛受胎率 母牛的适宜配种时间是在发情结束或即将结束时。根据经验，早上发情的牛在当天下午配种一次，第二天早晨再配种一次，下午发情的牛在第二天早上配种一次，第二天下午再配种一次较合适。在奶牛生产中母牛产后生殖器恢复正常并可以配种的时间是60天。如果在产后35-40天第一个情期配种，可缩短产犊间隔。 正确运用输精技术，包括精液的处理和输精方法。要由液氮罐提取精液，精液在液氮罐颈部停留不应超过10秒，储精瓶停留部位应在距颈管部8厘米以下；颗粒精液在2.9%柠檬酸钠液1-2毫升中，水浴加温在40℃温水中解冻；精液镜检在38℃-40℃的温度下进行；精子活率不低于30%，直接运